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马链球菌兽疫亚种荧光定量PCR检测方法的建立及在入境马匹回顾性检测分析中的应用

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中国兽医学报 2024年

作者：胡雨桐周学慧赵梦茹陈翔吴晓薇赵治国王艳赵光伟广州海关技术中心上海海关呼和浩特海关技术中心西南大学动物医学院

为建立一种针对马链球菌兽疫亚种(Streptococcusequisubspecieszooepidemicus，SEZ)快速、特异、敏感的检测方法，并了解SEZ在入境我国马匹中的感染情况，试验首先根据SEZ标准菌株(ATCC43079)的保守基因comB设计合成特异性引物，经PCR... 详细信息

为建立一种针对马链球菌兽疫亚种(Streptococcusequisubspecieszooepidemicus，SEZ)快速、特异、敏感的检测方法，并了解SEZ在入境我国马匹中的感染情况，试验首先根据SEZ标准菌株(ATCC43079)的保守基因comB设计合成特异性引物，经PCR扩增后构建pMD19-T-comB重组质粒，以此为标准品模板建立基于SYBR Green I 染料的荧光定量PCR检测方法(quantitative PCR ，qPCR)；进而利用所建方法对2018―2023年由荷兰、比利时、日本、德国、阿根廷和新西兰等6个国家入境我国口岸的477份马血清样本进行SEZ感染情况的检测分析。结果发现本试验所建立的qPCR检测方法特异性良好，仅对SEZ存在特异性扩增；敏感性试验表明该方法最低检测量为4.58 ×101copies/μL；重复性试验检测结果显示批内重复性变异系数均小于0.5%，批间重复性变异系数均低于3.0%，表明重复性良好，稳定性高。回顾性检测分析显示2018年荷兰入境的共40份样本均为阴性(0/40)；2019年比利时入境样本中检测到1份阳性(1/20)，日本和德国入境样本均为阴性(0/36)；2021年日本样本中3份为阳性(3/34)，阿根廷1份为阳性(1/20)，荷兰均为阴性(0/40)；2022年荷兰76份样本均为阴性(0/76)；2023年荷兰126份样本检出阳性样本5份(5/126)，新西兰88份样本中检出阳性1份(1/88)。总计阳性样本11份，阳性率为2.31%(11/477)，总体阳性率较低。结果说明，成功建立了用于检测SEZ的SYBR Green I荧光定量PCR 检测方法，其对我国出入境、口岸部门的快速检疫以及该病的流行病学调查等工作提供必要的技术支撑。

