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PPARδ调控自噬在GLP-1受体激动剂艾塞那肽改善胰岛β细胞功能中的作用

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中国病理生理杂志 2022年第10期38卷 1737-1746页

作者：苏燕娜林倍思陈亚兰刘子瑜甘露徐芬许雯中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科广东省糖尿病防治重点实验室广东广州510630

目的:探讨胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)受体激动剂艾塞那肽(exenatide/exendin-4,Exe)对胰岛β细胞功能的作用及机制。方法:通过高脂饮食(high-fat diet,HFD)喂养C57BL/6J小鼠12周构建2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)模型后随机分为HFD+生理盐水(saline)组和HFD+Exe(24 nmol·kg-1·d-1)组,另设正常饮食对照(normal diet control,NC)组,每组10只。监测体重和空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)。HFD喂养12周及Exe干预8周时行腹腔注射葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)及腹腔注射胰岛素耐量实验(intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT)。实验结束时留取胰腺组织行微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)免疫荧光染色,提取各组小鼠原代胰岛总蛋白检测过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)、LC3B-II和P62的蛋白水平。采用棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞,分别予Exe(20 nmol/L)和GW501516(10μmol/L)干预24 h后行葡萄糖刺激胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)实验,并检测PPARδ、LC3B-II和P62蛋白水平。另外,取部分NIT-1细胞经PA诱导后分别予Exe或/和GSK0660(1μmol/L)干预24 h,并且进一步通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建PPARδ基因敲除(PPARδ-KO)细胞,经PA诱导后予Exe干预24 h,验证PPARδ在Exe激活β细胞自噬中的作用。结果:在HFD喂养12周后,小鼠体重和FPG显著升高,糖耐量受损明显,成功构建小鼠T2DM模型;与HFD+saline组相比,Exe治疗可明显降低T2DM小鼠体重和FPG,改善受损糖耐量(P<0.05)。与NC组相比,HFD+saline组胰岛LC3B荧光表达降低,胰岛LC3B-II和PPARδ的蛋白表达量降低,P62蛋白表达升高;与HFD+saline组相比,Exe治疗后胰岛LC3B荧光表达增加,LC3B-II和PPARδ蛋白表达量升高,P62蛋白表达量降低(P<0.05)。此外,与PA组相比,Exe和GW501516干预组在高糖刺激下NIF-1细胞胰岛素的分泌量显著增加,且PPARδ和LC3B-II的蛋白表达升高,P62的蛋白表达下降(P<0.05);与PA+Exe组对比,PA+Exe+GSK0660干预组LC3B-II蛋白表达下调,P62蛋白表达上调(P<0.05)。进一步在PPARδ-KO NIT-1细胞中发现,与PA组相比,Exe干预PPARδ-KO细胞不能引起LC3B-II及P62蛋白表达改变。结论:GLP-1受体激动剂Exe可通过PPARδ激活自噬,从而改善胰岛β细胞功能。

关键词：艾塞那肽 2型糖尿病过氧化物酶体增殖物激活受体δ 自噬胰岛β细胞

长链非编码RNA钾电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录物1靶向调控miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞功能的机制研究

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中华糖尿病杂志 2022年第5期14卷 473-481页

作者：陈亚兰李晏丽林倍思麦晓东彭粤跃陈丹蕊苏燕娜徐芬李万根许雯中山大学附属第三医院内分泌与代谢病科广东省糖尿病防治重点实验室广州510630 广州医科大学附属第二医院内分泌科广州510260

