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乳腺癌患者外周血hMAM mRNA的定量及其临床意义研究

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乳腺癌患者外周血hMAM mRNA的定量及其临床意义研究

作者：胡贤春南昌大学

学位级别：硕士

目的建立SYBR Green I实时定量逆转录PCR(SYBR Green I real-time quantitative RT-PCR,SYBR Green I Q-RT-PCR)体系检测乳腺癌患者外周血及乳腺癌、癌旁乳腺组织人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)mRNA表达的量,探讨hMAM mRNA作为检测CTCs(circulating tumor cells)标记物的可行性,分析外周血存在CTCs及其量与乳腺癌临床、病理特点之间的联系。方法用SYBR Green I Q-RT-PCR检测hMAM mRNA在乳腺癌细胞株MDA-MB-231和61例乳腺癌患者、33例乳腺良性肿瘤患者、11例健康志愿者的外周血;10例乳腺癌组织、10例对应癌旁乳腺组织中表达的量。结果 *** Green I Q-RT-PCR连续检出乳腺癌细胞株MDA-MB-231极低表达hMAM mRNA,CT值在34.454.67,变异系数(CV)=0.25%;乳腺良性肿瘤患者及健康志愿者外周血hMAM mRNA均阴性,显示了该方法良好的重复性、灵敏度及特异性。 2.乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表达阳性率为16.4%(10/61)。其中0期0/3,Ⅰ期0/5,Ⅱ期5/33(15.15%),Ⅲ期5/20(25.0%);No 3/31(9.7%),N1 2/12(6.7%),N2 4/15(26.7%),N3 1/3(33.3%);hMAM mRNA阳性率随其分期进展而增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。10例外周血hMAM mRNA阳性患者中,其乳腺癌组织HER2阳性表达者8例,HER2阴性0例,差异有显著性(P=0.028)。外周血hMAM mRNA表达的量在198～6210,(X|-)±S=1119.9±1829.4,与临床、病理特征间比较无统计学差异。 3.乳腺癌组织hMAM mRNA阳性率为80%(8/10)。其中Ⅰ期1/1(100%),其相对量为37800;Ⅱ期6/6(100%),中位相对量为100.4;Ⅲ期1/3(33.3%),相对量2.94。其中2例乳腺癌患者不论其癌组织或癌旁乳腺组织hMAM mRNA均阴性;癌组织hMAM mRNA阳性的乳腺癌患者其癌旁乳腺组织亦阳性。乳腺癌组织hMAM mRNA表达的量与其临床、病理特征间比较无统计学意义。结论 1.本研究建立SYBR Green I Q-RT-PCR体系可对乳腺癌患者外周血CTCs水平进行定量检测;也可对乳腺癌组织进行hMAM mRNA表达量分析。 2.乳腺癌患者外周血有一定比例hMAM mRNA阳性表达,且与其乳腺癌组织HER2表达相关;乳腺癌及癌旁乳腺组织存在较高比例和较高水平hMAM mRNA表达,极少数乳腺癌及其癌旁乳腺组织同时不表达或低表达hMAM mRNA。 *** mRNA可作为检测乳腺癌患者外周血CTCs的指标。 4.乳腺癌患者外周血CTCs水平的预后意义需进一步对随访结果分析。

关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移循环肿瘤细胞 hMAM基因逆转录聚合酶链反应

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外源纤维素酶对苦丁茶浸提效果影响的研究

安徽农业科学 2008年第31期36卷 13703-13703,13721页

作者：胡贤春王盈峰长江大学园艺园林学院湖北荆州434025

[目的]了解外源纤维素酶对苦丁茶浸提效果的影响。[方法]在温度55℃、pH值4.8保持不变的条件下,以纤维素酶浓度、茶水比和浸提时间为因素、苦丁茶内含物浸出的含量为指标,进行单因素试验,研究合适的苦丁茶浸提方法。[结果]随着纤维素酶... 详细信息

