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流式细胞术检测单增李斯特菌与酿酒酵母

现代食品科技 2014年第3期30卷 195-200页

作者：黄生权付萌唐青涛黄韵胡双芳余以刚肖性龙无限极(中国)有限公司广东江门529156 华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640

为探讨流式细胞术对单增李斯特菌和酿酒酵母的活菌与热灭活菌的检出效果,本文采用荧光染色试剂SYTO-9和碘化乙锭(PI)对单增李斯特菌和酿酒酵母的活菌与热灭活菌的细胞悬液进行染色,采用流式细胞仪同时测量红色荧光与绿色荧光从而得出细... 详细信息

为探讨流式细胞术对单增李斯特菌和酿酒酵母的活菌与热灭活菌的检出效果,本文采用荧光染色试剂SYTO-9和碘化乙锭(PI)对单增李斯特菌和酿酒酵母的活菌与热灭活菌的细胞悬液进行染色,采用流式细胞仪同时测量红色荧光与绿色荧光从而得出细胞悬液中的细菌和酵母的含量。结果表明经核酸荧光染料染色后,再结合流式细胞术对细菌与酵母菌进行检测,步骤简单、耗时短。该法不仅简化了测量步骤且分辨率高,对单增李斯特菌和酿酒酵母均具有良好的检出结果,能分辨同一体系中同一菌种的活细胞与热灭活细胞和同一体系中的细菌与酵母活细胞;该法检出限低,将单增李斯特菌稀释后,最低检出限可达1.2×104 cells/mL,将酿酒酵母稀释后,最低检出限可达6×103 cells/mL,因此能大大缩短增菌时间或者避免繁复的增菌步骤。

关键词：流式细胞术荧光李斯特菌酿酒酵母

免疫磁珠分离-实时荧光PCR快速检测虾中沙门氏菌

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现代食品科技 2017年第11期33卷 235-242页

作者：李亚茹周冬根夏杏洲曹怡芳杨慧宁胡双芳肖性龙华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 广东海洋大学食品科技学院广东湛江524094

建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合实时荧光PCR(real time PCR)快速、灵敏地检测虾中沙门氏菌的方法。用纳米磁珠与抗沙门氏菌多克隆抗体制备免疫磁珠,优化反应条件,建立IMS方法。同时针对沙门氏菌ttr基因合成探... 详细信息

建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合实时荧光PCR(real time PCR)快速、灵敏地检测虾中沙门氏菌的方法。用纳米磁珠与抗沙门氏菌多克隆抗体制备免疫磁珠,优化反应条件,建立IMS方法。同时针对沙门氏菌ttr基因合成探针和引物,构建real time PCR体系,选4株代表性的沙门氏菌检测其特异性和灵敏度。结果显示,免疫磁珠的最适添加量为100μL,免疫磁珠与样品菌液的最佳反应时间为30 min。建立的免疫磁珠分离-实时荧光PCR(IMS-real time PCR)方法特异性高,对于虾中沙门氏菌的检测限为鼠伤寒沙门氏菌5×10~1 CFU/25 g,猪霍乱沙门氏菌5×10~2 CFU/25 g,肠炎沙门氏菌和甲型副伤寒沙门氏菌1×10~2CFU/25 g,检测全程可在6 h内完成。对40份实际样品,IMS-real time PCR方法与国标法检测结果完全一致。建立的IMS-Real time PCR方法用时短、灵敏度高,为水产品中沙门氏菌的快速检测提供了技术支撑,对沙门氏菌引起的食源性疾病的预防和控制具有现实意义。

关键词：免疫磁珠分离实时荧光PCR 沙门氏菌检测

基于cgcA基因实时荧光PCR快速检测穆汀斯克罗诺杆菌的研究

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现代食品科技 2016年第2期32卷 296-301页

作者：庄平余以刚胡双芳李蓉肖性龙华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 中山出入境检验检疫局广东中山528403

为实现奶粉中常见污染菌穆汀斯克罗诺杆菌的快速检测与控制,本文根据cgcA基因序列设计出特异性探针和引物,建立了运用实时荧光定量PCR法检测穆汀斯克罗诺杆菌的反应体系和反应条件,并对该法的特异性、灵敏度、稳定性进行评价,并进行人... 详细信息

为实现奶粉中常见污染菌穆汀斯克罗诺杆菌的快速检测与控制,本文根据cgcA基因序列设计出特异性探针和引物,建立了运用实时荧光定量PCR法检测穆汀斯克罗诺杆菌的反应体系和反应条件,并对该法的特异性、灵敏度、稳定性进行评价,并进行人工染菌样品检测实验。特异性结果表明,对穆汀斯克罗诺杆菌的荧光PCR检测结果的特异性为100%;灵敏度结果表明,穆汀斯克罗诺杆菌检出限在440 cfu/m L;稳定性结果表明,穆汀斯克罗诺杆菌组内实验CV在0.48~0.69%之间波动,而组间实验CV在0.69~0.73%之间波动;人工染菌样品试验表明,在增菌6 h后能检出阳性。本研究所建立的实时荧光定量PCR法特异性好、灵敏度高、稳定性强,有望成为快速检测食品中穆汀斯克罗诺杆菌污染的新方法,具有很好的研究价值和应用前景。

