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泰山赤灵芝复合降解酶提取白花丹参须根有效成分的研究

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中国中药杂志 2013年第5期38卷 678-682页

作者：李艳玲辛晓明苗增民史仁玖郝岗平泰山医学院生物科学学院山东泰安271016

目的:研究泰山赤灵芝复合降解酶在白花丹参须根有效成分提取中的应用。方法:采用木质纤维素复合降解酶来提取丹参须根中的有效成分,通过正交试验法优化酶解参数。结果:利用优化酶解工艺所得到的丹参须根提取液中总丹参酮和总丹酚酸的提... 详细信息

目的:研究泰山赤灵芝复合降解酶在白花丹参须根有效成分提取中的应用。方法:采用木质纤维素复合降解酶来提取丹参须根中的有效成分,通过正交试验法优化酶解参数。结果:利用优化酶解工艺所得到的丹参须根提取液中总丹参酮和总丹酚酸的提取率可达11.923%,12.465%,比常规非酶法提取提高了62.794%,56.086%。结论:采用木质纤维素复合降解酶酶解法可以充分提取出丹参须根中的有效成分,为中药废弃物的再次利用提供了一条新途径。

关键词：赤灵芝漆酶纤维素酶白花丹参有效成分

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泰山黄精内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

中草药 2013年第11期44卷 1490-1494页

作者：李艳玲王德才史仁玖苗增民廉立慧泰山医学院生物科学学院山东泰安271016

目的研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果从泰... 详细信息

目的研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌,分属于7个属,分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.,占总菌株的31.3%,其次是不产孢真菌Sterile mycelia(28.1%)和链格孢属Alternaria sp.(21.9%)。各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,根中内生真菌的分离率最高,茎和叶中次之,果实中最少。共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性,其中8株具有广谱抗耐药菌活性。对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定,将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune。结论泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌,为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径。

关键词：泰山黄精内生真菌分离鉴定抑菌活性

青岛地区兔源产气荚膜梭菌的分离鉴定及遗传多样性分析

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中国兽医学报 2013年第12期33卷 1822-1827页

作者：吕长辉孙佳芝刘晶晶苗增民王海荣柴同杰山东农业大学动物科技学院山东泰安271018 泰山医学院生命科学学院山东泰安271018

兔的梭菌性肠炎是由产气荚膜梭菌感染引起的严重危害养兔业的一种疾病,为了更好地控制此病,本研究调查了青岛地区规模化兔场爆发此病时产气荚膜梭菌的毒素型及遗传多样性。2010年11月-2012年5月期间,采集青岛地区规模化养兔场疑似产气... 详细信息

兔的梭菌性肠炎是由产气荚膜梭菌感染引起的严重危害养兔业的一种疾病,为了更好地控制此病,本研究调查了青岛地区规模化兔场爆发此病时产气荚膜梭菌的毒素型及遗传多样性。2010年11月-2012年5月期间,采集青岛地区规模化养兔场疑似产气荚膜梭菌感染兔的肝脏进行产气荚膜梭菌的分离鉴定,采用Multiple-PCR方法对分离菌株进行毒素型分析,应用ERIC-PCR方法分析分离菌株的遗传多样性。共分离到25株产气荚膜梭菌,其中A型24株(96%),C型1株(4%)。用ERIC-PCR方法将25株分离株分于9个聚类中,其中Ⅴ型为主要流行型。结果表明:青岛地区规模化兔场中产气荚膜梭菌流行的毒素型主要为A型,且具有多种基因亚型,其中Ⅴ型为主要流行型。此结果为该地区兔产气荚膜梭菌病的免疫和微生态防治提供了重要的参考依据。

关键词：青岛地区产气荚膜梭菌 Multiple—PCR ERIC—PCR

新型猪源H1N1流感病毒的分离鉴定及在实验条件下气源性传播的特点

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畜牧兽医学报 2013年第3期44卷 434-440页

作者：李欣张红娜李欣贤李晓霞侯佩强夏咸柱苗增民柴同杰山东农业大学动物科技学院山东省中德疫源人兽共患病研究中心泰安271018 泰山医学院泰安271016 泰安市疾病防控中心泰安271000 中国人民解放军军事医学科学院兽医研究所长春130000

