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环氧乙烷/环氧丙烷无规共聚醚的合成与表征

环氧乙烷/环氧丙烷无规共聚醚的合成与表征

作者：苑仁旭郑州大学

学位级别：硕士

以醇为引发剂的环氧乙烷(EO)/环氧丙烷(PO)无规聚醚是一种重要的非离子型表面活性剂。这类产物的亲水/亲油特性可以通过改变分子中的EO/PO配比来实现,因此,被广泛用作洗涤剂、分散剂、起泡剂、乳化剂、润滑剂等。对于以丙二醇为引发剂,E... 详细信息

以醇为引发剂的环氧乙烷(EO)/环氧丙烷(PO)无规聚醚是一种重要的非离子型表面活性剂。这类产物的亲水/亲油特性可以通过改变分子中的EO/PO配比来实现,因此,被广泛用作洗涤剂、分散剂、起泡剂、乳化剂、润滑剂等。对于以丙二醇为引发剂,EO/PO嵌段共聚醚的合成研究较多,而无规共聚醚的合成研究未见报道。近年来,科研工作者对于EO/PO嵌段共聚醚的浊点进行了深入的研究,发现该类聚醚的浊点除了与其自身的结构有关外,还受醇类、表面活性剂和电解质等添加剂的影响;而对于无规共聚醚浊点的影响因素研究的非常少。本论文主要对丙二醇引发EO和PO无规共聚合的方法进行了研究。通过对聚合条件、聚合物结构与性能之间关系的研究,来合成一类新型的无规共聚醚,并期望把该类共聚醚用于纺丝油剂的制备。并对无规共聚醚水溶液的浓度、无规共聚醚结构及无机电解质、酸、醇、表面活性剂对浊点的影响进行了详细的研究。并合成了EO/PO嵌段共聚醚与无规共聚醚的部分性能进行比较。初步探索了用氯代丁烷对无规聚醚封端的合适条件。实验结果表明: 1.聚合反应温度升高,反应速度加快,温度过高导致产物的不饱和度高、颜色深:催化剂浓度增加,反应速度增加;EO/PO配比增加,产物的相对分子质量越接近于设定相对分子质量。 2.采用连续滴加单体的方法以丙二醇为引发剂合成无规聚醚,催化剂用量为产物质量的0.25%,反应温度为115℃,反应压力小于0.4MPa,产物的相对分子质量分布较窄,产物无色透明。 3.采用沸点高于150℃的引发剂时在80℃除水。而对于沸点较低的引发剂,则只能先合成相对分子质量较低的中间体,然后再以该中间体为引发剂合成目标产物。 4.采用核磁共振、红外光谱等方法对聚醚的结构进行了表征,并测定耐热性、浊点、粘度和表面张力等性能指标,分析了共聚醚的结构与性能之间的关系。 5.研究了无规共聚醚水溶液的浓度、无规共聚醚结构及无机电解质、酸、醇、表面活性剂对浊点的影响。结果表明所选择的电解质均能降低聚醚的浊点;酸能轻微提高聚醚的浊点;水溶性醇和非水溶性醇的影响效果不同,前者能提高聚醚

关键词：无规聚醚环氧乙烷环氧丙烷结构性能

ISG15抑制肺腺癌进展及其调控机制的研究

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ISG15抑制肺腺癌进展及其调控机制的研究

作者：曲同苑天津医科大学

学位级别：硕士

研究目的:初步研究ISG15在肺腺癌体外和体内所发挥的作用,阐明ISG15被调控的机制,初步明确ESRP1与ISG15之间的关系,为肺腺癌患者提供新的诊断、预后及治疗靶点。研究方法:1.收集天津医科大学肿瘤医院病理科收集2012年1月至2012年12月之... 详细信息