关键词：穆汀斯克罗诺杆菌荧光定量PCR 检测

咖啡豆的化学组分差异与感官品质的相关性分析

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食品工业科技 2013年第24期34卷 125-129,134页

作者：胡双芳卫亚西邢精精佟世生牛银雪刘萍中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 北京城市学院生物医药学部北京100083

为了探讨咖啡中化学组分与感官品质之间的关系,通过测定7种不同产区咖啡豆的蛋白质、还原糖、绿原酸、葫芦巴碱和咖啡因含量以及咖啡液pH,分析这些组分含量的多少与感官品质之间的关系。经Pearson线性相关性检验,咖啡感官评分高低与咖... 详细信息

为了探讨咖啡中化学组分与感官品质之间的关系,通过测定7种不同产区咖啡豆的蛋白质、还原糖、绿原酸、葫芦巴碱和咖啡因含量以及咖啡液pH,分析这些组分含量的多少与感官品质之间的关系。经Pearson线性相关性检验,咖啡感官评分高低与咖啡因含量和葫芦巴碱含量的线性相关性具有显著性,均成负相关,相关系数分别为r=0.855和r=0.366。同时咖啡感官好的风味品质与咖啡因损失量(r=0.897)、葫芦巴碱损失量(r=0.848)、绿原酸损失量(r=0.933)、还原糖损失量(r=0.713)正相关性均为极显著,与蛋白质损失量的线性相关性不显著。另外,7种不同产区咖啡豆,不同烘焙程度和不同品种咖啡间pH的差异不大。

关键词：咖啡化学组分感官品质相关性

SD-PMA-qPCR快速检测冷冻肉制品中活性沙门氏菌的研究

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现代食品科技 2017年第7期33卷 289-294页

作者：庄平余以刚周冬根李亚茹胡双芳肖性龙华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510640 宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012

为实现冷冻肉制品中活性沙门氏菌的快速检测与控制,本文利用PMA(叠氮溴化丙锭)和SD(脱氧胆酸钠)消除死菌和损伤菌的影响,建立了运用SD-PMA-qPCR法检测活性沙门氏菌的反应体系和反应条件,并进行人工染菌样品检测试验。SD的最佳浓度确定为... 详细信息

为实现冷冻肉制品中活性沙门氏菌的快速检测与控制,本文利用PMA(叠氮溴化丙锭)和SD(脱氧胆酸钠)消除死菌和损伤菌的影响,建立了运用SD-PMA-qPCR法检测活性沙门氏菌的反应体系和反应条件,并进行人工染菌样品检测试验。SD的最佳浓度确定为0.1%,最佳孵育时间为20 min。对-20℃低温冷冻处理3~4 d的沙门氏菌处理液,使用平板计数法、qPCR、PMA-qPCR和SD-PMA-qPCR进行计数,结果发现qPCR与PMA-qPCR二者检测值接近且明显高于平板计数值,而SD-PMA-qPCR检测值与平板计数值相近,这表明SD和PMA的联合使用能有效的消除死菌和损伤菌的影响。人工染菌样品试验表明,沙门氏菌检出限在10~2CFU/g,同时10~6 CFU/g大肠杆菌O157:H7的存在不会影响检测结果。本研究所建立的SD-PMA-qPCR检测方法特异性好、灵敏度高,有望成为快速检测冷冻肉制品中活性沙门氏菌的新方法,具有很好的研究价值和应用前景。

关键词：活性沙门氏菌叠氮溴化丙锭-荧光定量核酸扩增检测系统脱氧胆酸钠

高分辨率溶解曲线检测9种食源性致病菌方法的建立

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现代食品科技 2016年第3期32卷 271-280页

作者：胡双芳余以刚李蓉庄平夏杏洲肖性龙杨慧宁华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 中山出入境检验检疫局广东中山528400 广东海洋大学食品科技学院广东湛江524094

当今食源性疾病已成为一个全球关注的食品卫生问题,常见的细菌性食物中毒的病原菌有:致病性大肠杆菌(特别是出血性大肠杆菌O157:H7)、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性弧菌(包括霍乱弧菌和副溶血弧菌)、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、空肠... 详细信息