[目的]了解外源纤维素酶对苦丁茶浸提效果的影响。[方法]在温度55℃、pH值4.8保持不变的条件下,以纤维素酶浓度、茶水比和浸提时间为因素、苦丁茶内含物浸出的含量为指标,进行单因素试验,研究合适的苦丁茶浸提方法。[结果]随着纤维素酶浓度的增加,苦丁茶中氨基酸、水溶性糖、水浸出物的含量上升,纤维素含量下降,0.30%为最佳纤维素酶浓度。随着茶水比的增加,苦丁茶中氨基酸、水溶性糖和水浸出物的含量增加,黄酮含量减少,茶水比1∶40时浸提效果较佳。苦丁茶中氨基酸、水溶性糖、黄酮的含量受浸提时间的影响不大。[结论]当纤维素酶浓度为0.30%,茶水比为1∶40,浸提时间为40 min时,苦丁茶的浸提效果较佳。

关键词：纤维素酶苦丁茶浸提

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生姜汁对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

现代食品科技 2022年第7期38卷 120-125,89页

作者：潘雪莉赵振军胡贤春长江大学园艺园林学院湖北荆州434025

采用酶动力学方法研究了生姜汁对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用并对其抑酶物质进行了光谱分析。结果表明:山东大姜姜汁对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果最好(抑制率最高可达73.38%),酶动力学实验及Lineweaver-Burk双倒数作图结果显示姜汁对... 详细信息

采用酶动力学方法研究了生姜汁对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用并对其抑酶物质进行了光谱分析。结果表明:山东大姜姜汁对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果最好(抑制率最高可达73.38%),酶动力学实验及Lineweaver-Burk双倒数作图结果显示姜汁对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用表现为可逆竞争性抑制;5℃贮藏后姜汁对酶活性的抑制率降低至初期的46.50%,贮藏后的姜汁在热处理过程中对酶活性的抑制率表现为先升高后降低的趋势;超滤分离组分抑酶效果表明,姜汁MW≥10 ku组分相比于其他组分对酶活性的抑制率最高,可达67.16%,说明姜汁中发挥抑制酶活性作用的物质主要集中在MW≥10 ku的组分中;在姜汁与α-葡萄糖苷酶的混合体系中,姜汁成分在紫外吸收光谱240~280 nm波段处,吸光值显著降低,说明姜汁中发挥抑酶活性的部分成分分布在240~280 nm波段处。该研究为深入开展姜汁降血糖活性研究及其深加工产品的开发奠定了理论基础。

关键词：姜汁 α-葡萄糖苷酶 PNPG 抑制作用

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茶树接种AM真菌在干旱胁迫下的生理响应

茶叶科学 2024年第5期44卷 718-734页

作者：鲁薇邬晓龙胡贤春郝勇刘春艳长江大学园艺园林学院湖北荆州434025 长江大学城市建设学院湖北荆州434023

为探究干旱胁迫下丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizal,AM)真菌对茶树生长及生理的作用机理,以福鼎大白茶(Camellia sinensis cv.‘Fuding Dabaicha’)茶树实生苗为试验材料,采用温室盆栽法,在正常水分和干旱胁迫下分别接种或不接种AM真菌... 详细信息

为探究干旱胁迫下丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizal,AM)真菌对茶树生长及生理的作用机理,以福鼎大白茶(Camellia sinensis cv.‘Fuding Dabaicha’)茶树实生苗为试验材料,采用温室盆栽法,在正常水分和干旱胁迫下分别接种或不接种AM真菌幼套近明球囊霉(Claroideoglomus etunicatum),探究AM真菌在不同干旱胁迫时长(4周、6周、8周)下对茶树实生苗生长、光合、渗透调节及气孔开度等的生理响应。结果显示,在两种不同的水分条件下,接种AM真菌处理均显著促进了茶树生长,增加了地上部和地下部生物量,改善了根系构型,与不接种AM真菌相比,茶树根系总长度、二级侧根和三级侧根的数量、叶片渗透势分别增加了20.00%~38.77%、48.90%~163.33%、60.00%~442.86%、29.77%~41.24%,降低了干旱胁迫下茶树叶片气孔密度和相对电导率,与不接种AM真菌相比分别降低了16.00%~42.37%、2.21%~6.67%,且在干旱胁迫下的效果更为显著。干旱胁迫显著抑制了AM真菌对茶树根系的侵染和茶树的生长,表现为抑制了茶树根系构型的建立,降低了叶片叶绿素含量、最大光量子效应(QY_max)、叶片相对含水量(RWC)、气孔开度及渗透势等。接种AM真菌能显著缓解这种抑制效应,改善茶树对干旱胁迫的生理响应,从而促进茶树生长。研究表明,AM真菌可通过优化茶苗根系构型,提高茶苗叶片的保水和光合能力,调节气孔及渗透平衡,从而促进植株对水分和养分的吸收,缓解干旱对茶树的损伤,提高茶树实生苗的抗旱能力,且随着干旱时间的延长AM真菌的促进效果更为显著。

