检索结果-南通市图书馆

作者：胡菜扬州大学

学位级别：硕士

我国是世界上鸡遗传资源最丰富的国家,目前家禽养殖几乎实现集约化生产,在集约化生产过程中,受精率低等问题严重限制了生产效益,而影响受精率最直接的原因就是精液的数量和质量,精液的质量和数量取决于精原干细胞（Spermatogonia Stem C... 详细信息

我国是世界上鸡遗传资源最丰富的国家,目前家禽养殖几乎实现集约化生产,在集约化生产过程中,受精率低等问题严重限制了生产效益,而影响受精率最直接的原因就是精液的数量和质量,精液的质量和数量取决于精原干细胞（Spermatogonia Stem Cells,SSCs）的数量和质量。SSCs是位于睾丸中最原始的干细胞,是精子发生的起始细胞,其自我更新分化是精子发生的前提,精子发生的中断,无论是生理性的,还是由于病理性损伤,都可以由SSCs调节或恢复,因此解析SSCs形成的调控机制具有重要的理论和实践意义。SSCs的形成是一个受到多种因素调节的复杂的调控网络,目前有研究表明细胞能量代谢模式改变可促进细胞类型的转换,该过程产生的代谢产物可影响表观遗传修饰而调控基因表达。MicroRNAs（miRNAs）是一类大小为22 nt的RNA,越来越多的miRNAs已被发现在生殖细胞的发生、增殖和分化中发挥重要的调控作用。近年来,细胞代谢产物调节miRNA从而调控细胞的增殖分化等研究被大量报道。因此,研究细胞能量代谢调节miRNAs而影响SSCs的发生机制,可为从代谢角度入手诠释SSCs生成机制提供新的策略。本研究通过前期的代谢组学测序分析,筛选出在SSCs形成过程的关键代谢产物Vitamin B6并验证其在SSCs形成过程中的功能。基于RNA-seq数据分析,筛选出SSCs形成过程的关键的miRNA（miR-1458）并验证其在SSCs形成过程中的功能,进一步发现Vitamin B6能够调节miR-1458。本研究旨在探究Vitamin B6和miR-1458在SSCs形成过程中的调控关系,解析Vitamin B6参与调控miR-1458的表达而影响SSCs形成的机制,具体研究结果如下:（1）代谢产物Vitamin B6的筛选及其在SSCs形成过程的功能:基于代谢组学数据,分析并筛选在ESCs和SSCs上差异表达的关键代谢产物Vitamin B6,并检测其在ESCs和SSCs细胞中的浓度,结果显示Vitamin B6在ESCs中的浓度极显著高于SSCs（P＜0.01）;采用CCK8检测不同浓度下细胞的吸光值、EdU检测不同浓度下细胞的增殖情况以及线粒体膜电位检测不同浓度下细胞凋亡情况,得出Vitamin B6添加的最适浓度为20 μM;为了验证Vitamin B6在SSCs形成过程的功能,在RA诱导的第0d添加Vitamin B6,通过细胞形态学观察发现添加Vitamin B6后类胚体形成数量变少并且在诱导第10 d没有出现类精原干细胞,qRT-PCR结果显示Vitamin B6抑制生殖标记基因Cvh和integrinβ1的表达,间接免疫荧光和流式细胞分析结果显示Vitamin B6能够抑制SSCs标记蛋白integrin β1的表达,从而抑制SSCs的形成效率。以上结果表明Vitamin B6能够抑制SSCs的形成。（2）miR-1458的筛选及其在SSCs形成过程中的功能:基于前期的RNA-seq数据,分析并筛选出在ESCs和SSCs上差异表达的miR-1458,qRT-PCR结果显示miR-1458在ESCs的表达量极显著高于SSCs（P＜0.01）。为了进一步验证miR-1458在SSCs形成过程的功能,在RA诱导第0 d转染miR-1458 mimics和inhibitor慢病毒,在诱导过程中通过细胞形态学、qRT-PCR检测生殖标记基因的表达、间接免疫荧光和流式细胞分析结果显示miR-1458体外抑制ESCs诱导分化为SSCs;体内通过注射miR-1458 mimics和miR-1458 inhibitor慢病毒,18.5 d睾丸免疫组化检测结果显示miR-1458在体内能够抑制SSCs的形成。（3）探究Vitamin B6和miR-1458的关系及作用机制:为了探究Vitamin B6与miR-1458的关系,在ESCs中添加Vitamin B6,qRT-PCR结果显示Vitamin B6能够极显著上调miR-1458的表达量（P＜0.01）。为了明确Vitamin B6如何调控miR-1458的表达,构建miR-1458启动子区的双荧光素酶报告载体,双荧光素酶活性检测结果显示Vitamin B6极显著上调miR-1458的转录水平（P＜0.01）,同时WB检测发现Vitamin B6能够改变组蛋白H3K4me2表达水平。ChIP-qPCR检测发现RA诱导SSCs形成过程中miR-1458启动子区的组蛋白H3K4me2富集水平极显著下调（P＜0.01）,而Vitamin B6能够极显著提高miR-1458启动子区组蛋白H3K4me2的富集水平。进一步双荧光素酶报告检测发现干扰组蛋白H3K4me2甲基化酶LMLL2极显著下调miR-1458启动活性（P＜0.01）;干扰组蛋白H3K4me2去甲基化酶LSD1则极显著提高miR-1

