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瘢痕疙瘩诊断生物标志物及治疗靶点研究进展

中华医学杂志 2023年第3期103卷 219-223页

作者：孔宇祥李志帅肖苒刘元波严笠中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院瘢痕与创面治疗二科北京100144

瘢痕疙瘩是皮肤创伤病理性愈合的结果,具有侵袭性且复发率高。由于瘢痕疙瘩形成的病理机制尚未阐明,缺乏特异的诊断标志物及安全、精准和有效的分子治疗靶点,本文从疾病预测和临床诊断两个方面总结瘢痕疙瘩的诊断及预测标志物,重点阐述... 详细信息

瘢痕疙瘩是皮肤创伤病理性愈合的结果,具有侵袭性且复发率高。由于瘢痕疙瘩形成的病理机制尚未阐明,缺乏特异的诊断标志物及安全、精准和有效的分子治疗靶点,本文从疾病预测和临床诊断两个方面总结瘢痕疙瘩的诊断及预测标志物,重点阐述参与瘢痕疙瘩纤维化和炎症调控相关的信号通路,对通路中潜在的治疗靶点及其药物进行综述,并提出新的研究策略和方向。

关键词：瘢痕疙瘩标志物治疗靶点信号通路成纤维细胞

单细胞测序数据分析瘢痕疙瘩和局限性硬皮病组织中周细胞的差异

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中华整形外科杂志 2023年第6期39卷 602-609页

作者：孔宇祥李志帅傅歆严笠肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心北京100144 中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144

目的:探讨瘢痕疙瘩和局限性硬皮病组织中周细胞的异质性及其演化轨迹差异,为研究2种皮肤纤维化疾病的致病机制和治疗靶点提供新的线索。方法:选取GEO和GSA-Human数据库中的3例局限性硬皮病、4例瘢痕疙瘩及其对应的邻近正常皮肤样本细胞... 详细信息

目的:探讨瘢痕疙瘩和局限性硬皮病组织中周细胞的异质性及其演化轨迹差异,为研究2种皮肤纤维化疾病的致病机制和治疗靶点提供新的线索。方法:选取GEO和GSA-Human数据库中的3例局限性硬皮病、4例瘢痕疙瘩及其对应的邻近正常皮肤样本细胞的单细胞转录组测序数据,绘制数据的表达矩阵。采用R语言的Seurat 4.3.0包进行处理后分群绘制t-SNE可视化图谱。采用Monocle 2.24.0包对其中的周细胞进行拟时序轨迹分析。结果:瘢痕疙瘩和局限性硬皮病皮肤组织无监督聚类为19个不同的细胞群体,其中周细胞为C7、C11群,高表达PDGFRB和RGS5基因,占总细胞数的7.53%。周细胞进一步可分为8个亚群,拟时序分析发现基因表达变化主要有细胞命运1(fate 1)和细胞命运2(fate 2)2个分支轨迹,依照时序周细胞可分为5个状态(S1~S5);其中S4占前分支的绝大部分,代表最初状态的周细胞;S5构成细胞命运1分支的大部分,代表分化较早期状态的周细胞;S1、S2、S3构成命运2分支的大部分,其中S3代表分化中期状态的周细胞,而S1、S2则代表分化晚期状态的周细胞。在正常皮肤中,各分化状态的周细胞均匀分布,而瘢痕疙瘩周细胞主要分布于前支(S4)、分支1(S5)及分支2中的前一部分(S3),分别代表初始、早期及分化中期的细胞状态,分支基因表达动态分析显示其高表达SOX4、COL4A1、COL6A3、AHR、CXCL3和IL1R1等基因;而局限性硬皮病的周细胞主要分布于分支2的中后部分(S1、S2),代表分化末期的细胞,高表达ACTA2和MYH11等基因。结论:瘢痕疙瘩和局限性硬皮病中周细胞具有异质性以及不同的演化轨迹;瘢痕疙瘩周细胞更具有干细胞样特性,通过高表达与细胞干性、上皮-间质转换、侵袭性和免疫微环境调控相关的基因,对其侵袭性和复发的病理特性发挥重要作用;而局限性硬皮病中周细胞可能主要转分化为肌成纤维细胞,导致其纤维化病理表型。

关键词：瘢痕疙瘩局限性硬皮病周细胞单细胞RNA测序拟时序分析

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糖皮质激素促间充质干细胞的成骨效应

中国组织工程研究 2013年第14期17卷 2625-2632页

作者：董平肖苒中国医学科学院整形外科医院北京市100144

背景:糖皮质激素是有效的免疫抑制和抗炎症药物而广泛应用于临床,然而长期服用后也会引起一些不良反应如骨质疏松症。糖皮质激素通过促进成骨细胞与骨细胞的凋亡,同时抑制间充质干细胞向成骨细胞分化,导致成骨细胞数量减少;然而在一定... 详细信息

