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电针对急性脊髓损伤大鼠24h差异蛋白质组学及SOD含量变化的机理研究

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电针对急性脊髓损伤大鼠24h差异蛋白质组学及SOD含量变化的机理研...

作者：苑晓晨北京中医药大学

学位级别：硕士

急性脊髓损伤(Acute Spinal Cord Injury,ASCI)是威胁人类生命的主要损伤性疾病之一。其发病率、致残率、死亡率都很高,每年各国对本病的基础和临床研究均投入了大量的精力,但是其发病机制尚不清楚,仍处于探索阶段。对于急性脊髓损伤的... 详细信息

急性脊髓损伤(Acute Spinal Cord Injury,ASCI)是威胁人类生命的主要损伤性疾病之一。其发病率、致残率、死亡率都很高,每年各国对本病的基础和临床研究均投入了大量的精力,但是其发病机制尚不清楚,仍处于探索阶段。对于急性脊髓损伤的临床治疗,目前还没有特效的方法。针刺作为治疗急性脊髓损伤的有效方法之一,以其独特性发挥了重要作用。本研究选用改进的Allen’s打击装置制造脊髓损伤大鼠模型,旨在应用适宜频率参数的电针治疗,探讨其改善急性脊髓损伤大鼠受损脊髓状态的分子机制。对损伤部位的脊髓组织进行SOD含量的检测;取损伤部位脊髓组织进行蛋白质组学分析,找出相关差异蛋白。探讨电针在该模型上产生疗效的可能的神经化学机制,并在蛋白质组学的角度上探讨其机制,并现将主要结果简述如下:1.损伤局部组织SOD含量:24h后对大鼠进行治疗,然后处死动物取出损伤段脊髓,测定SOD的浓度。发现(1)①与空白组比较:模型组和药物组含量下降,且有极显著性差异。②与空白组比较:电针组含量下降,有显著性差异。(2)与模型组比较:电针组和药物组无差异,但是有增加的趋势。2.对大鼠脊髓全蛋白质进行双向凝胶电泳,借助Mascot软件从中找出差异表达蛋白质点。应用基质辅助激光解吸电离串联质谱,对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果:成功发现个8蛋白质点,表达水平具有显著性差异变化。在已发现的蛋白点中,成功鉴定出7种蛋白质:①磷酸丙糖异构酶(triosephosphate isomerase)(TPI)②还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-脱氢酶复合体Ⅰ-亚复合物10(subcomplex 10)③磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglycerate mutase 1)④核苷二磷酸激酶(NDPK)⑤E2泛素连接酶(E2N)⑥神经丝亚单位(NF-M)⑦DJ-1蛋白。通过本动物实验可见,针刺对早期急性脊髓损伤具有一定的治疗效果。鉴定出的蛋白质可能通过细胞的能量代谢,蛋白质的合成和水解,自由基的产生和清除,及其神经细胞骨架重建等途径参与了ASCI的损伤及修复过程。

关键词：电针急性脊髓损伤差异蛋白质组学 SOD CBS运动联合计分法

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浅谈针灸推拿治疗黄褐斑

浅谈针灸推拿治疗黄褐斑

督脉电针对急性脊髓损伤6h后大鼠差异蛋白质组学的机理研究

中国针灸学会第七届全国中青年针灸推拿学术研讨会

作者：苑晓晨北京中医药大学

黄褐斑是一种惟面部出现黄褐色斑片为特征的色素沉着性皮肤病,属中医“黧黑斑”、“面黯”的范畴,为妇科常见的一种皮肤病。该病多见于中年女性,一般表现为以对称性发生于面部的淡褐色或深褐色色素斑,好发于鼻部、额部、颧部、口周和面... 详细信息

黄褐斑是一种惟面部出现黄褐色斑片为特征的色素沉着性皮肤病,属中医“黧黑斑”、“面黯”的范畴,为妇科常见的一种皮肤病。该病多见于中年女性,一般表现为以对称性发生于面部的淡褐色或深褐色色素斑,好发于鼻部、额部、颧部、口周和面颊等处,多无自觉症状,皮损为淡褐色或深褐色色素沉着斑,边缘多清楚,表面光滑,无鳞屑,曝晒后色素可加深。

