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冬季油樟产黄酮内生真菌的分离鉴定及其抗氧化和挥发性成分分析

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中国抗生素杂志 2024年第6期49卷 650-661页

作者：刘雯雯刘晓凤沈爱军冯瑞章胡连清陈露魏琴周万海宜宾学院四川省油樟工程技术研究中心宜宾644007 宜宾学院农林与食品工程学部宜宾644007 四川天一学院健康产业学院德阳618000

目的深入挖掘油樟内生真菌资源,从冬季油樟根、茎、叶中筛选产黄酮菌株并对其抗氧化和挥发性成分进行分析。方法采用组织培养、形态学观察和分子生物学方法分离鉴定油樟内生真菌,借助显色反应和NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)比色法筛选具有... 详细信息

目的深入挖掘油樟内生真菌资源,从冬季油樟根、茎、叶中筛选产黄酮菌株并对其抗氧化和挥发性成分进行分析。方法采用组织培养、形态学观察和分子生物学方法分离鉴定油樟内生真菌,借助显色反应和NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)比色法筛选具有产黄酮能力菌株,利用清除自由基初步评估产黄酮最优菌株的抗氧化活性,并通过气相色谱-质谱法(GC-MS)分析菌株的发酵产物成分。结果共获得61株内生真菌,隶属于3门23科29属,子囊菌门(Ascomycota)为优势门,肉座菌科(Hypocreaceae)和小丛壳科(Glomerellaceae)为优势科,木霉属(Trichoderma)和炭疽菌属(Colletotrichum)为优势属。不同组织间内生真菌种类和数量存在明显差异,其中茎部菌株多样性、均匀度和丰富度指数均最高,且茎部和叶部相似性系数最高。通过产黄酮筛选到WG5(Trichoderma)和WG15(青霉属,Penicilium)2株内生真菌,其中WG15总黄酮含量较高且表现出较好的抗氧化活性,DPPH和ABTS自由基清除率的IC50分别为0.52和0.49 mg/L。挥发性物质分析显示,2株菌株代谢产物存在共性和差异,主要包括酯类、酸类、醇类和酚类等物质,共有苯乙醇、2,6-二叔丁基苯酚和棕榈酸成分。结论WG15具有较好的产黄酮和抗氧化能力,可用于后续其他功能的开发,为内生真菌次生代谢产物的活性研究提供了菌种资源。

关键词：油樟内生真菌物种鉴定功能探索多样性

饲粮中不同含量油樟叶对肉兔肠道pH、盲肠发酵和盲肠菌群的影响

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浙江农业学报 2024年第6期36卷 1279-1289页

作者：刘雯雯胡连清周万海魏琴冯瑞章赵鑫车丽涛陈金玉宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644007 宜宾学院四川省油樟工程技术研究中心四川宜宾644007

为探讨向饲粮中添加油樟叶对肉兔肠道pH、盲肠发酵和盲肠微生物菌群结构的影响,选择30日龄断奶新西兰白兔120只,在基础饲粮中添加0(A组)、3%(B组)、6%(C组)、12%(D组)油樟叶,于60 d喂养期结束后测定其肠道内的pH值,并采用气相色谱法和... 详细信息

为探讨向饲粮中添加油樟叶对肉兔肠道pH、盲肠发酵和盲肠微生物菌群结构的影响,选择30日龄断奶新西兰白兔120只,在基础饲粮中添加0(A组)、3%(B组)、6%(C组)、12%(D组)油樟叶,于60 d喂养期结束后测定其肠道内的pH值,并采用气相色谱法和高通量技术分别测定盲肠中的挥发性脂肪酸含量和微生物多样性。结果发现,油樟叶对各组肉兔肠道的pH值和盲肠中的挥发性脂肪酸含量无显著影响。油樟叶添加量对肉兔盲肠的微生物OTU数量有显著(P<0.05)影响,B组的细菌OTU数量显著低于C组、D组,C组的真菌OTU数量显著高于其他组。与A组相比,在门水平上,B、C组拟杆菌门(Bacteroidota)的相对丰度显著升高,C、D组疣微菌门(Verrucomicrobiota)和D组互养菌门(Synergistota)的相对丰度显著降低;在属水平上,B组粪厌氧棒杆菌属(Anaerostipes)、拟杆菌属(Bacteroides)、Muribaculaceae unclassified、Marvinbryantia、考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)、经黏液真杆菌属(Blautia)、Akkermansia和互养菌属(Synergistes)的相对丰度显著升高,D组瘤胃球菌属(Ruminococcus)的相对丰度显著升高。综上所述,饲粮中添加油樟叶对肉兔肠道pH、盲肠发酵和盲肠内容物微生物无明显不良影响,且添加适宜含量(3%)油樟叶可改善肉兔盲肠微生物菌群丰度,促进肠道有益菌生长。

