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中医药高校本科生科研项目创新实验设计

中国中医药现代远程教育 2024年第13期22卷 174-176页

作者：苏运芳张紫娟马金莲宋军营谢治深张振强河南中医药大学中医药科学院/河南省中医药防治重大慢病工程研究中心河南郑州450046 河南中医药大学医学院河南郑州450046

中医药高校本科生科研项目是以中医药创新研究为出发点,通过师生团队合作,利用高校科研平台进行的本科生创新实验设计,为拓展本科生中医药研究创新思维提供了良好的契机。文章以指导中医药高校本科生科研项目为例,以中医药研究为对象,... 详细信息

中医药高校本科生科研项目是以中医药创新研究为出发点,通过师生团队合作,利用高校科研平台进行的本科生创新实验设计,为拓展本科生中医药研究创新思维提供了良好的契机。文章以指导中医药高校本科生科研项目为例,以中医药研究为对象,从组建团队、查阅资料和选题、初步验证、提出假说、实验设计与实施等方面,探索并总结出培养本科生创新实验设计的思路及措施,以激发本科生对科研的浓厚兴趣和创新思维。

关键词：中医药高校本科生科研项目科研思维

基于网络药理学及动物实验探讨还少丹治疗阿尔茨海默病的作用机制

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中成药 2023年第6期45卷 2032-2038页

作者：苏运芳刘宁宁马金莲张紫娟郝莉宋军营张振强河南中医药大学中医药科学院河南省中医药防治重大慢病工程研究中心河南郑州450046 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450099 河南中医药大学医学院河南郑州450046

目的基于网络药理学及动物实验探讨还少丹治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和中医药百科全书数据库(ETCM)预测还少丹有效成分及其对应的靶点;运用Drugbank、DIsGeNET、GeneCards数据库筛... 详细信息

目的基于网络药理学及动物实验探讨还少丹治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和中医药百科全书数据库(ETCM)预测还少丹有效成分及其对应的靶点;运用Drugbank、DIsGeNET、GeneCards数据库筛选AD相关靶点;通过Venny在线工具绘制Veen图,获得AD与还少丹共有靶点;采用Metascape和Omicshare Tools进行GO和KEGG富集分析,筛选出还少丹主要作用途径和信号通路;通过STRING制作“还少丹有效活性成分-AD靶点”的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图谱,Cytoscape绘制关键靶点调控网络。采用侧脑室注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立AD小鼠模型,行为学实验评价小鼠学习记忆和空间探索能力,HE染色观察小鼠脑组织病理形态,Western blot法检测小鼠脑组织Tau蛋白磷酸化水平,免疫组化法检测小鼠脑组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,ELISA法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果共筛选得到还少丹活性成分243种,还少丹与AD共有靶点562个,核心节点123个。还少丹干预AD生物过程包括调节激素水平、炎症反应等;细胞组分包括突触后膜、树突、线粒体呼吸链复合体、转录调控复合物和蛋白激酶复合物等;分子功能包括氧化还原酶活性、神经递质受体活性、核受体活性、蛋白结构域特异性结合、乙酰胆碱受体活性等。还少丹对AD的治疗作用可能通过cAMP信号通路、MAPK信号通路、钙信号通路、细胞凋亡、FoxO信号通路等途径。动物实验结果表明,还少丹能够改善AD小鼠的认知能力及脑内病理变化,抑制海马组织Tau蛋白过度磷酸化,调控Bcl-2、Bax蛋白表达,提高SOD活性和GSH水平。结论还少丹通过多靶点、多途径、多通路发挥抗AD作用,其机制可能与调控细胞凋亡、氧化应激等有关。

