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PK2通过CaSR激活NLRP3炎性小体在睾丸炎中的作用与机制研究

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PK2通过CaSR激活NLRP3炎性小体在睾丸炎中的作用与机制研究

作者：苏钰芳华中科技大学

学位级别：硕士

【目的】探究在UPEC诱导的大鼠睾丸炎模型中,TM中CaSR的表达情况。【方法】从湖北省疾控中心购买250-300kg的Wistar雄性大鼠构建UPEC睾丸炎模型,收集其睾丸组织、睾丸间质液和血液标本。首先,用LB无抗生素细菌培养基摇UPEC菌液过夜,酶... 详细信息

【目的】探究在UPEC诱导的大鼠睾丸炎模型中,TM中CaSR的表达情况。【方法】从湖北省疾控中心购买250-300kg的Wistar雄性大鼠构建UPEC睾丸炎模型,收集其睾丸组织、睾丸间质液和血液标本。首先,用LB无抗生素细菌培养基摇UPEC菌液过夜,酶标仪检测UPEC菌液浓度;从大鼠两侧输精管逆行注射菌液后缝合伤口。等量的生理盐水注射作为对照组。7天后确认UPEC睾丸炎模型是否构建成功,实验方法有UPEC基因PAPC及菌落的鉴定,睾丸HE染色,以及电镜下寻找睾丸中UPEC细菌。确认模型构建成功后,取新鲜的睾丸分离出TM,鉴定细胞的纯度,检测巨噬细胞内CaSR的表达情况。【结果】模型构建7天后,UPEC组大鼠睾丸匀浆中明显含有UPEC细菌PAPC基因;且将UPEC组睾丸匀浆涂平板后,次日肉眼可见大量UPEC细菌菌落生成,而对照组平板无细菌菌落生长。电镜下在UPEC感染组大鼠睾丸间质中发现UPEC细菌。肉眼可见UPEC感染组Wistar大鼠睾丸体积与质量较生理盐水对照组相比均减少;精子前向运动率和精子总数与生理盐水对照组相比均降低,精子质量明显受到影响。在睾丸组织中,结果显示,CaSR在正常的大鼠睾丸组织中表达,且感染UPEC后CaSR m RNA与蛋白水平明显升高。TM的RT-PCR与WB结果同样显示,CaSR在UPEC感染组TM中大量表达。【结论】UPEC大鼠睾丸炎模型构建成功;无论是在基因水平还是蛋白水平,UPEC促进CaSR在TM中表达增加。【目的】本部分在UPEC促进CaSR在睾丸巨噬细胞表达增加的基础上,我们进一步研究CaSR在睾丸炎机制中的作用,探索了感染性睾丸炎的天然免疫机制。【方法】构建UPEC大鼠睾丸炎模型,分为生理盐水对照组,UPEC感染组,CaSR抑制剂NPS2143阴性对照组以及UPEC+NPS2143抑制剂组。第一天我们按照第一部分的实验方法构建生理盐水对照组大鼠10只,UPEC感染组20只。次日取10只UPEC感染组大鼠,在睾丸原位注射CaSR抑制剂NPS-2143以构建UPEC+NPS2143抑制剂组。然后在10只生理盐水对照组及10只UPEC感染组大鼠睾丸中原位注射等体积的DMSO（NPS-2143溶剂）,另构建10只NPS-2143阴性对照组。通过HE染色观察睾丸组织学变化;取附睾尾部精子分析精子总数及前向运动;运用质谱的方法检测各组大鼠血清中睾酮的水平并进行分析;我们通过fluo4-am荧光标记的流式法和酶标仪法检测各组大鼠巨噬细胞内钙离子的情况;通过ELISA方法检测睾丸间质液与原代TM上清液中IL-1β的分泌情况;然后,在体外实验中,先分离出正常的大鼠睾丸巨噬细胞,再在细胞培养基中用细菌UPEC体外刺激0min、30min、60min、120min,检测刺激后TM中CaSR与NLRP3的基因表达水平。同时在体内实验中,分离出原代TM并检测TM中CaSR与NLRP3 m RNA表达水平;运用Western Blot实验方法检测原代睾丸巨噬细胞中NLRP3蛋白和Caspase-1蛋白的表达情况。【结果】UPEC感染组睾丸组织切片表现出明显的炎性损伤,包括生精上皮排列不规则且层数减少以及间质中免疫细胞的浸润;值得一提的是,UPEC+NPS-2143抑制剂组大鼠睾丸的炎性损伤有所缓解;NPS-2143阴性对照组较生理盐水对照组未见明显的变化。UPEC感染后大鼠精子总数与精子前向运动率与对照组相比明显下降,而使用CaSR抑制剂NPS-2143后精子总数与精子前向运动率有所提高。正常情况下,大鼠血清中睾酮的水平约为4.5ng/m L,UPEC感染后大鼠睾酮的水平约下降3倍,经过CaSR抑制剂NPS-2143干预后,与UPEC感染组相比睾酮的水平约升高了1倍。体内实验流式结果显示,与对照组相比,UPEC组原代巨噬细胞胞浆内含有大量的钙离子内流（P＜0.01）,使用CaSR抑制剂NPS-2143后钙离子内流减少（P＜0.05）。酶标仪检测巨噬细胞胞浆钙离子水平的结果显示UPEC+NPS-2143组中钙离子的水平较UPEC感染组相比下降（P＜0.05）。体外实验结果显示,细菌UPEC体外刺激的最佳时间是60min,UPEC刺激后TM中CaSR与NLRP3的基因水平均明显升高。Western Blot结果显示,UPEC感染后大鼠睾丸原代巨噬细胞中NLRP3的蛋白水平明显增加,而CaSR抑制剂可以抑制NLRP3蛋白的表达。【结论】异常增高的CaSR是造成UPEC睾丸炎性损伤的重要因素之一,对精子活力、精子总数、睾丸结构以及血清睾酮的水平产生负面影响,然而CaSR抑制剂NPS-2143可以在一定程度上缓解这些炎性损伤;在UPEC感染后,睾丸巨噬细胞内CaSR可能通过促进钙离子内流激活NLRP3炎性小体通路。【目