目的探讨长链非编码RNA钾电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录物1(Kcnq1ot1)通过调节miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞胰岛素分泌的作用机制。方法自2020年6至12月在中山大学附属第三医院招募初诊2型糖尿病(T2DM)患者25例,同时招募年龄匹配且... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA钾电压门控通道亚家族Q成员1重叠转录物1(Kcnq1ot1)通过调节miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞胰岛素分泌的作用机制。方法自2020年6至12月在中山大学附属第三医院招募初诊2型糖尿病(T2DM)患者25例,同时招募年龄匹配且无糖尿病的受试者21例作为对照组。收集受试者的年龄、体重指数(BMI),检测空腹血糖(FPG)和糖化血红蛋白(HbA1c),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清中Kcnq1ot1表达量,并分析其与FPG和HbA1c的相关性。12只5周龄雄性C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为高脂饮食(HFD)组(n=6)和正常饮食(CD)组(n=6),喂养20周后,提取原代胰岛细胞RNA。将体外培养的Min6细胞分为牛血清白蛋白(BSA)组和棕榈酸(PA,400μmol/L)组;按照是否转染Kcnq1ot1 siRNA分为si-NC组和si-Kcnq1ot1组;按照是否转染miR-92a-1-5p的模拟物或抑制剂分为:模拟物对照组、模拟物组、抑制剂对照组和抑制剂组;按照转染Kcnq1ot1/NC siRNA后是否加入抑制剂分为si-NC+抑制剂对照组、si-Kcnq1ot1+抑制剂对照组、si-NC+抑制剂组和si-Kcnq1ot1+抑制剂组。采用qRT-PCR检测Kcnq1ot1、miR-92a-1-5p和胰岛素转录本1(Ins1)、胰岛素转录本2(Ins2)、胰岛素受体(Insr)、NK6同源盒蛋白1(Nkx6.1)、胰岛素受体底物1(Irs1)和神经生成素3(Ngn3)mRNA水平;Western blotting检测胰岛素和Insr蛋白表达水平;葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛素分泌水平;双荧光素酶报告基因实验验证Kcnq1ot1与miR-92a-1-5p之间的直接作用关系。各组间指标的差异比较采用独立样本t检验、方差分析,采用Pearson相关分析法分析受试者Kcnq1ot1表达量与FPG和HbA1c的相关性。结果T2DM患者血清中Kcnq1ot1的表达量较对照组显著下调(P<0.01),且Kcnq1ot1的表达量与FPG和HbA1c呈负相关关系(r=-0.52、-0.49,均P<0.05)。与CD组相比,HFD组小鼠胰岛中Kcnq1ot1表达量下调(P<0.001)。在Min6细胞中,与BSA组相比,PA组细胞中Kcnq1ot1表达量下调(P<0.01);与si-NC组相比,si-Kcnq1ot1组葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低(P<0.05),且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均降低(P<0.05);与模拟物对照组相比,模拟物组葡萄糖刺激的胰岛素分泌降低(P<0.05),且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均降低(P<0.05);与抑制剂对照组相比,抑制剂组葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平升高(P<0.05),且Ins1、Ins2、Insr、Nkx6.1、Irs1和Ngn3的mRNA水平及Insr和胰岛素的蛋白水平均升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,模拟物和Kcnq1ot1-WT质粒共转染细胞后,Kcnq1ot1-WT荧光素酶活性降低(P<0.05);抑制剂和Kcnq1ot1-WT质粒共转染细胞后,Kcnq1ot1-WT的荧光素酶活性显著升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-Kcnq1ot1组miR-92a-1-5p表达升高(P<0.05);与si-Kcnq1ot1+抑制剂对照组相比,si-Kcnq1ot1+抑制剂组Min6细胞中的Ins1、Ins2、Insr、Irs1和Ngn3转录水平及胰岛素和Insr的蛋白水平升高(P<0.05)。结论长链非编码RNA Kcnq1ot1可能通过靶向调控miR-92a-1-5p影响胰岛β细胞功能。

关键词：糖尿病胰岛素分泌长链非编码RNA Kcnq1ot1 miR-92a-1-5p

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热敏灸治疗变应性鼻炎36例临床观察

中医杂志 2017年第3期58卷 233-236页

作者：林煜芬钟泽斌苏燕娜泉州医学高等专科学校晋江市西园社区卫生服务中心泉州医学高等专科学校附属人民医院

目的观察热敏灸治疗变应性鼻炎(AR)患者的临床疗效。方法 72例患者随机分为治疗组和对照组各36例,治疗组给予热敏灸治疗,隔天治疗1次。对照组给予呋嘛滴鼻液滴鼻治疗,每日2次,每次3~5滴。两组均以10天为1个疗程,连续治疗2个疗程,疗程之... 详细信息

