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口腔扁平苔藓病理改变的免疫发病机制研究进展

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复旦学报（医学版） 2005年第2期32卷 247-248页

作者：孙红英胡宝洋周国民俞立英复旦大学附属华山医院口腔科上海200040 人体解剖和组织胚胎学系上海200032

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是最常见的非感染性口腔黏膜疾病,主要累及颊部、舌及牙龈等部位,有时可合并皮肤病变.病变可呈条纹状、斑块状白色损害、黏膜糜烂、萎缩等多种表现.该病在成人中发病率为1%～4%,易发于40岁以上的成... 详细信息

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是最常见的非感染性口腔黏膜疾病,主要累及颊部、舌及牙龈等部位,有时可合并皮肤病变.病变可呈条纹状、斑块状白色损害、黏膜糜烂、萎缩等多种表现.该病在成人中发病率为1%～4%,易发于40岁以上的成人,女性多见[1].

关键词：口腔扁平苔藓发病机制研究病理改变口腔黏膜疾病淋巴细胞迁移细胞黏附分子 40岁以上组织病理学非感染性皮肤病变黏膜糜烂自身免疫神经精神全身疾病上皮组织条纹状斑块状发病率等因素 OLP

玻璃体内移植骨髓基质细胞显著减少小鼠氧诱导视网膜病血管新生(英文)

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神经解剖学杂志 2014年第3期30卷 249-260页

作者：林聪肖虹蕾胡宝洋周国民复旦大学上海医学院人体解剖与组织胚胎学教研室上海200032 中国科学院动物学系北京100101

目的:探索通过玻璃体内细胞移植预防和治疗早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity,ROP)的可能途径。方法:获取成年大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSC),并连续传代。应用免疫组织化学和ELISA技术检测MSC中及MSC条件培养基(... 详细信息

目的:探索通过玻璃体内细胞移植预防和治疗早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity,ROP)的可能途径。方法:获取成年大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSC),并连续传代。应用免疫组织化学和ELISA技术检测MSC中及MSC条件培养基(MSC-CM)中生长因子的表达。通过体外检测内皮细胞增殖、迁移和管腔形成确认MSC-CM的作用。将DiI标记的MSCs细胞移植入氧诱导视网膜病(oxygen induced retinopathy,OIR)模型小鼠玻璃体腔。应用免疫荧光技术检测神经或胶质细胞分布与分化标志。采用视网膜整装片ADP酶组织化学染色和视网膜前内皮血管细胞核计数方法评估新生血管的抑制作用。转染血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)干扰RNA质粒的MSCs验证VEGF的保护作用。结果:体外培养的MSCs表达VEGF,胰岛素生长因子(insulin-like growth factors,IGF)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)。MSC-CM促进体外培养内皮细胞的增殖,迁移和管型形成。发现眼内移植后,标记的MSCs聚集在视网膜前的玻璃体内,或者整合入视网膜,并表达胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)。吸入高氧前玻璃体内注射MSCs能显著缓解视网膜新生血管。体外和体内研究证实转染VEGF干扰RNA质粒的MSCs后其保护作用减弱。结论:在OIR早期移植MSCs能显著减少新生血管形成。VEGF等因子的旁分泌,可能在此过程发挥重要作用;通过细胞移植保护视网膜血管可以作为治疗ROP的潜在途径。

关键词：早产儿视网膜病氧诱导视网膜病骨髓基质细胞 VEGF siRNA 细胞移植小鼠

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干细胞神经定向分化研究与医学转化

济宁医学院学报 2012年第5期35卷 316-321页

作者：胡宝洋中国科学院动物研究所干细胞与转化研究重点实验室计划生育生殖生物学国家重点实验室

作为一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞,人类多能性干细胞,包括人胚干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)及人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)等,能进一步分化成为多种类型的功能细胞,修复受损组织,有... 详细信息