关键词： UPEC睾丸炎 CaSR 睾丸巨噬细胞精子质量睾酮 NPS-2143 精子活力 UPEC IL-1β PK2

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超声新技术对无精子症诊断的新进展与意义

中华男科学杂志 2023年第10期29卷 949-952页

作者：苏钰芳(综述) 方磊(综述) 李翠玲(综述) 余俊(审校) 江西省妇幼保健院肿瘤科江西南昌330006 九江学院附属医院急诊科江西九江332000 广州市第一人民医院超声医学科广东广州510180 中部战区总医院超声诊断科湖北武汉430014

无精子症的诊断和治疗极其依赖辅助检技术,且相较于CT、MRI,超声对无精子症的诊断更具有实用价值。目前关于超声技术主要集中在超声造影、实时超声弹性成像以及超声靶向穿刺,本文旨在总结与展望超声新技术在无精子症中的应用。实时超声... 详细信息

无精子症的诊断和治疗极其依赖辅助检技术,且相较于CT、MRI,超声对无精子症的诊断更具有实用价值。目前关于超声技术主要集中在超声造影、实时超声弹性成像以及超声靶向穿刺,本文旨在总结与展望超声新技术在无精子症中的应用。实时超声弹性成像技术在乳腺疾病中应用广泛且技术成熟,有望在无精子症中发挥更大的作用;超声靶向穿刺技术能极大降低睾丸生精功能的损伤,但应用仍不广泛。新技术间的联合应用能弥补各自的不足,提高无精子症诊断的准确率。因此,进一步研究超声新技术对无精子症的诊断必能发挥更大的作用。

关键词：无精子症超声靶向穿刺超声造影技术实时超声弹性成像技术

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热休克蛋白70(HSP70)与男性肿瘤

热休克蛋白70(HSP70)与男性肿瘤

第十三届全国免疫学学术大会

作者：苏钰芳章慧平华中科技大学同济医学院

HSP70是一类主要存在于胞质内的可溶性钙结合蛋白,是一类高度保守的蛋白质分子,其N端的结构域具有ATP酶活性,C端的疏水结构可结合多种新合成肽链,可帮助蛋白分子完成折叠及转运。在细胞质功能蛋白的折叠、转运和降解中发挥着重要作用。... 详细信息

