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阳离子脂质肽用于单纯型大疱性表皮松解症基因治疗的初步评价

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华西药学杂志 2023年第2期38卷 142-146页

作者：胡雪依路姣杨焕郝丹金蓉蓉聂宇四川大学生物医学工程学院、国家生物医学材料工程技术研究中心四川成都610064

目的合成两亲性阳离子脂质肽(RLS),通过报告绿色荧光蛋白基因(pEGFP)及治疗基因野生型角蛋白14(KRT14)的表达水平检测,考察其在小鼠成纤维细胞L929、小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3和人永生化角质形成细胞HACAT中的基因递送效率。方法利用1H... 详细信息

目的合成两亲性阳离子脂质肽(RLS),通过报告绿色荧光蛋白基因(pEGFP)及治疗基因野生型角蛋白14(KRT14)的表达水平检测,考察其在小鼠成纤维细胞L929、小鼠胚胎成纤维细胞NIH-3T3和人永生化角质形成细胞HACAT中的基因递送效率。方法利用1HNMR和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱表征RLS的化学结构。采用溶剂注入法制备RLS自组装体,检测其与基因复合前后的粒径、电位。将RLS自组装体与pEGFP静电吸附形成的基因复合物转染至L929、NIH-3T3、HACAT,利用EGFP表达平均荧光强度(MFI)半定量法评估复合物的转染效率,并在转染48 h后,采用CCK-8试剂法考察复合物对以上3种细胞的毒性。实时荧光定量PCR(q-PCR)检测KRT14 mRNA的表达水平。结果成功制备了粒径为142.8±0.9 nm,Zeta电位为28.7±0.4 mV的RLS自组装体。将其与DNA复合后,粒径增至167.1±2.3 nm,Zeta电位降至20.2±0.5 mV。RLS基因复合物在3种细胞中均未显示明显毒性。在转染L929、NIH-3T3和HACAT细胞后,RLS组的pEGFP的平均荧光强度分别为96、46、33。q-PCR结果显示:在L929、NIH-3T3、HACAT细胞中,RLS组KRT 14 mRNA的表达水平分别约是Lipo2000的130、100和5倍,是PEI的1.7×10^(5)、120、5倍,证明了阳离子脂质肽具有高的基因递送效率。结论RLS作为一种高效、安全的基因递送载体。在由KRT14基因突变引起的单纯型大疱性表皮松解症遗传性皮肤疾病中,具有一定的应用潜力。

关键词：阳离子脂质肽两亲性基因转染基因递送绿色荧光蛋白基因野生型角蛋白14 单纯型大疱性表皮松解症,遗传性皮肤疾病

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关于无症状反流性食管炎的发病因素研究

关于无症状反流性食管炎的发病因素研究

作者：胡雪承德医学院

学位级别：硕士

根据蒙特利尔共识意见将胃食管反流病（Gastroesophageal reflux disease,GERD）定义为胃内容物反流引起不适症状和（或）并发症的一种疾病。但在近年来的临床实践中发现,部分患者没有胃食管反流病的相关症状,却在内镜下发现食管黏膜糜... 详细信息