关键词：油樟叶肉兔盲肠发酵菌群结构

不同品种糯红高粱花期内生酵母菌群多样性分析

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中国酿造 2024年第4期43卷 158-165页

作者：刘雯雯陈露胡连清冯瑞章魏琴周万海向秋瑾黄思琪宜宾学院四川省油樟工程技术研究中心四川宜宾644007 宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644007

采用Illumina MiSeq高通量测序技术对花期糯红高粱不同品种及不同器官的内生酵母菌群多样性进行分析,并采用线性判别分析效应值(LEfSe)及FUNGuild分析样品间的差异菌和功能菌。结果表明,共注释到8门182属。地方种青壳洋内生酵母菌的群... 详细信息

采用Illumina MiSeq高通量测序技术对花期糯红高粱不同品种及不同器官的内生酵母菌群多样性进行分析,并采用线性判别分析效应值(LEfSe)及FUNGuild分析样品间的差异菌和功能菌。结果表明,共注释到8门182属。地方种青壳洋内生酵母菌的群落多样性和丰富度均高于杂交种金糯粱1号,叶部丰富度最高。不同品种及茎叶的优势菌门均为子囊菌门(Ascomycota),花和根部的优势菌门分别为担子菌门(Basidiomycota)、未知真菌门(unclassified fungi);在属水平上,金糯粱1号和青壳洋优势菌属分别为刺盾炱目未分类菌属(unclassified Chaetothyriales)和未知真菌属,根、茎、叶和花部的优势菌属分别为未知真菌属、枝氯霉属(Ramichloridium)、刺盾炱目未分类菌属和Didymium。LEfSe分析显示,青壳洋中最重要的差异指示属为Papiliotrema;根、茎、叶和花部最重要的差异指示属分别为镰刀菌属(Fusarium)、枝氯霉属、Alatosessilispora和Pseudozyma。FUNGuild功能预测显示,糯红高粱内生酵母菌群功能丰富,可分为7种营养模式和24个生态功能群,且青壳洋和叶部独有功能菌数最多。

关键词：糯红高粱花期品种器官高通量测序内生酵母菌多样性

绿樟肖叶甲肠道细菌多样性分析及功能菌株的筛选

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宜宾学院学报 2024年第6期24卷 102-108页

作者：胡连清彭俊琪陈露刘雯雯冯瑞章周万海魏琴秦晓红查黎萍宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644000 香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室四川宜宾644000

为分析绿樟肖叶甲肠道内生细菌群落结构及功能特点,采用高通量测序技术与纯培养技术相结合的方法分析绿樟肖叶甲肠道内生细菌多样性及群落结构,并通过选择培养基筛选其中的功能菌. Illumina MiSeq测序结果表明,绿樟肖叶甲肠道内生细菌... 详细信息

为分析绿樟肖叶甲肠道内生细菌群落结构及功能特点,采用高通量测序技术与纯培养技术相结合的方法分析绿樟肖叶甲肠道内生细菌多样性及群落结构,并通过选择培养基筛选其中的功能菌. Illumina MiSeq测序结果表明,绿樟肖叶甲肠道内生细菌隶属于15门、24纲、56目、97科、140属;通过COG功能分类统计发现,绿樟肖叶甲肠道中参与“碳水化合物运输和代谢”及“氨基酸转运与代谢”功能的菌群的相对丰度较高.纯培养结果显示,从绿樟肖叶甲肠道分离的37株内生细菌隶属于4门4纲4目4科9属;通过功能选择培养基筛选出23株产蛋白酶功能菌、6株产酯酶功能菌、3株产脂肪酶功能菌.这表明绿樟肖叶甲肠道内生细菌的群落多样且功能丰富.

关键词：绿樟肖叶甲肠道细菌多样性分析高通量测序技术纯培养

危害油樟的东方绢金龟肠道细菌多样性分析及功能菌株筛选

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安徽林业科技 2024年第1期50卷 31-38页

作者：胡连清刘婉茹刘雯雯冯瑞章周万海魏琴彭俊琪查黎萍陈露宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644000 香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室四川宜宾644000

本文以危害油樟的东方绢金龟为研究对象,采用Illumina Miseq高通量测序技术与纯培养技术相结合的方法,分析东方绢金龟肠道细菌的多样性和群落结构,并利用不同的功能选择培养基筛选功能菌株,丰富特有的功能菌种资源。Illumina Miseq测序... 详细信息

