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串联抗菌肽Cecropin B基因在莱茵衣藻中的表达及其抗菌活性分析(英文)

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生物化学与生物物理进展 2012年第4期39卷 344-351页

作者：穆菲芸李辉胡章立深圳大学生命科学学院海洋生物资源与生态环境重点实验室深圳518060

为了应对各种抗生素在水产养殖业所带来的副作用,我们在本文中尝试利用微藻对一种抗菌肽进行表达的可行性研究.根据莱茵衣藻核基因组偏爱密码子对抗菌肽Cecropin B基因进行改造,并将4个经改造的Cecropin B基因依次串联起来,中间加上莱... 详细信息

为了应对各种抗生素在水产养殖业所带来的副作用,我们在本文中尝试利用微藻对一种抗菌肽进行表达的可行性研究.根据莱茵衣藻核基因组偏爱密码子对抗菌肽Cecropin B基因进行改造,并将4个经改造的Cecropin B基因依次串联起来,中间加上莱茵衣藻的自剪切连接肽序列LWMRFA,人工合成总长度为522 bp的串联Cecropin B基因.将串联Cecropin B基因克隆到含hsp70-RBCS2启动子和RBCS2终止子的pH105载体上,再与携带ble筛选基因的表达框架连接,构建重组表达载体pCB124.采用玻璃珠转化法将载体pCB124导入莱茵衣藻cc-849中,筛选得到能表达抗菌肽Cecropin B的转基因衣藻.经过6个月的保持培养后,进一步对转基因藻细胞提取液进行抗菌活性分析,发现转基因藻具有明显的抑制革兰氏阴性菌(大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和溶壁微球菌)生长的特征.这一结果为具有抗菌活性的饵料藻的生产和应用提供了新的途径.

关键词：抗菌肽莱茵衣藻饵料藻串联Cecropin B

利用固定化藻菌耦合系统同步去除污水中的COD和氮磷

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环境科学 2011年第8期32卷 2311-2316页

作者：邓旭魏斌胡章立深圳大学生命科学学院深圳518060

利用活性污泥和莱茵衣藻建立了一套固定化藻菌耦合系统同步去除污水中的COD和氮磷.系统污水日处理量为6 m3,水力停留时间为12 h.对于活性污泥部分,当厌氧槽搅拌转速为15 ***-1,好氧槽DO值为5 mg.L-1时COD由150 mg.L-1左右降到50 mg.L-1... 详细信息

利用活性污泥和莱茵衣藻建立了一套固定化藻菌耦合系统同步去除污水中的COD和氮磷.系统污水日处理量为6 m3,水力停留时间为12 h.对于活性污泥部分,当厌氧槽搅拌转速为15 ***-1,好氧槽DO值为5 mg.L-1时COD由150 mg.L-1左右降到50 mg.L-1,氨氮从20～30 mg.L-1降到0.5 mg.L-1以下,但总磷只能从2～3 mg.L-1降到1.0 mg.L-1左右.对于固定化藻细胞流化床,最佳操作条件为DO浓度5 mg.L-1,光照度2 000 lx,固定化藻球填充率20%.连续化处理系统最终出水COD降到15 mg.L-1左右,氨氮0.5 mg.L-1以下,总磷0.5 mg.L-1左右.在2个月的连续运行期间,出水水质始终保持稳定,表明该连续化污水处理系统具有良好的操作稳定性.

关键词：耦合处理系统氨氮磷污水处理固定化藻菌

回转器模拟微重力刺激对不同品系稻田鱼腥藻代谢特性的影响

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微生物学报 2001年第4期41卷 489-493页

作者：胡章立刘永定涂欢深圳大学生物工程系深圳518060 中国科学院水生生物研究所武汉430072 深圳市科技局

以稻田鱼腥藻空间搭载克隆株 (AoSR1 6)、回复再搭载克隆株 (AoSR1 6 1 7)和原始出发株 (AnabeanaoryzaHB2 3)为材料 ,通过回转器模拟微重力刺激实验 ,对不同品系稻田鱼腥藻的微重力生物学效应进行了分析。结果发现 ,模拟微重力刺激对... 详细信息