根据蒙特利尔共识意见将胃食管反流病（Gastroesophageal reflux disease,GERD）定义为胃内容物反流引起不适症状和（或）并发症的一种疾病。但在近年来的临床实践中发现,部分患者没有胃食管反流病的相关症状,却在内镜下发现食管黏膜糜烂。这种情况被定义为无症状性反流性食管炎（Asymptomatic reflux esophagitis,ARE）。目前关于影响ARE发病的相关因素仍认识不足,还需进一步研究。目的:通过比较无症状反流性食管炎患者及有症状反流性食管炎患者的饮食习惯、生活方式及内镜下表现,探讨影响无症状反流性食管炎发生的相关因素。方法:本研究选取了于2022年07月至2023年02月在我院行内镜检查并明确诊断为反流性食管炎（Reflux esophagitis,RE）的患者。研究对象包括年龄在18至80岁的患者,并针对这一人群进行系统的问卷调查,具体问卷调查方式包括:（1）行内镜检查后现场发放问卷调查;（2）内镜检查后门诊复诊时发放问卷调查;（3）通过电话随访方式进行问卷调查。其中部分基础资料及内镜资料通过门诊电子病例系统、内窥镜系统收集。我们将患者划分为两组,即无症状反流性食管炎（ARE）组和症状性反流性食管炎（Symptomatic reflux esophagitis,SRE）组。在调查中详细收集患者的基线资料,包括年龄、性别、身体质量指数（Body mass index,BMI）等,并深入了解他们的生活方式、饮食习惯,计算焦虑评分和抑郁评分。记录患者的基础疾病情况,如高血压、糖尿病。此外,记录内镜检查结果,包括内镜下RE分级、胃食管阀瓣分级、内镜下诊断、幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染情况等。通过对这些数据的深入分析,探讨影响无症状反流性食管炎发生的相关因素,为了解无症状反流性食管炎患者的临床特征和发生的相关因素提供参考,为个体化的治疗方案提供支持。结果:1.2022年07月-2023年02月行内镜检查的患者共计6809人,诊断RE的患者共计1035人（15.2%）,共纳入符合标准的反流性食管炎患者923例（13.6%）。根据FSSG问卷调查结果对其进行分组,分为ARE组104例（11.3%）,SRE组819例（88.7%）。2.全部RE患者总体资料分析,其中一般资料分析:男性584例,女性339例,男/女性别比约为1.72:1;平均年龄为（53.3±12.4）岁;BMI平均范围为（24.9±2.7）kg/m2;吸烟占39.3%（363例）;饮酒占50.2%（463例）;饮浓茶占26.4%（244例）;饮用咖啡占19.1%（176例）;便秘占23.7%（219例）;久坐占38.0%（351例）;FSSG评分>1分共计819例（88.7%）,FSSG评分≤1分共计104例（11.3%）;SAS评分45.0（35.0,47.0）分;SDS评分44.0（36.0,47.0）分;高血压占17.7%（163例）;糖尿病占5.7%（53例）。内镜资料分析:合并萎缩性胃炎占24.2%（223例）;消化道溃疡占10.0%（92例）;胆汁反流占3.3%（30例）;贲门息肉占1.6%（15例）;食管裂孔疝占5.0%（46例）;胃食管阀瓣分级（Ⅰ+Ⅱ级）占55.7%（514例）;Hp感染占57.7%（533例）;轻度RE（A级+B级）占95.2%（879例）。***组和SRE组一般资料比较显示:在ARE组中,男性占55.8%（58例）、平均年龄为（53.0±12.7）岁、吸烟占37.5%（39例）、饮浓茶占25%（26例）、便秘占21.2%（22例）、久坐占32.7%（34例）、高血压占16.3%（17例）,以上数据在两组间比较均无统计学差异（P>0.05）;ARE组的平均BMI（24.4±2.1）kg/m2,SRE组的平均BMI（25.0±2.8）kg/m2,两组间的BMI存在统计学差异（P<0.05）;将BMI分为正常、超重、肥胖,两组在BMI分类上存在统计学差异（P<0.05）;ARE组中饮酒占59.6%（62例）,SRE组占49.0%（401例）;ARE组饮用咖啡占8.7%（9例）,SRE组占20.4%（167例）;两组在饮酒、饮用咖啡方面差异具有统计学意义（P<0.05）;ARE组中糖尿病占23.1%（24例）,而SRE组中占3.5%（29例）,经统计分析差异具有统计学意义（P<0.001）;通过对患者进行SAS量表及SDS量表问卷调查,其中ARE组的SAS的评分41.0（36.0,45.0）分,SRE组评分45.0（37.0,47.0）分。ARE组SAS评分低于SRE组SAS评分;ARE组SDS评分42.0（35.0,45.0）分,

关键词：反流性食管炎无症状发病因素内镜下表现

乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式构建的行动研究 ——以Q小学为例

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乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式构建的行动研究...