本文以危害油樟的东方绢金龟为研究对象,采用Illumina Miseq高通量测序技术与纯培养技术相结合的方法,分析东方绢金龟肠道细菌的多样性和群落结构,并利用不同的功能选择培养基筛选功能菌株,丰富特有的功能菌种资源。Illumina Miseq测序结果表明,东方绢金龟肠道细菌隶属于15门、25纲、57目、98科、141属、188种,优势门为厚壁菌门,优势属为毛螺菌科的未分类属与丹毒杆菌属;可培养肠道细菌结果分析表明,128株菌隶属于4门、5纲、6目、7科、10属,优势门为朊细菌门,优势属为沙雷氏菌属;运用功能选择培养基筛选出19株产蛋白酶功能菌、13株产酯酶功能菌、9株产脂肪酶功能菌。研究结果解析了东方绢金龟肠道细菌的多样性,为今后深入了解东方绢金龟肠道细菌在调控东方绢金龟与寄主植物油樟互作关系中的作用奠定基础。

关键词：东方绢金龟肠道细菌多样性分析 Illumina Miseq测序纯培养

艳山姜茎叶渣覆盖对冬种莴苣田杂草、土壤及生长的影响

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中国农学通报 2024年第10期40卷 103-108页

作者：胡连清刘雯雯陈雨薇冯瑞章周万海魏琴陈露赵鑫赵善梅宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644000 香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室四川宜宾644000 简阳市农业技术推广中心四川简阳641400

为筛选适合应用于杂草控制及莴苣生长最适叶渣覆盖量,以富含化感物质的艳山姜修剪茎叶为材料,根据覆盖栽培理论和化感作用控草原理,通过在莴苣田行间覆盖不同量艳山姜茎叶渣,评价田间杂草、莴苣生长及土壤理化性质变化。结果显示,随着... 详细信息

为筛选适合应用于杂草控制及莴苣生长最适叶渣覆盖量,以富含化感物质的艳山姜修剪茎叶为材料,根据覆盖栽培理论和化感作用控草原理,通过在莴苣田行间覆盖不同量艳山姜茎叶渣,评价田间杂草、莴苣生长及土壤理化性质变化。结果显示,随着艳山姜茎叶渣覆盖量的增加,其对莴苣田杂草的抑制效果增强。其中,与对照组相比,用1200 g/m^(2)艳山姜茎叶渣覆盖处理后,莴苣田间杂草的种类、数量和多样性降低,杂草生物量(鲜重、干重)分别降低了87.93%、90.54%。同时,莴苣叶片叶绿素含量和单株平均鲜重最高,品质最优。此外,土壤有机质、全氮、速效氮和速效磷含量增高。当覆盖量大于1600 g/m^(2)时,土壤理化性状呈现不同变化趋势,莴苣生长受到抑制,但品质总体有提升。总体而言,在四川宜宾地区冬春莴苣生产中,使用1200 g/m^(2)的艳山姜茎叶渣覆盖处理能够最有效地抑制田间杂草生长、改善土壤环境并促进莴苣生长发育。

关键词：艳山姜覆盖栽培化感作用杂草抑制莴苣

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动画短片角色表演中的夸张手法应用研究

动画短片角色表演中的夸张手法应用研究

作者：胡连清东北师范大学

学位级别：硕士

近十年来,动画的产量日益上升,逐渐成为一门最有艺术前途的行业,各个高校、培训机构开设的动画相关的课程也在逐年增多。通过网络可以观看到大量的学生短片创作,优秀的动画短片创作有很多,当然也存在由于技术手段和理念的不成熟导致最... 详细信息

近十年来,动画的产量日益上升,逐渐成为一门最有艺术前途的行业,各个高校、培训机构开设的动画相关的课程也在逐年增多。通过网络可以观看到大量的学生短片创作,优秀的动画短片创作有很多,当然也存在由于技术手段和理念的不成熟导致最终做出来的短片没有那么理想,我们在平时观看影片时所提到的演技卓越,角色表演之于整部电影主题的阐述精准等等,都是在着重揭示着角色表演的内涵,这同样也适用于动画本身。动画创作人对整部剧中人物、事件运筹帷幄。动画师使用图画来代替表示文字的表意的性能。在绘制人物角色的动作时,他们遵循着动作和技术的相关规则,使画中人物可以像真实演员一样自由灵活地移动起来。在动画的角色表演中,夸张手法起着功不可没的作用,夸张是动画的特质,角色动作的幅度大小,以何种方式,夸张到某个程度,都需要设计师明确地将夸张的关键点勾画出来。夸张不是随意的去夸张,而是要根据短片的情景和风格去设定夸张的使用,夸张在动画中对于动画角色性格的塑造、渲染氛围、启发想象力等等都起着很大的作用。本篇论文所要研究的就是动画短片角色表演中的夸张手法的应用研究,还有基于学生动画短片创作中夸张手法所出现的一些问题分析,如程式化的夸张手法、单一的面部表情夸张,在使用夸张手法时脱离了运动规律等等,以及针对这些问题提出相对应的解决方法。