关键词：还少丹阿尔茨海默病网络药理学实验验证凋亡氧化应激

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糖酵解途径及其关键酶对阿尔茨海默病的影响

中国老年学杂志 2023年第9期43卷 2293-2296页

作者：王瑞芳宋军营袁永苏运芳贾亚泉张振强河南中医药大学中医药科学院河南郑州450046 河南中医药大学第一临床医学院河南郑州450046

阿尔茨海默病(AD)在60岁以上的老年人中发病率极高,是由多因素所导致的神经退行性疾病[1],主要病理学特征为β样淀粉蛋白(Aβ)沉积形成的老年斑和由tau蛋白过度磷酸化形成的神经纤维原缠结。研究表明,在AD患者中,代谢减退早于认知功能... 详细信息

阿尔茨海默病(AD)在60岁以上的老年人中发病率极高,是由多因素所导致的神经退行性疾病[1],主要病理学特征为β样淀粉蛋白(Aβ)沉积形成的老年斑和由tau蛋白过度磷酸化形成的神经纤维原缠结。研究表明,在AD患者中,代谢减退早于认知功能障碍及这些病理改变[2]。而人体内的能量代谢主要来源于糖酵解。当糖酵解功能下降时,大脑会通过减少突触密度及产生高糖基化合物以加重AD症状,不仅如此,糖酵解途径与上述AD病理也有密切联系。

关键词：阿尔茨海默病糖酵解关键酶 β样淀粉蛋白

重组溶葡萄球菌素的抑菌特性及对小鼠肠道菌群结构的影响

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重组溶葡萄球菌素的抑菌特性及对小鼠肠道菌群结构的影响

作者：苏运芳西北农林科技大学

学位级别：硕士

溶葡萄球菌素能够专一水解金黄色葡萄球菌起到特异的溶杀作用。金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎的三大病原菌之一，目前已成功培育出转溶葡萄球菌素基因牛，通过牛乳腺上皮细胞特异性分泌溶葡萄球菌素来抵抗奶牛乳房炎。然而，随着转基... 详细信息

溶葡萄球菌素能够专一水解金黄色葡萄球菌起到特异的溶杀作用。金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎的三大病原菌之一，目前已成功培育出转溶葡萄球菌素基因牛，通过牛乳腺上皮细胞特异性分泌溶葡萄球菌素来抵抗奶牛乳房炎。然而，随着转基因动物的培育成功，相关畜禽制品及食品安全问题越来越受到重视。目前，有关转溶葡萄球菌素动物食品安全性方面的研究报道极为有限。肠道菌群作为一项重要指标，与动物和人类的健康密切相关。因此，本研究通过检测牛乳腺上皮细胞表达的重组溶葡萄球菌素的抑菌特性，以及对小鼠肠道菌群结构的影响，为转溶葡萄球菌素基因奶牛临床抗感染能力提供试验依据，并从微生态学角度为溶葡萄球菌素残留的食品安全性做出评价，本研究对转基因动物食品的安全性研究具有潜在意义。本试验采用试纸片法和肉汤稀释法来测定重组溶葡萄球菌素的抑菌圈大小、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC），通过与溶葡萄球菌素标准品和两种抗生素相比较，评价重组溶葡萄球菌素的抑菌活性;通过PCR-DGGE技术检测小鼠食用溶葡萄球菌素前后肠道菌群结构变化来研究其对小鼠肠道菌群结构的影响，并对主要条带进行测序分析，得出以下结果： 1、试纸片法试验结果显示重组溶葡萄球菌素有专一抑制金黄色葡萄球菌的作用，而对其他菌株无效;重组溶葡萄球菌素与标准品的抑菌活性差异不显著（P>0.05）;对于耐青霉素的金黄色葡萄球菌，重组溶葡萄球菌素仍然表现出良好的抑菌活性。肉汤稀释法结果表明重组溶葡萄球菌素的抑菌活性优于对耐药金葡菌最有效的盐酸万古霉素，MIC为0.1μg/mL~0.2μg/mL。 2、PCR-DGGE图谱显示，各试验组与对照组间小鼠肠道菌群存在共性条带和差异性条带;UPGMA聚类分析显示，小鼠肠道菌群结构相似性随着食用溶葡萄球菌素剂量的加大而逐渐降低，其中1μg/mL、5μg/mL和15μg/mL溶葡萄球菌素剂量组组内相似性分别为75%、64%和57%，5μg/mL重组溶葡萄球菌素剂量组组内相似性为71%;差异性分析结果显示，与对照组相比，各剂量组小鼠饲喂各阶段与饲喂前肠道菌群带谱间的相似性变化差异均不显著（P＞0.05）;通过对图谱中主要条带进行测序和比对分析表明，未知细菌约占总测序菌株的64%，鉴定出的细菌与拟杆菌（Bacteroides）、尿道气球菌（Aerococcus urinaeequi）、马胃葡萄球菌（Staphylococcusequorum）、Lactobacillus taiwanensis、Jeotgalicoccus coquinae、鼠乳杆菌（Lactobacillusmurinus）、罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）和一株不可培养的厚壁菌门细菌（Uncultured Firmicutes）最为相似，同源性都在95%以上;15μg/mL剂量溶葡萄球菌素和5μg/mL剂量重组溶葡萄球菌素对一株乳酸菌（Lactobacillus taiwanensis）有促进作用。