作为一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞,人类多能性干细胞,包括人胚干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)及人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)等,能进一步分化成为多种类型的功能细胞,修复受损组织,有望为解决退行性疾病与组织损伤等难题提供新的途径。根据发育生物学理论,目前已建立有效的干细胞分化方案,可将人多能干细胞分化为特定类型的神经元和胶质细胞,包括GABA能、多巴胺能、脊髓运动神经元,以及星形胶质细胞和少突胶质细胞。本文综述了当前干细胞生物学中的与神经分化相关的几个热点问题,着重介绍人类与小鼠干细胞生物学方面的差异及干细胞研究向再生医学转化中的问题,特别是我国干细胞研究医学转化所面临的机遇与挑战。这些问题的解决将对提高我国的干细胞研究水平,推动干细胞研究向医学应用转化具有重要意义。

关键词：干细胞再生医学细胞移植转化研究

人胚胎干细胞来源多巴胺前体细胞治疗帕金森病猴

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生命科学 2016年第8期28卷 902-906页

作者：王昱凯周琪胡宝洋中国科学院动物研究所

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见于中老年人的神经系统退行性疾病,由中脑腹侧的多巴胺能(dopaminergic,DA)神经元缺失造成。这类疾病可通过移植由人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESC)或其他途径获得的多巴胺... 详细信息

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种常见于中老年人的神经系统退行性疾病,由中脑腹侧的多巴胺能(dopaminergic,DA)神经元缺失造成。这类疾病可通过移植由人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESC)或其他途径获得的多巴胺能神经元实现治疗。然而,在应用于临床之前,需要对这些多巴胺能神经元的安全性和有效性在合适的动物模型中进行充分、全面的评价。为评价由临床级人胚胎干细胞分化的多巴胺能神经元是否安全、有效,根据先导专项部署,我们建立了MPTP诱导的帕金森病猴模型,并将由人胚胎干细胞定向分化的多巴胺能神经元植入受损猴脑区。结果表明,在所有接受细胞移植的猴中,未发生移植细胞形成的肿瘤和继发肿瘤。移植细胞可分化为多巴胺能神经元并使局部多巴胺水平提高,带来不同程度的行为学改善。这些发现提示,多能干细胞分化的多巴胺能神经元移植治疗帕金森病安全、有效,可进一步应用于帕金森病的治疗。

关键词：干细胞帕金森病再生医学中国科学院战略性先导科技专项

血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子-2及雌激素受体在早产儿视网膜病发病机制中的作用

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复旦学报（医学版） 2007年第2期34卷 228-232页

作者：石文静陈超周国民胡宝洋肖虹蕾复旦大学附属儿科医院新生儿科-卫生部新生儿疾病重点实验室上海200032 复旦大学上海医学院解剖系与组织胚胎学系上海200032

目的测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和雌激素受体（ER）表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病（ROP）发病机制中的作用.方法选择7日龄（P7）C57BL/6J新生小鼠47... 详细信息

