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Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠体外受精实验研究

中国实验动物学报 2020年第3期28卷 351-357页

作者：张帆安学芳赵赫李丽肖宇宙中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

目的探索两种I型干扰素受体缺失对于小鼠体外受精的影响并对体外受精条件进行优化。方法对两种Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠(IFN-αR^-/-、IFN-α/βR^-/-)及背景野生型小鼠(C57BL/6)分别进行体外受精及胚胎移植,每组超排5只小鼠,3次重复,记... 详细信息

目的探索两种I型干扰素受体缺失对于小鼠体外受精的影响并对体外受精条件进行优化。方法对两种Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠(IFN-αR^-/-、IFN-α/βR^-/-)及背景野生型小鼠(C57BL/6)分别进行体外受精及胚胎移植,每组超排5只小鼠,3次重复,记录相关数据,分析干扰素受体缺失是否对小鼠体外受精存在影响。分别将两种Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠配子与C57BL/6小鼠配子进行体外受精杂交试验,每组5只小鼠,3次重复,探讨Ⅰ型干扰素受体缺失对雌雄配子体外受精的影响。同时,优化体外受精条件,探索提高受精率技术方法,每组5只小鼠,三次重复。结果两种Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠平均体外受精率低于背景品系C57BL/6小鼠,组间差异具有显著性(P<0.05)。干扰素α受体缺失小鼠体外受精率高于干扰素α、β受体双缺失小鼠体外受精率,组间差异具有显著性(P<0.05)。两种Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠的精子与C57BL/6小鼠卵细胞体外受精率均高于其卵细胞与C57BL/6小鼠精子的体外受精率,组间差异具有显著性(P<0.05)。通过延长精子获能时间至1 h或在获能液及受精液中加入1 mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)能够提高体外体外受精率,相应组间差异具有显著性(P<0.05)。结论 Ⅰ型干扰素受体缺失可能导致相应品系小鼠体外受精率降低,而且对卵细胞的影响较精子的影响更为显著,通过适当延长精子获能时间或改变获能及受精液成分,能够提高体外受精率。

关键词： Ⅰ型干扰素受体小鼠体外受精

还原型谷胱甘肽在AG129小鼠生物净化及快速繁殖中的应用

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中国实验动物学报 2020年第1期28卷 96-99页

作者：张帆安学芳赵赫李丽肖宇宙中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

目的AG129小鼠自然产仔困难,采用常规体外受精试剂无法获得足够数量用于移植的胚胎。使用还原型谷胱甘肽(GSH)调节小鼠体外受精液成分,完成对AG129小鼠体外受精,为体外受精困难品系的基因工程小鼠生物净化及快速扩繁提供思路。方法设计... 详细信息

目的AG129小鼠自然产仔困难,采用常规体外受精试剂无法获得足够数量用于移植的胚胎。使用还原型谷胱甘肽(GSH)调节小鼠体外受精液成分,完成对AG129小鼠体外受精,为体外受精困难品系的基因工程小鼠生物净化及快速扩繁提供思路。方法设计3个含不同浓度GSH的精子获能及受精液的实验组,浓度分别0.5、1、2 mmol/L,1个不含GSH的精子获能液及受精液的对照组,每组超排5只小鼠,重复3次。结果不同GSH实验组及对照组间平均受精率差异具有显著性(P<0.05),在精子获能及受精液中GSH浓度为1 mmol/L时,AG129小鼠体外受精效果最佳,平均受精率为(43.35±1.76)%,胚胎状态良好。将获得胚胎移植受体小鼠,受体动物均妊娠并顺利产仔。结论体外受精液中的GSH浓度为1 mmol/L时,能够显著提高AG129小鼠体外受精效率,为类似体外受精困难品系的小鼠生物净化及快速繁殖提供解决方案。

关键词： AG129小鼠谷胱甘肽生物净化快速繁殖

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3D打印病毒模型(上)

百科知识 2019年第1期 34-35页

作者：高丁肖宇宙

利用3D打印技术以及病毒结构生物学的研究成果,中国科学院武汉病毒研究所的科学家们制作了几种有代表性的病毒模型,为我们呈现了直观生动的病毒形貌。烟草花叶病毒(TMV)是人类发现的第一种病毒。它是一种单链RNA