研究目的:初步研究ISG15在肺腺癌体外和体内所发挥的作用,阐明ISG15被调控的机制,初步明确ESRP1与ISG15之间的关系,为肺腺癌患者提供新的诊断、预后及治疗靶点。研究方法:1.收集天津医科大学肿瘤医院病理科收集2012年1月至2012年12月之间的预后信息完整的肺腺癌石蜡标本153例及4例配对的远期转移灶石蜡标本,通过ISG15免疫组织化学染色,观察分析ISG15染色免疫评分及表达定位与不同年龄、性别、肿瘤大小、病理类型、pTNM分期及有无淋巴结转移之间的关系;通过Keplan-Merier、COX多因素分析ISG15染色免疫评分及表达定位与患者预后之间的关系;通过单因素分析,ISG15染色免疫评分及表达定位与远期复发/转移的关系,通过ISG15免疫组织化学染色比较分析原发灶与转移灶之间的表达差异。2.使用慢病毒构建稳定过表达/降表达ISG15的肺腺癌细胞系A549和H1299,通过Transewll实验和伤口愈合实验来探究ISG15对肺腺癌细胞侵袭能力的影响;通过CCK-8实验和细胞克隆形成实验探究ISG15对肺腺癌细胞增殖能力的影响;对肺腺癌细胞系A549和H1299给予外源性重组纯化ISG15处理,通过CCK-8实验和细胞克隆形成实验探究外源性ISG15对肺腺癌细胞增殖能力的影响3.使用H1299细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组,ISG15降表达组,外源性ISG15组,观察裸鼠体重及肿瘤体积,八周后取出裸鼠内脏及肿瘤组织,制成石蜡标本进行HE及免疫组化染色。4.使用慢病毒构建稳定过表达/降表达ESRP1的肺腺癌细胞系A549和H1299,通过Western blot和RT-qPCR检测ISG15蛋白水平和mRNA水平的变化;通过生物信息学对ISG15启动子区进行预测分析,在稳定过表达/降表达ESRP1的细胞中检测CREB的表达变化;向A549和H1299细胞中瞬时转染CREB质粒,使Western Blot观察ISG15的变化情况;向A549和H1299细胞中给予CREB小分子抑制剂处理,使用Western blot观察CREB以及ISG15在0h,3h,6h,9h,12h的变化情况;使用染色质免疫共沉淀探究CREB对ISG15的转录调控作用;针对CREB可能结合ISG15启动子区的位点进行突变,构建ISG15启动子区不同位点突变型质粒,使用双荧光素酶报告系统,探究CREB在ISG15启动子区的具体结合位点。5.在稳定过表达ESRP1的肺腺癌细胞系A549和H1299中,将细胞质与细胞核分离后进行Western Blot检测,观察在ESRP1过表达前后,ISG15表达水平及定位的变化并通过细胞免疫荧光实验进行验证;随机选取1中50例石蜡标本进行ESRP1免疫组织化学染色,观察分析同一病例中ESRP1及ISG15的染色表达及定位情况,是否和细胞实验结果相一致。6.在稳定过表达ISG15的肺腺癌细胞系A549和H1299,通过Western Blot和RT-qPCR检测ESRP1蛋白及mRNA水平的变化情况;给予放线菌酮处理,观察ESRP1在0h,6h,12h,18h,24h蛋白水平的降解情况;通过免疫共沉淀,探究ISG15与ESRP1之间是否存在直接作用关系。7.在稳定过表达ESRP1的基础上,给予上调ISG15或敲降ISG15的处理,通过Western Blot检测EMT相关指标的变化情况;通过Transwell实验和伤口愈合实验,探究ISG15协同ESRP1对肺腺癌细胞EMT过程的抑制情况。研究结果:***15高表达与肿瘤大小（P＜0.001）、pTNM分期（P＜0.001）和淋巴结转移（P=0.038）密切相关,Keplan-Merier生存分析显示,高表达ISG15的患者其OS（P=0.023）和RFS（P=0.021）均显著高于低表达或不表达ISG15的患者;ISG15核阳性与肿瘤大小（P=0.021）、pTNM分期（P=0.011）和淋巴结转移（P=0.025）密切相关,通过Keplan-Merier生存分析显示,具有ISG15核阳性的患者其OS（P＜0.001）和RFS（P＜0.001）均显著高于不具有ISG15核阳性的患者;COX多因素分析显示,ISG15表达水平以及ISG15核阳性情况均为影响OS的独立预后因素;高表达ISG15或ISG15核阳性的患者均不易出现远期复发转移,且同一病例的原发灶与转移灶出现了ISG15由阳性到阴性的转变。2.过表达ISG15组的细胞,其Transewll实验中穿膜细胞数目较对照组明显下降（P＜0.05）,伤口愈合实验中明显愈合减小（P＜0.05）,CCK-8实验及克隆形成实验中细胞增殖数量明显降低（P＜0.05）;降表达ISG15组其Transewll实

关键词：干扰素刺激基因15 上皮选择性剪切蛋白1 环磷腺苷效应结合蛋白肺腺癌上皮间质转化

拟南芥抗寒基因CBF1的克隆、表达载体的构建及鸡冠花离体再生体系的建立

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拟南芥抗寒基因CBF1的克隆、表达载体的构建及鸡冠花离体再生体系...