背景:糖皮质激素是有效的免疫抑制和抗炎症药物而广泛应用于临床,然而长期服用后也会引起一些不良反应如骨质疏松症。糖皮质激素通过促进成骨细胞与骨细胞的凋亡,同时抑制间充质干细胞向成骨细胞分化,导致成骨细胞数量减少;然而在一定的条件下,糖皮质激素又能够促进间充质干细胞表达成骨细胞标志基因诱导其向成骨方向分化。目的:对以地塞米松为代表的糖皮质激素在间充质干细胞成骨分化中发挥的作用以及可能的分子机制进行综述。方法:由第一作者检索PubMed数据库1978至2012年有关地塞米松和间充质干细胞成骨分化的文献,英文关键词"Mesenchymal stem cell,dexamethasone,osteogenesis,osteoporosis,Runx2,BMP,Noggin,GILZ,glucocorticoid receptor"以不同的组合方式查找,排除重复性的研究,最终保留55篇进行归纳综述。结果与结论:地塞米松能够调节Runx2,Noggin以及亮氨酸拉链蛋白等基因调控间充质干细胞成骨分化。当糖皮质激素作用于间充质干细胞时,可能由糖皮质激素受体介导其生理作用,也可能在糖皮质激素与其受体结合之前就受到11β-羟甾类脱氢酶的调节。另外,生理剂量(10-8mol/L)的地塞米松能促进间充质干细胞成骨分化,药理剂量(≥10-7mol/L)有抑制作用。

关键词：干细胞干细胞学术探讨糖皮质激素地塞米松间充质干细胞成骨分化糖皮质激素受体 Runx2 Noggin 亮氨酸拉链蛋白国家自然科学基金

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非编码RNA对毛囊调控作用的研究进展

医学综述 2022年第16期28卷 3132-3139页

作者：刘瑛肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心北京100144 中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144

随着二代测序技术的进步和生物信息学的发展,非编码RNA(ncRNA)已不再被认为是“转录杂音”,而是以RNA的形式在转录水平、转录后水平以及表观遗传学水平等水平调控基因表达。目前,有关ncRNA在免疫系统疾病、恶性肿瘤中的研究已较为广泛,... 详细信息

随着二代测序技术的进步和生物信息学的发展,非编码RNA(ncRNA)已不再被认为是“转录杂音”,而是以RNA的形式在转录水平、转录后水平以及表观遗传学水平等水平调控基因表达。目前,有关ncRNA在免疫系统疾病、恶性肿瘤中的研究已较为广泛,但对于其在毛囊中的作用尚不清楚。许多信号通路和分子参与毛囊的形态发生和再生,如Wnt/β联蛋白、音猬因子和骨形态发生蛋白等。非编码RNA,尤其是微RNA、长链ncRNA和环状RNA,通过调控这些信号通路,在毛囊发育、分化和毛发周期中具有重要作用。未来,应深入探索毛囊相关ncRNA的作用及调控机制。

关键词：毛囊发育非编码RNA 微RNA 长链非编码RNA 环状RNA

间质细胞双尾C基因条件性敲除小鼠模型建立及其表型分析

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中华整形外科杂志 2023年第9期39卷 1003-1009页

作者：尹艳爽李秀杨志岗马世泽曹焱肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心、中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院病理科北京100144

目的构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型,并对其表型进行分析。方法将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交,获得子代小鼠,饲养1~2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA,经PCR扩增及... 详细信息

目的构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型,并对其表型进行分析。方法将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交,获得子代小鼠,饲养1~2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后,在DNA水平检测小鼠基因型;选取经鉴定后生长至3周龄的Bicc1基因条件性敲除小鼠(实验组)、野生型小鼠(对照组)各3只进行后续实验:通过腹腔注射他莫昔芬进行诱导敲除Bicc1基因,于1周后取小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤及脂肪组织,一部分组织通过实时定量PCR(RT-qPCR)鉴定其中的Bicc1 mRNA表达水平;另一部分组织以10%多聚甲醛固定,随后进行HE染色和Masson染色,在光镜下观察分析。应用SPSS 28.0软件对数据进行分析,组间比较采用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果通过繁育获得间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠,基因型为Bicc1^(f/f)Cre+/-,野生型小鼠基因型为Bicc1^(f/f)Cre^(-/-);RT-qPCR检测结果显示,实验组小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤、脂肪组织中Bicc1 mRNA表达水平均显著低于对照组(P均<0.01);HE染色和Masson染色显示,与对照组相比,实验组小鼠肾小球萎缩,肾小囊形状不规则,部分肾小囊消失;骨骼肌纤维排列疏松散乱,肌纤维堆积不致密;皮肤及脂肪组织未见明显差别。结论成功建立了间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠模型,可以为研究Bicc1基因在组织器官间质细胞中的作用提供动物模型;3周龄小鼠间质细胞中敲除Bicc1后1周,其肾脏和骨骼肌发生病理性改变。

