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副猪格拉瑟菌Apd蛋白的功能及其在致病中作用机理的研究

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副猪格拉瑟菌Apd蛋白的功能及其在致病中作用机理的研究

作者：肖坤雪华中农业大学

学位级别：硕士

副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)可以引起格拉瑟病(Gl(?)sser’s disease),引起猪群多发性纤维素性浆膜炎,包括关节炎和脑膜炎,GPS引发的疾病对养猪业造成了巨大的经济损失。Apd被认为是副猪格拉瑟菌的一种黏附素蛋白,可能是... 详细信息

副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)可以引起格拉瑟病(Gl(?)sser’s disease),引起猪群多发性纤维素性浆膜炎,包括关节炎和脑膜炎,GPS引发的疾病对养猪业造成了巨大的经济损失。Apd被认为是副猪格拉瑟菌的一种黏附素蛋白,可能是副猪格拉瑟菌的重要毒力因子,但其功能与如何参与副猪格拉瑟菌致病尚不清楚。本研究以猪肺泡巨噬细胞3D4/21为试验模型,通过构建apd基因缺失株和原核表达重组蛋白rApd,利用Co-IP、Western Blot、细胞免疫荧光研究黏附蛋白Apd在细胞膜上的互作蛋白,利用q-PCR并结合以断乳仔猪为动物模型的感染试验探究Apd对副猪格拉瑟菌致病性的影响,为揭示副猪格拉瑟菌致病机理提供理论依据。研究主要有以下三个方面:1、副猪格拉瑟菌Apd参与细菌对机体的黏附与侵袭构建apd缺失株及其回补菌株,通过体外黏附与侵袭试验,可以发现缺失apd后细菌对细胞的黏附与侵袭能力显著减弱,并通过仔猪动物试验也发现该现象,缺失株感染动物后,对组织载菌量、病理切片等进行分析发现apd缺失株对机体的入侵能力、致病力减弱,这表明Apd参与细菌对宿主的黏附。2、副猪格拉瑟菌Apd与宿主vimentin之间有相互作用为探究Apd在细胞膜上互作蛋白,使用原核表达系统表达重组蛋白rApd,利用Co-IP擭取靶蛋白,经蛋白质谱分析,发现细胞膜上vimentin与Apd相互作用,并利用Co-IP、Western Blot和细胞免疫荧光证实了副猪格拉瑟菌Apd与细胞vimentin相互作用。另一方面vimentin还以分泌形式被细胞分泌到胞外,本研究利用Co-IP及Western Blot进一步证实了副猪格拉瑟菌Apd蛋白能够与血清中vimentin相互作用。3、副猪格拉瑟菌Apd基因影响细菌致病性通过测定野生株CF7066、缺失株CF7066-Δapd和回补株CF7066-CΔapd生长曲线,发现缺失株增殖能力显著减弱,体外生物被膜试验也表明基因apd参与了细菌生物被膜形成的调控。在动物感染试验中我们观察到与野生株比,缺失株CF7066-Δapd感染后的动物病理反应轻微,缺失株致病能力减弱,通过检测三种菌株的几种重要毒力因子在m RNA水平表达量的变化发现缺失apd后,细菌多种重要毒力因子的表达量显著降低,这表明apd影响副猪格拉瑟菌毒力构成。综上所述,本论文发现副猪格拉瑟菌Apd能与宿主vimentin相互作用且Apd参与细菌黏附能力、致病能力的构成。这是少有的对副猪格拉瑟菌Apd蛋白的功能及其在致病中作用的研究。

关键词：副猪格拉瑟菌自转运蛋白 Apd Co-IP Vimentin

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协同共建大中小学思政课一体化建设长效机制

中国高等教育 2024年第7期 33-35页

作者：肖坤湖北商贸学院党委

大中小学思政课一体化建设要有系统思维,在师资队伍建设方面,构建合作培养机制;在教学数据方面,可通过大中小学思政课一体化建设平台实现共享,对学生思想政治、道德素养进行持续跟踪分析,并以此作为大中小学思政课教学持续改进的依据;... 详细信息

大中小学思政课一体化建设要有系统思维,在师资队伍建设方面,构建合作培养机制;在教学数据方面,可通过大中小学思政课一体化建设平台实现共享,对学生思想政治、道德素养进行持续跟踪分析,并以此作为大中小学思政课教学持续改进的依据;在教学内容方面,针对大中小学生的年龄特点进行设计与谋划,注重完善现有的实践教育教学基地,提高思政课的针对性和实效性。

