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三七内生放线菌的分离及拮抗三七根腐病原活性研究

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微生物学杂志 2023年第1期43卷 85-91页

作者：张金丽苗翠苹云南医药健康职业学院云南昆明650106 云南大学云南省微生物研究所云南昆明650091

挖掘云南文山三七内生放线菌菌种资源以及对分离到的放线菌菌株进行三七根腐病病原菌的抗菌活性评价,为生物防治三七根腐病的发生、传播、有效治理及解决三七连作障碍和后续研究三七内生放线菌的代谢产物提供菌种资源。采用三种分离方... 详细信息

挖掘云南文山三七内生放线菌菌种资源以及对分离到的放线菌菌株进行三七根腐病病原菌的抗菌活性评价,为生物防治三七根腐病的发生、传播、有效治理及解决三七连作障碍和后续研究三七内生放线菌的代谢产物提供菌种资源。采用三种分离方法、六种分离培养基对文山两个产地三七全株植物进行内生放线菌分离,分离到的菌株通过16S rRNA基因扩增测序鉴定到属,通过琼脂扩散法对菌株发酵液进行抗菌活性初筛。共分离到56株内生放线菌,经形态特征初步排重后,选22株代表菌株进行16S rRNA基因扩增测序,并鉴定到属,其分属于链霉菌属(Streptomyces)、放线产孢菌属(Actinomycetospora)、拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)、黄英菌属(Yinghuangia)四个属。对23株菌株发酵液进行抗菌活性初筛,14株菌株(60.87%)具有不同程度的抗菌活性,其中菌株S004、S006、S014、S016、S022、S042、S047、S053对三七根腐病病原菌有较好的抗菌活性,具备进一步深入研究的价值。本研究初步探索出适合三七内生放线菌分离的分离方法,获得一批三七内生放线菌菌种资源,并筛选出8株对三七根腐病病原菌有较好抗菌活性的菌株。

关键词：三七内生放线菌多样性根腐病病原菌活性评价

石豆兰内生细菌分离鉴定、发酵条件优化及对棉花枯萎病菌的抑制

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天然产物研究与开发 2022年第4期34卷 656-664页

作者：苗永美韩朔苗翠苹张维徐荣华安徽科技学院生命与健康科学学院凤阳233100 云南大学生命科学学院昆明650504

由尖孢镰刀菌萎蔫专化型(Fusarium oxysporum f.***.vasinfectum)引起的棉花枯萎病是棉花生产上最严重病害之一,而植物内生菌是生物农药重要资源。本研究采用组织研磨、涂布法分离石豆兰属植物内生菌,对峙法和琼脂柱法筛选对棉花枯萎病... 详细信息

由尖孢镰刀菌萎蔫专化型(Fusarium oxysporum f.***.vasinfectum)引起的棉花枯萎病是棉花生产上最严重病害之一,而植物内生菌是生物农药重要资源。本研究采用组织研磨、涂布法分离石豆兰属植物内生菌,对峙法和琼脂柱法筛选对棉花枯萎病菌有抑制作用的菌株并进行分子鉴定;单因素试验和Box-Behnken设计优化产抑菌物质的发酵条件,电镜分析脂肽对菌丝形态影响。结果表明:筛选到13株菌对棉花枯萎病菌有抑制效果,其中BBs-27抑菌活性最高,经分子鉴定与Bacillus subtilis subsp.subtilis strain 168相似性为98.93%;优化出培养基为LB中添加2.5%蔗糖和0.01%(NH_(4))_(2)HPO_(4)、pH=5、装液量20 mL/50 mL、接种量2%、40℃、180 r/min、发酵105 h,经验证抑菌率达到88.06%。脂肽的半抑菌率浓度IC_(50)为488.93μg/L,电镜观察发现脂肽会使菌丝膨大、不规则,分化出大量分生孢子。BBs-27作为生防菌具有进一步研究开发价值。

关键词：石豆兰内生菌棉花枯萎病脂肽菌丝形态

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飞龙斩血内生菌种群分布及抑菌活性检测

微生物学报 2014年第3期54卷 276-284页

作者：杨本寿苗翠苹张建华姜国银杨德虞泓云南农业大学园林园艺学院云南昆明650091 云南大学中草药生物资源研究所云百草实验室云南昆明650091 曲靖医学高等专科学校微生物研究所云南曲靖655000 云南大学云南省微生物研究所云南昆明650091

【目的】研究药用植物飞龙斩血内生菌的种群组成及其抑菌活性,以了解飞龙斩血内生菌的种群分布状态和得到抗菌活性菌株。【方法】采用严格的表面消毒程序、添加抑菌剂的方法分离、培养内生菌株。利用表型和分子技术相结合的方法对内生... 详细信息