关键词：黄热病毒病毒模型 RNA

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3D打印病毒模型(下)

百科知识 2019年第2期 36-37页

作者：高丁肖宇宙

利用3D打印技术以及病毒结构生物学的研究成果,中国科学院武汉病毒研究所的科学家们制作了几种有代表性的病毒模型,为我们呈现了直观生动的病毒形貌。从左至右分别为登革热病毒,西尼罗河病毒,腺病毒,噬菌体(头部),细小病毒,疱疹病毒,乙... 详细信息

利用3D打印技术以及病毒结构生物学的研究成果,中国科学院武汉病毒研究所的科学家们制作了几种有代表性的病毒模型,为我们呈现了直观生动的病毒形貌。从左至右分别为登革热病毒,西尼罗河病毒,腺病毒,噬菌体(头部),细小病毒,疱疹病毒,乙肝病毒(核衣壳)。

关键词：病毒模型核衣壳乙肝病毒

新型夹竹桃天蛾质型多角体病毒的分离与初步鉴定

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病毒学报 2016年第5期32卷 619-626页

作者：占智高肖宇宙刘卓荣张稳超王金昌王洪秀关丽梅杨罡黄朝靳亮江西省科学院微生物研究所南昌330029 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071 江西省农业科学院农业应用微生物研究所南昌330200

为了开发新型的夹竹桃天蛾的生物杀虫剂,本文从自然死亡的夹竹桃天蛾幼虫分离到病原微生物。通过电镜观察、FLAC(Full Length Amplification of cDNAs)技术以及病原体的基因组S2和S10片段的同源性分析,初步确认该病原体是一种质型多角... 详细信息

为了开发新型的夹竹桃天蛾的生物杀虫剂,本文从自然死亡的夹竹桃天蛾幼虫分离到病原微生物。通过电镜观察、FLAC(Full Length Amplification of cDNAs)技术以及病原体的基因组S2和S10片段的同源性分析,初步确认该病原体是一种质型多角体病毒(Daphnis nerii Cypovirus,DnCPV))。该病毒基因组电泳分析显示病毒基因组由10条dsRNA组成,大小在89 2bp和(约)4 160bp之间,其条带大小与现有的22类型均不相同。采用FLAC技术克隆了一种该CPV的基因组cDNA,并完成了基因组S2片段和S10片段序列测定工作。测序结果显示,DnCPV基因组S2片段编码RNA聚合酶,S10片段编码多角体蛋白。两者末端保守序列相同,正链5’端和3’端分别存在末端保守序列5’AGUCAAA·AGC3’。基于RNA聚合酶和多角体蛋白的氨基酸序列的系统发育分析显示该质型多角体病毒与19型和5型质型多角体病毒有较近的亲缘关系,但是电泳型上存在明显差异。因此推测该病毒是一种多角体病毒新类型,暂命名为夹竹桃质型多角体病毒南昌株(DnCPV-NC)。

关键词：夹竹桃天蛾质型多角体病毒分离与鉴定 FLAC

分月扇舟蛾颗粒体病毒的形态和限制性内切酶图谱分析

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华中农业大学学报 2004年第6期23卷 616-619页

作者：汤显春彭辉银张小霞赵淑玲肖宇宙中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

将从自然罹死的分月扇舟蛾Closteraanastomosis (L .)幼虫中分离到的一种颗粒体病毒 (简称CaL GV)置于电子显微镜下观察 ,其形态为椭圆形 ,大小为 (30 4 .5 3× 139.0 9)nm ;经碱解病毒粒子为杆状 ,大小为(2 4 6 .2 1× 6 1.36 )nm ;经... 详细信息

将从自然罹死的分月扇舟蛾Closteraanastomosis (L .)幼虫中分离到的一种颗粒体病毒 (简称CaL GV)置于电子显微镜下观察 ,其形态为椭圆形 ,大小为 (30 4 .5 3× 139.0 9)nm ;经碱解病毒粒子为杆状 ,大小为(2 4 6 .2 1× 6 1.36 )nm ;经酚∶氯仿∶异戊醇 (2 5∶2 4∶1)抽提 ,氯仿∶异戊醇 (2 4∶1)洗涤 ,2倍体积无水乙醇沉淀 ,抽提的核酸经EcoRⅠ ,HindⅢ ,NcoⅠ ,PstⅠ限制型内切酶酶解 ,1×TAE缓冲液 ,0 .8%琼脂糖凝胶电泳 ,获得CaLGV核酸酶解图谱。以λDNA HindⅢ酶解片段在凝胶中的迁移率与相应片段分子量的对数值做标准曲线 ,求得CaLGV平均分子量为 10 0 .4 8kb ,核酸含量为OD2 60 /OD2 80 =1.89。