作者：李春苑兰州大学

学位级别：硕士

冷驯化是一个由数百个基因协同调控的复杂的生物过程。在这个由众多基因构成的调控网络中,少数关键性调控基因控制着大量基因的表达。C-repeatbinding factor(CBF)基因是冷诱导转录级联反应的调节子,该基因的过表达植株表现出抗寒性的... 详细信息

冷驯化是一个由数百个基因协同调控的复杂的生物过程。在这个由众多基因构成的调控网络中,少数关键性调控基因控制着大量基因的表达。C-repeatbinding factor(CBF)基因是冷诱导转录级联反应的调节子,该基因的过表达植株表现出抗寒性的增强。本实验以拟南芥野生型Arabidopsis thaliana C24为材料,从C24基因组中克隆CBF1(C-repeat binding factor 1)全序列,连接到表达载体pCAMBIA1300中,成功构建了CBF1的真核表达载体。此外,同时建立鸡冠花组织培养再生体系,用于后期CBF1的遗传转化和抗冻性转基因植株的获得。主要内容如下:1拟南芥CBF1基因的克隆与鉴定:根据NCBI数据库中的拟南芥CBF1基因序列,设计含有限制性内切酶XbaⅠ和SacⅠ酶切位点的上、下游特异引物,通过PCR获得CBF1基因767bp全序列。将获得的CBF1基因连接到pMD18-T载体中,用热激法转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,构建克隆载体pMD18T-CBF1。通过蓝白斑筛选、菌落PCR以及双酶切鉴定,测序,挑取正确的克隆进行下一步操作。2 CBF1基因真核表达载体的构建:将pMD18T-CBF1和表达载体pCAMBIA1300均用XbaⅠ和SacⅠ双酶切后回收目的基因CBF1和载体pCAMBIA1300,T4连接酶连接过夜,热激转化大肠杆菌感受态DH5α,酶切鉴定获得阳性克隆。将重组质粒pCAMBIA1300-CBF1热激转化农杆菌GV3101,鉴定后的阳性菌株用于花卉植物的遗传转化。3鸡冠花再生体系的建立:以鸡冠花顶芽为外植体,通过愈伤组织和不定芽的诱导建立了再生体系。分化培养基为:MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.5mg/L IAA,愈伤组织的诱导率为86.7%,不定芽的诱导率为71.7%。1/2MS培养基生根诱导,生根率为92%。为下一步CBF1基因的遗传转化奠定了实验基础。我们成功克隆了CBF1基因并构建出CBF1真核表达载体,建立了鸡冠花再生体系,为下一步转化鸡冠花等花卉植物、提高其抗冻性奠定了坚实基础。

关键词：拟南芥 CBF1 克隆表达载体构建鸡冠花

非均一相互作用能对超薄膜生长影响的Monte Carlo模拟研究

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物理学报 2010年第9期59卷 6430-6437页

作者：刘祖黎苑新喜魏合林姚凯伦华中科技大学物理学院武汉430074 中国地质大学数学与物理学院武汉430074

利用Monte Carlo(MC)模拟技术研究了非均一的吸附原子与基底相互作用能在一定的生长条件下对超薄膜生长过程的影响.非均一相互作用能是由基底表面原子在垂直和水平方向上实际位置与理想晶格原子位置的偏差所造成.本文用高斯分布来表示... 详细信息

利用Monte Carlo(MC)模拟技术研究了非均一的吸附原子与基底相互作用能在一定的生长条件下对超薄膜生长过程的影响.非均一相互作用能是由基底表面原子在垂直和水平方向上实际位置与理想晶格原子位置的偏差所造成.本文用高斯分布来表示这种非均一相互作用能.模拟结果表明:非均一相互作用能对超薄膜的生长过程及薄膜的形貌有显著的影响.这种影响同时受到生长条件的限制,在中等温度时相互作用能的非均一性对岛的个数、平均大小的影响最显著;温度的增加在一定程度上可抵御相互作用能的非均一性对薄膜生长的影响.

关键词：薄膜生长 Monte Carlo模拟相互作用能