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生物法合成（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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生物法合成（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

作者：舒学香浙江工业大学

学位级别：硕士

(S)4-氯-3-羟基丁酸乙酯（（S）-CHBE）是他汀类药物一羟甲基戊二酰CoA（HMG-CoA）还原酶抑制剂的关键手性中间体,也可经由氯基的置换、还原等反应,导入其他基团生成所需的手性药物中间体。利用生物催化羰基不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯... 详细信息

(S)4-氯-3-羟基丁酸乙酯（（S）-CHBE）是他汀类药物一羟甲基戊二酰CoA（HMG-CoA）还原酶抑制剂的关键手性中间体,也可经由氯基的置换、还原等反应,导入其他基团生成所需的手性药物中间体。利用生物催化羰基不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯合成（S）4-氯-3-羟基丁酸乙酯具有反应条件温和、成本低、产量高、产物光学纯度高等优点,已成为制备（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重要方法。本文首先建立了底物4-氯乙酰乙酸乙酯和产物（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的气相分析方法,并成功实现了两种异构体在手性色谱柱上的基线分离。从200余份土样和实验室现有菌株中筛选到一株能够高效催化4-氯乙酰乙酸乙酯合成（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的菌株ZJB-12164,产物光学纯度（ee.）达99%以上。通过形态学观察、生理生化试验、18S rDNA测序,确定该菌株为Candida sorboxylosa。通过单因素实验优化了C sorboxylosa ZJB-12164产羰基还原酶的培养基成分和最适发酵产酶条件,确定了最适培养基组成为（g/L）:葡萄糖 10.0,酵母提取粉 50.0,KH2P04 2.5,CuC12 0.02,NaCI1.0。最适发酵产酶条件为:装液量30mL/500 mL,接种量1%（V/V）,初始pH5.0。在上述培养条件下,30℃、150r/min培养20h后,菌体干重达11.2 g/L,羰基还原酶酶活达202.4U/L。进一步考察了C.sorboxylosa ZJB-12164全细胞催化不对称还原过程中缓冲液pH、温度、辅助底物、底物浓度等参数的影响,确定了最适反应条件:温度35℃,pH 8.0磷酸盐缓冲液,辅助底物40 g/L葡萄糖。当湿菌体的浓度为50 g/L时,最适底物浓度为60 mM。通过向反应体系中分批添加底物,可显著消除底物抑制。反应过程中控制pH恒定的基础上,8h后产物积累达到了 207.9 mM,产率达86.6%。以上结果表明,Csorbxylosa ZJB-12164在生物合成（S）-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中具有一定的应用潜力,为建立廉价、高效、具有自主知识产权（S）4-氯-3-羟基丁酸乙酯合成工艺奠定基础。

关键词： (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯 4-氯乙酰乙酸乙酯羰基还原酶不对称还原 Candida sorboxylosa

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以茶叶提取物作抑菌剂制备猕猴桃酒工艺研究

食品科技 2019年第6期44卷 242-247页

作者：舒学香周文朱克永吴霞四川工商职业技术学院都江堰611830 四川大学轻纺与食品学院成都610065

茶叶是一种纯天然物质,用水浸提得到的提取物中含有大量茶多酚,茶多酚具有一定的抑菌作用,且对人体具有保健作用无毒副作用。采用Box-Behnken响应面法对以茶叶提取物作抑菌剂制备猕猴桃酒的工艺进行了优化,以最优工艺制备猕猴桃酒,对其... 详细信息

茶叶是一种纯天然物质,用水浸提得到的提取物中含有大量茶多酚,茶多酚具有一定的抑菌作用,且对人体具有保健作用无毒副作用。采用Box-Behnken响应面法对以茶叶提取物作抑菌剂制备猕猴桃酒的工艺进行了优化,以最优工艺制备猕猴桃酒,对其理化指标进行了检测,并采用顶空固相微萃取技术和气相-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析其香气成分。结果显示,其最优工艺条件为:主发酵温度22.5℃,初始p H3.5,接种量0.10%,所得猕猴桃酒与以SO2为抑菌剂制得的猕猴桃酒具有相似的理化性质和香气成分组成。

关键词：猕猴桃酒茶叶提取物工艺优化理化指标香气成分

羰基还原酶产生菌Candida sorboxylosa的筛选与产酶条件优化

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工业微生物 2013年第5期43卷 14-20页

作者：舒学香孙丽慧郑裕国浙江工业大学生物工程研究所浙江杭州310014

从采自全国各地的200余份土壤样品中,筛选得到一株能够高效合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的菌株Candida sorboxylosa。对该菌株的产羰基还原酶条件进行的研究表明,最适发酵培养基配方:葡萄糖10 g/L,酵母提取粉50 g/L,KH_2PO_4 2.5 g/L,Cu... 详细信息