关键词：精原干细胞 Vitamin B6 miR-1458 组蛋白H3K4me2 TBX6

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鸡MAPK8生物信息学分析及慢病毒干扰载体效率检测

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中国家禽 2022年第3期44卷 17-22页

作者：胡菜王颖洁靳锴吴宇慧赵宗仪李熠张亚妮扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009 温州肯恩大学理工学院浙江温州325000

研究旨在对鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESC)向鸡精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSC)分化过程中显著差异基因——丝裂原活化蛋白激酶8(Mitogen-activated protein kinase 8,MAPK8)进行生物信息学分析,验证MAPK8慢病毒干扰载体活性及干扰效率,为后期验证MAPK8在ESC向SSC分化过程中的调控方式以及功能研究奠定基础。试验采用RNA-seq和qRT-PCR分析和检测鸡ESC、PGC和SSC的差异表达基因;利用生物信息学在线预测软件对其进行理化性质及结构特征分析;比较鸡MAPK8基因序列与其它物种的同源性并进行组织表达谱检测;验证MAPK8慢病毒干扰载体的活性与干扰效率。结果显示:MAPK8在SSC上特异高表达;生物信息学分析显示鸡MAPK8是一种亲水性的无信号脂溶性蛋白,存在2个N-糖基化位点、13个O-糖基化位点和45个磷酸化位点,与其它物种高度同源(序列一致性达到80%),保守性较高;表达谱分析发现其在性腺中高表达;MAPK8慢病毒干扰载体能够稳定表达EGFP荧光蛋白且shRNA-1干扰效率最佳。该结果为深入探究MAPK8在鸡ESC向SSC分化过程中的功能奠定了基础。

关键词：鸡 MAPK8 生物信息学分析慢病毒干扰载体

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鸡gga-miR-31-5p启动子真核表达载体的构建及其转录因子结合位点预测

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浙江农业学报 2022年第4期34卷 713-719页

作者：邓哲宇王乙婷王颖洁胡菜吴宇慧赵宗仪左其生张亚妮扬州大学动物科学技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

为确定鸡gga-miR-31-5p启动子基本活性区域,并分析调控其转录的重要转录因子,初步探究影响鸡gga-miR-31-5p的表达调控机制,采用PCR法扩增鸡gga-miR-31-5p启动子,插入到pEGFP-N1载体,构建重组载体。利用菌液PCR及测序鉴定阳性重组质粒。... 详细信息

为确定鸡gga-miR-31-5p启动子基本活性区域,并分析调控其转录的重要转录因子,初步探究影响鸡gga-miR-31-5p的表达调控机制,采用PCR法扩增鸡gga-miR-31-5p启动子,插入到pEGFP-N1载体,构建重组载体。利用菌液PCR及测序鉴定阳性重组质粒。将重组载体转染DF-1细胞系,观察其启动活性。利用在线预测网站预测gga-miR-31-5p启动子区域的转录因子结合位点。结果显示,成功克隆出gga-miR-31-5p启动子片段,并成功构建其pEGFP重组载体。体外转染结果表明,该区域具有启动活性,并发现鸡gga-miR-31-5p启动子区域存在RARα、ER、c-Jun、GR等重要转录因子结合位点。研究初步确定了鸡gga-miR-31-5p启动子区域,同时发现该区域存在重要转录因子结合位点,该结果为后续探讨进一步研究gga-miR-31-5p启动子的生物学功能奠定基础。