关键词：茶树生长生理特性丛枝菌根真菌干旱胁迫

干旱胁迫下AMF对茶树光合特性及其基因表达的影响

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园艺学报 2024年第10期51卷 2358-2370页

作者：陈鑫邬晓龙刘升锐胡贤春刘春艳长江大学园艺园林学院湖北荆州434025 安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室合肥230036

为探究干旱胁迫下丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)对茶树(Camellia sinensis)光合特性的影响,于温室盆栽条件下,对‘福鼎大白茶’实生苗进行水分和接种AMF试验。结果显示,干旱胁迫(田间最大持水量的55%)显著抑制了AMF... 详细信息

为探究干旱胁迫下丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)对茶树(Camellia sinensis)光合特性的影响,于温室盆栽条件下,对‘福鼎大白茶’实生苗进行水分和接种AMF试验。结果显示,干旱胁迫(田间最大持水量的55%)显著抑制了AMF对茶树根系的侵染,降低了叶片中叶绿素b含量、最大光量子效应(QY_max)值、胞间CO_(2)浓度(Ci)、气孔纵径和横径以及气孔开度,碳同化相关酶基因CsRbcL、CsTK、CsFBPase、CsPRK以及叶绿素合成酶基因CsHEME的表达下调;提高了叶绿素a/b、非光化学猝灭(NPQ_lss)参数,叶绿素合成酶CsHEMA1表达上调。正常供水(田间最大持水量的75%)和干旱胁迫条件下接种AMF,显著提高了叶绿素a和总叶绿素的含量、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、Ci、蒸腾速率(Tr),降低了NPQ_lss及气孔密度,不同程度地诱导了两种水分条件下碳同化相关酶基因CsRbcL、CsTK、CsFBPase、CsPRK以及叶绿素合成相关酶基因CsHEMA1、CsHEMC、CsHEME、CsHEMG和CsCHLE的表达。与此同时,接种AMF还显著增加了干旱胁迫下叶绿素b的含量、QY_max、气孔纵经、横径和气孔开度以及正常供水下叶绿素a/b。研究表明,接种AMF可促进茶树的光合作用,提高茶树对干旱的适应性,且在干旱胁迫下效果显著。

关键词：茶树丛枝菌根真菌干旱胁迫气孔光合特性

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李飞:冰雪中他与死神赛跑

当代贵州 2008年第10期 52-53页

作者：胡贤春丹寨县排调镇人民政府

冰雪中,李飞不抛弃、不放弃,从死神手中挽救了两条鲜活的生命……2月1日,黔东南自治州丹寨县排调镇仍然被罕见的雪凝灾害包围着。下午5点,一位神色慌张、上气不接下气的中年男子,一头撞进镇妇幼保健站的医生办公室,结结巴巴地说：“出,... 详细信息

冰雪中,李飞不抛弃、不放弃,从死神手中挽救了两条鲜活的生命……2月1日,黔东南自治州丹寨县排调镇仍然被罕见的雪凝灾害包围着。下午5点,一位神色慌张、上气不接下气的中年男子,一头撞进镇妇幼保健站的医生办公室,结结巴巴地说：“出,出事了。”等这位男子缓过气来大家才明白：由于冰冻路滑,该镇长娃村27岁的孕妇杨光姣只能在家待产,两天前出现的阵痛让她痛不欲生,急需救助。