从采自全国各地的200余份土壤样品中,筛选得到一株能够高效合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的菌株Candida sorboxylosa。对该菌株的产羰基还原酶条件进行的研究表明,最适发酵培养基配方:葡萄糖10 g/L,酵母提取粉50 g/L,KH_2PO_4 2.5 g/L,CuCl_2 0.02 g/L,NaCl 1 g/L。最适发酵培养条件:装液量30 mL/500 mL摇瓶,接种量1%,初始pH 5.0,该茵在此条件下发酵培养20 h,底物4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)羰基还原酶酶活达到202.42 U/L,与优化前相比,提高11.8倍。该茵在催化COBE的转化反应中,具有很好的立体选择性,产物光学纯度(e.e.%)始终大于99%。

关键词：（S）4-氯-3-羟基丁酸乙酯 Candida sorboxylosa 羰基还原酶 4-氯乙酰乙酸乙酯

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猕猴桃果酒酿造专用酵母菌株的筛选

中国酿造 2021年第8期40卷 99-104页

作者：舒学香周文吴霞隋明唐贤华四川工商职业技术学院酒类与食品工程系四川都江堰611830 四川大学轻工科学与工程学院四川成都610065

以猕猴桃果皮和果园土壤为出发材料,经菌株形态初筛以及菌株发酵特性复筛,得到了一株酵母菌株T-13。经形态学、生理生化和分子生物学鉴定,确定该菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。菌株T-13发酵试验结果表明,经菌株T-13发酵猕... 详细信息

以猕猴桃果皮和果园土壤为出发材料,经菌株形态初筛以及菌株发酵特性复筛,得到了一株酵母菌株T-13。经形态学、生理生化和分子生物学鉴定,确定该菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。菌株T-13发酵试验结果表明,经菌株T-13发酵猕猴桃汁72 h后,猕猴桃汁降糖9.9°Bx,CO_(2)质量损失13 g(6.13%),所产猕猴桃果酒的酒精度为5.8%vol,优于筛选到的其他酵母和市售果酒酵母,说明菌株T-13的发酵能力较强。经感官评价和气相色谱质谱联用(GC-MS)对风味成分分析发现,菌株T-13所产的猕猴桃原酒风味较好,主要表现在丁酸乙酯、苯乙醇、乙基9-癸烯酸酯等风味物质的增加,并且能保留猕猴桃浆果的典型风味特征。

关键词：猕猴桃果酒酵母筛选鉴定挥发性风味物质

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以丙酸钙作抑菌剂制备猕猴桃酒工艺研究

中国酿造 2019年第5期38卷 146-151页

作者：周文舒学香张崇军唐贤华四川工商职业技术学院四川都江堰611830 四川大学轻纺与食品学院四川成都610065

该研究采用Box-Behnken响应面法对以丙酸钙作抑菌剂制备猕猴桃酒的工艺进行了优化,以最优工艺制备猕猴桃酒,对其理化指标进行了检测,并采用顶空固相微萃取技术和气相-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析其挥发性风味物质成分。结果显示,... 详细信息

该研究采用Box-Behnken响应面法对以丙酸钙作抑菌剂制备猕猴桃酒的工艺进行了优化,以最优工艺制备猕猴桃酒,对其理化指标进行了检测,并采用顶空固相微萃取技术和气相-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析其挥发性风味物质成分。结果显示,猕猴桃酒最优工艺条件为发酵温度24 ℃,初始pH值为3.5,接种量0.09%,所得猕猴桃酒与以SO2为抑菌剂制得的猕猴桃酒具有相似的理化性质和挥发性风味物质成分组成,但挥发性风味物质含量具有较大差别。

关键词：猕猴桃酒丙酸钙工艺优化理化指标挥发性风味物质

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四川浓香型白酒糟醅理化因子的产区特征解析

酿酒 2023年第6期50卷 62-66页

作者：杨娜周文舒学香艾丽张崇军唐贤华胡媛媛四川工商职业技术学院轻工工程学院四川都江堰611830

四川作为浓香型白酒的主要产地,在全国白酒产业中一直占据着重要地位。为解析四川浓香型白酒糟醅发酵过程中理化指标的产区特征,对比分析了泸州、宜宾和德阳三个代表性地区中浓香型白酒发酵过程糟醅的水分、酸度、淀粉、还原糖和酒精含... 详细信息