目的测定新生小鼠视网膜正常发育及视网膜病时血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和雌激素受体（ER）表达的改变,了解它们在早产儿视网膜病（ROP）发病机制中的作用.方法选择7日龄（P7）C57BL/6J新生小鼠474只,雌雄各半,分为吸氧组和对照组两大组,再按性别分成4小组,用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定VEGF、FGF-2和ER的mRNA水平,用免疫组化测定它们的蛋白水平.具体分组及取材时间为：组1（n=126）,吸氧组,雌性;组2（n=126）,吸氧组,雄性,两组均自吸氧后每天分离视网膜至P21（P8～P21）行RT-PCR,每天摘眼石蜡包埋后行免疫组化;组3（n=111）,对照组,雌性;组4（n=111）,对照组,雄性,均自P7起每天分离视网膜至P17（P7～P17）行RT-PCR,自P7起每天摘眼至P21（P7～P21）行免疫组化.结果（1）VEGF mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组自P8起显著下降,且在整个吸氧阶段持续降低,至出氧箱后缓慢上升,自P15起显著上升,并和对照组形成显著差异,受氧浓度的调节非常明显.FGF-2 mRNA在正常小鼠始终维持相对稳定的低水平;在吸氧组,吸氧期间无明显变化,出氧箱后3 d开始上升.ER mRNA在正常小鼠自P7起上升,P9达高峰,P11起下降并始终维持低水平;在吸氧组,吸氧期间变化与对照组相似,出氧箱后5 d开始上升,并维持较高水平直至P21.这3个细胞因子的蛋白水平变化均晚于其基因水平变化,但变化趋势基本相同.（2）性别和吸氧都不能单独影响上述细胞因子的表达（P＞0.05）;日龄可独立地影响它们的表达;吸氧和日龄两因素结合起来可显著影响它们的表达（P＜0.000 1）.结论引起ROP发病的根本原因是早产,吸氧是其重要的外因;VEGF、FGF-2和ER参与血管的形成,在视网膜血管正常发育和ROP的发病机制中起重要作用;VEGF直接受氧浓度调节,在众多细胞因子中可能起关键性作用.

关键词：早产儿视网膜病血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子雌激素受体小鼠

阻断神经生长因子信号部分抑制雌二醇对恒河猴视网膜血管内皮细胞的作用

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解剖学报 2004年第6期35卷 612-616页

作者：胡宝洋刘坤万瑾龚宏华佘振珏肖虹蕾周国民复旦大学上海医学院解剖学与组织胚胎学系

目的　研究神经生长因子 (NGF)信号系统在雌激素调控视网膜血管内皮细胞中的作用。　方法　选用恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞系RF 6A ,RT PCR检测雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、NGF及其受体在视网膜血管内皮细胞中的表达。分... 详细信息

目的　研究神经生长因子 (NGF)信号系统在雌激素调控视网膜血管内皮细胞中的作用。　方法　选用恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞系RF 6A ,RT PCR检测雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、NGF及其受体在视网膜血管内皮细胞中的表达。分别观察雌二醇 (estradiol,E2 )、NGF及VEGF、EGF、BDNF等对血管内皮细胞活力(MTT法 )的作用。用流式细胞术细胞周期法检测E2 、NCF及E2 与K2 5 2a共同处理组的凋亡率。NGF抗体和选择性TrkA拮抗剂K2 5 2a研究对上述作用的阻断效应。同样的分组进行细胞划痕修复实验。 96孔板AngioMatrix胶上观察E2 及NGF对RF 6A内皮细胞管腔形成能力的影响。　结果　RF 6A在细胞外基质胶上可形成管腔样结构。RT PCR检测到ER α、NGF及NGF受体TrkA的mRNA。 1nmol L～ 1 0 0nmol LE2 可以剂量依赖性的增强细胞活力及单层细胞的划痕修复能力 ,其增强作用可部分被NGF抗体及 1 0 0nmol L的K2 5 2a选择性阻断。凋亡率检测显示各组凋亡率相近。E2 可促进RF 6A形成管腔 ,但不能被NGF抗体、TrkA阻断。　结论　除VEGF外 ,E2 还可通过NGF信号系统对视网膜血管内皮细胞活力、划痕修复起促进作用。但结果提示 ,阻断NGF信号系统不影响E2 促RF 6A形成管腔的作用。

关键词：雌激素神经生长因子视网膜血管内皮细胞管腔形成恒河猴

视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞的诱导分化作用

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解剖学报 2006年第3期37卷 285-289页

作者：万瑾胡宝洋刘坤郑华肖虹蕾佘振珏周国民复旦大学上海医学院人体解剖学与组织学胚胎学系上海200032

目的探讨视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞(BMSCs)的诱导分化作用。方法原代培养胚龄17d(E17)及生后3d(P3)SD大鼠的视网膜细胞,分别收集培养上清液,过滤后与DMEM按2:3混合,用此混合液诱导BMSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,对... 详细信息