关键词：鸡 gga-miR-31-5p 启动子转录因子

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如皋黄鸡miR-1458与TBX6靶向关系验证

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中国家禽 2023年第8期45卷 31-37页

作者：耿晴晴程富富胡菜武嵘峰吴宇慧赵宗仪赵梓多张亚妮扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室江苏扬州225009

研究旨在探究miR-1458与TBX6的靶向调控关系。试验基于前期建立视黄酸(Retinoic acid,RA)体外诱导胚胎干细胞(ESCs)向精原干细胞(SSCs)的分化模型,通过RNA-seq测序结果发现ESCs向SSCs分化过程中差异表达的miR-1458,采用miRNA定量检测miR... 详细信息

研究旨在探究miR-1458与TBX6的靶向调控关系。试验基于前期建立视黄酸(Retinoic acid,RA)体外诱导胚胎干细胞(ESCs)向精原干细胞(SSCs)的分化模型,通过RNA-seq测序结果发现ESCs向SSCs分化过程中差异表达的miR-1458,采用miRNA定量检测miR-1458在ESCs/SSCs中的表达量,miR-1458靶基因富集通路分析筛选出富集通路,分析其与生殖细胞发育的相关性。基于前期联合分析RA诱导ESCs的mRNA-seq数据中|log2(fold change)|>8筛选出的与miR-1458互作的差异性mRNA,依据靶基因预测软件数据库在线预测该基因与miR-1458是否存在结合位点,利用qRT-PCR验证两者的关系,同时利用同源重组法将靶基因的3′UTR及点突变序列插入pMIR-REPORT^(TM)双荧光素酶报告载体中,共转染DF-1细胞,通过双荧光素酶报告载体确定miR-1458与TBX6的靶向调控关系。结果显示:ESCs向SSCs分化过程中差异表达miR-1458,miR-1458在生殖细胞分化过程中发挥重要作用;miR-1458与TBX63′UTR存在结合位点;miR-1458和TBX6分别在ESCs和SSCs中呈现此消彼长的表达趋势;miR-1458能够抑制TBX6的表达;miR-1458可靶向TBX63′UTR区调节TBX6的表达。研究表明miR-1458在鸡的ESCs和SSCs中呈现差异性高表达,并且miR-1458能够直接靶向调控TBX63′UTR区从而调节TBX6的表达,为后续研究miR-1458在SSCs形成过程中的机制探究奠定基础。

关键词：如皋黄鸡 miR-1458 TBX6 SSCs 双荧光素酶报告检测

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鸡LncBMP4编码小肽EPC5的生物信息学分析和多克隆抗体制备

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农业生物技术学报 2023年第3期31卷 650-658页

作者：夏钱龚威金晶张晨高晓敏陈晨周舒简胡菜张玉李碧春左其生扬州大学动物科学与技术学院

鸡(Gallus gallus)原始生殖细胞(primordial germ cells, PGCs)在转基因动物制备和种质资源保护领域具有广泛应用前景，为了解析鸡PGCs形成的分子机制，本研究前期鉴定了1个调节鸡PGCs形成的关键长链非编码RNA-骨形成蛋白(long noncodin... 详细信息