关键词：大中小学思政课一体化建设协同共建

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呼吸与危重症年度进展2023

中华结核和呼吸杂志 2024年第1期47卷 39-43页

作者：肖坤解立新解放军总医院呼吸与危重症医学部北京100039

本文回顾国内外呼吸危重症领域在2023年度(2022年10月1日到2023年9月30日)的临床研究进展。2023年发布的ARDS新全球定义做了较大修改:纳入SpO_(2)/FiO_(2)作为ARDS诊断标准,新增经鼻高流量湿化氧疗治疗参数作为不插管患者ARDS诊断依据,... 详细信息

本文回顾国内外呼吸危重症领域在2023年度(2022年10月1日到2023年9月30日)的临床研究进展。2023年发布的ARDS新全球定义做了较大修改:纳入SpO_(2)/FiO_(2)作为ARDS诊断标准,新增经鼻高流量湿化氧疗治疗参数作为不插管患者ARDS诊断依据,明确无创正压通气下PEEP≥5 cmH 2O诊断不插管患者ARDS的必要性,并增加超声诊断价值等;床旁电阻抗、跨肺压和重症超声为危重患者个体化评估提供有效手段;终末肺泡死腔分数、肠道微生态失衡、ICU获得性虚弱等是危重症预后重要预警指标;基于大数据建立机器学习模型可有效预测危重症预后;ECMO联合俯卧位可改善患者预后;认知障碍、疲劳等是危重症患者出院后最常见的持续症状;对肺损伤特定细胞亚型受体进行干预可能是未来肺损伤组织修复个体化治疗的靶点。

关键词：临床研究进展个体化治疗危重症患者出院后 PEEP 组织修复肺损伤无创正压通气

基于国际人才培养的化学工程翻译教学革新对策

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化学工程 2022年第11期50卷 I0013-I0014页

作者：肖坤雪邓雪梅重庆第二师范学院外国语言文学学院重庆400065

近年来,随着经济全球化与科技全球化进程的不断迈进,工业社会分工越来越呈现跨国家跨地区发展,国际垂直分工越来越精细化,整个世界在工业生产和发展中被紧密连接,逐渐形成一个有机的整体。在这种生产全球化的趋势下,各行各业的发展均需... 详细信息

近年来,随着经济全球化与科技全球化进程的不断迈进,工业社会分工越来越呈现跨国家跨地区发展,国际垂直分工越来越精细化,整个世界在工业生产和发展中被紧密连接,逐渐形成一个有机的整体。在这种生产全球化的趋势下,各行各业的发展均需要充分与世界发展局势接轨,如学习先进生产技术、广泛融入贸易群体、积极贡献技术力量等,这些都是一个行业在迈向世界的过程中所必须经历的阶段。

关键词：先进生产技术生产全球化经济全球化工业生产化学工程翻译教学精细化社会分工

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彝族创世神话中的华夏认同

民族学刊 2024年第3期 115-121+141页

作者：肖坤冰吉祥西南民族大学民族学与社会学学院

中国各少数民族的英雄史诗、创世神话等不仅表达了各民族的世界观、宇宙观，也从“华夏边缘”反映出本民族与汉族及其他周边民族的交往、交流和交融的历史。在我国西南民族地区流传的口头传统中，有大量以“同源共祖”为主题的英雄史诗... 详细信息

中国各少数民族的英雄史诗、创世神话等不仅表达了各民族的世界观、宇宙观，也从“华夏边缘”反映出本民族与汉族及其他周边民族的交往、交流和交融的历史。在我国西南民族地区流传的口头传统中，有大量以“同源共祖”为主题的英雄史诗、创世神话、建寨传说和叙事长诗等。这些口头传统是在少数民族内部自发形成的、超越血缘和地域的共同体认同。在西南横断山区，汉、藏、羌、彝等民族和睦相处，各民族之间的交流互动十分活跃。因此，在彝族的创世神话中，既包含着彝族先民的本民族记忆，也包含着彝族与周边藏、羌、汉等民族交往的历史记忆。同时，在新的时代背景下，彝族通过对神话的“复述”和重新“叙事”,不断调整和重塑与其他周边民族的关系，这使古老的神话在新时代焕发出新的生命力。彝族创世神话中所体现出的朴素的华夏认同观念将有助于进一步凝聚与巩固中华民族共同体意识。

