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不同比例和发酵时间对燕麦、光叶紫花苕混合青贮品质的影响

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中国饲料 2024年第3期 143-148页

作者：王子苑舒健虹陈光吉吉玉玉王小利贵州省草业研究所贵州贵阳550006

为研究不同比例和发酵时间对燕麦、光叶紫花苕混合青贮品质的影响,试验设置5个处理组:40%燕麦和60%光叶紫花苕(Y40G60)、50%燕麦和50%光叶紫花苕(Y50G50)、60%燕麦和40%光叶紫花苕(Y60G40)、70%燕麦和30%光叶紫花苕(Y70G30)以及80%燕麦... 详细信息

为研究不同比例和发酵时间对燕麦、光叶紫花苕混合青贮品质的影响,试验设置5个处理组:40%燕麦和60%光叶紫花苕(Y40G60)、50%燕麦和50%光叶紫花苕(Y50G50)、60%燕麦和40%光叶紫花苕(Y60G40)、70%燕麦和30%光叶紫花苕(Y70G30)以及80%燕麦和20%光叶紫花苕(Y80G20),分别在青贮8、16、30 d和45 d测定其营养成分和发酵参数。结果表明:Y60G40组的感官评价、相对饲用价值、乳酸、乙酸含量和费氏评分分别较Y40G60组显著提高21.99%、4.93%、38.46%、25.57%和33.94%(PY70G30组>Y80G20组>Y50G50组>Y40G60组。综上,燕麦与光叶紫花苕混合比例为60:40青贮效果最佳,推荐适宜发酵时间为30 d。

关键词：燕麦光叶紫花苕混合青贮发酵时间隶属函数评价

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低营养以及干旱胁迫下百脉根的基因表达特征

分子植物育种 2022年

作者：李亚娇马培杰龙忠富舒健虹王小利贵州省农业科学院草业研究所

百脉根是重要的牧草资源，在贵州喀斯特贫瘠地区广泛生长，低营养和干旱胁迫阻碍了百脉根培育产业的发展。因此本研究模拟低营养和干旱的种植条件，测定了百脉根的转录组，以探究百脉根在基因转录水平上对于胁迫的响应。结果发现，共同... 详细信息

百脉根是重要的牧草资源，在贵州喀斯特贫瘠地区广泛生长，低营养和干旱胁迫阻碍了百脉根培育产业的发展。因此本研究模拟低营养和干旱的种植条件，测定了百脉根的转录组，以探究百脉根在基因转录水平上对于胁迫的响应。结果发现，共同胁迫下百脉根叶片中的基因表达量明显增加，其中低营养胁迫处理的上调基因数量是下调基因数量的2.75倍。差异基因主要富集于植物激素信号转导、异黄酮生物合成两个代谢途径中，在GO数据库中主要被映射到代谢过程、催化活性、细胞过程中。此外，我们还筛选了69个转录因子，差异表达数量最多的转录因子主要来自ERF、WRKY、MYB、WRKY、NAC等转录因子家族，其中ERF家族数量最多。本研究测定的转录组数据，质量可靠，为后续的百脉根分子育种提供了大量的数据参考，此外也明确了差异基因主要富集的通路，对未来采用基因工程手段研究和改良百脉根提供了理论参考，为深入研究贵州天然豆科牧草百脉根抗逆机制提供理论依据。

关键词：百脉根(Lotus corniculatus L.) 非生物胁迫转录组分析转录因子

二穗短柄草BdCO基因表达与生物学功能分析

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植物生理学报 2022年第5期58卷 889-903页

作者：路雪萍童伟杨舒健虹马培杰赵德刚王小利贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵州省农业生物工程重点实验室贵阳550025 贵州省农业科学院草业研究所贵阳550006

CONSTANS(CO)基因在光周期途径中发挥重要调控作用。本研究旨在探究CO基因在二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的生物学功能。通过实时荧光定量PCR分析表明Bd CO基因在长日照、短日照、连续光照、连续黑暗和不同发育阶段都呈现明... 详细信息