以稻田鱼腥藻空间搭载克隆株 (AoSR1 6)、回复再搭载克隆株 (AoSR1 6 1 7)和原始出发株 (AnabeanaoryzaHB2 3)为材料 ,通过回转器模拟微重力刺激实验 ,对不同品系稻田鱼腥藻的微重力生物学效应进行了分析。结果发现 ,模拟微重力刺激对稻田鱼腥藻不同品系均表现出一定的生长刺激效应 ,尤为空间飞行后的克隆株更为明显。比较三个品系在微重力刺激下的光合与呼吸活性 ,原始出发株的光合与呼吸活性明显高于空间搭载株。在回转器培养情况下 ,具有高固氮酶活性的克隆株 (AoSR1 6和AoSR1 6 1 7)所固定的氮 ,除了用于藻细胞正常的生命活动外 ,主要用于其生长增强效应 ,而藻胆蛋白累积量和氨分泌量较之对照培养时要少得多。对回转器培养后的稻田鱼腥藻进行单克隆分离 ,结果没有出现类似于空间搭载实验的性状分离现象。

关键词：微重力稻田鱼腥藻回转器固氮酶活性

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藻类空间生物学效应机制研究

空间科学学报 1997年第S1期17卷 24-34页

作者：胡章立刘永定中国科学院水生生物研究所武汉430072

本文拟从直接导致藻类产生生物学效应的空间环境因素（如微重力和空间辐射等）入手，对近年来有关藻类感受、传导及响应空间环境因素的途径及分子机制的研究结果，进行初步介绍．

关键词：藻类微重力空间辐射分子机制

稻田鱼腥藻空间搭载与回复搭载克隆株间代谢特性的比较研究

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空间科学学报 1997年第S1期17卷 56-61页

作者：胡章立刘永定中国科学院水生生物研究所武汉430072

本文对具有高固氮酶活性空间返地单克隆株（AoSR16）、回复搭载返地克隆株（AoSR16—17）与原始出发株间的代谢特性进行了比较分析．结果表明，三者在生长特性、光合和呼吸活性、固氮酶活性，藻胆蛋白累积与氨分泌等方面均表现出不同程... 详细信息

本文对具有高固氮酶活性空间返地单克隆株（AoSR16）、回复搭载返地克隆株（AoSR16—17）与原始出发株间的代谢特性进行了比较分析．结果表明，三者在生长特性、光合和呼吸活性、固氮酶活性，藻胆蛋白累积与氨分泌等方面均表现出不同程度的差异．空间环境导致的稻田鱼腥藻代谢变化是藻类对空间环境的一种适应形式．同时，我们发现空间飞行导致的高固氮酶活性藻株经地面保持培养后表现出二种不同的效应，即可回复的表型效应和可遗传的稳定效应．

关键词：稻田鱼腥藻代谢性状分离空间环境

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空间环境导致的藻类生物学效应

空间科学学报 1997年第S1期17卷 14-23页

作者：胡章立刘永定中国科学院水生生物研究所武汉430072

藻类空间生物学效应研究目前已从“发现效应”（第一阶段）转入到“揭示效应的分子机理”（第二阶段）的新阶段，涉及的研究层次包括种群、群体、个体、组织细胞和分子的各个方面．本文拟就空间环境导致的藻类生物学效应研究作一综述．

关键词：藻类空间环境生物学效应回转器

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利用莱茵衣藻去除污水中氮磷的研究

环境科学 2010年第6期31卷 1489-1493页

作者：邓旭魏斌胡章立深圳大学生命科学学院深圳518060

对莱茵衣藻去除废水中氮磷的性能进行了研究,考察了初始氮磷浓度、氮磷比、光照条件、pH值和细胞固定化等因素对去除效率的影响.结果表明,莱茵衣藻对氮磷的去除率在初始氮磷浓度分别在55mg·L-1和7mg·L-1以下时接近100%,但初始氨氮浓... 详细信息