关键词：小鼠,基因敲除间质细胞双尾C基因条件性基因敲除他莫昔芬

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干细胞与整形外科

中华整形外科杂志 2019年第4期35卷 319-323页

作者：肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心 100144

总结了近年来表皮干细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞和诱导多能干细胞等在皮肤、骨和软骨再生和修复中的应用研究进展,阐述了干细胞技术在整形外科的发展方向。

关键词：干细胞皮肤骨软骨再生修复

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皮肤中的上皮间质转化

中华医学杂志 2013年第14期93卷 1118-1120页

作者：焦虎肖苒中国医学科学院整形外科医院研究中心北京100144

上皮间质转化（EMT）是指上皮细胞转变成具有间充质特性细胞的过程，其最早在胚胎发育过程中被发现，出生后在创伤修复、肿瘤转移、组织纤维化等生物过程中发挥作用。现就与皮肤EMT相关的研究综述如下。

关键词：上皮间质转化皮肤胚胎发育过程上皮细胞组织纤维化创伤修复肿瘤转移 EMT

猪耳廓及关节来源软骨细胞构建组织工程软骨的实验研究

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中华整形外科杂志 2014年第1期30卷 33-40页

作者：康宁刘霞曹谊林肖苒中国医学科学院整形外科医院研究中心北京100144

【摘要】目的探讨耳廓及关节来源软骨细胞构建组织工程软骨的差异。方法分离培养健康长枫杂交猪耳廓、关节来源软骨细胞及骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs），分别以软骨细胞单独接种或与BMSCs1：1混合接种聚... 详细信息

【摘要】目的探讨耳廓及关节来源软骨细胞构建组织工程软骨的差异。方法分离培养健康长枫杂交猪耳廓、关节来源软骨细胞及骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs），分别以软骨细胞单独接种或与BMSCs1：1混合接种聚羟基乙酸／聚乳酸（Polyglycolicacid／Polylacticacid，PGA／PLA）支架2种模式构建组织工程软骨。针对每种构建模式按软骨细胞来源随机分为4组，每组4例样本，分别为耳廓软骨细胞组、关节软骨细胞组、耳廓软骨细胞＋BMSCs1：1共培养组、关节软骨细胞＋BMSCs1：1共培养组。于体外培养8周、裸鼠皮下植入6周后分别取材进行大体观察，比较单独培养或共培养构建过程中4组样本的组织厚度和湿重，HE、番红O、lI型胶原免疫组化和丽春红／维多利亚蓝染色比较软骨组织形成情况，Real—timePCR检测软骨相关基因的表达，采用两组独立样本f检验进行统计学分析。结果体外培养8周，各组均能形成软骨样结构，只有耳廓软骨细胞＋BMSCs组可见少量弹性纤维分泌；单独应用关节软骨细胞构建的组织工程软骨厚度为（3．12±0．24）mm，较耳廓软骨细胞组平均增厚38．1％（P〈0．05），关节软骨细胞＋BMSCs1：1共培养构建的组织工程软骨厚度为（2．41±0．21）mm，较耳廓软骨细胞＋BMSCs组平均增厚19．3％（P〈0．05）；体内重塑6周后，耳廓软骨细胞组及耳廓软骨细胞＋BMSCs组均可见大量弹性纤维，关节软骨细胞组及关节软骨细胞＋BMSCs组均形成了典型的透明软骨结构并发生了骨化，X型胶原和MMPl3的表达水平均显著上调（P〈0．05）。因此体内重塑6周后，耳廓软骨细胞单独培养或与BMSCs共培养均可形成弹性软骨结构，关节软骨细胞单独培养或与BMSCs共培养可形成透明软骨结构。结论应用不同组织来源软骨细胞构建的组织工程软骨，回植体内环境后可重塑相应来源的组织学特征。

关键词：【关键词】软骨细胞骨髓间质干细胞组织工程

脂肪组织来源间充质干细胞生物学特性及与肥胖的关系

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中国细胞生物学学报 2014年第2期36卷 236-241页

作者：吕涛肖苒曹谊林中国医学科学院整形外科医院研究中心北京100144

脂肪组织来源间充质干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)因储量丰富、获取简便、扩增迅速、可被诱导多向分化、免疫原性低等诸多优点受到广泛关注,为多种疾病的治疗提供了新思路。肥胖及其相关疾病的发生率日益上升,严重... 详细信息

脂肪组织来源间充质干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)因储量丰富、获取简便、扩增迅速、可被诱导多向分化、免疫原性低等诸多优点受到广泛关注,为多种疾病的治疗提供了新思路。肥胖及其相关疾病的发生率日益上升,严重影响人类的生存质量。ADSCs在肥胖的发生和发展过程中起着不可忽视的作用。该文着重对近十年ADSCs的生物学特性研究进展及其在肥胖发生与发展中的作用进行综述,为其早日应用于临床实践提供参考。

关键词：脂肪组织来源间充质干细胞(ADSCs) 血管周膜细胞免疫表型肥胖因子肥胖