CONSTANS(CO)基因在光周期途径中发挥重要调控作用。本研究旨在探究CO基因在二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的生物学功能。通过实时荧光定量PCR分析表明Bd CO基因在长日照、短日照、连续光照、连续黑暗和不同发育阶段都呈现明显昼夜节律并受光周期调控。将构建的目的蛋白与绿色萤光蛋白融合表达载体注射入本氏烟草(Nicotiana benthamiana)中,发现BdCO定位于细胞核,预示该蛋白在细胞核中发挥作用。利用酵母单杂交技术筛选出与BdCO启动子结合的关键转录因子BdGI,通过双荧光素酶检测进一步证实BdGI对BdCO转录有激活作用。采用酵母双杂交、双分子荧光互补和免疫共沉淀三种方法证明了BdCO蛋白与BdFKF1蛋白、BdZTL蛋白分别在体内和体外存在互作关系。综上所述,BdCO基因表达受生物钟和光周期双重调控,该基因编码蛋白可能在细胞核内行使功能。

关键词：二穗短柄草 CO基因表达分析蛋白互作

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低磷与干旱胁迫下百脉根代谢组学分析

草地学报 2022年第2期30卷 329-338页

作者：李亚娇马培杰龙忠富舒健虹陈莹王小利贵州省农业科学院草业研究所贵州贵阳550006

为了探究百脉根(Lotus corniculatus)在低磷和干旱胁迫下代谢物质的变化,本实验选择对照(CK)、低磷(LP)和干旱胁迫(PEG)三种处理下的百脉根作为实验材料,利用代谢组学对低磷和干旱胁迫下的百脉根进行代谢物的分析。结果表明,干旱胁迫样... 详细信息

为了探究百脉根(Lotus corniculatus)在低磷和干旱胁迫下代谢物质的变化,本实验选择对照(CK)、低磷(LP)和干旱胁迫(PEG)三种处理下的百脉根作为实验材料,利用代谢组学对低磷和干旱胁迫下的百脉根进行代谢物的分析。结果表明,干旱胁迫样本共测到390种差异代谢产物,其中314种下调表达,76种上调表达,注释到70条代谢通路。低磷胁迫样本共检测到332种代谢产物发生变化,其中209种下调表达,123种上调表达,注释到58条代谢通路。干旱胁迫样本主要聚类为脂肪酰基、羧酸及其衍生物、有机氧化合物、类黄酮,富集程度最显著的途径为类固醇生物合成。低磷胁迫样本主要聚类为脂肪酰基、羧酸及其衍生物、有氧化合物、类黄酮,富集程度最显著的途径为苯乙烯、二芳庚烷和姜酚的生物合成。研究利用代谢组学方法对百脉根组织部位中的代谢物进行分析鉴定,探究在低磷和干旱胁迫条件下百脉根组织部位中的代谢物以及差异代谢物种类和含量,为以后百脉根非生物胁迫的研究提供数据基础。

关键词：百脉根低磷干旱胁迫代谢组学

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百脉根WRKY基因家族生物信息学分析

分子植物育种 2023年第14期21卷 4606-4617页

作者：马培杰李亚娇舒健虹王小利贵州省农业科学院草业研究所贵阳550006

WRKY转录因子是一个超家族的调节因子,参与植物的多种生物过程和逆境胁迫反应。然而,在百脉根中对WRKY家族还没有相关的研究。本研究共鉴定出79个LjWRKYs基因,它们不均匀分布在各染色体上的基因位点编码,与拟南芥At WRKYs进行系统发育分... 详细信息

WRKY转录因子是一个超家族的调节因子,参与植物的多种生物过程和逆境胁迫反应。然而,在百脉根中对WRKY家族还没有相关的研究。本研究共鉴定出79个LjWRKYs基因,它们不均匀分布在各染色体上的基因位点编码,与拟南芥At WRKYs进行系统发育分析,分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类。保守基序和外显子-内含子数目表明79个LjWRKYs在不同亚簇中均具有较大的差异,顺式作用元件结果显示在上游2000 bp启动子区域包含多种逆境胁迫、激素和生长发育相关的元件。共线性结果有36对片段复制和1对串联重复复制共线性基因,且Ka/Ks均小于1。本研究通过分析百脉根WRKY基因家族的基本结构与性质,为深入研究百脉根WRKY基因家族提供了基础。