新型猪源性H1N1流感病毒能引起人和猪的呼吸道传染性疾病,自2009年4月起在全球范围内暴发,引起广泛的关注和研究,本试验拟对其分离株的气源性传播特点进行研究。2011年1月,华东某地区出现流感疫情,本研究从病死猪的鼻腔棉拭子和肺脏中... 详细信息

新型猪源性H1N1流感病毒能引起人和猪的呼吸道传染性疾病,自2009年4月起在全球范围内暴发,引起广泛的关注和研究,本试验拟对其分离株的气源性传播特点进行研究。2011年1月,华东某地区出现流感疫情,本研究从病死猪的鼻腔棉拭子和肺脏中分离到1株新型猪源性H1N1流感病毒A/swine/Shandong/07/2011;用荧光定量PCR方法检测发病猪场舍内、外的空气样品中病毒含量;建立气溶胶传染模型来分析该株病毒在实验条件下气源性传播的特点。结果显示:猪舍内空气样品的阳性率为26.10%,病毒含量在3.14～5.72log10copies.m-3空气之间;舍外下风向10m处空气样品的阳性率为40.70%,病毒含量在2.24～3.77log10copies.m-3空气之间;在传染模型中,A/swine/Shandong/07/2011能够造成气溶胶感染组试验猪的感染,但感染率比直接接触组低。研究表明,A/swine/Shandong/07/2011株具有形成病毒气溶胶的能力,在实验条件下能够引起气源性感染。

关键词：新型猪源性H1N1流感病毒荧光定量PCR 病毒气溶胶气溶胶传播模型

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病房环境气载内毒素含量的研究

济宁医学院学报 2006年第1期29卷 22-23页

作者：苗增民李松张彬柴同杰山东农业大学动物科技学院泰山医学院检验系

目的检测病房环境气载内毒素的浓度。方法采用国际标准AGI-30收集器和LAL凝胶法相结合的方法,首先用AGI-30收集病房环境气载内毒素,再用LAL凝胶法进行测定,并计算出病房环境气载内毒素的浓度EU/m3。结果收集到病房内和病房外走廊环境中... 详细信息

目的检测病房环境气载内毒素的浓度。方法采用国际标准AGI-30收集器和LAL凝胶法相结合的方法,首先用AGI-30收集病房环境气载内毒素,再用LAL凝胶法进行测定,并计算出病房环境气载内毒素的浓度EU/m3。结果收集到病房内和病房外走廊环境中的气载内毒素并计算出浓度分别为33-267EU/m3和66-512EU/m3。结论本方法灵敏度和准确度高,可作为病房环境评定的一种重要参考指标。

关键词：病房环境气载内毒素 EU/m^3

超临界CO_2流体萃取及GC-MS联用技术优化提取和分析四叶参挥发油成分

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中国新药杂志 2015年第14期24卷 1665-1669页

作者：高艳霞苏延友贾凤娟李艳玲苗增民洒荣波唐瑜菁孙继政泰山医学院泰安271016 山东农业大学生命科学学院泰安271018

目的:利用超临界CO2流体萃取技术及气象色谱-质谱(GC-MS)联用技术提取并分析四叶参挥发油成分。方法:利用超临界CO2流体萃取技术,从四叶参中萃取挥发油并进行工艺优化。用GC-MS技术对其化学成分进行分析,并采用面积归一化法确定其百分... 详细信息

目的:利用超临界CO2流体萃取技术及气象色谱-质谱(GC-MS)联用技术提取并分析四叶参挥发油成分。方法:利用超临界CO2流体萃取技术,从四叶参中萃取挥发油并进行工艺优化。用GC-MS技术对其化学成分进行分析,并采用面积归一化法确定其百分含量。结果:四叶参挥发油超临界CO2流体萃取的最佳提取工艺为:萃取温度40℃,萃取压力20 MPa,萃取时间3 h,萃取得率1.21%。利用GC-MS联用技术鉴定出46种化合物,其中组分含量最高的是A-菠菜甾醇15.71%,其次是1,4-Dimethyl-8-isopropylidenetricyclo[5.***.0.0(4,10)]decane 13.64%,再次是反式角鲨烯12.12%,然后是亚油酸甲酯11.45%,D7-菠菜甾醇10.52%,这几个成分占四叶参挥发油总量的63.44%。结论:该方法优化了四叶参挥发油的提取工艺并对其成分进行了定性分析,为四叶参的综合开发利用奠定了基础。