【目的】研究药用植物飞龙斩血内生菌的种群组成及其抑菌活性,以了解飞龙斩血内生菌的种群分布状态和得到抗菌活性菌株。【方法】采用严格的表面消毒程序、添加抑菌剂的方法分离、培养内生菌株。利用表型和分子技术相结合的方法对内生菌进行分类鉴定。纸片扩散法对分离获得的内生菌进行抑菌活性试验。【结果】从飞龙斩血植株内分离得到了3株内生细菌,1株内生放线菌和82株内生真菌。分类鉴定为14目16科27属,镰孢属(Fusarium)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)、曲霉属(Aspergillus)为飞龙斩血内生真菌中的优势种群。通过对30株病原指示菌的抑菌活性检测,18株内生菌对多种指示菌有明显的抑制作用。16株是内生真菌,分属11属。【结论】本试验研究了飞龙斩血内生菌的种群分布,获得了一些具有抗菌活性的内生菌,为飞龙斩血内生菌资源的开发利用提供了基础。

关键词：飞龙斩血内生菌种群分布鉴定抑菌活性

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滇牡丹内生真菌的分离及其抑菌活性研究

中国药学杂志 2011年第10期46卷 738-741页

作者：苗翠苹余莹陈有为王皎吴少华云南大学云南省微生物研究所昆明650091 云南中医学院中药学院昆明650500

目的研究滇牡丹内生真菌的种群组成及其代谢产物的抑菌活性,获得抗菌活性较好的菌株,以寻找新型抗菌物质。方法采用内生菌常规分离法对健康滇牡丹植株的根、茎、叶进行内生真菌的分离鉴定。以11种指示菌,采用纸片扩散法对分离获得的内... 详细信息

目的研究滇牡丹内生真菌的种群组成及其代谢产物的抑菌活性,获得抗菌活性较好的菌株,以寻找新型抗菌物质。方法采用内生菌常规分离法对健康滇牡丹植株的根、茎、叶进行内生真菌的分离鉴定。以11种指示菌,采用纸片扩散法对分离获得的内生真菌进行抑菌活性实验。结果从滇牡丹植物中分离到81株内生真菌,经形态鉴定,分属于19个属。抑菌实验表明,有46株内生真菌对至少1种指示菌有抑制作用,占分离总菌株的56.8%。结论滇牡丹内生真菌中存在着丰富的抗菌天然活性物质,可为寻找新型抗菌物质提供资源。

关键词：滇牡丹内生真菌抑菌活性

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土生曲霉转化三七中药材的研究

天然产物研究与开发 2012年第8期24卷 1014-1019页

作者：陈有为苗翠苹吴少华云南大学省微生物研究所西南微生物多样性教育部重点实验室昆明650091

从土壤真菌中筛选出直接转化中药材三七化学成分的菌株YM31966,经鉴定该菌株为土生曲霉(Asper-gillus terreus)。以固态转化方式,结合化学提取分离方法,通过高效液相色谱、核磁共振及质谱等波谱检测,该菌株转化三七产物由三七皂苷nR2、... 详细信息

从土壤真菌中筛选出直接转化中药材三七化学成分的菌株YM31966,经鉴定该菌株为土生曲霉(Asper-gillus terreus)。以固态转化方式,结合化学提取分离方法,通过高效液相色谱、核磁共振及质谱等波谱检测,该菌株转化三七产物由三七皂苷nR2、RX1和人参皂苷Rg1、Rd、Rh1、Rh4构成主体成分,而原三七成分Rb1、Rc、Re和R1、R3,R6等物质被分解。结果表明,土生曲霉是一株能转化中药材三七的微生物,它具有改变原三七化学成分,形成新化合物,以及提高某些原化合物成分含量的作用。

关键词：土生曲霉三七转化人参皂苷三七皂苷

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链霉菌YIM 245次生代谢产物的研究

天然产物研究与开发 2012年第B12期24卷 1-4页

作者：靳荣线曹艳茹苗翠苹李文均姜怡吴少华云南大学云南省微生物研究所西南微生物多样性教育部重点实验室昆明650091 西北农林科技大学资源环境学院杨凌712100

利用多种柱色谱层析方法从来自非洲特有动物之一长颈鹿(Giraffa camelopardalisc)的粪便链霉菌YIM245的发酵产物中分离得到7个化合物,通过理化性质及波谱数据分析,分别鉴定为2'-脱氧胞嘧啶核苷(1)、2’-脱氧胸苷(2)、2’-脱氧尿苷(3)、2... 详细信息