四川作为浓香型白酒的主要产地,在全国白酒产业中一直占据着重要地位。为解析四川浓香型白酒糟醅发酵过程中理化指标的产区特征,对比分析了泸州、宜宾和德阳三个代表性地区中浓香型白酒发酵过程糟醅的水分、酸度、淀粉、还原糖和酒精含量的变化。研究结果表明,相比较泸州和德阳地区,宜宾地区的糟醅在发酵过程中水分、酒精度、淀粉和还原糖的利用率都最高,而酸度较低。泸州地区发酵糟醅中整体水分和酒精度含量、淀粉和还原糖的消耗量都较低,仅酸度相对较高。德阳地区发酵糟醅的各项理化指标则介于宜宾和泸州地区之间。主成分分析也表明三个地区在浓香型白酒发酵过程中存在显著差异。本研究揭示了四川各产区浓香型白酒糟醅发酵过程中各理化因子的变化规律,为今后在实际生产中实现发酵过程的科学精准调控提供理论依据。

关键词：四川浓香型白酒产区特征理化指标变化规律

中温大曲在发酵和贮存过程中微生物群落结构分析

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中国酿造 2019年第6期38卷 113-118页

作者：唐贤华田伟张崇军周文舒学香四川工商职业技术学院四川都江堰611830 中国测试技术研究院四川成都610021

通过聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术解析中温大曲在不同发酵期和贮存期的微生物群落结构,获得表征中温大曲细菌和真菌群落结构的DGGE指纹图谱。结果表明,中温大曲细菌有19种,其中芽孢杆菌属(Bacillus)和乳酸菌属(Lactob... 详细信息

通过聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术解析中温大曲在不同发酵期和贮存期的微生物群落结构,获得表征中温大曲细菌和真菌群落结构的DGGE指纹图谱。结果表明,中温大曲细菌有19种,其中芽孢杆菌属(Bacillus)和乳酸菌属(Lactobacillus)均属于优势菌群;真菌共13种,其中根霉属(Rhizopus)和酵母属(Saccharomyces)均属于优势菌。大曲微生物总体的变化趋势是发酵开始时微生物数量较少,发酵中期(4~8 d)微生物数量达到顶峰,大量细菌和真菌旺盛繁殖,发酵后期(12 d)微生物群落逐渐减少并趋于稳定;贮存期内,微生物的种类的趋于平稳,数量变化较大。

关键词：中温大曲细菌真菌聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳

高产虫草酸蛹虫草菌株的分离鉴定及培养条件优化

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中国酿造 2019年第11期38卷 134-139页

作者：唐贤华张崇军隋明周文舒学香四川工商职业技术学院酒类与食品工程系四川都江堰611830 四川大学轻纺与食品学院四川成都610065

该研究以蛹虫草子实体为研究对象,采用组织分离法从中分离纯化高产虫草酸的蛹虫草菌株,通过分子生物学技术对其进行鉴定,并以虫草酸含量为响应值,利用单因素试验和响应面法对其培养条件进行优化。结果表明,分离得到一株高产虫草酸的菌株... 详细信息

该研究以蛹虫草子实体为研究对象,采用组织分离法从中分离纯化高产虫草酸的蛹虫草菌株,通过分子生物学技术对其进行鉴定,并以虫草酸含量为响应值,利用单因素试验和响应面法对其培养条件进行优化。结果表明,分离得到一株高产虫草酸的菌株YCC-1,并被鉴定为蛹草拟青霉(Paecilomyces militaris),菌株YCC-1产虫草酸的最佳培养条件为接种量7.8%、初始pH值6.0、培养温度25℃、转速140 r/min。在此最优条件下,虫草酸含量为132.65 mg/g,较优化前提高22.86%,为蛹虫草菌株液体发酵培养生产虫草酸提供试验依据。

关键词：蛹虫草虫草酸分离鉴定培养条件优化响应面试验

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高温酱香型大曲发酵力测定条件的优化研究

酿酒 2016年第4期43卷 58-60页

作者：唐贤华周文舒学香四川工商职业技术学院四川都江堰611830

探讨了用CO_2失重法^([1])测定高温酱香型大曲发酵力的影响因素。以泸州某酒厂的高温酱香型大曲作为主要研究对象,研究了高粱粉糖化液培养时间、糖度和发酵温度对大曲发酵力的影响。初步提出了测定大曲发酵力的最适条件,利用正交试验对... 详细信息

探讨了用CO_2失重法^([1])测定高温酱香型大曲发酵力的影响因素。以泸州某酒厂的高温酱香型大曲作为主要研究对象,研究了高粱粉糖化液培养时间、糖度和发酵温度对大曲发酵力的影响。初步提出了测定大曲发酵力的最适条件,利用正交试验对进行优化,得到结果如下:发酵力的最佳测定时间为72h,培养温度为30℃,糖度为7°Be。用CO_2生成量表示发酵力强弱,其结果准确可靠,符合实际。

关键词：中高温大曲发酵力测定条件正交试验