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2018—2023年黑龙江省肾综合征出血热流行趋势分析

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热带病与寄生虫学 2024年第3期22卷 147-151页

作者：田育文沈纪川高飞马涛胡泉博所佳宁袁爽黑龙江省疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150030 中国疾病预防控制中心现场流行病学培训项目广州市疾病预防控制中心

目的了解黑龙江省肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)人群发病情况及动物宿主感染情况,为HFRS防控措施的制定和调整提供科学依据。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集2018—2023年黑龙江省HFRS病例信息,从... 详细信息

目的了解黑龙江省肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)人群发病情况及动物宿主感染情况,为HFRS防控措施的制定和调整提供科学依据。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集2018—2023年黑龙江省HFRS病例信息,从黑龙江省疾病预防控制中心获取疫苗接种及鼠类宿主监测数据,对HFRS三间分布、人群疫苗接种情况、鼠类宿主感染率和带毒指数等进行分析。结果2018—2023年黑龙江省累计报告HFRS病例5233例,死亡34例,年报告发病率为1.60/10万~3.50/10万,总体呈下降趋势(χ^(2)_(趋势)=18.97,P<0.01),年均报告发病率为2.47/10万,年均报告死亡率为0.02/10万。2019—2022年黑龙江省人群HFRS疫苗接种数逐年上升,2023年略有减少。男、女报告病例数分别为4031例、1202例,发病率分别为3.79/10万、1.14/10万;报告病例数和发病率最高的年龄组均为50~59岁(1386例,3.54/10万);职业以农民为主(3170例,占60.58%)。发病呈双峰分布,主高峰出现在10—12月(2628例,占50.22%),次高峰在5月(471例,占9.00%)。发病率前5位的地区为双鸭山市(5.68/10万)、黑河市(5.54/10万)、鸡西市(4.76/10万)、鹤岗市(4.40/10万)、佳木斯市(4.34/10万);FlexScan空间聚集性扫描显示,双鸭山市、黑河市、鸡西市、鹤岗市、佳木斯市、牡丹江市、齐齐哈尔市、伊春市为一类聚集区。鼠类宿主监测显示,年均鼠密度为7.12%,年均带毒率为7.11%,年均感染率为7.16%,年均带毒指数为7.05。结论2018—2023年黑龙江省HFRS发病率呈下降趋势,但防控形势依然严峻。今后仍需加强高危人群健康教育和预防性接种工作,同时加强和完善鼠类宿主动物监测,提高HFRS监测预警能力。

关键词：肾综合征出血热宿主动物流行趋势黑龙江省

水稻空育131（cry1C*）分子检测及抗虫性评价

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水稻空育131（cry1C*）分子检测及抗虫性评价

作者：胡泉博黑龙江大学

学位级别：硕士

水稻是世界主要粮食作物之一,全世界有近一半人口(主要分布在亚州国家),以稻米为主食。中国稻作面积约占世界稻作面积的四分之一,占全国粮食播种面积的三分之一,水稻高产、稳产对中国以及世界粮食安全具有举足轻重的影响。影响水稻产量... 详细信息

水稻是世界主要粮食作物之一,全世界有近一半人口(主要分布在亚州国家),以稻米为主食。中国稻作面积约占世界稻作面积的四分之一,占全国粮食播种面积的三分之一,水稻高产、稳产对中国以及世界粮食安全具有举足轻重的影响。影响水稻产量的因素很多,螟虫危害是导致水稻减产主要因素之一,目前控制水稻虫害的主要方法是化学药剂杀虫法,但是使用化学药剂防治虫害往往存在农药残留、环境污染、生产成本增加等问题。利用生物防治水稻虫害的方法能够较大程度地缓解化学药剂防治虫害所存在的负面效应。通过转基因育种的手段,将来自于其他物种(比如苏云金芽孢杆菌)的抗虫基因,导入黑龙江省水稻基因组中,培育寒区转基因抗虫水稻品种,在当前黑龙江省水稻螟虫危害日益蔓延的情况下,对寒区水稻生产具有重大的意义。黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室,利用农杆菌介导,将二代Bt抗虫基因cry1C*导入到了黑龙江省主栽水稻品种水稻空育131核基因组,获得一系列转基因水稻空育131 (cry1C*)株系。本研究对空育131 (cry1C*)株系进行分子检测及抗虫性评价,主要结果如下：1.对水稻空育131 (cry1C*) T0,T1,T4代,进行目的基因cry1C*的PCR检测。结果表明,转基因水稻各个世代均有PCR反应呈阳性的植株,说明cry1C基因已经整合进入了水稻空育131基因组中,并在转基因水稻世代间稳定遗传。2.为了鉴定选择标记bar基因的表达,对转基因水稻T1代进行了室内抗PPT筛选,对T4代进行了田间抗除草剂basta试验。从水稻空育131 (cry1C*) T1代中获得了抗PPT植株,从T4代中鉴定到了抗basta的转基因水稻株系,说明外源bar基因整合进入了水稻空育131基因组中,并在转基因水稻世代间稳定遗传及表达。这完全可以间接地证明与bar基因紧密连锁的cry1C*基因在水稻空育131(cry1C*)世代间稳定表达。3.对水稻空育131 (cry1C*) T4代抗basta株系进行室内接虫鉴定,在接虫5天后转基因株系对二化螟虫致死率达到了100%,表明转基因水稻空育131(cry1C*)对二化螟具有高度抗性。4.对水稻空育131(cry1C*)T4代抗虫株系进行Southern杂交的结果显示,外源目的基因cry1C*主要以单拷贝形式整合到了水稻基因组。这些单拷贝转基因抗虫株系,是培育寒区抗螟虫转基因水稻品种的物质基础。5.田间抗性评价结果显示转基因水稻空育131(cry1C*)株系完全没有发生螟虫危害。另外,根据目测,转基因株系与受体品种空育131在分蘖数,实粒数,千粒重等农艺性状方面没有明显差异。