关键词：重组溶葡萄球菌素金黄色葡萄球菌抑菌活性 PCR-DGGE 肠道菌群结构

基于线粒体质量控制系统观察六味地黄丸对老龄小鼠的神经保护作用

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中国比较医学杂志 2023年第6期33卷 24-34页

作者：王世界杨晶马贺王璐瑶张紫娟苏运芳张振强河南中医药大学中医药科学院郑州450046 河南中医药大学医学院郑州450046

目的观察六味地黄丸对老龄小鼠海马区线粒体质量控制系统的影响及神经保护机制。方法将50只20月龄C57BL/6J老龄小鼠按照每组10只进行随机分组,包括模型组,六味地黄丸低、中、高剂量组,多奈哌齐组,另选10只3月龄C57BL/6J野生小鼠为正常... 详细信息

目的观察六味地黄丸对老龄小鼠海马区线粒体质量控制系统的影响及神经保护机制。方法将50只20月龄C57BL/6J老龄小鼠按照每组10只进行随机分组,包括模型组,六味地黄丸低、中、高剂量组,多奈哌齐组,另选10只3月龄C57BL/6J野生小鼠为正常组。各组给药60 d后,进行行为学实验,免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)的表达,透射电镜观察线粒体的健康程度及自噬小体的数量,Western blot检测线粒体质量控制系统相关蛋白。结果高剂量组与模型组比较,行为学实验结果显示六味地黄丸可以提高小鼠的学习记忆能力,增强运动能力,减轻焦虑;免疫荧光实验显示GFAP、TNF-α表达下降,电镜观察发现正常线粒体数量增多;Western blot实验结果显示PTEN诱导激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、帕金蛋白(PARKIN)、自噬相关3号染色体基因(autophagy related 3,ATG3)、自噬相关7号染色体基因(autophagy related 7,ATG7)、微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3β,LC3B)、线粒体融合蛋白2(mitochondrial fusion protein 2,MFN2)、线粒体内源发动蛋白1(optic atrophy 1,OPA1)、线粒体转录因子A(recombinant transcription factor A,mitochondrial,TFAM)、γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator 1α,PGC-1α)蛋白的表达上升,泛肽结合蛋白1(sequestosome protein 1,P62)、线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,DRP1)、TNF-α蛋白的表达下降。结论六味地黄丸可以提高小鼠的认知学习能力,减轻小鼠海马区的神经炎症,改善线粒体质量控制系统。

关键词：六味地黄丸脑老化线粒体质量控制系统神经炎症

双系父权:“并家婚”中的代际关系及其实践逻辑

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深圳大学学报（人文社会科学版） 2024年第1期41卷 125-133页

