检索结果-南通市图书馆

新工科背景下“食品加工综合实训”实验教学改革探讨

科教导刊（电子版） 2024年第8期 24-26页

作者：朱峰康美玲李媛媛肖圣燕枣庄学院山东枣庄 277101

实验课程是培养学生批判性思维和解决实际问题能力的良好平台.在双创教改的背景下,高校本科细胞生物学实验课程的教学与评估方式的改革成为提高学生实践能力和创新精神的关键一环.文章将深入探讨这一改革的背景、目的、实施策略以及可... 详细信息

实验课程是培养学生批判性思维和解决实际问题能力的良好平台.在双创教改的背景下,高校本科细胞生物学实验课程的教学与评估方式的改革成为提高学生实践能力和创新精神的关键一环.文章将深入探讨这一改革的背景、目的、实施策略以及可能面临的挑战,以及改革所带来的实践效果.以期推动创新教育、促进产学研融合、激发创业热情、推动教育体制改革,为培养更符合社会需求的人才打下坚实基础.

关键词：双创教育教学改革细胞生物学课程实验

来源：博看期刊评论

在线全文

博看期刊

学校读者我要写书评

暂无评论

农产品加工 2024年第5期 110-112页

作者：冯晓慧朱峰吴瑶瑶肖圣燕吕慧枣庄学院山东枣庄277160

实践教学是新工科背景下高教必不可少的核心内容,针对“食品加工综合实训”课程中存在的问题,从教学模式、教学手段、教学内容、考核方式、学赛融合等方面进行改革探索,课程以成果为导向,结合小组合作学习教学方法,将创新设计融入教学项... 详细信息

实践教学是新工科背景下高教必不可少的核心内容,针对“食品加工综合实训”课程中存在的问题,从教学模式、教学手段、教学内容、考核方式、学赛融合等方面进行改革探索,课程以成果为导向,结合小组合作学习教学方法,将创新设计融入教学项目,充分考虑以学生为中心,注重培养学生团队协作能力及工程实践能力,通过多维度、全方面的考核制度构建创新型实践教学体系,目的在于提高学生实践创新能力,实现对于应用型创新型高素质人才培养的目标。

关键词：食品加工综合实训实践教育教学改革创新

桑褐斑壳丰孢菌pmcamk基因的克隆与表达时相分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

蚕业科学 2023年第1期49卷 15-22页

作者：肖圣燕程隆基许凯蔡威江秀均白兴荣朱峰枣庄学院食品科学与制药工程学院山东枣庄277160 枣庄学院生命科学学院山东枣庄277160 云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所云南蒙自661101

钙/钙调素依赖性蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent protein kinases, CAMK)作为钙信号途径中的关键蛋白,在多种细胞过程中发挥重要作用。以桑褐斑壳丰孢菌(Phloeospora maculans)为研究对象,利用反转录PCR结合RACE技术克隆桑褐斑... 详细信息

钙/钙调素依赖性蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent protein kinases, CAMK)作为钙信号途径中的关键蛋白,在多种细胞过程中发挥重要作用。以桑褐斑壳丰孢菌(Phloeospora maculans)为研究对象,利用反转录PCR结合RACE技术克隆桑褐斑壳丰孢菌(Phloeospora maculans)钙/钙调素依赖性蛋白激酶基因pmcamk的序列全长,利用荧光定量PCR技术,研究pmcamk在桑褐斑壳丰孢菌侵染宿主后不同时期以及其分生孢子在水中萌发过程中的表达模式,以期深入了解桑褐斑壳丰孢菌Ca^(2+)信号转导途径与孢子萌发之间的关系。结果表明,pmcamk的cDNA序列全长为1 422 bp,由1 221 bp的开放阅读框和201 bp的3′非翻译区组成,GenBank登录号为MK713976。pmcamk开放阅读框共编码406个氨基酸残基,蛋白质分子质量约为45.5 kD,等电点为6.28。系统进化树分析表明桑褐斑壳丰孢菌与小麦叶枯病菌的CAMK同源性最高,属于CAMKⅠ类群并且聚类在同一进化分支。在桑褐斑壳丰孢菌侵染桑树的早期阶段(0.25、 0.5、1 d),pmcamk的表达量呈上升趋势,在侵染后2、3、4、6 d其表达量逐渐下降。这与不同时间阶段桑褐斑壳丰孢菌在水中萌发过程中pmcamk的表达趋势基本一致,推测PmCAMK在桑褐斑病菌孢子萌发过程中发挥着重要作用。