关键词：四叶参超临界CO2萃取工艺优化气相色谱-质谱定性分析

培养法和染色法对养殖环境中微生物气溶胶浓度的检测

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动物医学进展 2010年第S1期31卷 86-89页

作者：刘敬博柴同杰苗增民刘晓敏山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

比较不同检测方法对微生物气溶胶检验效果的影响。采用国际标准的AGI-30空气采样器,收集空气样品,分别用培养计数法和DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚)染色计数法来比较不同养殖环境中微生物气溶胶的浓度。培养计数法测得鸡舍、猪舍和牛舍环... 详细信息

比较不同检测方法对微生物气溶胶检验效果的影响。采用国际标准的AGI-30空气采样器,收集空气样品,分别用培养计数法和DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚)染色计数法来比较不同养殖环境中微生物气溶胶的浓度。培养计数法测得鸡舍、猪舍和牛舍环境中微生物气溶胶的浓度分别为5.73×105～6.72×106cfu/m3空气,9.5×105～4.01×106cfu/m3空气,5.4×104～8.33×105cfu/m3空气,而DAPI染色计数的浓度分别为8.0×106～3.25×108cell/m3空气,1.5×107～2.28×108cell/m3空气,9.0×105～5.93×107cell/m3空气。培养计数法所得浓度仅为DAPI染色计数法的0.04%～10.4%。染色计数法可能会更加客观的反映环境中微生物气溶胶的浓度。

关键词：气载微生物培养计数法 DAPI染色畜禽舍环境

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人胚胎干细胞饲养层培养体系的建立

济宁医学院学报 2005年第3期28卷 4-5页

作者：苗增民李松窦忠英山东农业大学泰山医学院西北农林科技大学

目的建立人胚胎干细胞饲养层培养体系。方法以胎鼠和人胎儿为材料,以DMEM加15%FBS加0.1mM2ME为基础培养液,分别制备胎鼠和胎儿成纤维细胞饲养层。结果分别获得了传16代的胎鼠成纤维细胞和传7代的人胎儿成纤维细胞,建立了人胚胎干细胞饲... 详细信息

目的建立人胚胎干细胞饲养层培养体系。方法以胎鼠和人胎儿为材料,以DMEM加15%FBS加0.1mM2ME为基础培养液,分别制备胎鼠和胎儿成纤维细胞饲养层。结果分别获得了传16代的胎鼠成纤维细胞和传7代的人胎儿成纤维细胞,建立了人胚胎干细胞饲养层的培养体系。结论胎鼠成纤维细胞和人胎儿成纤维细胞相比较,后者生长速度慢,且较易老化;胎鼠成纤维细胞饲养层更有利于人胚胎干细胞的生长;8～14d龄胎鼠最适宜制备人胚胎干细胞饲养层;在室温条件下,以0.2%胰酶加0.04%EDTA为消化液处理原代胎鼠组织块时间以15～20min为宜。

关键词：人胚胎干细胞饲养层成纤维细胞

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影响胚胎干细胞分离克隆的因素

泰山医学院学报 2004年第6期25卷 679-681页

作者：李松宋文刚苗增民窦忠英泰山医学院山东泰安271000 山东农业大学山东泰安271000 西北农林科技大学陕西杨凌712100

目前,世界各国争相研究胚胎干(Embryonic-Stem,ES)细胞,并且已经取得很大进展.但迄今为止仅在小鼠上获得真正意义的ES细胞,即具有参与生殖系传递能力的胚胎干细胞.这说明在其它动物及人类ES细胞研究方面,还存在许多有待探讨的问题.本文... 详细信息

目前,世界各国争相研究胚胎干(Embryonic-Stem,ES)细胞,并且已经取得很大进展.但迄今为止仅在小鼠上获得真正意义的ES细胞,即具有参与生殖系传递能力的胚胎干细胞.这说明在其它动物及人类ES细胞研究方面,还存在许多有待探讨的问题.本文就目前公认的饲养层、培养基、添加物、胚胎日龄、遗传背景以及获取原始生殖细胞的时间等对ES细胞分离克隆的影响加以系统阐述,以期为今后的研究工作提供相关参考.

关键词：胚胎干细胞分离克隆影响因素