作者：苏运勋郑州大学政治与公共管理学院河南郑州450001

“双系父权”是一种姻亲、血亲和代际关系三足鼎立的新型家庭权力关系格局。以“并家婚”为表现形式的双系实践日益引起学界普遍关注和讨论,但既有研究对双系代际互动的具体机制及其中的权力关系缺乏系统性分析。基于苏南地区的田野调... 详细信息

“双系父权”是一种姻亲、血亲和代际关系三足鼎立的新型家庭权力关系格局。以“并家婚”为表现形式的双系实践日益引起学界普遍关注和讨论,但既有研究对双系代际互动的具体机制及其中的权力关系缺乏系统性分析。基于苏南地区的田野调查研究发现,以“不嫁不娶”、“两头走”、统一亲属称谓、双边继承和赡养、平等冠姓权等为表现形式的双系实践日益普遍,并形成相对稳定的双系代际互动模式。在这种双系代际互动模式中,女方原生家庭在小家庭中的地位和话语权日益凸显。双方父母基于对代际亲密关系的情感诉求、传宗接代的价值诉求以及家庭平等的权利诉求,不断加深对小家庭的干预,从而形塑出“双系父权”格局。“双系父权”格局之下,双系原生家庭为小家庭提供了充足的经济支持和人力支持,这使得年轻夫妻不仅在经济层面上能够维持中产阶层生活,还能够在一定程度上从家庭事务中解放出来,更好地平衡家庭与事业之间的关系,这对于年轻女性而言尤其重要。作为回报,小家庭也不得不让渡一部分权利给双方父母,以此保持代际之间的均衡互惠。“双系父权”的提出突破了父权制理论的父系单系家庭假设,进一步丰富和推动了父权制理论。

关键词：并家婚代际亲密关系代际互动性别平等双系父权

α-苯巯基-α-氨基乙酸乙酯类LSD1抑制剂的设计、合成及活性评价

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中国药学杂志 2023年第1期58卷 26-32页

作者：李中华秦婷婷王真真乔永辉胡锴苏运芳张宁宁张紫娟马金莲河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的设计构建α-苯巯基-α-氨基乙酸乙酯类组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)抑制剂,并进行生物活性评价与计算机模拟研究。方法以乙醛酸乙酯、氨和芳基硫酚为原料,采用三组分一锅法构建α-苯巯基-α... 详细信息

目的设计构建α-苯巯基-α-氨基乙酸乙酯类组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)抑制剂,并进行生物活性评价与计算机模拟研究。方法以乙醛酸乙酯、氨和芳基硫酚为原料,采用三组分一锅法构建α-苯巯基-α-氨基乙酸乙酯类小分子化合物。采用课题组构建的筛选平台,测试目标化合物在5和1μmol·L^(-1)浓度下对LSD1的抑制率,将活性最好的化合物测试其半数抑制浓度值(IC_(50)),并通过分子模拟研究其结合机制。利用稀释法评价抑制剂的可逆性,通过迁移(transwell)和蛋白质印迹(Western blot)试验评价抑制剂对肿瘤细胞的抗转移和上皮-间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程。结果共合成11个目标化合物,多数化合物具有很好的LSD1抑制活性。活性最好的化合物4j的IC_(50)值为0.28μmol·L^(-1),能够可逆性作用于LSD1,在细胞水平能通过抑制LSD1来提高H3K4me2的表达水平。此外,化合物4j能够抑制肺癌细胞H1299的转移能力和EMT过程。结论α-苯巯基-α-氨基乙酸乙酯类结构是一类结构新颖的LSD1抑制剂骨架,为进行后续结构优化和构效关系研究打下良好基础。

关键词：组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1 酶抑制作用可逆性分子模拟抗肿瘤作用

基于永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02对猪源益生性乳酸菌的筛选

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2011年第11期39卷 12-18页

作者：王大会赵献军齐雪峰苏运芳李义佟琪西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

【目的】从健康仔猪的粪便及各肠段内容物和黏液中分离乳酸菌,并以永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02为体外细胞模型对猪源益生性乳酸菌进行筛选。【方法】采用分离培养和常规生化试验对乳酸菌进行分离与鉴定。用永生化猪小肠上皮细胞ZYM-... 详细信息