作者：胡雪云贵州师范大学

学位级别：硕士

2022年颁布的《义务教育语文课程标准》明确规定了写作实践活动的要求,给乡村小学的写作教学提出了新的挑战和机遇。而现有乡村小学的高年级写作教学面临着一系列的难题。因此,需要抓住当前发展契机,构建一个高年级写作教学模式让写作... 详细信息

2022年颁布的《义务教育语文课程标准》明确规定了写作实践活动的要求,给乡村小学的写作教学提出了新的挑战和机遇。而现有乡村小学的高年级写作教学面临着一系列的难题。因此,需要抓住当前发展契机,构建一个高年级写作教学模式让写作教学高质量发展。首先,本研究通过阅读大量文献了解当前乡村小学高年级语文写作教学模式的研究现状、研究方法、研究思路,对已有的文献进行述评明确出当前研究的不足,确立了乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式构建的理论基础——认知加工理论和海耶斯-弗劳尔写作认知模型。其次,通过与教师和学生的访谈、写作教学课堂的观察以及学生写作文本的分析,对乡村小学高年级语文写作教学“说读思写评改”的现实进行考察,了解其当前现状。再次,在文献分析和现实考察的基础上,构建乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式,主要包括理论基础、教学原则、教学目标、实现条件、操作步骤、教学评价和教学策略七个方面。最后,将乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式应用于教学实践,开展三轮行动研究。第一轮行动研究为尝试与探索阶段,旨在解决乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式的各个步骤在教学中如何形成协同有效的整体以及在教学过程中如何加强认知监控和指导两个问题。第二轮行动研究是调整与改进阶段,旨在解决乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式如何体现乡村特色、如何增强评价结果的客观性以及如何增强修改过程的反思效果三个问题。第三轮行动研究是提升与应用阶段,旨在解决如何让写作成为联结学校与家庭的工具、如何提高学困生的评价能力以及如何让写作的构思更全面的三个问题。在这个过程中不断完善和改进乡村小学高年级语文“说读思写评改”写作教学模式,证明此模式能够提升乡村小学生的写作水平。

关键词：乡村小学高年级 “说读思写评改”写作教学模式

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体态律动应用于古诗词童声合唱教学研究

体态律动应用于古诗词童声合唱教学研究

作者：胡雪月西安音乐学院

学位级别：硕士

斜拉索外置式钢锚管锚固结构疲劳性能试验研究

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斜拉索外置式钢锚管锚固结构疲劳性能试验研究

作者：胡雪冰重庆交通大学

学位级别：硕士

斜拉桥作为一种索、塔、梁三种结构组成的缆索承重桥梁,具有良好的力学性能和跨越能力。索梁锚固结构作为斜拉桥索力传递的关键构件之一,具有结构焊缝密集、传力机理复杂、局部应力集中等问题。本文研究的新型锚固结构相较于传统钢锚管... 详细信息