关键词：冰雪李飞赛跑妇幼保健丹寨县自治州黔东南办公室

后发酵茶中短短芽孢杆菌产酶能力及其在茶叶渥堆过程酶活性分析

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食品安全质量检测学报 2023年第17期14卷 78-86页

作者：潘雪莉罗燕胡贤春赵振军长江大学园艺园林学院荆州434025

目的全面了解源自后发酵茶中短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis,***)的产酶特性,揭示其对后发酵茶品质形成的作用。方法对短短芽孢杆菌进行全基因组测序和关键酶预测,结合预测结果对短短芽孢杆菌进行纯培养、接种茶叶渥堆,分析其纯培... 详细信息

目的全面了解源自后发酵茶中短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis,***)的产酶特性,揭示其对后发酵茶品质形成的作用。方法对短短芽孢杆菌进行全基因组测序和关键酶预测,结合预测结果对短短芽孢杆菌进行纯培养、接种茶叶渥堆,分析其纯培养和参与茶叶渥堆过程的产酶能力、酶活性及渥堆茶叶主要品质成分的动态变化。结果测序结果表明短短芽孢杆菌糖苷水解酶、糖基转移酶得到注释基因最多,分别占比39.22%和33.33%。在短短芽孢杆菌的纯培养和参与茶叶渥堆过程中,短短芽孢杆菌具有产生蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、过氧化物酶和多酚氧化酶的能力,其中蛋白酶、淀粉酶和果胶酶活性较强,纯培养条件下蛋白酶酶活力最高可达到550.91 U/mL;相较于液体纯培养,在茶叶基质上培养有助于短短芽孢杆菌纤维素酶酶活力的提高,增幅达到691.02%;在短短芽孢杆菌参与的茶叶渥堆过程中,茶多酚、儿茶素、氨基酸和黄酮呈现下降趋势,茶多酚最大降幅为80.61%,咖啡碱检测含量显著增加,增幅最大为56.15%;相关性分析结果表明,渥堆过程短短芽孢杆菌产生的纤维素酶等与茶叶品质成分的变化表现出显著的正相关。结论短短芽孢杆菌在后发酵茶渥堆过程可以分泌多种胞外酶,通过酶促作用影响后发酵茶理化成分的改变。

关键词：短短芽孢杆菌后发酵茶基因组测序酶活性理化成分

基于SWOT分析的恩施州茶产业发展战略探讨

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茶叶通讯 2011年第3期38卷 26-28,31页

作者：周开相胡贤春费永俊长江大学园艺园林学院荆州424023

湖北恩施州是中国现存为数不多的蒸青绿茶——恩施玉露的原产地和核心产区,更是历史名茶宜红的重要产区,为了进一步加快其发展,通过查阅大量的资料、实地走访、结合营销理论,运用战略分析模式SWOT法,对恩施州的茶产业发展进行研究分析;... 详细信息

湖北恩施州是中国现存为数不多的蒸青绿茶——恩施玉露的原产地和核心产区,更是历史名茶宜红的重要产区,为了进一步加快其发展,通过查阅大量的资料、实地走访、结合营销理论,运用战略分析模式SWOT法,对恩施州的茶产业发展进行研究分析;提出了产业规模化,打造品牌;政策开放化,联合作战;技术先进化,加快改良;文化深入化,加强竞争;销售多元化,提高收益等发展战略建议。

关键词：恩施茶叶 SWOT 分析发展战略

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大宗茶类氟含量的测定与比较

长江大学学报（自科版）（中旬） 2012年第12期9卷 3-5页

作者：赵振军胡贤春长江大学园艺园林学院湖北荆州484025

以大宗茶叶为研究对象，采用氟离子选择电极法测定茶叶中的氟元素含量。结果表明：大宗茶的氟含量均符合国家标准，茶叶等级不同，氟含量也不同，优质茶叶的氟含量比低质茶叶低；不同茶类氟含量不同，青茶〉黑茶〉红茶〉绿茶。

关键词：大宗茶氟含量安全性