关键词：彝族创世神话同源共祖华夏认同中华民族共同体意识

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人类学观“茶”:我的田野与学术

民族艺术 2024年第2期 5-13页

作者：肖坤冰西南民族大学民族学与社会学学院西南民族大学西南民族研究院

在人类学学科史上,人类学者对人与物之间的关系探讨经历了物作为一种“客体之物”到人与物相互交融的过程。回顾从硕士研究生求学阶段到成长为一名人类学者、从中国西南到海外田野的经历,个人以茶为载体的学术经历正体现了物质亲密(mate... 详细信息

在人类学学科史上,人类学者对人与物之间的关系探讨经历了物作为一种“客体之物”到人与物相互交融的过程。回顾从硕士研究生求学阶段到成长为一名人类学者、从中国西南到海外田野的经历,个人以茶为载体的学术经历正体现了物质亲密(material intimacies)对人的社会行为的影响。当学者作为主体进行“田野调茶”时,茶也以其“物质能动性”(material agency)塑造着人类学者的精神世界。在某种程度上,中国独特的茶文化遗产塑造了学者身边的人文环境。

关键词：茶研究物研究饮食人类学具身化风土

新文科背景下英语专业口译课程教学探索与思考

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重庆第二师范学院学报 2023年第1期36卷 117-121页

作者：肖坤雪重庆第二师范学院外国语言文学学院重庆400067

分析英语专业口译课程教学的现实瓶颈和成因,在新文科背景下探索英语专业口译课程教学的关键问题,试着提出教学效果的提升策略和保障措施,意在及时发现英语口译课程教学存在的问题,在全面改革和系统优化中增强对学生口译能力的培养。

关键词：口译课程教学教学探索教学思考英语专业新文科

新发展阶段我国县域全民健身公共服务协同治理的特点、难点与路径

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沈阳体育学院学报 2024年第1期43卷 23-29页

作者：肖坤鹏刘长江西安交通大学体育中心陕西西安710049

进入新发展阶段,对我国县域全民健身公共服务协同治理特点的深刻理解决定了共同富裕道路上我国县域构建更高水平全民健身公共服务体系的未来走向。运用文献资料、实证调研等研究方法探究新发展阶段我国县域全民健身公共服务协同治理的... 详细信息

进入新发展阶段,对我国县域全民健身公共服务协同治理特点的深刻理解决定了共同富裕道路上我国县域构建更高水平全民健身公共服务体系的未来走向。运用文献资料、实证调研等研究方法探究新发展阶段我国县域全民健身公共服务协同治理的特点、难点与路径。研究认为,协同目标的共识性、协同主体的多元性、协同方式的差异性是新发展阶段我国县域全民健身公共服务协同治理的特点。难点:相关政策法规不健全,协同治理难以实现有法可依;治理主体缺少合作,协同治理的体制仍未形成;社会力量参与不足,协同治理难以形成多元共治格局;评估机制不完善,协同治理的评估结果不实用。路径:完善相关法律法规,强化协同治理的制度供给;发挥政府主导作用,完善协同治理的管理体制;深化治理主体改革,优化协同治理的服务机制;发挥第三方评估机构的作用,健全协同治理的评估机制。

关键词：新发展阶段县域共同富裕全民健身公共服务协同治理

城乡全民健身公共服务融合发展:县域推进研究的新视角

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体育文化导刊 2024年第3期 53-59页

作者：肖坤鹏刘长江西安交通大学体育中心西安710049

运用文献资料、逻辑分析等方法,以县域推进为研究视角探讨城乡全民健身公共服务融合发展的意义、困境,并提出发展路径,促进乡村振兴与新型城镇化协同实施。意义:畅通资源要素自由流动,促进公共服务功能互补,推动社会经济共同繁荣。困境... 详细信息

运用文献资料、逻辑分析等方法,以县域推进为研究视角探讨城乡全民健身公共服务融合发展的意义、困境,并提出发展路径,促进乡村振兴与新型城镇化协同实施。意义:畅通资源要素自由流动,促进公共服务功能互补,推动社会经济共同繁荣。困境:全民健身工作制度尚需完善,多元主体治理能力有待提升,市场组织参与机制亟待建立,体育财力投入力度仍需加强。路径:完善县域全民健身工作制度,发挥典型案例示范引领作用,打通市场组织参与机制堵点,强化基层体育治理财力投入。

关键词：群众体育全民健身公共服务城乡融合县域推进