关键词：马链球菌兽疫亚种荧光定量PCR SYBR GreenⅠ 马

禽致病性大肠杆菌CpxRA双组分系统的机制探究

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禽致病性大肠杆菌CpxRA双组分系统的机制探究

作者：胡雨桐安徽农业大学

学位级别：硕士

禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)属于肠道外致病性大肠杆菌(Extraintestinal pathogenic Escherichia coli,Ex PEC),它是一种革兰氏阴性菌,兼性厌氧型微生物。APEC会引起鸡、鸭、鹅等禽类的局部或全身性感染,同时伴有多个器官的损伤疾病综合征,从而导致禽类发病率升高和死亡率提升,造成巨大的经济损失,是禽类常见的肠外传染病原体之一。APEC的一些特征与尿路致病性大肠杆菌(Uropathogenic Escherichia coli,UPEC)和新生儿脑膜炎大肠杆菌(Neonatal Meningitis Escherichia coli,NMEC)相似。它们可通过处理活禽或食用未煮熟的家禽产品而通过食源性交叉感染传播给人类,这表明存在人畜共患病风险。因此,对人类健康来说,APEC可能是一个潜在的危险。直至今日,对于如何防治禽致病大肠杆菌病,人们除了大量使用抗菌药物以外,依然没有更好的办法。与此同时,随着抗生素的长期使用和滥用,导致多重耐药菌株的出现。外排泵基因的表达是细菌多药耐药的常见机制。双组分调控系统(TCS)是广泛分布于各种细菌体内的一种调控系统,已有报道称CpxRA双组分系统对细菌耐药有影响,CpxRA参与细菌的生存能力和致病性,包括毒力、抗氧化应激等。然而,CpxRA双组分系统具体的调控机制尚不清楚。此研究揭示了CpxRA双组分系统对禽致病性大肠杆菌抗生素敏感性和生物被膜形成的影响以及对Emr KY外排泵的调控机制,进而说明CpxRA双组分系统在抗生素胁迫下在APEC中的重要调节作用。1.为了确认cpxRA基因缺失是否对APEC菌株的生长有影响。我们进行了生长曲线实验和活菌计数实验(CFU)。在相同培养条件下,测定各菌株的生长趋势。结果表明野生株WT/p STV28、突变株XM1/p STV28和回补菌株XM1/p CcpxRA在含有15μg/m L的Cm的LB培养基中的生长趋势相似。在生长曲线的滞后期、指数期和平稳期,CFU均无显著差异,说明cpxRA的缺失对APEC菌株的生长没有影响。2.通过生物被膜形成试验来检测cpxRA对APEC生物被膜形成的影响,结果显示,与野生株相比,突变株生物被膜的形成减少,而回补株则恢复了生物被膜的形成能力。通过药敏试验来检测在红霉素、氧氟沙星两种抗菌剂存在的情况下APEC的敏感性实验,结果显示在cpxRA基因的缺失下APEC40对上述两种抗生素的敏感性显著降低。通过RNA抽提、反转录PCR实验和实时荧光定量PCR(RT-q PCR)实验,检测编码多药物外排泵emr K,emr Y基因的转录水平。结果表明,相比于野生株,突变株中编码多药物外排泵的基因(emr K和emr Y)的转录水平均提高,而回补株中这两个基因的转录水平恢复到与野生型相似水平。这些数据表明,Cpx信号通路在大肠杆菌APEC生物被膜的形成中起着重要的调控作用,同时证明CpxR负调控细菌对氧氟沙星和红霉素的敏感性。3.通过蛋白体外表达与纯化技术、电泳迁移率变化试验(EMSA)等分子生物学手段探究CpxR蛋白与emr KY基因启动子区域的结合情况。实验阳性对照显示CpxR能够与其自身启动子结合,实验结果表明,CpxR蛋白能够直接结合emr KY基因启动子区域,且随着CpxR浓度的增加,移带强度增加。结果证实CpxR可以特异性结合emrKY的启动子,说明CpxR可以直接调控emrKY外排泵的转录。

关键词：禽致病性大肠杆菌 CpxRA双组分体系抗生素敏感性生物被膜外排泵

养血扶白散治疗乳腺癌化疗相关性中性粒细胞减少的临床观察

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养血扶白散治疗乳腺癌化疗相关性中性粒细胞减少的临床观察

作者：胡雨桐湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察养血扶白散治疗乳腺癌化疗相关性粒细胞减少的临床疗效及安全性,通过患者临床疗效评价标准、生存质量评分水平、不良反应发生率等情况,观察养血扶白散在治疗乳腺癌化疗相关性粒细胞减少的临床疗效。方法:将符合纳入、排除标准... 详细信息