【目的】从健康仔猪的粪便及各肠段内容物和黏液中分离乳酸菌,并以永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02为体外细胞模型对猪源益生性乳酸菌进行筛选。【方法】采用分离培养和常规生化试验对乳酸菌进行分离与鉴定。用永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02作为体外模型,通过黏附性试验、耐酸耐胆盐试验和对致病菌的黏附抑制试验对菌株进行筛选。【结果】分离筛选出了12株乳酸菌,其黏附能力存在差异。Y091231、Y091221、Y224031、X302032、Y223052和Y223072等6株菌的黏附性较好,黏附指数依次为:2 903.25±83.33,2 320.37±81.02,1 965.43±37.72,1 416.12±62.74,1 100.00±68.10,988.73±17.06。对其进行耐酸耐胆盐试验和抑菌试验,结果表明,菌株Y091231、Y091221和Y224031对致病菌均具有较强的黏附抑制能力,且对高胆盐、低pH具有较强的耐受性。其中Y091231对大肠杆菌C83921的黏附抑制率可达(99.40±3.17)%,Y091221对致病性沙门氏菌的黏附抑制率为(97.10±2.04)%,Y091231对金黄色葡萄球菌CVCC2258的黏附抑制率为(98.00±2.31)%。Y091231、Y091221和Y224031 3株菌分别被鉴定为发酵乳杆菌、乳酸乳杆菌和嗜酸乳杆菌。【结论】筛选得到的3株益生性乳酸菌,不仅具有耐酸耐胆盐能力,而且对小肠黏膜上皮细胞具有强黏附性,对大肠杆菌C83921、致病性沙门氏菌和金黄色葡萄球菌CVCC2258具有较强的黏附抑制能力,可作为肠道微生态制剂的候选菌株。

关键词：永生化猪小肠上皮细胞猪源乳酸菌黏附性黏附抑制

PCR-DGGE技术研究重组人溶菌酶对小鼠肠道菌群结构的影响

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中国兽医学报 2013年第9期33卷 1345-1351页

作者：李义苏运芳齐雪峰马会明张涌赵献军西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100

利用基于16SrDNA的PCR-DGGE技术结合特异性和共性条带割胶回收DNA进行克隆和测序,监测了饲喂不同剂量重组人溶菌酶(rhLYZ)后小鼠在不同时间内粪样细菌区系以及菌群结构多样性的变化,并鉴定了部分特异性和共性菌群成员,分析rhLYZ对小鼠... 详细信息

利用基于16SrDNA的PCR-DGGE技术结合特异性和共性条带割胶回收DNA进行克隆和测序,监测了饲喂不同剂量重组人溶菌酶(rhLYZ)后小鼠在不同时间内粪样细菌区系以及菌群结构多样性的变化,并鉴定了部分特异性和共性菌群成员,分析rhLYZ对小鼠肠道微生物群落结构和多样性的影响。结果显示,随着小鼠日龄的增加,其粪样微生物种类趋于多样性。在口服接种rhLYZ后,与对照组相比,除高剂量组(1g/L)小鼠粪样微生物多样性较对照组明显减少外,中剂量(0.5g/L)、低剂量(0.25g/L)及极低剂量组(0.10g/L)组差异不显著。结果表明,rhLYZ对小鼠肠道菌群结构影响作用呈现剂量依赖性。与对照组相比,各接种剂量组小鼠肠道中优势菌种保持不变,主要有拟杆菌、马胃葡萄球菌、缓慢葡萄球菌等葡萄球菌属,约乳杆菌、罗伊乳杆菌等乳酸菌属。

关键词：变性梯度凝胶电泳重组人溶菌酶肠道菌群结构