关键词：分月扇舟蛾颗粒体病毒形态限制性内切酶

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ABSL-2实验室管理技术要点

ABSL-2实验室管理技术要点

马尾松毛虫质多角体病毒NS5蛋白的表达和功能初步分析

第十届中国实验动物科学年会

作者：安学芳张帆朱幼玲肖宇宙中国科学院武汉病毒研究所实验动物中心

目的动物生物安全二级(ABSL-2)实验室是很多种危害生物因子科研活动所必需的感染性动物实验室,目前国家对ABSL-2实验室没有实行认证监督管理,只须在地方卫生局进行备案,监督力度不大。因此,在ABSL-2实验室运行管理过程中,工作人员和管... 详细信息

目的动物生物安全二级(ABSL-2)实验室是很多种危害生物因子科研活动所必需的感染性动物实验室,目前国家对ABSL-2实验室没有实行认证监督管理,只须在地方卫生局进行备案,监督力度不大。因此,在ABSL-2实验室运行管理过程中,工作人员和管理人员必须具有高度的生物安全意识和责任感,在实验室设施设备硬件条件的保障作用下,尚需强化管理,从组织管理机构、人员、设施设备、实验操作过程、物品以及意外情况处理等方面细化管理,加强防护,防止危害生物因子泄露,以保证工作人员以及社会的安全与人类健康。

关键词： ABSL-2实验室生物安全管理技术

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国病毒学 2006年第4期21卷 401-404页

作者：张万菊赵淑玲张小霞汤显春肖宇宙梅春蕾孙修炼彭辉银中国科学院武汉病毒研究所病毒分子生态学实验室

马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株第9个片段编码非结构蛋白NS5,利用pET-32a(+)载体带有组氨酸标记的重组蛋白进行表达,获得纯化的重组蛋白。利用凝胶电泳阻滞检测试验(EMSA)检测蛋白和核酸的结合作用,结果表明NS5蛋白能与病毒基因组dsRN... 详细信息

马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株第9个片段编码非结构蛋白NS5,利用pET-32a(+)载体带有组氨酸标记的重组蛋白进行表达,获得纯化的重组蛋白。利用凝胶电泳阻滞检测试验(EMSA)检测蛋白和核酸的结合作用,结果表明NS5蛋白能与病毒基因组dsRNA结合。

关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV) 原核表达凝胶迁移阻滞试验(EMSA)

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甜菜夜蛾室内人工饲养技术方法的建立

实验动物科学 2014年第2期31卷 44-46页

作者：肖宇宙安学芳中国科学院武汉病毒研究所实验动物中心武汉430071

随着生物农药的不断发展,许多昆虫也逐步加入到实验动物行列中,甜菜夜蛾在农业及生命科学相关领域的研究中作为科研材料发挥着重要的作用。利用合理的人工配方饲料,通过室内长期的继代饲养繁育,确定了甜菜夜蛾生活史中各个阶段温度、湿... 详细信息

随着生物农药的不断发展,许多昆虫也逐步加入到实验动物行列中,甜菜夜蛾在农业及生命科学相关领域的研究中作为科研材料发挥着重要的作用。利用合理的人工配方饲料,通过室内长期的继代饲养繁育,确定了甜菜夜蛾生活史中各个阶段温度、湿度和光照等技术参数,掌握了甜菜夜蛾室内人工饲养管理的关键技术,从而建立了适宜甜菜夜蛾生长发育以及连续传代繁育的环境设施条件和技术方法。目前,甜菜夜蛾已经在室内连续传代超过100代,其产卵率、孵化率、幼虫成活率、化蛹率和蛹质量以及成虫羽化率等都一直处于稳定状态,种群未出现退化现象。

关键词：实验昆虫甜菜夜蛾室内人工饲养技术