关键词：黄褐斑针灸疗法推拿治疗中医病机

来源： cnki会议评论

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北京中医药大学学报 2008年第3期31卷 202-205页

作者：李志刚耿昊苑晓晨魏开华北京中医药大学针灸学院北京100029 军事医学科学院国家生物医学分析中心

目的确定急性脊髓损伤(SCI)后差异表达蛋白,初步探讨其功能,从差异蛋白组学角度研究SCI的病理机制,以及电针对该病的治疗作用。方法大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、药物组、电针组,每组15只大鼠,共75只。采用自制的改良式Allen... 详细信息

目的确定急性脊髓损伤(SCI)后差异表达蛋白,初步探讨其功能,从差异蛋白组学角度研究SCI的病理机制,以及电针对该病的治疗作用。方法大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、药物组、电针组,每组15只大鼠,共75只。采用自制的改良式Allen’s打击装置造模。术后6h取脊髓损伤区2cm的脊髓组织称重,保存。对样本蛋白进行提取、定量、蛋白双向电泳图像分析,找出差异点进行质谱分析和数据库检索。结果成功鉴定出6种蛋白质:假定蛋白LEF3-IAP2、泛素羧基末端水解酶、先驱B环蛋白3、假定蛋白ORF F-93、角蛋白16、泡溶酶蛋白。结论通过本动物实验可见,针刺对早期脊髓损伤具治疗效果。鉴定出的蛋白质可能通过引起炎症细胞浸润、神经细胞凋亡等途径参与了SCI的损伤及修复过程。

关键词：差异蛋白质组学电针急性脊髓损伤大鼠

不同温度下弹跳金属微粒对圆盘绝缘子表面电荷积聚的影响

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绝缘材料 2022年第10期55卷 39-46页

作者：赵慧存高宇王文渠王欢苑晓晨天津大学电气自动化与信息工程学院天津300072

气体绝缘开关设备(GIS)和输电线路(GIL)中的金属微粒在电场作用下可弹跳至绝缘子附近,加剧表面电荷积聚,严重时会引发沿面闪络事故。选取126 kV圆盘绝缘子为试样,设计了同轴电极系统,采用Kelvin型静电探头研究了不同温度下(23、40、60℃... 详细信息

气体绝缘开关设备(GIS)和输电线路(GIL)中的金属微粒在电场作用下可弹跳至绝缘子附近,加剧表面电荷积聚,严重时会引发沿面闪络事故。选取126 kV圆盘绝缘子为试样,设计了同轴电极系统,采用Kelvin型静电探头研究了不同温度下(23、40、60℃)弹跳金属微粒对绝缘子表面电荷积聚特性的影响。结果表明:在室温下,绝缘子非平面区的电荷积聚模式与金属微粒的运动模式有着密切的关系;表面电荷积聚量与温度呈正相关;当温度上升至60℃时,运动到地电极垂直面的金属微粒易引发闪络,在与闪络同径向的非平面区会积聚大量的异极性电荷。

关键词：气体绝缘设备绝缘子表面电荷弹跳金属微粒温度

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振动诱发金属微粒弹跳对圆盘绝缘子表面电荷积聚的影响

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绝缘材料 2022年第11期55卷 63-70页

作者：王文渠高宇赵慧存苑晓晨王欢天津大学电气自动化与信息工程学院天津300072

绝缘子上积聚的表面电荷是影响直流GIS/GIL绝缘性能的关键因素,金属微粒对表面电荷的积聚具有重要影响。在GIS/GIL的运行过程中,设备振动诱发金属微粒弹跳从而改变电荷的积聚行为,威胁设备的绝缘安全。因此,研究振动诱发的金属微粒弹跳... 详细信息

绝缘子上积聚的表面电荷是影响直流GIS/GIL绝缘性能的关键因素,金属微粒对表面电荷的积聚具有重要影响。在GIS/GIL的运行过程中,设备振动诱发金属微粒弹跳从而改变电荷的积聚行为,威胁设备的绝缘安全。因此,研究振动诱发的金属微粒弹跳对表面电荷积聚的影响具有重要意义。本文以126 kV圆盘绝缘子为试样,搭建了非周期振动发生装置,测量了振动条件下线形金属微粒的运动轨迹及绝缘子表面电荷的积聚情况,分析了启举方式和微粒最终位置对绝缘子表面电荷积聚的影响。结果表明:微粒以先滚动后启举的方式比直接启举的方式导致表面电荷积聚更明显,并且微粒最终静止在交界区比静止在平面区积聚更多电荷。