关键词：桑褐斑病桑褐斑壳丰孢菌钙/钙调素依赖性蛋白激酶基因克隆表达时相

结合雨课堂和PBL教学法的细胞工程课程教学探索

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

教育信息化论坛 2023年第17期 12-14页

作者：朱峰肖圣燕冯晓慧杨阳枣庄学院生命科学学院山东枣庄277160

细胞工程是非常年轻且富有活力的学科,是生物技术专业开设的核心课程之一。为了有效激发学生的学习兴趣及学习主动性,培养学生的自主探究能力、综合分析能力和创新精神,使学生适应社会发展的需要,针对细胞工程传统教学中存在的问题,基... 详细信息

细胞工程是非常年轻且富有活力的学科,是生物技术专业开设的核心课程之一。为了有效激发学生的学习兴趣及学习主动性,培养学生的自主探究能力、综合分析能力和创新精神,使学生适应社会发展的需要,针对细胞工程传统教学中存在的问题,基于雨课堂和PBL教学法,从课堂教学内容、课堂教学模式、实践教学及学业评价方式等方面,对细胞工程课程教学展开探索与实践。

关键词：细胞工程 PBL教学法教学改革实践教学考核评价

家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25互作蛋白的筛选及Endoreticulatus sp.Zhenjiang α-微管蛋白的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25互作蛋白的筛选及Endoreticulatus sp....

作者：肖圣燕江苏科技大学

学位级别：硕士

微孢子虫是一类专营细胞内寄生的单细胞真核生物,该病原体具有广泛的寄主域,从原生生物到哺乳动物,包括人类都能够被其感染。家蚕微粒子病作为蚕桑业中的重要病害,每年给蚕业生产造成巨大的经济损失。随着N.bombycis基因组学、相关分子... 详细信息