关键词：百脉根 WRKY 基因家族

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低磷胁迫下高羊茅转录组学分析

分子植物育种 2022年

作者：马培杰李亚娇舒健虹王子苑罗维龙忠富王小利贵州省农业科学院草业研究所

对高羊茅(Festuca arundinacea)叶片进行转录组测序分析，挖掘响应低磷胁迫的相关基因，探讨高羊茅抵御逆境胁迫的分子机制。用KHPO浓度为0.005 mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫处理下的高羊茅作为研究材料，应用HiSeq4000 PE-25... 详细信息

对高羊茅(Festuca arundinacea)叶片进行转录组测序分析，挖掘响应低磷胁迫的相关基因，探讨高羊茅抵御逆境胁迫的分子机制。用KHPO浓度为0.005 mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫处理下的高羊茅作为研究材料，应用HiSeq4000 PE-250测序平台对叶片进行转录组测序，对测序结果进行基因功能注释分析和差异表达基因(DEGs)筛选。获得低磷胁迫处理下高羊茅叶片中2 269个DEGs。GO富集结果表明，低磷胁迫下高羊茅中的DEGs均显著富集到叶绿体被膜、叶绿体基质、酸性磷酸酶活性、去磷酸化、蔗糖-1F果糖基转移酶活性等过程中；KEGG途径富集分析表明，高羊茅低磷胁迫处理下的DEGs显著富集的代谢途径主要涉及甘油磷脂代谢、甘油脂类代谢、类胡萝卜素生物合成、苯丙氨酸代谢等。转录因子鉴定结果显示高羊毛低磷胁迫处理下差异表达数量最多的转录因子主要来自C3H、NAC、C2H2、WRKY、bHLH等转录因子家族；通过高通量转录组测序，初步获取了高羊茅响应低磷胁迫的基因表达特征，为深入研究高羊茅抗逆机制提供理论依据。

关键词：高羊茅低磷胁迫转录组分析转录因子

添加乳酸菌、白酒糟和玉米粉对不同青贮时间象草营养价值和品质的影响

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家畜生态学报 2023年第8期44卷 25-33页

作者：王子苑舒健虹赵明坤张蓉王小利贵州省草业研究所贵州贵阳550006

试验旨在研究添加乳酸菌、白酒糟和玉米粉对不同青贮时间象草营养价值和发酵品质的影响。试验设1个对照组和5个处理组,对照组为象草单独青贮(CK),处理组分别为象草+乳酸菌组(NL)、象草+白酒糟组(ND)、象草+白酒糟+乳酸菌组(NDL)、象草+... 详细信息

试验旨在研究添加乳酸菌、白酒糟和玉米粉对不同青贮时间象草营养价值和发酵品质的影响。试验设1个对照组和5个处理组,对照组为象草单独青贮(CK),处理组分别为象草+乳酸菌组(NL)、象草+白酒糟组(ND)、象草+白酒糟+乳酸菌组(NDL)、象草+白酒糟+玉米粉组(NDC)和象草+白酒糟+玉米粉+乳酸菌组(NDCL),分别在发酵第5、13、30和45天开袋取样,测定感官品质、营养成分、发酵指标和有氧稳定性。结果表明:与对照组相比,添加乳酸菌、白酒糟和玉米粉均明显提高了象草青贮料的感官评分;处理组的干物质(DM)、粗脂肪(EE)、粗蛋白(CP)含量和相对饲用价值(RFV)均较对照组显著提高(PNDL组>NDC组>ND组>NL组>CK组。综上,添加乳酸菌、白酒糟和玉米粉均能有效改善象草青贮料的营养价值,提高发酵品质和有氧稳定性,三者组合添加能获得更好的青贮效果。

关键词：乳酸菌白酒糟玉米粉象草有氧稳定性

贵州岩溶山区野生天蓝苜蓿根瘤菌资源发掘、固氮特性及其多样性研究

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草地学报 2022年第7期30卷 1891-1899页

作者：曾庆飞韦兴迪韦鑫欧二绫吉玉玉舒健虹龙忠富贵州省农业科学院草业研究所贵州贵阳550006

天蓝苜蓿(Medicago lupulina)是一种广为分布的优良野生豆科饲草植物。为了发掘贵州岩溶山区天蓝苜蓿特定的根瘤菌资源,筛选获得固氮促生能力强、寄主识别范围广的高效抗逆天蓝苜蓿根瘤菌,从贵州省19个县(市)4个不同生态功能区采集天蓝... 详细信息