HSP70是一类主要存在于胞质内的可溶性钙结合蛋白,是一类高度保守的蛋白质分子,其N端的结构域具有ATP酶活性,C端的疏水结构可结合多种新合成肽链,可帮助蛋白分子完成折叠及转运。在细胞质功能蛋白的折叠、转运和降解中发挥着重要作用。有研究表明,HSP70在细胞内发挥着分子伴侣、抗氧化、抗细胞凋亡等重要作用,在很多肿瘤细胞中呈高表达,这常常提示肿瘤具有很强的增殖能力和侵袭性,从而对宿主的机能有更大的危害,引起预后不佳等问题,由此可作为肿瘤预后的判断指标,已有很多文献报道HSP70与男性肿瘤的关联,例如有文献报道HSP70能作为判断肾细胞癌预后的判断指标。与男性肿瘤相关的文献也有不少,本文旨在对此方面的研究进行归纳与总结。

关键词： HSP70 肾母细胞溜睾丸肿瘤

来源： cnki会议评论

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CDC25与卵巢癌

CDC25与卵巢癌

新媒体时代高中思想政治课数字化教学的运用研究

第十三届全国免疫学学术大会

作者：苏钰芳章慧平华中科技大学同济医学院

CDC25(CDC25 phosphatases)是裂殖酵母有丝分裂的启动因子,它诱导真核细胞进入有丝分裂M期。其中CDC25B是CDC25激酶家族中最重要的成员是关键的细胞周期调节因子,在各个阶段中均有表达并起到一定的作用。CDC25B的编码基因位于20p13,它... 详细信息

CDC25(CDC25 phosphatases)是裂殖酵母有丝分裂的启动因子,它诱导真核细胞进入有丝分裂M期。其中CDC25B是CDC25激酶家族中最重要的成员是关键的细胞周期调节因子,在各个阶段中均有表达并起到一定的作用。CDC25B的编码基因位于20p13,它已被证实是一种新的癌基因,包括有头颈癌、乳腺癌、大肠癌、结肠癌、非小细胞肺癌等多种肿瘤。CDC25B的过表达可导致处于G2期及S期的细胞迅速进入有丝分裂,从而加快肿瘤的生长,促进其恶性转化。有相关文献报道卵巢癌的TNM分期和是否存在淋巴结转移与CDC25B的表达水平均相关。它们之间是通过哪条通路而相互起作用的,本文通过CDC25与卵巢癌的相关性进行概述。

关键词： CDC25 卵巢癌

来源： cnki会议评论

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新媒体时代高中思想政治课数字化教学的运用研究

作者：苏钰婷洛阳师范学院

学位级别：硕士

《普通高中思想政治课程标准(2017年版2020年修订)》要求教师“立足当今信息化环境下学习的新特点,在课程实施中,要充分利用现代信息技术,拓展教育资源和教育空间”实施教学与评价。教育部发布的《教育信息化十年发展规划(2011-2020年)... 详细信息

《普通高中思想政治课程标准(2017年版2020年修订)》要求教师“立足当今信息化环境下学习的新特点,在课程实施中,要充分利用现代信息技术,拓展教育资源和教育空间”实施教学与评价。教育部发布的《教育信息化十年发展规划(2011-2020年)》提到“教育教学要形成与国家教育现代化发展目标相适应的教育信息化体系。”《教育部2022年工作要点》提出,要实施教育数字化战略行动,积极发展“互联网+教育”,加快推进教育数字转型和智能升级,探索大中小学数字化教学课堂建设,深化网络学习空间应用,改进课堂教学模式和学生评价方式。这提出了融合现代教育信息技术对探索大中小学数字化教学课堂建设的要求。为切实提高高中思想政治教师的数字素养、提升数字化教学技能,向中学生呈现丰富的课堂教学形式,提升思想政治课育人效果,在新媒体时代对高中思想政治课数字化教学的运用进行研究显得十分有意义。本文由绪论、正文和结语构成,正文主要有以下四章。第一章是新媒体时代高中思想政治课数字化教学的相关理论概述。本章阐述了数字化教学概述、数字化教学的理论基础、数字化教学的运用价值。第二章是新媒体时代高中思想政治课数字化教学的运用现状调查与分析。本章利用问卷调查法和访谈法对高中思想政治课数字化教学中存在的问题进行调查研究,并从教师和学生两个层面进行原因分析。第三章是新媒体时代数字化教学在高中思想政治课中运用的原则和策略,也是本文的重点章节。本章主要从增强数字化教学意识,提高师生对数字化教学的认识;利用数字化教学资源,提高课堂教学质量;提升数字化教学技能,提高课堂教学效率;善用数字化教学工具,丰富课堂教学形式;转变传统评价观念,采用多维数字化学业评价方式五个方面阐述了新媒体时代高中思想政治课数字化教学的策略。第四章是新媒体时代高中思想政治课数字化教学的运用案例。本章以人教版高中政治必修二《政治生活》中第一单元第一课第三框《政治生活:自觉参与》为例进行教学设计和教学反思。