斜拉桥作为一种索、塔、梁三种结构组成的缆索承重桥梁,具有良好的力学性能和跨越能力。索梁锚固结构作为斜拉桥索力传递的关键构件之一,具有结构焊缝密集、传力机理复杂、局部应力集中等问题。本文研究的新型锚固结构相较于传统钢锚管锚固结构,其特点为:钢锚管通过与锚固腹板等众多板件的连接将其焊接在主梁两侧形成外置式钢锚管形式,具有便于拉索系统检测、养护以及更换施工等优点。论文在交通运输部科技示范工程“三峡库区奉建高速公路安全智能建造科技示范工程”项目支持下,依托重庆奉建高速公路大溪河特大桥开展锚固结构1:2缩尺模型试验研究,研究斜拉索外置式钢锚管锚固结构的受力、变形规律及其疲劳性能,为斜拉桥锚固结构设计与施工提供参考。论文研究工作及取得的成果如下:(1)采用MidasCivil有限元软件建立大溪河特大桥空间有限元模型,综合考虑成桥索力、活载索力幅确定最不利荷载位置,最终确定索力最大的WS26号斜拉索所在节段为重点研究对象。根据依托工程交通量预测模型,采用Monte Carlo统计模拟方法,通过MATLAB计算机编程语言分析得出依托工程的疲劳荷载谱。根据疲劳线性损伤理论,结合BS5400、AASHTO等相关设计规范,明确外置式钢锚管锚固结构缩尺模型疲劳试验幅值为300k N。(2)基于相似理论,以应力相等为条件提出了大溪河特大桥锚固结构疲劳试验1:2缩尺模型的设计方案。建立ANSYS有限元模型,通过原桥节段模型和试验模型应力等效对比,计算确定缩尺模型的设计构造细节。综合分析实际工程桥梁索梁锚固区的疲劳性能以及试验要求,提出了合理的疲劳试验方案。(3)在山区桥梁及隧道工程国家重点实验室开展了索梁锚固结构的静力、疲劳试验,揭示了外置式钢锚管锚固结构的受力、变形规律及其疲劳性能。试验结果表明:钢锚管所受拉索的集中力作用通过锚固腹板传递到主梁腹板,中间通过稳定板、加劲肋逐次释放锚固结构的应力集中现象。结构薄弱位置分布在锚固腹板与钢锚管连接焊缝处。经过280万次疲劳加载后,缩尺模型主要传力焊缝的应力基本保持不变,各部位均未发现疲劳裂纹。应力测试结果与有限元结构分析结果一致,表明锚固结构整体性能良好,并且具有较大的安全储备。(4)依据国内外相关设计规范,对外置式钢锚管锚固结构的疲劳性能进行了评价,缩尺模型在锚固腹板与钢锚管连接焊缝处的疲劳验算点最大等效应力为48.45MPa,满足工程应用的疲劳强度要求。(5)采用ABAQUS与FRANC3D对应力集中的锚固腹板与钢锚管连接焊缝处进行裂纹扩展模拟,基于线弹性断裂力学理论对结构寿命进行了预测。结果表明:当锚固结构缩尺模型荷载循环次数超过1401万次后,钢锚管与锚固腹板倒角处焊缝裂纹达到锚固腹板厚度24mm,说明在保证材料制作工艺、结构焊接质量以及正常养护的基础上,依托工程外置式钢锚管锚固结构在设计寿命内发生疲劳破坏的概率很小。(6)在索梁锚固结构疲劳试验基础上,通过ANSYS精细有限元模型进一步对外置式钢锚管锚固结构进行了优化分析,研究了稳定板与锚固腹板倒角两者之间的距离以及锚固腹板倒角半径对锚固结构受力的影响规律。结果表明:稳定板与锚固腹板倒角距离为150mm、锚固腹板倒角半径为230mm时,锚固结构受力状况较为理想,为斜拉桥锚固结构设计提供了科学依据。

关键词：外置式索梁锚固结构模型实验疲劳荷载谱疲劳性能疲劳寿命

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西北内陆干旱区适水灌溉规模研究

西北内陆干旱区适水灌溉规模研究

作者：胡雪雪西北农林科技大学

学位级别：硕士

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K公司薪酬体系优化研究

K公司薪酬体系优化研究

作者：胡雪颖云南师范大学

学位级别：硕士

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乡村振兴背景下河南省农旅融合发展路径研究

农业经济 2024年第6期 79-80页

作者：胡雪松郑州经贸学院河南郑州451191

全面推进乡村振兴是党和国家构建新时代农村现代化格局的重要举措,统筹推进农旅融合发展是河南省实现乡村振兴战略的基础与关键,也是河南省实现农村三产融合目标的重要突破口。本文首先分析了农旅融合发展的动力机制,并把脉河南省农旅... 详细信息

全面推进乡村振兴是党和国家构建新时代农村现代化格局的重要举措,统筹推进农旅融合发展是河南省实现乡村振兴战略的基础与关键,也是河南省实现农村三产融合目标的重要突破口。本文首先分析了农旅融合发展的动力机制,并把脉河南省农旅融合发展现状,探究其发展过程中面临的问题,提出了河南省农旅融合发展路径。

关键词：农旅融合乡村振兴发展路径

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论魏晋南北朝医学之气与文学之气

论魏晋南北朝医学之气与文学之气

作者：胡雪蓓重庆三峡学院

学位级别：硕士

气是具有悠久历史、丰富内涵及民族特色的重要美学、文学理论范畴。作为具有多义性的类概念,气是化生万物的质料,是构成人体的基本物质,是创造与批评文学的核心。魏晋南北朝是“气”概念变化发展的重要历史时期。这一时期,文学走向自觉... 详细信息