目的观察热敏灸治疗变应性鼻炎(AR)患者的临床疗效。方法 72例患者随机分为治疗组和对照组各36例,治疗组给予热敏灸治疗,隔天治疗1次。对照组给予呋嘛滴鼻液滴鼻治疗,每日2次,每次3~5滴。两组均以10天为1个疗程,连续治疗2个疗程,疗程之间间隔2天。观察两组治疗前后症状和体征分级总评分,同时治疗组采用RQLQ量表来评估其生活质量水平。治疗后评价临床疗效。结果两组治疗后症状和体征分级总评分均较治疗前明显降低(P0.05)。治疗组治疗后鼻部症状评分明显低于对照组(P<0.01)。治疗组36例中显效15例,有效15例,无效6例,总有效率为83.33%;对照组分别为8例、16例、12例及66.67%,两组临床疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论热敏灸治疗AR疗效显著,并改善了患者的生活质量。

关键词：变应性鼻炎热敏灸生活质量

热敏灸治疗变应性鼻炎的临床疗效及其腧穴热敏化规律研究

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针刺研究 2017年第6期42卷 527-532页

作者：林煜芬卢健敏苏燕娜钟泽斌张作丹泉州医学高等专科学校福建泉州362010 泉州医学高等专科学校附属人民医院福建泉州362000 晋江市西园社区卫生服务中心福建晋江362201

目的:观察热敏灸治疗变应性鼻炎(AR)的临床疗效,并寻找其腧穴热敏化规律。方法:AR患者随机分为热敏灸组及针刺组,每组35例。热敏灸组采用艾灸热敏化腧穴,针刺组采用针刺治疗,两组均隔天治疗1次,10次为1个疗程,治疗2个疗程。观察治疗前... 详细信息

目的:观察热敏灸治疗变应性鼻炎(AR)的临床疗效,并寻找其腧穴热敏化规律。方法:AR患者随机分为热敏灸组及针刺组,每组35例。热敏灸组采用艾灸热敏化腧穴,针刺组采用针刺治疗,两组均隔天治疗1次,10次为1个疗程,治疗2个疗程。观察治疗前后AR患者症状、体征评分的变化,比较两组的临床疗效,观察腧穴热敏化的出现率,探讨腧穴、经络、热敏灸感现象分布规律。结果:热敏灸组总有效率为82.86%(29/35),针刺组总有效率为74.29%(26/35),两组临床疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后的症状和体征分级总评分均比本组治疗前降低(P<0.01),其中热敏灸组治疗后较针刺组降低更明显(P<0.05)。两组治疗后的症状(喷嚏、流涕、鼻痒、鼻塞)及体征各分值比治疗前降低(P<0.01)。热敏灸组35例均探查到热敏化腧穴,在总共探查的57个腧穴中,每个患者出现的热敏化腧穴个数不等,出现热敏化频率最高的10个腧穴依次为迎香、印堂、鼻通、上印堂、肺俞、神阙、上星、风池、蝶腭、大椎;热敏化腧穴所归经脉主要分布在于督脉、手阳明大肠经、足太阳膀胱经;在6种热敏灸感形式中,以传热为主,其次为扩热、透热、其他非热感觉(以痒感为主)、表面不(微)热深部热、局部不(微)热远部热。结论:热敏灸治疗AR疗效显著,临床上可优先选取迎香、印堂、鼻通、上印堂、肺俞、神阙、上星、风池、蝶腭、大椎等腧穴进行探查以缩短热敏灸治疗时间、加强艾灸的疗效。

关键词：热敏灸变应性鼻炎疗效腧穴热敏化

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者血清PCT、IL-6、hs-CRP水平与肺功能的相关性研究

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广州医药 2017年第3期48卷 93-95,101页

作者：谭杰康艳虹苏燕娜马为广东药科大学附属第一医院呼吸内科广州510080 广州医科大学附属广州市第一人民医院呼吸内科广州510180

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性期加重期(AECOPD)患者血清降钙素原(PCT)、白介素6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平变化及与肺功能的相关性。方法选择121例COPD急性加重期患者为实验组研究对象,选取同期体检的80例稳定期COPD患者为对照... 详细信息