关键词：新媒体数字化教学高中思想政治课

滑子菇多糖的分离纯化及细胞水平抗氧化活性研究

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滑子菇多糖的分离纯化及细胞水平抗氧化活性研究

作者：苏钰明燕山大学

学位级别：硕士

针灸联合厚朴排气合剂对子宫颈癌根治术患者胃肠功能、炎症因子及生活质量的影响

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中国医学创新 2022年第34期19卷 101-105页

作者：夏杨吴海根苏钰芳贺新兰江西省妇幼保健院江西南昌330006

目的:分析针灸联合厚朴排气合剂对子宫颈癌根治术患者胃肠功能、炎症因子及生活质量的影响。方法:选取2020年3月-2022年3月于江西省妇幼保健院行子宫颈癌根治术的患者80例为研究对象,按照随机数字表法分为对照组40例,研究组40例。对照... 详细信息

目的:分析针灸联合厚朴排气合剂对子宫颈癌根治术患者胃肠功能、炎症因子及生活质量的影响。方法:选取2020年3月-2022年3月于江西省妇幼保健院行子宫颈癌根治术的患者80例为研究对象,按照随机数字表法分为对照组40例,研究组40例。对照组给予厚朴排气合剂治疗,研究组给予针灸+厚朴排气合剂治疗。对比两组临床疗效、胃肠功能恢复情况,以及治疗前后的中医症候积分、胃肠激素水平、炎症因子水平和生活质量。结果:研究组总有效率为92.50%,显著高于对照组的75.00%(P<0.05)。与对照组相比,研究组首次进流食时间、首次排便时间、肛门排气时间、肠鸣音恢复时间较早,胃液引流量较少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后两组降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)水平,以及恶心、嗳气、腹胀、腹痛评分均下降,且研究组均低于对照组,子宫颈癌生存质量评估量表(FACT-Cx)评分均升高,且研究组高于对照组(P<0.05)。结论:子宫颈癌根治术患者应用针灸联合厚朴排气合剂治疗效果明显,可有效缓解临床症状,减轻炎性反应,并改善胃肠功能和提高生活质量,临床应用价值较高。

关键词：子宫颈癌根治术针灸厚朴排气合剂胃肠功能炎症因子生活质量

中医针灸辅助治疗对子宫颈癌放化疗患者睡眠质量的影响

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中国医学创新 2021年第36期18卷 87-92页

作者：夏杨吴海根苏钰芳章玲玲江西省妇幼保健院江西南昌330000

目的:探讨中医针灸辅助治疗对子宫颈癌放化疗患者睡眠质量的影响。方法:回顾性分析2020年6月-2021年6月在江西省妇幼保健院就诊的90例更年期伴有睡眠障碍的子宫颈癌放化疗患者的临床资料,按照不同治疗方法将其分为两组,每组45例。两组... 详细信息

目的:探讨中医针灸辅助治疗对子宫颈癌放化疗患者睡眠质量的影响。方法:回顾性分析2020年6月-2021年6月在江西省妇幼保健院就诊的90例更年期伴有睡眠障碍的子宫颈癌放化疗患者的临床资料,按照不同治疗方法将其分为两组,每组45例。两组均给予对症支持治疗措施,在此基础上,对照组给予口服香芍颗粒和百乐眠胶囊治疗,研究组给予针灸加口服香芍颗粒和百乐眠胶囊治疗,两组均持续治疗8周。比较两组临床疗效、治疗前后更年期症状评分(MRS)、睡眠质量指数(PSQI)及不良反应发生情况。结果:研究组总有效率为95.56%,显著高于对照组的75.56%(P0.05)。治疗后,两组PSQI各维度评分及总分均显著低于治疗前,且研究组均低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:中医针灸辅助治疗可有效改善子宫颈癌放化疗患者睡眠质量,且安全性较高,值得推广。

关键词：中医针灸百乐眠胶囊子宫颈癌放化疗更年期症状睡眠质量

基于虚拟双目立体视觉的弧焊熔池宽度在线测量方法

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基于虚拟双目立体视觉的弧焊熔池宽度在线测量方法

作者：苏钰坤天津理工大学

学位级别：硕士