微孢子虫是一类专营细胞内寄生的单细胞真核生物,该病原体具有广泛的寄主域,从原生生物到哺乳动物,包括人类都能够被其感染。家蚕微粒子病作为蚕桑业中的重要病害,每年给蚕业生产造成巨大的经济损失。随着N.bombycis基因组学、相关分子侵染机制以及检测防控技术体系构建等研究工作的开展与推进,近10年来,有关N.bombycis的研究取得了较大的进展。但是,明确N.bombycis的侵染机制,攻克微粒子病这一顽症,目前依然是世界蚕业界研究领域的重点和难点。微孢子虫的孢壁位于孢子的最外层,主要由蛋白质和几丁质构成,孢壁蛋白是孢子壁的主要组成成分。在对N.bombycis孢壁蛋白的研究中,发现并获得了与侵染寄主、稳定孢壁结构及增殖等活动相关的重要蛋白质。目前,已发现并报道的N.bombycis孢壁蛋白主要有:SWP5、SWP11、SWP12、SWP16、SWP25、SWP26、SWP30与SWP32。其中,SWP5不仅能够与微孢子虫极管相互作用,还参与细胞吞噬作用;SWP26参与了N.bombycis对宿主家蚕的粘附过程,进而影响了孢子对宿主细胞的侵染,该蛋白中的肝素结合基序(heparin binding motif,HBM)在介导N.bombycis孢子对宿主细胞的粘附和侵染中起到了重要作用。N.bombycis孢壁蛋白SWP25位于N.bombycis孢子壁的内壁,有一个含有20个氨基酸的信号肽。此外,该孢壁蛋白也含有一个能够参与孢子粘附的肝素结合基序。我们希望通过本研究,筛选与SWP25相互作用的家蚕蛋白,探索孢壁蛋白SWP25在N.bombycis侵染宿主过程中可能发挥的生物学功能。本研究中我们利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将绿色荧光蛋白报告基因EGFP和N.bombycis孢壁蛋白SWP25基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中,随后转化大肠杆菌BmDH10Bac感受态细胞,经同源重组获得vBmEGFP-SWP25质粒,随后将此杆状病毒穿梭质粒转染家蚕卵巢细胞(BmN)获得重组杆状病毒。转染成功的细胞可观测到明显的绿色荧光信号,同时利用Western blot方法,可在被重组杆状病毒感染的BmN细胞中检测到大小约55 kDa蛋白条带的存在。结果表明,N.bombycis孢壁蛋白SWP25基因可与EGFP基因融合,并在BmN细胞中成功表达,这为研究SWP25的生物学功能以及筛选与之互作的宿主蛋白奠定了基础。随后,为了进一步探索孢壁蛋白SWP25的生物学功能,我们利用EGFP作为抗原决定簇通过免疫共沉淀技术在细胞水平筛选可能与SWP25具有相互作用的宿主家蚕蛋白。通过质谱鉴定结合生物信息学分析,初步筛选出8种候选互作蛋白,为家蚕硫氧还蛋白过氧化物酶(BmTpx)、家蚕蛋白激酶C受体l(BmRACK1)、家蚕Rab-11蛋白(BmRab11)、家蚕Rab-18蛋白(Bm Rab18)、家蚕泛素结合蛋白4(Bm Ubcd4)、家蚕热休克蛋白(BmHSP40/BmDna J)、家蚕BTB/POZ结构域及MATH结构域蛋白(Bombyx mori BTB/POZ and MATH domain-containing protein)、家蚕TBC1D15蛋白(BmTBC1D15),并对它们进行了分析和讨论。此外,本研究通过RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆得到了一种从家蚕分离出的内网虫属微孢子虫Endoreticulatus sp.Zhenjiangα-微管蛋白基因的cDNA全长。该内网虫属微孢子虫α-微管蛋白基因的cDNA全长为1382 bp,其开放阅读框(open reading frame,ORF)为1320 bp,编码一个含439个氨基酸残基的蛋白,预测蛋白分子量为48.6 k Da,等电点为5.1,无信号肽序列,是一个稳定的结构蛋白;在线BLAST同源性分析和多序列比对结果显示,Endoreticulatus sp.Zhenjiang与内网虫属微孢子虫Endoreticulatus sp.CHW-2004 Taiwan的α-微管蛋白具有明显同源性,它们之间的核苷酸相似性为99.4%,氨基酸序列的相似性为99.5%。依据所得到的c DNA全长设计引物Spe-F/Spe-R进行特异性PCR诊断,结果只有Endoreticulatus sp.Zhenjiang能够扩增出α-微管蛋白基因,几种Nosema属微孢子虫(N.bombycis,N.philosamiae,N.hemerophila,N.phyllobrotica,N.antheraeae)无法扩增出特异性条带。这一结果为我们诊断因Endoreticulatus sp.Zhenjiang等内网虫属微孢子虫感染引起的家蚕微粒子病奠定了基础。

关键词：家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25 内网虫属微孢子虫 α-微管蛋白特异性PCR诊断

家蚕微孢子虫SWP25基因BmN细胞表达质粒的构建及表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

江苏农业学报 2016年第5期32卷 1023-1028页

作者：肖圣燕李镇刚冉瑞法黄平朱峰沈中元云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所云南蒙自661101 江苏科技大学江苏镇江212003 中国农业科学院蚕业研究所江苏镇江212018

本研究旨在构建含家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25的家蚕卵巢细胞(BmN)表达质粒,检测该基因在宿主细胞中的表达,为在细胞水平筛选与家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25相互作用的宿主蛋白奠定基础。利用家蚕核型多角体病毒Bac-to-Bac表达系统,将... 详细信息