目的探讨视网膜细胞培养上清液对骨髓基质细胞(BMSCs)的诱导分化作用。方法原代培养胚龄17d(E17)及生后3d(P3)SD大鼠的视网膜细胞,分别收集培养上清液,过滤后与DMEM按2:3混合,用此混合液诱导BMSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,对诱导后的细胞进行神经丝蛋白(NF)、胶质源性纤维酸性蛋白(GFAP)及视网膜特异性标记物进行免疫化学染色,统计分析阳性细胞数;再用RT-PCR进一步检测诱导结果。结果E17和P3细胞上清液均能诱导BMSCs表达NF[(10.35±2.66)%,(10.64±3.94)%]和GFAP[(27.86±7.97)%,(24.38±5.80)%],但只有P3细胞上清液诱导的BMSCs表达视蛋白(opsin),同时RT-PCR也检测到视细胞发育调节转录因子Crx mRNA的表达。结论视网膜细胞培养上清液可以诱导BMSCs向神经元、胶质细胞与视细胞分化。

关键词：骨髓基质细胞视网膜诱导分化细胞培养大鼠

小鼠视网膜血管发育中EphrinB2的表达

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小鼠视网膜血管发育中EphrinB2的表达

中国解剖学会2002年年会

作者：胡宝洋佘振珏肖虹蕾周国民复旦大学医学院解剖与组织胚胎学系复旦大学医学院解剖与组织胚胎学系复旦大学医学院解剖与组织胚胎学系复旦大学医学院解剖与组织胚胎学系

＜正＞受体酪氨酸激酶家族成员EphB及其配体EphrinB对细胞迁移、边界形成以及血管发育等都起重要作用。我们观察了EphrinB2在幼年小鼠视网膜中的表达,以及视网膜血管的分布特点,以期进一步探讨Ephrin B2在视网膜血管发育中的作用。方法...

＜正＞受体酪氨酸激酶家族成员EphB及其配体EphrinB对细胞迁移、边界形成以及血管发育等都起重要作用。我们观察了EphrinB2在幼年小鼠视网膜中的表达,以及视网膜血管的分布特点,以期进一步探讨Ephrin B2在视网膜血管发育中的作用。方法:取生后12天C57BL/6J小鼠,Avertin（20μl/g）腹腔注射麻

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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晶状体损伤促进视神经再生的作用及机制

解剖学杂志 2006年第1期29卷 7-10,13页

作者：潘凌郑华万瑾佘振珏肖虹蕾胡宝洋周国民复旦大学上海医学院解剖与组织胚胎学系上海200032

目的：研究晶状体损伤对视神经再生的促进作用,并探讨巨噬细胞所起的作用。方法：成年 SD 大鼠钳夹造成视神经损伤模型(NC),戳伤晶状体(LP),玻璃体内注射酵母多糖(ZI)或注射体外活化的单核/巨噬细胞 (MI),动物以此分组。用 Nissl 染色... 详细信息

目的：研究晶状体损伤对视神经再生的促进作用,并探讨巨噬细胞所起的作用。方法：成年 SD 大鼠钳夹造成视神经损伤模型(NC),戳伤晶状体(LP),玻璃体内注射酵母多糖(ZI)或注射体外活化的单核/巨噬细胞 (MI),动物以此分组。用 Nissl 染色法显示存活的视网膜节细胞(RGCs),用抗 GAP-43抗体标记轴突再生 RGCs,用抗 ED-1抗体标记活化的单核/巨噬细胞。结果：NC+LP 组存活的 RGCs 比 NC 组明显增加,再生的 RGCs 及活化的单核/巨噬细胞都有明显增多的结果。NC+ZI 组与 NC+MI 组也有类似结果。结论：晶状体损伤具有显著促进视神经再生的作用,其机制可能与趋化并激活巨噬细胞有关。

关键词：视神经损伤晶状体损伤视神经神经再生巨噬细胞