关键词：直流GIS/GIL 表面电荷线形金属微粒振动

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不同时段电针对急性脊髓损伤大鼠作用机制的蛋白质组学分析

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针刺研究 2009年第2期34卷 75-82页

作者：苑晓晨宋金玲田贵华时素华李志刚北京中医药大学针灸学院北京100029

目的:检测电针急性脊髓损伤(ASCI)大鼠6、24、48h差异蛋白变化情况,初步分析其作用机制。方法:105只SD大鼠随机分为正常组、6h模型组、6h电针组、24h模型组、24h电针组、48h模型组和48h电针组,每组15只。采用自制的Allen’s打击装置造A... 详细信息

目的:检测电针急性脊髓损伤(ASCI)大鼠6、24、48h差异蛋白变化情况,初步分析其作用机制。方法:105只SD大鼠随机分为正常组、6h模型组、6h电针组、24h模型组、24h电针组、48h模型组和48h电针组,每组15只。采用自制的Allen’s打击装置造ASCI模型。电针"大椎""命门"。取脊髓损伤区脊髓组织对样本蛋白进行提取、定量、蛋白双向电泳图像分析,找出差异点进行质谱分析和数据库检索。结果:本研究共鉴定出了10个丰度变化大于1.5倍的差异蛋白。在6h段,有5种差异蛋白,与正常组比,模型组4种差异蛋白表达上调,1种下调,电针后4种差异蛋白的表达被逆转;在24h段,有7种差异蛋白,造模后6种差异蛋白上调,1种下调,电针后6种蛋白的表达被逆转;在48h段,有8种差异蛋白,造模后6种差异蛋白上调,2种下调,电针后其中5种差异蛋白的表达变化被逆转。与电针效应有关的蛋白功能涉及细胞能量代谢、信号转导、DNA修复、细胞凋亡、构建细胞骨架等。随着损伤时间的增加,被鉴定出的脊髓内差异表达蛋白也增多。24h组与6h组比较,多了2种差异蛋白:核苷二磷酸激酶及磷酸丙糖异构酶1,造模后其表达上调,电针后下调。48h组与24h组比较,多了3种差异蛋白:二氢硫辛酰胺脱氢酶、苹果酸脱氢酶1及三磷酸甘油醛脱氢酶,这3种蛋白在造模后表达分别上调、下调、上调,电针后均表现为上调,减少了2种蛋白:核苷二磷酸激酶及E2泛素结合酶。结论:电针可逆转急性损伤脊髓内多数差异蛋白表达的变化,其作用可能是通过抑制神经细胞凋亡、改善细胞能量代谢、调节异常蛋白等途径促进脊髓损伤的修复。随着时间和针刺次数的增加,电针可能逐渐侧重于发挥改善细胞能量代谢和抑制其凋亡的作用,而对受损蛋白的调节作用在减弱。

关键词：急性脊髓损伤电针差异表达蛋白蛋白组学分析

15d-PGJ_2减弱香烟提取物抑制人脐静脉内皮细胞迁移

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基础医学与临床 2011年第4期31卷 394-399页

作者：李炳蔚苑晓晨李宏伟修瑞娟中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所北京100005

目的探讨15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对香烟提取物(CSE)抑制人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移的保护作用。方法 "划痕法"检测HUVECs的迁移。毛细管样成管实验检测HUVECs的血管新生。Western blot检测occludin蛋白表达。结果与对... 详细信息

目的探讨15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对香烟提取物(CSE)抑制人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移的保护作用。方法 "划痕法"检测HUVECs的迁移。毛细管样成管实验检测HUVECs的血管新生。Western blot检测occludin蛋白表达。结果与对照组相比,CSE显著抑制HUVECs迁移,使单个视野划痕内细胞数由629±28降低至364±17(P<0.01),15d-PGJ2干预可使细胞数回升至546±20(P<0.01)。CSE抑制HUVECs血管新生,15d-PGJ2可逆转CSE对HUVECs血管新生的抑制。与对照组相比,CSE使HUVECs occludin蛋白表达量由0.37±0.04降至0.12±0.03(P<0.01)。15d-PGJ2干预可使其回调至0.28±0.04(P<0.01),但仍低于对照组(P<0.05)。结论 CSE对HUVEVs迁移的抑制作用可能是通过下调occludin蛋白的表达实现的。15d-PGJ2减弱CSE下调occludin表达而逆转CSE对HUVECs迁移的抑制。