鸡(Gallus gallus)原始生殖细胞(primordial germ cells, PGCs)在转基因动物制备和种质资源保护领域具有广泛应用前景，为了解析鸡PGCs形成的分子机制，本研究前期鉴定了1个调节鸡PGCs形成的关键长链非编码RNA-骨形成蛋白(long noncoding RNA-bone morphogenetic protein 4, Lnc BMP4)，可编码小肽EPC5 (expression in primordial germ cells chromosome 5)。本研究通过在线预测软件初步分析EPC5小肽的化学结构并进行初步的亚细胞定位。通过化学合成法构建PET-EPC5-His-B2M原核融合表达载体并转化大肠杆菌(Escherichia coli) BL2感受态细胞，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-Dthiogalactopyranoside, IPTG)诱导后大量表达和纯化EPC5抗原。利用纯化的抗原进行动物免疫并收集抗血清(G1480, G1481)，通过ELISA检测抗血清效价。纯化抗体并通过Western blot进行鉴定。结果表明，EPC5主要定位于细胞内并具有RNA聚合酶亚基。成功构建PET-EPC5-His-B2M载体，且诱导表达后重组蛋白大小约为25 k D。ELISA检测发现G1480抗血清效价为1∶5.12×105(OD抗血清/OD免前血≥2.1),G1481抗血清效价为1∶1.024×106(OD抗血清/OD免前血≥2.1)。对G1480抗血清进行纯化，产生的EPC5多克隆抗体浓度为10 mg/m L,ELISA检测显示效价为9.8 ng/m L时(OD450>0.2)。Western blot检测结果显示制备的多克隆抗体可以特异性结合体内外表达的EPC5蛋白。本研究成功地制备EPC5多克隆抗体，为进一步研究EPC5在PGCs形成过程中的功能和机制提供了基础。

关键词：鸡多克隆抗体 LncRNA 原始生殖细胞(PGCs)

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鸡TBX6过表达和干扰载体构建及干扰载体效率检测

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中国家禽 2023年第10期45卷 12-18页

作者：武嵘峰陈欣雨胡菜耿晴晴程富富席一凡左其生张亚妮扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009

研究旨在构建TBX6的过表达和干扰载体,为后续研究TXB6在精原干细胞(Sper⁃matogonial stem cells,SSCs)形成过程中的功能奠定基础。通过qRT-PCR检测TBX6在胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)和SSCs的表达水平,根据NCBI上提供的TBX6 CDS区的序列,设计引物扩增目的片段,将其连接到经线性化的慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copG⁃FP-T2A-Puro上,构建TBX6的过表达载体;同时,根据TBX6 CDS区设计三个干扰靶点,在退火后将其连接到经线性化的干扰载体pLVX-shRNA2-puro上,并且进一步将三个干扰载体转染鸡成纤维细胞系(DF-1),观察荧光表达情况并通过qRT-PCR检测其干扰效率。结果显示,TBX6在SSCs上的表达量显著高于ESCs(P<0.05),测序和双酶切验证显示成功构建TBX6过表达及干扰载体;干扰载体转染DF-1细胞后均能稳定表达EGFP荧光蛋白,且shRNA2-TBX6的干扰效果最好。结果表明,TBX6过表达及干扰载体构建成功,且经定量检测后确定shRNA2-TBX6的干扰效果最好。

关键词： TBX6 过表达载体干扰载体

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STAT1和组蛋白乙酰化修饰调控鸡lncRNA-BMP4转录研究

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中国畜牧兽医 2022年第9期49卷 3321-3332页

作者：高晓敏周舒简陈晨金晶胡菜张晨左其生张亚妮陈国宏李碧春扬州大学动物科学与技术学院中国教育部国际农业与农产品安全研究联合实验室扬州225009 江苏科技大学生物技术学院镇江212003

【目的】探讨影响鸡长链非编码RNA(long chain noncoding RNA,lncRNA)-骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)启动子转录的因素,并对调控lncRNA-BMP4特异表达的分子机制进行研究。【方法】以鸡肌肉基因组为模板,PCR扩增... 详细信息