气是具有悠久历史、丰富内涵及民族特色的重要美学、文学理论范畴。作为具有多义性的类概念,气是化生万物的质料,是构成人体的基本物质,是创造与批评文学的核心。魏晋南北朝是“气”概念变化发展的重要历史时期。这一时期,文学走向自觉,传统医学呈多样化发展之势。医学之气与文学之气同源共生,医学之气在生命观、创作和批评上影响了文学之气,这种影响不仅突出了“气”在文学本体论、创作论和批评论中的作用,更丰富了文艺心理学、文艺生理学的内容。本研究将从宇宙论、生命论、艺术论三方面展开,厘清魏晋南北朝时期医学之气与文学之气的发展脉络,从文学史角度阐释两者存在的理论连接与思想交汇,在此基础上指出医学之气在创作论、批评论层面上对文学之气的影响。从先秦到魏晋,“气”由重伦理道德转向重气质才性,人逐渐掌握决定“气”内涵的权利。传统医学在魏晋南北朝“疫气”的肆虐下努力寻找新的平衡阴阳及人体内外之气的方式,把人体作为是否容易感染疫病的最关键一环;文学在此时期加入了情欲分离后的个人呐喊,情感性、特征化的文学创作与品评成为主旋律,但依旧是“言志”与“缘情”的结合,甚至以“缘情”来“言志”。《人物志》正式确认了人物品评在文学中的地位,虽然其思想仍旧暗示着对人体之气的混乱认识,但由于奠定了以气论人的思维方式,将文学创作与批评的重心落在人上,因而与传统医学在人体之气上有所勾连。气之升降出入运动为气化,气化是人体生命活动存在的基本方式。气及气化运动之实质化为体质,其来源于人的天生禀赋及后天养育,也受到社会风尚的影响。魏晋南北朝时期的体质及身体崇拜与文学创作、品评的关联有着明显的阶段性:三国两晋时期的战乱、疫病及由此带来的思想与行为上的矛盾使得文士虽然强调生命的重要性,但其个人体质逐渐被削弱。传统医学与文学在此形成了反向的双生循环:气弱——体弱——文强——体弱——气弱。气弱是根本,体弱是气弱的表现,文强是气弱在文学上的结果。南朝进一步强化了这一循环,并将身体纤弱标准化为文学超凡、政治超脱的衬托,人之性格特征及精神成为超脱身体的更好追求,“二浙文弱”成了其代名词,同时也成了北朝讽刺南朝的形容。北朝因由鲜卑统治,其民族体质强壮且“尚武”,孔子成了北朝文化身份认同的象征。因此,北朝文士成为此一时期对刚健在身体和文学上共同讴歌的代表,也是对秦汉时期阳刚男子气质的复归。这种“削弱——纤弱——刚健”的总体特征与文学创作“风骨——-艳丽——慷慨”的总体趋势一一对应,成为魏晋南北朝时期传统医学之气及文学之气的独特发展进路。文学批评的底层逻辑显示出其和“扶正祛邪”这一传统医学核心逻辑的互通之处。针对作品的批评属于“祛邪”,对作者的才性命运的品藻则属于“扶正”。曹丕以“气分清浊”喻示其对邪气内生的担忧和对禀赋的重视;陆机则提出了“物”与“感”之间的“象”,这与传统医学“同病异治”、“异病同治”治则类似,都意识到了“病”的传变之象;刘勰更加强调后天保养身心,若作者“博学”,且遵循“四时调神”以“养气”,则可远离任何形式的“病”。文学批评将文学创作中的“心气不爽”视作“正气”中的矛盾部分,并将增强作者本人的才性视作“扶正”;而由于祛邪实际上体现了对不同标准的维护,对不同文学作品的品评就一直处在流动的“扶正祛邪”之中,也流动在后世的批评鉴赏之中。总结而言,魏晋南北朝时期医学之气与文学之气在人之气实质化——体质上找到了物质性沟通点,进而在文学创造、文学批评与主体之间达成了力的结构一致:医学之气——人——文学之气。由此,医学之气与文学之气的关系可以概括为异质同构,医学之气深刻影响了文学创作与文学批评。

关键词：魏晋南北朝医学之气文学之气体质扶正祛邪