关键词：香烟提取物内皮细胞迁移 15-脱氧-前列腺素J2

褪黑素抑制白介素-1β诱导的人脐静脉内皮细胞通透性

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基础医学与临床 2011年第4期31卷 409-413页

作者：苑晓晨李炳蔚李宏伟修瑞娟中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所北京100005

目的观察褪黑素(MLT)对白介素-1β(IL-1β)诱导的内皮通透性改变的影响。方法用不同浓度的IL-1β和MLT干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。用Transwell系统检测透过单层HUVECs的荧光标记的葡聚糖。用免疫荧光和Western blot检测HUVECs钙黏素... 详细信息

目的观察褪黑素(MLT)对白介素-1β(IL-1β)诱导的内皮通透性改变的影响。方法用不同浓度的IL-1β和MLT干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。用Transwell系统检测透过单层HUVECs的荧光标记的葡聚糖。用免疫荧光和Western blot检测HUVECs钙黏素(VE-cadherin)的表达。结果与对照组相比,5、10和20 ng/mL的IL-1β分别使HUVECs通透性由1.5±0.1升高为4.8±0.3、5.2±0.4和9.8±0.8(P<0.01);10和100μmol/L的MLT分别使10 ng/mL的IL-1β诱导的通透性从5.2±0.4降至2.8±0.3和2.7±0.3(P<0.01)。IL-1β破坏VE-cadherin在细胞膜上表达的连续性,MLT抑制IL-1β的这种作用。与对照组相比,IL-1β使HUVECs的VE-cadherin表达量由0.91±0.04降至0.42±0.05(P<0.01)。MLT可使其表达量上调至0.69±0.04,显著高于IL-1β组(P<0.01),但仍低于对照组(P<0.01)。结论 MLT能够通过抑制IL-1β诱导的VE-cadherin表达的降低来保护人脐静脉内皮细胞屏障的完整性。

关键词：褪黑素白介素-1β 内皮细胞通透性血管内皮钙黏素

荧光显微镜观察封闭式脊髓窗内的大鼠脊髓微循环

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基础医学与临床 2013年第8期33卷 1019-1023页

作者：苑晓晨李炳蔚武清斌荆瀛黎盛有明李宏伟刘淑英修瑞娟中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所北京100005

目的探讨应用荧光显微镜通过改进的封闭式脊髓窗,观察大鼠脊髓背侧软脊膜微循环状态的可行性及效果。方法用8周龄雄性SD大鼠,暴露T9至T11棘突,咬除T10棘突和椎板,暴露硬脊膜;在T9和T11棘突上安装固定器辅助物。用牙科丙烯酸树脂和玻璃... 详细信息

目的探讨应用荧光显微镜通过改进的封闭式脊髓窗,观察大鼠脊髓背侧软脊膜微循环状态的可行性及效果。方法用8周龄雄性SD大鼠,暴露T9至T11棘突,咬除T10棘突和椎板,暴露硬脊膜;在T9和T11棘突上安装固定器辅助物。用牙科丙烯酸树脂和玻璃片为原料在T10节段安装改进的封闭脊髓窗。采血并离心(2 000×g)收集红细胞,将100μL压积的红细胞用Dil荧光染料(5 mg/L)体外孵育,静脉注射入体内;用罗丹明6G(0.3 g/L)静脉注射,体内标记白细胞。大鼠脊柱用微循环观测椎体固定器进行固定。用动物活体荧光成像显微系统进行观测和记录。结果通过该系统可以观测大鼠软脊膜上微血管的形态和分布特点、血管密度;可以观测到Dil标记的红细胞在血管内的黏附和流速,观察和记录罗丹明6G标记的白细胞在血管壁的黏附滚动。结论改进式的封闭脊髓窗和微循环观测椎体固定器,可用于对大鼠软脊膜上微血管进行观察和检测。

关键词：大鼠脊髓微循环活体荧光脊髓窗