【目的】探讨影响鸡长链非编码RNA(long chain noncoding RNA,lncRNA)-骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)启动子转录的因素,并对调控lncRNA-BMP4特异表达的分子机制进行研究。【方法】以鸡肌肉基因组为模板,PCR扩增并克隆鸡lncRNA-BMP4的启动子区,构建lncRNA-BMP4-EFGP载体,对lncRNA-BMP4启动活性进行定性分析;通过染色体5′-末端缺失的方法和双荧光素酶系统检测筛选lncRNA-BMP4启动子核心区域。通过在线工具预测分析调控核心区域的潜在转录因子;利用点突变和双荧光素酶系统筛查真正影响lncRNA-BMP4的转录因子;通过表观修饰验证DNA甲基化、组蛋白乙酰化对lncRNA-BMP4的转录调控作用。【结果】试验成功扩增lncRNA-BMP4启动子片段1288 bp,与pEGFP-N1载体连接后转染鸡成纤维细胞系(DF-1)具有荧光表达,说明lncRNA-BMP4启动子有启动活性。染色体5′-末端缺失和双荧光素酶系统检测发现,核心启动子区域为―832~―651 bp,Jaspar数据库分析筛选到核心区域的转录因子有SOX17、CREB1及STAT1。双荧光素酶系统检测发现,STAT1可促进lncRNA-BMP4核心启动区域的活性;DNA甲基化抑制剂5′-Azacd对lncRNA-BMP4的转录活性未有任何影响,而组蛋白乙酰化抑制剂TSA可极显著提高其转录活性(P<0.01)。【结论】提示lncRNA-BMP4的转录活性受STAT1和组蛋白乙酰化的正调控,而DNA甲基化不影响其转录。研究结果为详细解析lncRNA-BMP4的功能和分子机制提供了理论依据。

关键词：鸡 lncRNA 启动子 STAT1 表观遗传修饰

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miR-302d的载体构建及其与Tle4基因的靶向关系验证

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中国家禽 2023年第2期45卷 20-26页

作者：吴宇慧席一凡张文慧程富富胡菜赵宗仪陈欣雨李熠张亚妮扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 温州肯恩大学计算机科学与技术学院浙江温州325035

试验旨在探究精原干细胞(SSCs)形成过程中的关键miR-302d行使功能的分子机制。试验克隆mi R-302d前体序列并连入PGMLV-CMV-MCS-EF1-Zs Green1-T2A-Puro构建mi R-302d过表达载体(mi R-302d mimics);合成mi R-302d的干扰靶点并连入PGMLV-SC5载体构建mi R-302d干扰载体(mi R-302d inhibitor)。通过生物信息预测获得mi R-302d靶基因并构建其3′UTR的野生型(WT)和突变型载体(MT);将mi R-302d过表达载体分别与WT和MT载体共转染DF-1和293T细胞,检测靶基因3′UTR的活性。同时检测在DF-1细胞中过表达或干扰mi R-302d后靶基因的表达变化。结果显示:成功构建mi R-302d的过表达和干扰载体;预测结果显示Tle4为mi R-302d的潜在靶基因,且该基因为ESCs分化为SSCs过程的重要基因;双荧光素酶活性检测结果显示不论是在DF-1还是293T细胞中,与转染WT+mi R-NC组相比,转染WT+mi R-302d组的双荧光素酶活性显著下降(P0.05),且过表达mi R-302d后下调Tle4的表达,而干扰mi R-302d后上调Tle4的表达。结果表明,miR-302d可直接调节靶基因Tle4的表达。

关键词： miR-302d Tle4 双荧光素酶报告检测

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Hsd3β2基因RNA干扰载体构建及对鸡ESCs向PGCs分化的调控

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农业生物技术学报 2018年第9期26卷 1567-1576页

作者：张晨王曼金晶何娜娜李婷婷孙新宇胡菜周舒简孙长花左其生张亚妮李碧春扬州大学农业科技发展研究院/教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室/动物科学与技术学院

原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)作为配子的原始祖细胞,参与胚胎生殖细胞的发育过程。类固醇激素通路中3β羟基类固醇脱氢酶2(3β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,Hsd3β2)能促进细胞分化,但其对原始生殖细胞的形成具体调控... 详细信息