天蓝苜蓿(Medicago lupulina)是一种广为分布的优良野生豆科饲草植物。为了发掘贵州岩溶山区天蓝苜蓿特定的根瘤菌资源,筛选获得固氮促生能力强、寄主识别范围广的高效抗逆天蓝苜蓿根瘤菌,从贵州省19个县(市)4个不同生态功能区采集天蓝苜蓿根瘤样品,经分离、纯化、菌体形态观察、16S rRNA基因序列比对分析,获得69个根瘤菌保存菌株。区系分析结果表明,分离菌株分属6属25种,其中中华根瘤菌属(Sinorhizobium)的分布频率高达55.71%,为优势属,草木樨中华根瘤菌(S.meliloti)分布频率达到38.51%,为优势种。选择来自不同地域、不同种类的天蓝苜蓿根瘤菌28株,采用百脉根盆栽回接方法,结合菌株固氮酶活性的测定,筛选出优良促生固氮根瘤菌9株,其中5个菌株的酶活力及植物促生效果与另外4株的差异均达显著(P<0.05)或极显著水平(P<0.01),为最优促生根瘤菌。本研究结果可为区域草业发展及生态环境建设提供共生微生物资源。

关键词：天蓝苜蓿根瘤菌区系分析菌株筛选贵州岩溶山区

贵州多花木兰根际溶磷菌株的鉴定及代谢组学分析

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西北农业学报 2023年第8期32卷 1256-1267页

作者：舒健虹王子苑欧二绫李安曾庆飞王小利贵州省农业科学院草业研究所贵阳550006 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室山地生态与农业生物工程协同创新中心贵阳550025

为了研究溶磷菌如何响应和应对缺磷,将难溶性磷转变成可溶性磷的机制。利用贵州多花木兰根际土壤分离筛选获得溶磷菌株PD19-4,设置无磷(CK)、难溶性磷(UP)和可溶性磷(SP)3种磷元素条件下培养,并采用LC-MS/MS代谢组学方法分析其在不同磷... 详细信息

为了研究溶磷菌如何响应和应对缺磷,将难溶性磷转变成可溶性磷的机制。利用贵州多花木兰根际土壤分离筛选获得溶磷菌株PD19-4,设置无磷(CK)、难溶性磷(UP)和可溶性磷(SP)3种磷元素条件下培养,并采用LC-MS/MS代谢组学方法分析其在不同磷元素条件下培养产生的差异代谢物。经形态学鉴定、理化特性比较和16S rDNA序列比对NCBI数据库,发现PD19-4与巴氏假单胞菌(Pseudomonas baetica)最相似,且同源性达99.65%。代谢组分析发现:(1)菌株代谢物共鉴定出253个。CU(CK∶UP)、CS(CK∶SP)和US(UP∶SP)中差异显著下调的代谢物有68、101和108个。代谢物中有机酸类、氨基酸类、碳水化合物和核苷酸类差异物最多;(2)与CK相比,UP和SP中共同上调较明显的代谢物有磷酸糖类D-甘露糖6-磷酸、D-木酮糖-5-磷酸和核酮糖-5-磷酸类物质,且仅在UP中最活跃的代谢物是D-葡萄糖-6-磷酸和2-脱氧核糖1-磷酸。与UP相比,CK和SP中有机酸类精氨基琥珀酸差异倍数较大且相反,分别为17.28 log 2FC和-17.28 log 2FC;(3)KEGG注释和富集,与SP相比,CK和UP都共同富集在精氨酸、脯氨酸代谢、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸代谢途径、碳代谢、磷酸戊糖途径及ABC转运体通路。仅在US中富集的代谢通路有嘌呤代谢、氧化磷酸化、氨基糖和核苷酸糖代谢。综合以上,溶磷菌株从可溶性磷转到难溶性磷环境中,主要通过增加有机酸类和氨基酸类代谢物,同时增强嘌呤代谢、氧化磷酸化、氨基糖和核苷酸糖代谢及磷酸戊糖途径来提高溶磷性。

关键词：溶磷菌代谢组学贵州多花木兰差异代谢物