关键词：短片创作角色表演夸张手法

春季油樟可培养内生真菌多样性及产黄酮功能初筛

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热带作物学报 2022年第10期43卷 2149-2159页

作者：周万海刘雯雯魏琴胡连清冯瑞章赵善梅任玉嫣宜宾学院四川省油樟工程技术研究中心四川宜宾644007 宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644007

为开发油樟内生菌资源并发现潜在活性成分,本研究以春季油樟健康植株的根、茎、叶为材料,采用组织培养法分离纯化可培养内生真菌,结合ITS序列和系统发育树分析菌株多样性,筛选具有产黄酮功能菌株,设计单因素和正交试验优化产黄酮效果最... 详细信息

为开发油樟内生菌资源并发现潜在活性成分,本研究以春季油樟健康植株的根、茎、叶为材料,采用组织培养法分离纯化可培养内生真菌,结合ITS序列和系统发育树分析菌株多样性,筛选具有产黄酮功能菌株,设计单因素和正交试验优化产黄酮效果最佳菌株的发酵条件。结果表明:从油樟中共分离到62株可培养内生真菌,划分为3门、7纲、14目、22科、28属、54种。其中优势门为子囊菌门(Ascomycota,RF为88.71%),优势纲为座囊菌纲(Dothideomycetes,RF为45.16%),优势目为格孢腔菌目(Pleosporales,RF为37.10%),优势科为格孢菌科(Pleosporineae,RF为14.52%)、亚隔孢壳科(Didymellaceae,RF为12.90%),优势属为链格孢属(Alternaria,RF为12.90%)、附球菌属(Epicoccum,RF为11.29%)。以纲为类群单位,根组织分离的16属20种21株真菌的系统发育可分为7个类群,茎分离的13属24种30株真菌则分为2个类群,叶的8属10种11株真菌则分为3个类群。多样性指数和均匀度系数结果表明,油樟根部内生真菌种群多样性相对较丰富,群落分布相对均匀。10株内生真菌具有产黄酮功能,5株来自根部,5株来自于茎部,隶属2门3纲5目8科9属,其中YZ-29菌株产黄酮能力相对较强。YZ-29菌株最优发酵条件为初始pH 7、时间7 d、温度30℃、转速175r/min、装液量80mL/150mL。综上结果显示,内生真菌在油樟不同组织数量、种群及组成上存在差异,分离得到的功能性菌株值得深入挖掘和开发利用,为开展内生真菌在油樟抗氧化成分的生物合成机制方面的研究奠定基础。

关键词：油樟内生真菌多样性分析黄酮发酵条件

糯红高粱中产蛋白酶内生酵母筛选鉴定及发酵特性研究

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食品与发酵工业 2023年第5期49卷 74-80页

作者：胡连清刘雯雯刘婉茹周万海冯瑞章魏琴赵鑫赵善梅陈雨薇宜宾学院农林与食品工程学部四川宜宾644000 香料植物资源开发与利用四川省高校重点实验室四川宜宾644000 简阳市农业技术推广中心四川简阳641400

以糯红高粱中分离出的内生酵母为研究对象,筛选具有产蛋白酶功能的内生酵母,采用形态学观察和26S rDNA D1/D2区序列分析对内生酵母进行分类鉴定,并分析其氮源利用能力以及产酶发酵特性。结果发现:从糯红高粱分离得到33株产蛋白酶内生酵... 详细信息

以糯红高粱中分离出的内生酵母为研究对象,筛选具有产蛋白酶功能的内生酵母,采用形态学观察和26S rDNA D1/D2区序列分析对内生酵母进行分类鉴定,并分析其氮源利用能力以及产酶发酵特性。结果发现:从糯红高粱分离得到33株产蛋白酶内生酵母;经26S rDNA D1/D2区序列分析,这些菌株隶属于1门、4目、13属,优势目为银耳目(Tremellales),占57.62%;优势种属为Papiliotrema rajasthanensis,占27.3%。氮源利用能力研究发现,7株内生酵母具有产利用菜籽饼粕氮源的蛋白酶,J3-74菌株产酶能力最强;5株能产利用明胶的蛋白酶,J6菌株产酶能力最优;7株能产利用干酪素的蛋白酶,J3-78菌株的产酶能力最强。对其中2株产蛋白酶菌株的发酵条件优化发现,J6菌株在接种量为1%、pH为9.0、温度为25℃、葡萄糖为碳源、牛肉膏为氮源时产蛋白酶的活力最高。而J24菌株在接种量为2%、pH为5.0、温度为25℃、葡萄糖为碳源、牛肉膏为氮源时产蛋白酶的活力最高。结果表明,糯红高粱内生酵母种类及其功能具有多样性,可为功能菌株的进一步开发和利用提供支撑。

关键词：糯红高粱蛋白酶内生酵母发酵特性