目的:观察养血扶白散治疗乳腺癌化疗相关性粒细胞减少的临床疗效及安全性,通过患者临床疗效评价标准、生存质量评分水平、不良反应发生率等情况,观察养血扶白散在治疗乳腺癌化疗相关性粒细胞减少的临床疗效。方法:将符合纳入、排除标准的58例患者,采用随机数字分组法分为实验组和对照组,每组各29例。实验组采用基础治疗+养血扶白散口服,对照组采用基础治疗+利可君片。两组均每日定时用药,7天为1个疗程,观察对比两组治疗前后的患者临床疗效评价标准、生存质量评分水平、不良反应发生率等,进行数据分析和统计两组患者的总疗效水平。结果:（1）治疗前两组患者在病程比较、年龄等一般资料上比较,其差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）两组中医症候疗效治疗前后均有改善,但养血扶白散组优于利可君组;（3）在西医疗效观察过程中,两组间疗效差异均有统计学意义,养血扶白散组总体疗效优于利可君组。（4）KPS评分比较结论说明养血扶白散较利可君片组在改善患者生活质量上占优势,QOL评分比较证明两组患者治疗前后QOL评分组间比较均有升高,但养血扶白散组较利可君片组效果更佳。（5）临床观察期间,两组病例均未发生严重不良反应。结论:养血扶白散治疗乳腺癌化疗相关性中性粒细胞减少可以有效提升患者中性粒细胞水平,改善患者临床症状,提高生活质量,在总疗效水平方面相较利可君片组更佳,无明显不良反应发生发生,安全经济,可临床治疗上进一步推广和应用。

关键词：乳腺癌化疗相关性粒细胞减少养血扶白散

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奔流新闻的全域化探索

传媒 2023年第S1期 58-61页

作者：陈国宁胡雨桐甘肃新媒体集团兰州财经大学商务传媒学院

奔流新闻客户端是甘肃省探索建设新型主流媒体的全新平台，以用户为核心、数据为支撑，升级内容生产能力，努力实现与更广大用户的互联网连接及其他社会资源的聚合。奔流新闻客户端突出四个特质：全域广度、文化厚度、青春角度、民生温... 详细信息

奔流新闻客户端是甘肃省探索建设新型主流媒体的全新平台，以用户为核心、数据为支撑，升级内容生产能力，努力实现与更广大用户的互联网连接及其他社会资源的聚合。奔流新闻客户端突出四个特质：全域广度、文化厚度、青春角度、民生温度。致力于产出优质特色内容，“讲好中国故事、讲好‘一带一路’故事、讲好新时代甘肃故事”。上线以来，不断推出爆款作品，提升品牌影响力，成为甘肃旗舰型新媒体。

关键词：奔流新闻媒介融合文化传播主流媒体

文化铸魂,服务固根——奔流新闻的全域化探索

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青年记者 2023年第3期 78-80页

作者：陈国宁胡雨桐甘肃新媒体集团奔流新闻兰州财经大学商务传媒学院

奔流新闻客户端以技术升级为底层逻辑,把握优厚的历史文化资源,增强内容生产能力;始终以用户为核心,做好服务工作,努力实现与用户更广泛的连接及社会资源的整合;用经得起考验的好作品,“讲好中国故事、讲好‘一带一路’故事、讲好新时... 详细信息

奔流新闻客户端以技术升级为底层逻辑,把握优厚的历史文化资源,增强内容生产能力;始终以用户为核心,做好服务工作,努力实现与用户更广泛的连接及社会资源的整合;用经得起考验的好作品,“讲好中国故事、讲好‘一带一路’故事、讲好新时代甘肃故事”。

关键词：奔流新闻媒介融合文化传播主流媒体

文旅政务微信公众号高阅读量文章的框架研究——以微游甘肃为例

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文化产业 2023年第8期 4-6页

作者：胡雨桐兰州财经大学商务传媒学院

文旅融合背景下,文旅政务微信公众号成为各地政府加快文旅协同宣传的有效渠道。现以“微游甘肃”公众号的文章作为研究对象,将其划分为高阅读量组和低阅读量组,对两组文章在标题、内容、形式框架上的区别进行探究,发现高阅读量组的文章... 详细信息

文旅融合背景下,文旅政务微信公众号成为各地政府加快文旅协同宣传的有效渠道。现以“微游甘肃”公众号的文章作为研究对象,将其划分为高阅读量组和低阅读量组,对两组文章在标题、内容、形式框架上的区别进行探究,发现高阅读量组的文章具有地域文化鲜明、主题丰富、呈现立体等特征。