本研究旨在构建含家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25的家蚕卵巢细胞(BmN)表达质粒,检测该基因在宿主细胞中的表达,为在细胞水平筛选与家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25相互作用的宿主蛋白奠定基础。利用家蚕核型多角体病毒Bac-to-Bac表达系统,将家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25和报告基因EGFP克隆到杆状病毒转移载体pFast Bac1中,转化BmDH10Bac感受态细胞并筛选阳性重组质粒用于转染BmN细胞。经PCR技术鉴定,成功获得重组杆状病毒质粒v BmEGFP-SWP25。在转染成功的细胞中可观测到绿色荧光信号。使用Western blot方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞中检测到大小约55 000的重组蛋白条带,与理论值一致,表明家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25在BmN中成功表达。

关键词：家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25基因 Bac-to-Bac表达系统重组质粒转染融合蛋白表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

云南桑树褐斑病的发生与防控

蚕业科学 2018年第5期44卷 778-782页

作者：肖圣燕朱峰冉瑞法冯蔚李镇刚云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所

蚕桑产业是云南农业产业化主导产业之一,发展势头强劲、市场潜力大,云南现成为全国栽桑养蚕第三大省份。然而,桑树病害的发生成为影响蚕桑产业稳定发展的重要因素,其中以桑褐斑病最为严重。桑褐斑病是云南桑树最重要的叶部病害,由桑褐... 详细信息

蚕桑产业是云南农业产业化主导产业之一,发展势头强劲、市场潜力大,云南现成为全国栽桑养蚕第三大省份。然而,桑树病害的发生成为影响蚕桑产业稳定发展的重要因素,其中以桑褐斑病最为严重。桑褐斑病是云南桑树最重要的叶部病害,由桑褐斑壳丰孢[Phloeospora maculans (Bereng.) Allesch]感染引起,发病率高,危害严重,严重影响蚕桑生产发展。国内外学者对桑褐斑病的研究主要集中于桑褐斑病的分布、危害、病原、症状、传播途径、发病条件及防治方法等方面。本文从以上几个方面进行综述,以期为桑褐斑病更深入的研究及防治提供参考。

关键词：桑树褐斑病发生防治云南

蓝叶虫微孢子虫RPB1基因片段序列的测定及其系统发育分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科学 2014年第23期47卷 4736-4744页

作者：燕薇沈中元唐旭东徐莉李前龙肖圣燕乐亚杰付绪亮江苏科技大学中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点开放实验室

【目的】克隆蓝叶虫微孢子虫RPB1(RNA聚合酶II大亚基)基因片段,对其基因及编码的蛋白序列特征进行生物信息学分析,进一步明确蓝叶虫微孢子虫的分类学地位,为深入探究RPB1基因编码蛋白的具体生物学功能奠定基础。【方法】根据家蚕微孢子... 详细信息

【目的】克隆蓝叶虫微孢子虫RPB1(RNA聚合酶II大亚基)基因片段,对其基因及编码的蛋白序列特征进行生物信息学分析,进一步明确蓝叶虫微孢子虫的分类学地位,为深入探究RPB1基因编码蛋白的具体生物学功能奠定基础。【方法】根据家蚕微孢子虫RPB1基因序列,采用Primer Premier 5.0软件设计6对同源引物,利用PCR技术克隆蓝叶虫微孢子虫RPB1基因片段;通过GSDS、SMART、DNAstar、MEGA4.1等生物信息学分析软件对蓝叶虫微孢子虫RPB1基因片段进行系统发育分析。【结果】克隆得到了蓝叶虫微孢子虫RPB1基因片段序列,在Gen Bank登录号为KJ728831。该基因片段的长度为2 933 bp,包含一个长为2 922 bp的开放读码框,预测编码的蛋白质由974个氨基酸组成,蛋白分子量为109.38 k D,等电点为7.087。蓝叶虫微孢子虫RPB1基因片段结构为单外显子结构,编码的蛋白含有4个结构域:RPOLA、RNAolpb1、RNAolpb1和RNAolpb1。其中,RPOLA结构域在原核和真核生物中都是非常重要的结构域。该蛋白质的二级结构主要由4种形式组成:α螺旋、无规则卷曲、延伸链和β转角。α-螺旋和无规则卷曲所占比例相当高,延伸链主要位于α-螺旋和无规则卷曲之间。N-末端以α-螺旋的形式存在。多序列比对与系统进化分析发现,蓝叶虫微孢子虫和Nosema bombycis、N.trichoplusiae、Nosema sp.CPP、N.fumiferanae、N.disstriae、N.tyriae、N.granulosis 7种Nosema属微孢子虫聚类在同一进化支。蓝叶虫微孢子虫RPB1基因编码的蛋白与同一进化支上的其他7种微孢子虫RPB1基因编码的蛋白相似度在81.9%—99.6%,分化度在0.004—0.049。蓝叶虫微孢子虫与N.bombycis的RPB1基因序列相似性高达99.6%,并与N.bombycis具有非常近的亲缘关系。【结论】成功克隆了蓝叶虫微孢子虫RPB1基因片段,对其系统进化分析进一步证实了蓝叶虫微孢子虫确实属于Nosema属。