关键词：水稻 cry1C*基因分子检测抗虫性评价

非洲猪瘟病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

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中国预防兽医学报 2012年第10期34卷 807-809页

作者：崔尚金胡泉博刘业兵中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 中国兽医药品监察所北京100081

为将纳米PCR技术引入非洲猪瘟病毒(ASFV)检测,本研究建立了ASFV的高效纳米PCR检测方法,该方法采用纳米金颗粒作为热导介子,提高了PCR反应效率,采用该方法同时检测ASFV、大肠杆菌、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、典型猪瘟病毒、猪繁殖与... 详细信息

为将纳米PCR技术引入非洲猪瘟病毒(ASFV)检测,本研究建立了ASFV的高效纳米PCR检测方法,该方法采用纳米金颗粒作为热导介子,提高了PCR反应效率,采用该方法同时检测ASFV、大肠杆菌、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、典型猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪捷申病毒、猪脑心肌炎病毒等,结果只有ASFV能够扩增出552 bp的目的片段。敏感性试验表明纳米PCR检测技术是常规PCR检测技术敏感性的1 000倍以上,最低核酸拷贝数检出量可以达到10个拷贝。采用该方法对黑龙江、吉林和河南3个省份的8个地区临床送检的69份样品进行检测,检测结果显示均为阴性,在以上3个地区均未发现ASFV感染情况。

关键词：纳米PCR 非洲猪瘟病毒 P54基因

猪细小病毒抗体IPMA检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2011年第4期41卷 387-391页

作者：刘杉杉赵亚荣张超范吕超超胡泉博崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001 大北农动物医学研究中心北京100097

建立了一种检测猪细小病毒(PPV)血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),对该方法的反应条件、特异性、敏感性和重复性进行了系统试验,并与HI和ELISA的检测结果进行了比较。结果显示,PPV种毒按照1∶100的剂量接种后第48小时固定效... 详细信息

建立了一种检测猪细小病毒(PPV)血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA),对该方法的反应条件、特异性、敏感性和重复性进行了系统试验,并与HI和ELISA的检测结果进行了比较。结果显示,PPV种毒按照1∶100的剂量接种后第48小时固定效果最佳,辣根过氧化物酶-葡萄球菌A蛋白标记物的最适稀释度为1∶1 000,待检血清最适稀释度为1∶100。该IPMA方法与PCV2、PRV、PRRSV和CSFV的参考血清无交叉反应;PPV阳性血清稀释至1∶1 600时仍能检出;批内和批间重复性试验表明,该方法具有良好的重复性。符合性试验结果表明,该IPMA方法与HI和ELISA的符合率分别为96.0%与98.0%。用建立的IPMA方法检测PPV灭活疫苗免疫猪,结果免疫后第2周开始阳转,5周后全部阳转。对现地送检的400份猪血清样本进行检测,结果平均检出阳性率为86.5%。该IPMA方法的建立使PPV的血清学快速检测成为可能,可以用此方法开展PPV的抗体流行病学普查。

关键词：猪细小病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测

非洲猪瘟病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

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非洲猪瘟病毒高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用

黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热患者血清标本抗体检测

中国畜牧兽医学会养猪学分会五届三次理事会暨生猪产业科技创新发展论坛

作者：崔尚金胡泉博刘业兵中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室中国兽医药品监察所

将纳米PCR技术引入非洲猪瘟病毒(ASFV)检测,建立了ASFV的高效纳米PCR检测方法,该方法采用纳米金颗粒作为热导介子,提高了PCR反应效率,采用该方法同时检测ASFV、大肠杆菌、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒Ⅱ型.典型猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合... 详细信息

将纳米PCR技术引入非洲猪瘟病毒(ASFV)检测,建立了ASFV的高效纳米PCR检测方法,该方法采用纳米金颗粒作为热导介子,提高了PCR反应效率,采用该方法同时检测ASFV、大肠杆菌、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒Ⅱ型.典型猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪捷申病毒、猪脑心肌炎病毒等,结果只有ASFV能够扩增出552bp的目的片段。敏感性试验表明纳米PCR检测技术是常规PCR检测技术敏感性的1000倍以上,最低核酸拷贝数检出量可以达到10 copy。采用该方法对中国黑龙江、吉林和河南3个省份的8个地区临床送检的69份样品进行检测,检测结果显示均为阴性,在以上3个地区均未发现ASFV病毒感染情况。