关键词：阅读量文旅融合有效渠道政务微信公众号地域文化框架研究进行探究形式框架

主流媒体出圈路径探索:兼顾正能量与大流量--以央young系列节目为例

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新闻研究导刊 2022年第7期13卷 13-15页

作者：胡雨桐兰州财经大学商务传媒学院甘肃兰州730030

新传播格局下,主流媒体不断探索媒体融合新路径。2021年,央视推出了全新网络综艺央young系列,该系列是央视“出圈”的新尝试,兼顾主流价值和流量。文章以央young系列节目为研究对象,分别以“正能量”和“大流量”为研究视角,通过案例分... 详细信息

新传播格局下,主流媒体不断探索媒体融合新路径。2021年,央视推出了全新网络综艺央young系列,该系列是央视“出圈”的新尝试,兼顾主流价值和流量。文章以央young系列节目为研究对象,分别以“正能量”和“大流量”为研究视角,通过案例分析来探究央视的“出圈”路径。该研究认为,央视通过打造优质内容、坚持正确引导以及创新服务理念,发挥了传播正能量的作用;通过人气明星引流、充分利用融媒矩阵以及自有平台激发用户参与,取得了吸引大流量的效果。央young系列的成功表明主流媒体转型可以让正能量获得大流量。该出圈方式,对其他媒体加快融合转型有一定的借鉴意义。但介于该节目是进行式的状态,未来还会推出全新的主题节目,文章的研究对象只聚焦现有的三档节目,因此研究存在一定的局限性。

关键词：媒体融合新型主流媒体央young系列节目出圈大流量

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增强文化自信的内容改革逻辑

全媒体探索 2023年第4期 82-83页

作者：胡雨桐兰州财经大学商务传媒学院

新型主流媒体加快内容改革是构建文化强国的重要举措,也是加快自身融合发展的题中应有之义。在文化自觉的视域下,新型主流媒体的内容改革要以文化自觉意识作为传统文化内容创新与传播创新的前提,探索“深挖文化记忆——实现文化认同—... 详细信息

新型主流媒体加快内容改革是构建文化强国的重要举措,也是加快自身融合发展的题中应有之义。在文化自觉的视域下,新型主流媒体的内容改革要以文化自觉意识作为传统文化内容创新与传播创新的前提,探索“深挖文化记忆——实现文化认同——增强文化自信”的实践路径。

关键词：文化自觉新型主流媒体内容改革文化传播

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区域性主流媒体内容供给侧创新的支点

新闻论坛 2023年第4期37卷 25-27页

作者：胡雨桐陈国宁兰州财经大学商务传媒学院甘肃新媒体集团

内容供给侧的创新改革是加快主流媒体深度融合和打造全媒体传播体系的必然选择。本文以奔流新闻客户端作为研究对象,通过对政策逻辑、媒介逻辑以及甘肃省文化传播发展实际情况等因素的考量,认为加强地域文化传播是区域性主流媒体进行内... 详细信息

内容供给侧的创新改革是加快主流媒体深度融合和打造全媒体传播体系的必然选择。本文以奔流新闻客户端作为研究对象,通过对政策逻辑、媒介逻辑以及甘肃省文化传播发展实际情况等因素的考量,认为加强地域文化传播是区域性主流媒体进行内容供给侧创新的有效切入点。具体表现为,奔流新闻凭借“在地”优势,通过打造自主平台、协同多元主体、发挥资源聚合优势等途径,在增强资源配置能力的基础上,以精耕原创、多元内容形态生产、塑造文化IP栏目以及引入PUGC情感创作等途径,实现了立足于地域文化进行内容供给侧创新的有效实践。

关键词：文化传播区域性主流媒体内容供给侧奔流新闻