原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)作为配子的原始祖细胞,参与胚胎生殖细胞的发育过程。类固醇激素通路中3β羟基类固醇脱氢酶2(3β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,Hsd3β2)能促进细胞分化,但其对原始生殖细胞的形成具体调控机制还不得而知。本研究旨在通过构建类固醇激素合成过程中关键基因Hsd3β2的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰载体并研究其对鸡(Gallus gallus)胚胎干细胞分化为原始生殖细胞的影响。通过慢病毒包装Hsd3β2感染鸡胚胎干细胞并进行RNA干扰(RNA interference,RNAi)诱导,分别于2、4、6 d观察细胞形态变化并收集细胞样品,q RT-PCR检测Hsd3β2、生殖标记基因鸡Vasa基因同系物(chicken vasa homologue,Cvh)、鸡KIT原癌基因受体酪氨酸激酶(chicken KIT proto-oncogene receptor tyrosine kinase,C-kit)及甾类激素合成信号通路下游基因细胞色素P450亚酶(cytochrome P450 subenzyme,Cyp1a1)、葡萄糖醛酸转移酶1A1(UDP glucuronosyltransferase family 1member A1,Ugt1a1)和17β羟基类固醇脱氢酶7(17beta-hydroxysteroid dehydrogenase7,Hsd17b7)表达;流式细胞检测诱导产生类胚体阳性率;在鸡胚孵化过程中鸡胚注射慢病毒干扰载体,孵化4.5 d后收集生殖嵴,q RT-PCR检测Cvh、C-kit及下游基因Cyp1a1、Ugt1a1和Hsd17b7表达;流式细胞分析原始生殖细胞生成效率。本实验成功构建sh-Hsd3β2慢病毒载体,挽救实验表明过表达Hsd3β2能使sh RNA引起的基因表达下降回升;在体外诱导过程和鸡胚孵化过程中,q RT-PCR结果表明干扰Hsd3β2后,甾类激素合成信号通路中的下游基因的表达显著下调(P<0.01);在RA诱导实验过程中,随诱导时间推进,类胚体数量逐渐增加。Hsd3β2抑制后,类胚体形成数量减少。Cvh、C-kit在诱导过程中上调表达,但Hsd3β2干扰后,其表达显著降低(P<0.01),流式细胞分析表明干扰Hsd3β2后,诱导4d后产生类胚体阳性细胞(3.27±0.19)%显著低于对照组(7.39±0.09)%;体内实验结果表明干扰Hsd3β2后,Cvh、C-kit表达显著降低(P<0.01),生殖细胞数量显著减少。本研究结果表明Hsd3β2能通过甾类激素合成信号通路促进原始生殖细胞的形成,为研究该通路对原始生殖细胞形成具体机制提供理论基础。

关键词：鸡胚胎干细胞 3β羟基类固醇脱氢酶2基因(Hsd3β2) 甾类激素合成信号通路分化

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地震频段部分饱和条件下软孔隙流体饱和度对岩石弹性模量频散衰减的影响

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地球物理学进展 2024年

作者：赵立明陆菜平刘洋中国矿业大学矿业工程学院

本文构建软孔隙不同饱和度微-介观双尺度流体流动模型用以揭示地震频段岩石部分饱和时微-介观双尺度流体流动对弹性模量频散和衰减的影响. 这一模型经由Betti-Rayleigh互易定理推导软孔隙不同饱和度时频变湿骨架模量，然后将频变湿骨架... 详细信息

本文构建软孔隙不同饱和度微-介观双尺度流体流动模型用以揭示地震频段岩石部分饱和时微-介观双尺度流体流动对弹性模量频散和衰减的影响. 这一模型经由Betti-Rayleigh互易定理推导软孔隙不同饱和度时频变湿骨架模量，然后将频变湿骨架模量带入White球状斑块饱和模型获得. 模型数值计算显示：(1)岩石饱和度一定时，随着软孔隙饱和度增加，岩石弹性模量频散和衰减随之增加；当软孔隙完全饱和时，弹性模量频散和衰减达到最大；另一方面，衰减出现两个衰减峰：较低频段衰减峰与介观流有关，较高频段衰减峰与微观流有关. (2)当介观流、微观流特征频率差异较大时，软孔隙不同饱和度对介观流作用较小，而对微观流作用较大，当软孔隙完全饱和时，对微观流作用达到最大；当介观流、微观流特征频率相近时，软孔隙饱和度对介观流作用增加，且随着饱和度增加而作用增强. (3)新建模型与Li et al. (2018)微-介观双尺度模型对比可知，Li et al. (2018)模型可以有效预测部分饱和岩石高频弹性模量变化，但在地震、声波频段可能失效；对此模型进行改进后，其可以有效预测部分饱和岩石不同频段弹性模量变化. 最后，本文运用新建模型合理解释部分饱和砂岩地震频段范围衰减数据，验证了新建模型的有效性，并且表明：当岩石处于部分饱和状态时，软孔隙部分饱和更符合实际情况.

关键词：部分饱和微-介观流体流动喷射流斑块饱和 Betti-Rayleigh互易定理地震频段

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