关键词：纳米PCR 非洲猪瘟 P54基因

来源： cnki会议评论

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中国热带医学 2023年第4期23卷 358-361,377页

作者：胡泉博陈淑红华华杨明李冀宏黑龙江省疾病预防控制中心病毒病预防控制所黑龙江哈尔滨150030

目的检测黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疑似患者血清标本中的汉坦病毒急性期和恢复期抗体水平,为该疾病防控提供科学依据。方法应用酶联免疫吸附法对采集到的肾综合征出血热疑似患... 详细信息

目的检测黑龙江省2019—2021年肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疑似患者血清标本中的汉坦病毒急性期和恢复期抗体水平,为该疾病防控提供科学依据。方法应用酶联免疫吸附法对采集到的肾综合征出血热疑似患者急性期血清样本进行汉坦病毒IgM抗体检测,对恢复期血清标本进行IgM单抗体、IgG单抗体检测,使用SPSS 19.0软件对各年份间患者急性期血样IgM抗体阳性率进行χ^(2)检验分析,使用EpiData 3.1和Excel2003软件对患者性别、职业、年龄、发病日期及初诊间隔时间数据进行整理分析。结果共检测肾综合征出血热疑似患者急性期血清351份,恢复期血清208份。急性期血清标本IgM抗体阳性317份,阳性率为90.31%,各年份之间患者急性期IgM抗体阳性率差异无统计学意义(χ^(2)=0.895,P=0.639)。患者恢复期血清IgM单抗体阳性32份(15.39%);血清IgG单抗体阳性28份(13.46%);IgM、IgG抗体双阳性148份(71.15%)。男女患者性别比4.56∶1,男性患者远多于女性患者。职业以农民(253例,79.81%)为主,工人(19例,5.99%)及待业人员(17例,5.36%)次之。患者年龄最小10岁,年龄最大88岁,年龄中位数49岁,主要集中于30~<60年龄组(209例,65.93%),其中40~<50年龄组(86例,27.13%)占比最高,60~<90年龄组占比20.18%(64例)。每年5月、11月是黑龙江省HFRS发病高峰期。发病-初诊间隔时间中位数4 d。结论黑龙江省2019—2021年间肾综合征出血热病例的临床诊断与实验室检测的确诊病例之间存在约10%的差距,病毒特异性检测结果对当地出血热患者的确诊具有重要意义。

关键词：肾综合征出血热 IgM抗体 IgG抗体黑龙江

猪捷申病毒8型rVP1-ELISA检测方法的建立

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中国兽医科学 2012年第3期42卷 258-263页

作者：胡峰刘杉杉蔺文成王晓玲张超范王朝刘朝霞胡泉博崔尚金中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室黑龙江哈尔滨150001

为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性... 详细信息

为建立猪捷申病毒(PTV)抗体的间接ELISA检测方法,将PTV-8VP1基因克隆至原核表达载体pET-30a中,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta表达重组的VP1蛋白。SDS-PAGE及Western-blot分析结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为36.2ku,且能被PTV-8阳性血清特异性识别。以纯化的重组蛋白包被ELISA反应板,建立了检测PTV抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果表明,重组VP1蛋白与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒阳性血清不发生反应。敏感性试验结果表明血清稀释至1∶800时仍检测为阳性。该方法的批内、批间变异系数均小于10%,表明具有较好的重复性。利用建立的方法对633份临床样品进行检测,阳性率是88.10%。选取58份临床样品与间接免疫荧光方法作比对试验,两者的符合率是94.80%。

关键词：猪捷申病毒重组VP1蛋白原核表达间接ELISA

猪伪狂犬病病毒野毒环媒恒温检测方法的建立及应用

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猪伪狂犬病病毒野毒环媒恒温检测方法的建立及应用

猪伪狂犬病病毒野毒环媒恒温检测方法的建立及应用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会

作者：张超范崔尚金刘杉杉胡泉博中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室

环媒恒温检测方法(LAMP)是一种快速简便特异的检测方法,已广泛应用于多种细菌病和病毒病的检测。本实验成功建立了检测猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒的LAMP检测方法。利用该方法所建立的反应体系在恒温65℃水浴锅中作用60 min便可得到环媒恒... 详细信息

环媒恒温检测方法(LAMP)是一种快速简便特异的检测方法,已广泛应用于多种细菌病和病毒病的检测。本实验成功建立了检测猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒的LAMP检测方法。利用该方法所建立的反应体系在恒温65℃水浴锅中作用60 min便可得到环媒恒温反应所特有的阶梯状条带,而猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和健康猪睾丸细胞的扩增结果均为阴性。本方法对PRV的最低检出量为1×10 copies/μL,该检测方法的敏感性是普通PCR方法的100倍。该方法的建立为现地开展PRV野毒的快速诊断提供了有力的诊断工具。

关键词：猪伪狂犬病病毒环媒恒温

来源： cnki会议评论

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猪伪狂犬病病毒野毒环媒恒温检测方法的建立及应用