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性期加重期(AECOPD)患者血清降钙素原(PCT)、白介素6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平变化及与肺功能的相关性。方法选择121例COPD急性加重期患者为实验组研究对象,选取同期体检的80例稳定期COPD患者为对照组,比较两组患者血清PCT、IL-6、hs-CRP的差别,并对三者与COPD患者肺功能的相关性进行探讨。结果实验组患者IL-6、hs-CRP水平显著高于对照组(P<0.05)。实验组FEV1值、FEV1%显著低于对照组(P<0.05)。Pearson分析显示,实验组hs-CRP与肺功能指标FEV1%呈负相关关系(r=-1.51,P=0.048)。结论 AECOPD患者的血清炎症因子水平明显高于COPD稳定期患者,血清炎症因子与慢阻肺患者肺功能损伤密切相关。

关键词：慢性阻塞性肺疾病降钙素原白介素6 超敏C反应蛋白肺功能

胰高糖素样肽-1对非酒精性脂肪肝病状态下生长分化因子15表达的影响

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中华糖尿病杂志 2021年第5期13卷 482-489页

作者：甘露林倍思苏燕娜陈亚兰许雯杨黛稚梁华徐芬严晋华中山大学附属第三医院内分泌与代谢病科广东省糖尿病防治重点实验室广州510630

目的:探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)状态下生长分化因子15(GDF15)表达的影响。方法:共对25例NAFLD合并2型糖尿病患者26周不同药物治疗后(利拉鲁肽组9例、西格列汀组8例、甘精胰岛素组8例)进行分析。收集治疗前后... 详细信息

目的:探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)状态下生长分化因子15(GDF15)表达的影响。方法:共对25例NAFLD合并2型糖尿病患者26周不同药物治疗后(利拉鲁肽组9例、西格列汀组8例、甘精胰岛素组8例)进行分析。收集治疗前后体重、体重指数(BMI)及血清GDF15水平,通过磁共振成像-质子密度脂肪含量测量肝内脂肪含量(IHL)。8周龄雄性C57BL/6小鼠进行12周高脂饮食喂养,采用随机数字表法分为高脂饮食(HFD)组(6只)、艾塞那肽组(GLP-1组)(6只),另设正常饮食对照组(6只),干预8周后收取肝脏组织。HepG2细胞用300μmol/L棕榈酸钠(PA)处理,并予Exendin-4(浓度分别为0、1、20、100 nmol/L)干预,另设脱脂牛血清白蛋白对照组。使用lentiCRISPRv2-sgRNA载体构建稳定敲除GDF15的HepG2细胞,空载体转染的HepG2细胞作为阴性对照。转染的细胞用300μmol/L PA处理,并予100 nmol/L Exendin-4干预。测定血清及细胞上清中GDF15蛋白水平及肝脏组织和HepG2细胞的GDF15 mRNA水平与甘油三酯(TG)含量。采用单因素方差分析、协方差分析、Pearson相关分析等进行统计学分析。结果:在NAFLD合并糖尿病人群中,西格列汀组和甘精胰岛素组血清GDF15水平在治疗前后无明显变化。而利拉鲁肽组在26周后血清GDF15水平为(920.3±265.4)pg/ml,比治疗前的(742.2±279.0)pg/ml明显升高,差异有统计学意义(P=0.015);体重、BMI、IHL明显下降(P均<0.05)。利拉鲁肽组血清GDF15改变量与IHL改变量呈负相关(r=-0.676,P=0.045)。GLP-1显著改善高脂饮食喂养小鼠的肝脏脂质沉积及炎症状态。与HFD组相比,GLP-1组小鼠肝脏组织GDF15 mRNA明显升高。GLP-1能改善PA诱导的HepG2细胞脂质沉积,并以剂量依赖的方式上调GDF15的表达与分泌。与阴性对照组相比,敲除GDF15显著削弱了GLP-1改善细胞TG蓄积及炎症状态。结论:GLP-1可促进肝脏GDF15的表达与分泌,并改善NAFLD肝脏脂质沉积及炎症状态。