利用多种柱色谱层析方法从来自非洲特有动物之一长颈鹿(Giraffa camelopardalisc)的粪便链霉菌YIM245的发酵产物中分离得到7个化合物,通过理化性质及波谱数据分析,分别鉴定为2'-脱氧胞嘧啶核苷(1)、2’-脱氧胸苷(2)、2’-脱氧尿苷(3)、2’-脱氧腺苷(4)、菜油甾醇(5)、大豆素(6)和邻氨基苯甲酸(7)。应用96孔板法测定了化合物对5种病原指示菌的最低抑制浓度(MIC),结果表明该7个化合物均显示较弱的抗菌活性。

关键词：链霉菌次生代谢产物结构鉴定抗菌活性最低抑制浓度

滇牡丹内生真菌PR35的鉴定及次生代谢产物的研究

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中国中药杂志 2012年第11期37卷 1602-1606页

作者：胡娟王皎苗翠苹玄其存翟英哲宋飞陈有为吴少华云南大学云南省微生物研究所西南微生物多样性教育部重点实验室云南昆明650091 云南中医学院中药学院云南昆明650500

目的:对滇牡丹内生真菌PR35菌株进行菌种鉴定,并对其次生代谢产物的化学成分进行研究。方法:采用形态学观察结合ITS rDNA序列分析法进行菌种鉴定;应用多种柱色谱方法对其次生代谢产物进行分离纯化,并依据其理化性质及波谱数据鉴定化合... 详细信息

目的:对滇牡丹内生真菌PR35菌株进行菌种鉴定,并对其次生代谢产物的化学成分进行研究。方法:采用形态学观察结合ITS rDNA序列分析法进行菌种鉴定;应用多种柱色谱方法对其次生代谢产物进行分离纯化,并依据其理化性质及波谱数据鉴定化合物结构。结果:菌株PR35鉴定为长梗木霉Trichoderma longibrachiatum;从菌株PR35的发酵产物中分离获得5个化合物,分别鉴定为1-(2,6-dihydroxyphenyl)-3-hydroxybutan-1-one(1),1-(2,6-dihydroxyphenyl)propan-1-one(2),1-(2,4,6-trihydroxyphenyl)butan-1-one(3),4-methoxy-1-naphthol(4)和啤酒甾醇(5),其中化合物1～3对灰葡萄孢、燕麦镰孢和紧密单孢枝霉显示明显的抗真菌活性。结论:内生真菌长梗木霉首次从滇牡丹植物中分离获得,5个化合物均为首次从滇牡丹内生真菌中分离得到,其中化合物4为首次从微生物发酵产物中获得。

关键词：滇牡丹内生真菌长梗木霉鉴定次生代谢产物

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浅谈桥梁竖向预应力施工质量的控制

跨世纪 2008年第7期16卷 265-266页

作者：吴同生苗翠苹中国第十七冶有限公司路桥公司安徽马鞍山243000 安徽省公路工程建设监理有限责任公司安徽合肥230031

针对预应力混凝土箱梁腹板出现斜向裂缝的现象,介绍必须重视腹板竖向预应力的施工质量,对如何减小预应力损失,改进压浆工艺,确保压浆质量提出了具体方法.该文分析了竖向预应力施工质量的通病,提出了确保竖向预应力施工质量的控制措施,... 详细信息

针对预应力混凝土箱梁腹板出现斜向裂缝的现象,介绍必须重视腹板竖向预应力的施工质量,对如何减小预应力损失,改进压浆工艺,确保压浆质量提出了具体方法.该文分析了竖向预应力施工质量的通病,提出了确保竖向预应力施工质量的控制措施,并从锚具系统、管道系统和张拉锚固工艺方面提出了有关改进建议.

关键词：预应力砼箱梁竖向预应力施工质量控制

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曼陀罗植物内生真菌产生物碱菌株的筛选研究

天然产物研究与开发 2007年第B8期19卷 230-232页

作者：郑毅陈有为张传会吴少华宋艳秋曹旸苗翠苹云南大学省微生物研究所昆明650091

本文从植物曼陀（Datura arborea）中分离得到77株内生真菌。对它们分别进行菌株发酵，发酵产物经乙醇浸提，采用TLC和生物碱显色方法，观察到菌株Ym311977、Ym312023呈生物碱阳性反应。结合HPLC分析结果，表明该生物碱并非曼陀罗植物... 详细信息

本文从植物曼陀（Datura arborea）中分离得到77株内生真菌。对它们分别进行菌株发酵，发酵产物经乙醇浸提，采用TLC和生物碱显色方法，观察到菌株Ym311977、Ym312023呈生物碱阳性反应。结合HPLC分析结果，表明该生物碱并非曼陀罗植物中的主要生物碱成份。经鉴定，Ym311977属镰孢菌属（Fusarium sp．），Ym312023属毛壳菌属（Chaetomium sp．）。

关键词：曼陀罗内生真菌生物碱筛选