对莱茵衣藻去除废水中氮磷的性能进行了研究,考察了初始氮磷浓度、氮磷比、光照条件、pH值和细胞固定化等因素对去除效率的影响.结果表明,莱茵衣藻对氮磷的去除率在初始氮磷浓度分别在55mg·L-1和7mg·L-1以下时接近100%,但初始氨氮浓度进一步升高至75mg·L-1以上时会导致氨氮去除率急剧下降至50%.当氮磷比为5:1和10:1时,衣藻在3d内完全吸收水体中的氨氮,而当氮磷比为25:1时则需要6d;3种氮磷比下衣藻基本上4d内能完全去除水体中的磷.2种光照条件下(L/D为24h:0h和12h:12h)衣藻对氮磷的去除率都能达到100%,但L/D为24h:0h时的去除速率更快.衣藻去除氮磷的最适pH范围为6～7.藻细胞固定化后对氨氮的去除能力显著提高,在初始氨氮浓度为75mg·L-1时去除率由游离细胞的50%提高到100%;对磷的去除率不变,但速率有所减慢.

关键词：莱茵衣藻氨氮磷污水处理固定化

莱茵衣藻硫胁迫相关microRNA检测及其靶基因分析

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深圳大学学报（理工版） 2011年第3期28卷 237-242页

作者：胡章立舒龙飞苟德明深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室深圳大学生命科学学院深圳518060

采用特异反转录引物,构建莱茵衣藻microRNA(miRNA)的cDNA文库.选用U4核仁小分子RNA(small nucleolar RNA,snoRNA)作为内参,用SYBR green RT-PCR对3种与莱茵衣藻缺硫胁迫反应相关的miRNA进行检测,利用在线平台软件Web MicroRNAs Designer(WMD3)对miRNA靶基因进行预测.结果表明,在缺硫胁迫下,3种miRNA(miRNA1145.2、miRNA1146和miRNA1158)的表达水平均明显上调,与正常培养的莱茵衣藻表达miRNA的相对丰度比值分别为3.11、2.38和3.67.靶基因预测分析表明,miRNA1145.2能影响脂肪酸氧化反应,miRNA1146与辅酶Q代谢相关,miRNA1158可能参与磷酸戊糖途径调控.

关键词：生物工程分子生物学莱茵衣藻缺硫胁迫小分子核糖核酸实时定量反转录聚合酶链式反应

Hsp70A-RBCS2融合启动子调控PHB合成酶基因在莱茵衣藻中的表达

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中国科学（C辑） 2009年第8期39卷 775-782页

作者：王潮岗胡章立深圳大学生命科学学院生态与环境研究所深圳518060

利用Hsp70A-RBCS2融合启动子构建了新型的莱茵衣藻表达载体,并获得了聚-β-羟基丁酸(PHB)合成酶基因(phbC)的衣藻表达载体p105C124和pH105C124.通过"珠磨法"分别将上述两个衣藻表达载体导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849(Chlamydomonas re... 详细信息

利用Hsp70A-RBCS2融合启动子构建了新型的莱茵衣藻表达载体,并获得了聚-β-羟基丁酸(PHB)合成酶基因(phbC)的衣藻表达载体p105C124和pH105C124.通过"珠磨法"分别将上述两个衣藻表达载体导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849(Chlamydomonas reinhardtii CC-849)中,得到了具有Zeomycin抗性的转基因藻株.Hsp70A-RBCS2启动子介导的外源基因遗传转化效率明显高于RBCS2启动子,Southern杂交结果显示,phbC基因以低拷贝数整合进莱茵衣藻的基因组DNA中.在光照下,Hsp70A-RBCS2融合启动子能够有效调控phbC基因在莱茵衣藻中的转录和翻译,得到的蛋白产物具有PHB合成酶活性,40℃热激诱导可使PHB合成酶的酶活性提高到1.8倍.因此,Hsp70A-RBCS2融合启动子可使phbC基因在莱茵衣藻中实现可诱导的表达,该研究对利用衣藻合成PHB具有重要的学术意义,进一步的研究将通过"共转化"法获得二价或三价的转基因藻,最终实现在转基因藻中合成PHB.

关键词：转基因衣藻 phbC基因 Hsp70A-RBCS2启动子聚-β-羟基丁酸(PHB)