关键词：蓝叶虫微孢子虫 RPB1基因结构域系统发育分析

家蚕微孢子虫感染对家蚕BmN细胞凋亡以及凋亡蛋白抑制因子IAPs表达的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2017年第12期57卷 1888-1897页

作者：朱峰肖圣燕张永红邵榆岚唐芬芬陈世良白兴荣云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所云南蒙自661101

【目的】在无任何外界凋亡因素诱导条件下,探究家蚕微孢子虫感染对家蚕卵巢细胞-BmN凋亡的影响,以及凋亡蛋白抑制因子IAPs实相表达的变化情况。【方法】显微镜下观察家蚕微孢子虫感染BmN细胞后不同时间段宿主细胞的变化情况,以及利用荧... 详细信息

【目的】在无任何外界凋亡因素诱导条件下,探究家蚕微孢子虫感染对家蚕卵巢细胞-BmN凋亡的影响,以及凋亡蛋白抑制因子IAPs实相表达的变化情况。【方法】显微镜下观察家蚕微孢子虫感染BmN细胞后不同时间段宿主细胞的变化情况,以及利用荧光定量PCR方法检测家蚕促凋亡基因——细胞色素C(BmCyt c)表达水平的变化,随后检索家蚕基因组与蛋白质家族数据库搜寻家蚕凋亡蛋白抑制因子IAPs基因信息,并通过荧光定量PCR方法对这些基因的实相表达情况进行定量分析。【结果】家蚕微孢子虫感染BmN细胞的前5 d,细胞状态未见明显变化。感染后7 d,BmN细胞的生长受到了一定程度的影响。第12天时,对照组中几乎所有细胞出现空泡化或细胞死亡的现象,而感染家蚕微孢子虫的BmN细胞未见空泡的出现,并且大量细胞形态完整,细胞核清晰可见。同时,BmCyt c基因的表达几乎一直处于被抑制状态,特别是感染后的第10天与第12天,该基因的表达量显著性降低(P<0.01)。通过数据库检索共得到4个家蚕凋亡蛋白抑制因子:BmIAP-1、BmIAP-2、BmSurvivin-1与BmSurvivin-2。荧光定量PCR结果表明:BmIAP-1和BmSurvivin-1基因在感染后期(10 d与12 d)表达量有上升趋势,尤其是感染后的12 d,表达量显著上升(P<0.01)。然而,BmIAP-2与BmSurvivin-2基因的表达在大多数时间段均处于下调状态。【结论】当无任何外界凋亡因素诱导条件下,家蚕微孢子虫感染BmN细胞后可影响宿主细胞的生长,并可抑制细胞的正常生理凋亡。依据荧光定量PCR结果,我们推测在家蚕微孢子虫感染BmN细胞时,BmIAP-1和BmSurvivin-1蛋白可能在调节细胞凋亡的过程中起一定作用。

关键词：家蚕卵巢细胞家蚕微孢子虫细胞凋亡家蚕凋亡蛋白抑制因子荧光定量PCR