当今食源性疾病已成为一个全球关注的食品卫生问题,常见的细菌性食物中毒的病原菌有:致病性大肠杆菌(特别是出血性大肠杆菌O157:H7)、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性弧菌(包括霍乱弧菌和副溶血弧菌)、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、空肠弯曲菌以及阪崎克罗诺杆菌等。单独检测一种致病菌已无法满足现今社会对同时高效检测多种致病菌的要求,为建立一种同时对上述9种食品中常见致病菌的检测方法,本研究分别以上述9种菌的特异性基因为靶基因,创新性地结合一对通用引物,建立能同时检测多种食源性致病菌的多重HRM-real time PCR检测体系。结果表明该多重HRM-real time PCR检测体系通过两管PCR反应可对上述9种食品中常见致病菌进行有效的检测与区分,且具有良好的特异性和灵敏度。

关键词：高分辨率溶解曲线致病菌检测多重PCR

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不同干燥方式加工的梅干菜风味物质研究

广东农业科学 2016年第8期43卷 131-137页

作者：罗伟余以刚胡双芳邱杨华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 东莞出入境检验检疫局广东东莞523072

运用气-质联用方法对不同干燥方式加工的梅干菜风味物质进行研究,鉴定微波干燥的梅干菜中6个有机酸组分、16个酯类组分、10个醛类组分、5个醇类组分、6个酮类组分、4个杂环类组分、6个烃类组分,冷冻干燥的梅干菜中3个有机酸组分、15个... 详细信息

运用气-质联用方法对不同干燥方式加工的梅干菜风味物质进行研究,鉴定微波干燥的梅干菜中6个有机酸组分、16个酯类组分、10个醛类组分、5个醇类组分、6个酮类组分、4个杂环类组分、6个烃类组分,冷冻干燥的梅干菜中3个有机酸组分、15个酯类组分、7个醛类组分、4个醇类组分、5个酮类组分、2个杂环类组分和10个烃类组分。结果表明:微波和冷冻干燥梅干菜的酯类含量分别为45.28%和28.9%;微波干燥过程中梅干菜发生了酯化反应和氧化反应,产品褐变比较严重,产品色泽和复水性较差;冷冻干燥梅干菜较好保留了热敏性营养成分和风味物质,产品色泽和复水性好。

关键词：梅干菜风味物质气相色谱-质谱酯化反应

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通用型酵母菌实时荧光PCR检测方法的建立

现代食品科技 2014年第12期30卷 215-219,125页

作者：余以刚万松华胡双芳肖性龙吴晖华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640

为建立一种快速检测鉴定食品中酵母污染菌实时荧光PCR法,根据酵母基因序列设计出通用型探针和引物,建立了运用实时荧光PCR法检测酵母的反应体系和反应条件,进而对该方法进行特异性验证,灵敏度分析及稳定性评价,并应用于产品样本的检测... 详细信息

为建立一种快速检测鉴定食品中酵母污染菌实时荧光PCR法,根据酵母基因序列设计出通用型探针和引物,建立了运用实时荧光PCR法检测酵母的反应体系和反应条件,进而对该方法进行特异性验证,灵敏度分析及稳定性评价,并应用于产品样本的检测。特异性试验表明,酵母菌检测结果均为阳性,而细菌、霉菌均为阴性,荧光PCR检测结果的特异性为100%。灵敏度试验表明,酵母菌检出限在760 cfu/m L。稳定性试验表明,酵母菌组内实验CV在0.62-0.81%之间波动,而组间实验在0.43-0.77%之间波动。通过样品增菌检测发现在培养12 h后能检出阳性。本研究所建立的实时荧光PCR法特异性好、灵敏度高、稳定性好,具有快速、简便的特点,为快速检测食品中酵母污染提供新的方法和途径,具有很好的研究价值和应用前景。

关键词：酵母菌荧光定量PCR 检测

二维各向异性介质海洋可控源电磁场反演中灵敏度计算分析

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地球物理学进展 2024年

作者：叶益信胡双贵中国矿业大学资源与地球科学学院

灵敏度的计算是海洋可控源电磁数据线性反演中的关键一环，决定了电磁数据反演的质量和效率，因此有必要对灵敏度计算进行检验和分析。本文推导了频率域可控源电磁2.5维反演中灵敏度的计算公式，采用自适应非结构有限元算法计算电磁正... 详细信息

灵敏度的计算是海洋可控源电磁数据线性反演中的关键一环，决定了电磁数据反演的质量和效率，因此有必要对灵敏度计算进行检验和分析。本文推导了频率域可控源电磁2.5维反演中灵敏度的计算公式，采用自适应非结构有限元算法计算电磁正演响应，采用伴随互易的方式计算电磁灵敏度，只需计算两个基本相同的边值问题（原始场和伴随场），然后对两个相应的场进行点积积分，便可得到观测的电磁场分量对电导率参数的偏导数矩阵。采用一维各向同性模型对算法进行了检验，并通过与一维各向同性算法比较，验证了本文灵敏度计算方法的准确性。然后对一维各向异性模型和二维各向异性模型进行了计算分析，分析了不同电磁场分量在高低阻各向异性介质中的灵敏度分布特征。

关键词：灵敏度反演电磁场各向异性介质