关键词：糖尿病胰高糖素样肽-1 非酒精性脂肪肝病生长分化因子15

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乡村美学场域建构的实践逻辑与路径选择

南通大学学报（社会科学版） 2024年第3期40卷 137-148页

作者：苏燕苏州科技大学艺术学院

基于现代化与新农村建设之现实语境,乡村美学建设逐渐成为乡村振兴的新兴话语与实践导向。在基层实践中,乡村美学建设的推进仍面临着主体困境、文化困境与关系困境,因而迫切需要重新对传统乡村建设的内在机理进行梳理,并建构审美追求扎... 详细信息

基于现代化与新农村建设之现实语境,乡村美学建设逐渐成为乡村振兴的新兴话语与实践导向。在基层实践中,乡村美学建设的推进仍面临着主体困境、文化困境与关系困境,因而迫切需要重新对传统乡村建设的内在机理进行梳理,并建构审美追求扎根乡村、美学建设可持续发展的实践逻辑与方法。基于布迪厄的场域分析框架,建构乡村美学场域必须沿袭这一路径:政策革新、人文回归与乡村业态创新分别导致了社会资本倾斜、文化资本重构与经济资本的积累,乡民主体性的唤醒形塑了向美而行的新“惯习”,为乡村美学建设提供了内生动力;乡村美学场域长久发展的关键在于,以现代化的审美视野,进一步促进审美资源转化为审美资本,明确生态、经济、文化、科技各层面与乡村美学之间的动态关联,实现乡村人居美学、产业美学、文化美学、数字美学全面发展,为打造现代化新乡村提供新思路、开创新局面。

关键词：乡村美学建设场域理论乡村振兴

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企业风险承担与融资方式选择:债券融资还是银行借贷——基于董事高管责任保险的背景

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财会通讯 2024年第4期 77-81页

作者：路燕娜安阳学院财会学院河南安阳455000

文章以2009—2020年中国沪深A股上市公司为研究对象,探究董事高管责任保险与企业债务融资方式之间的关系及其作用机理。研究发现:董事高管责任保险通过“风险松绑”作用,提高企业风险承受能力,从而进行了更多的债券融资行为;异质性分析... 详细信息

文章以2009—2020年中国沪深A股上市公司为研究对象,探究董事高管责任保险与企业债务融资方式之间的关系及其作用机理。研究发现:董事高管责任保险通过“风险松绑”作用,提高企业风险承受能力,从而进行了更多的债券融资行为;异质性分析显示:在融资成本更高、银行业竞争更为激烈时以及在国有的企业中,购买了董责险的公司将更多通过债券融资来缓解企业融资约束;进一步研究表明,购买董责险的企业银行短期借款减少,但董责险和债务融资成本之间不存在显著关系,说明董责险只是使上市企业在债务融资中更倾向于选择债券融资。

关键词：风险偏好债务融资银行借贷融资方式

计算机视觉技术赋能大学英语课堂展示中的学习投入研究

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新疆师范大学学报(哲学社会科学版) 2024年

作者：谭苏燕王晋军广州大学外国语学院

学习投入是预测学习者学习效果的重要指标，学术界对其与课堂展示间的相关性研究鲜有涉猎。文本以某综合性大学303名非英语专业本科生为研究对象，采用人工智能与计算机视觉技术模型YOLOv7对大学英语课堂中的课堂展示实录进行学习投入... 详细信息

学习投入是预测学习者学习效果的重要指标，学术界对其与课堂展示间的相关性研究鲜有涉猎。文本以某综合性大学303名非英语专业本科生为研究对象，采用人工智能与计算机视觉技术模型YOLOv7对大学英语课堂中的课堂展示实录进行学习投入多模态数据分析，同时辅以问卷调查，形成双向印证。研究发现，学生课堂展示中的行为投入、认知投入和情感投入值均等于或高于3.78，投入结果均值达4.01，说明学生在课堂展示中的学习投入情况良好。此外，不同时段课堂展示对学生行为投入的影响显著；学生专注度及参与度在课中前10分钟的课堂展示中最佳。文本为课堂展示的有效性提供了智能化、多模态、多维度的实证支持，为课堂教学的数智技术应用提供了新视角。

关键词：大学英语课堂展示学习投入计算机视觉技术展示时段