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活化PBL作用肝癌细胞的表型分析与TCR Vβ基因亚家族的优势取用

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华人消化杂志 1998年第12期6卷 1033-1035页

作者：黄树林肖兰凤罗利琼陈红清广东药学院分子生物学研究室

目的采用抗ＣＤ２８，ＣＤ８０，ＣＤ２及ＣＤ５８分别刺激健康人ＰＢＬ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬ的表型变化及ＴＣＲＶβ基因亚家族的表达水平进行探讨．方法用ＦＡＣＳ分析作用肝癌细胞前后ＰＢＬ表型变化，并用ＲＴＰＣＲ... 详细信息

目的采用抗ＣＤ２８，ＣＤ８０，ＣＤ２及ＣＤ５８分别刺激健康人ＰＢＬ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬ的表型变化及ＴＣＲＶβ基因亚家族的表达水平进行探讨．方法用ＦＡＣＳ分析作用肝癌细胞前后ＰＢＬ表型变化，并用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析其ＴＣＲＶβ１２０的表达水平及特征．结果健康人ＰＢＬ作用肝癌细胞后ＣＤ３和ＣＤ８分子表达比作用前明显增高，而ＣＤ４分子无显著变化．健康人ＰＢＬ分别加ＩＬ２，ＰＨＡ，抗ＣＤ３和ＣＤ３＋ＣＤ２８，ＣＤ２８＋ＣＤ８０，ＣＤ２＋ＣＤ５８作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２）前表达水平平均约５％，作用ＢＥＬ７４０２后表达水平约１３％～２５％，其特征为Ｖβ７增高．结论在癌抗原的参与下，ｍＡｂ共刺激的Ｔ细胞活化，ＴＣＲ接受ＡＰＣ呈递的相应抗原的刺激，具有该ＴＣＲ的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ细胞克隆。

关键词：肝肿瘤 TCRVβ基因基因表达肿瘤细胞

小鼠促进骨髓抑制恢复相关因子IL-7基因的识别与克隆

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广东药学院学报 2008年第3期24卷 291-293,315页

作者：沈娟胡耀华邵红伟肖兰凤广东药学院生命科学与生物制药学院广东广州510006 广东药学院临床学院广东广州510350

目的寻找促进骨髓抑制恢复的相关细胞因子,进行骨髓抑制时基因表达差异分析,并对表达上调较大的细胞因子进行克隆验证。方法尾静脉注射5-Fu构建小鼠骨髓抑制模型,运用基因芯片方法分析正常小鼠与骨髓抑制模型第0,3,7,11,14天的基因表达... 详细信息

目的寻找促进骨髓抑制恢复的相关细胞因子,进行骨髓抑制时基因表达差异分析,并对表达上调较大的细胞因子进行克隆验证。方法尾静脉注射5-Fu构建小鼠骨髓抑制模型,运用基因芯片方法分析正常小鼠与骨髓抑制模型第0,3,7,11,14天的基因表达差异,针对表达上调较大的鼠IL-7基因设计引物,以RT-PCR克隆其编码序列,并构建phCMV/IL-7真核表达载体。结果得到一组符合促进骨髓抑制恢复细胞因子特点的基因,其中细胞因子IL-7表达量升高30倍。结论IL-7符合促进骨髓抑制恢复细胞因子的特点,为研究骨髓抑制恢复的新方案奠定了基础。

关键词：基因差异表达 IL-7 基因克隆骨髓抑制

复方斑蝥含药血清抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖的机制研究

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广东药学院学报 2011年第2期27卷 170-173页

作者：姜新根肖兰凤黄树林刘顺会广东药学院生命科学与生物制药学院广东广州510006 广东药学院临床医学院广东广州510006

目的探讨复方斑蝥抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖的作用机制。方法血清药理学方法制备复方斑蝥血清并处理人肝癌Bel-7402细胞,MTT方法观察其对人肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制作用,RT-PCR技术检测其对c-Myc、p53基因表达的影响。结果复方斑... 详细信息

目的探讨复方斑蝥抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖的作用机制。方法血清药理学方法制备复方斑蝥血清并处理人肝癌Bel-7402细胞,MTT方法观察其对人肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制作用,RT-PCR技术检测其对c-Myc、p53基因表达的影响。结果复方斑蝥含药血清能够显著抑制Bel-7402细胞的增殖,并下调c-Myc和上调p53基因的表达。结论复方斑蝥可能通过影响细胞增殖相关基因的表达抑制Bel-7402细胞的增殖,可作为一种抗肝癌中药复方的研究原型。

关键词：复方斑蝥人肝癌细胞Bel-7402 p53 c-朋弦细胞增殖

TCR Vβ7.1基因转染外周血单个核细胞后表达及抗癌作用

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广东药学院学报 2005年第3期21卷 318-319,322页

作者：王辉罗利琼林月霞肖兰凤广东药学院生物制药系/生物制药研究所广东广州510006

目的研究TCRVβ7.1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RTPCR方法扩增TCRVβ7.1基因并构建Vβ7.1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs),流式细胞仪检测转染效率,DNALadder实验和透射电镜... 详细信息

目的研究TCRVβ7.1基因在恢复肝癌病人细胞毒性T细胞(CTL)功能方面的作用。方法以RTPCR方法扩增TCRVβ7.1基因并构建Vβ7.1-pLXSN表达载体。重组体以脂质体转染外周血单个核细胞(PBLs),流式细胞仪检测转染效率,DNALadder实验和透射电镜观察转染后T细胞诱导肿瘤细胞凋亡情况。结果TCRVβ7.1基因转染PBLs后可有效表达并诱导肿瘤细胞凋亡。结论该方法为T细胞介导的肿瘤基因治疗提供了有效途径。

关键词： TCR Vβ7.1 转染表达凋亡

晚期肺癌患者胸水及外周血中T细胞受体(TCR)Vβ亚家族表达的对比研究

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海南医学 2012年第22期23卷 7-9页

作者：郭宁宁陈敬生区裕升肖兰凤惠州市第三人民医院肿瘤科广东惠州516001

目的探讨晚期肺癌患者(Ⅲ～Ⅳ期)胸水及外周血中T细胞受体Vβ亚家族的表达,比较二者的异同。方法收集2010年7月至2012年5月共89例临床诊断为肺癌晚期的患者胸水及外周血标本,采用流式细胞仪方法测定其T细胞受体Vβ亚家族的表达情况,统... 详细信息

目的探讨晚期肺癌患者(Ⅲ～Ⅳ期)胸水及外周血中T细胞受体Vβ亚家族的表达,比较二者的异同。方法收集2010年7月至2012年5月共89例临床诊断为肺癌晚期的患者胸水及外周血标本,采用流式细胞仪方法测定其T细胞受体Vβ亚家族的表达情况,统计分析胸水及外周血中Vβ亚家族表达的异同。结果 89例晚期肺癌外周血和胸水均主要高表达Vβ3和Vβ9,分别为Vβ3(16/89)、Vβ9(18/89)和Vβ3(20/89)、Vβ9(15/89);患者胸水与外周血Vβ亚家族存在差异,部分差异有统计学意义(P0.05),其中胸水中Vβ3的高表达相对于患者外周血和健康人差异均有统计学意义(P<0.05)。结论晚期肺癌患者胸水及外周血中Vβ亚家族的表达不全相同;晚期肺癌胸水中的高表达Vβ亚家族少于外周血,其中Vβ3在胸水中可能有特异性。此研究为晚期肺癌的生物治疗及T细胞过继免疫疗法在临床中的应用奠定理论基础。

关键词：晚期肺癌 TCR Vβ基因外周血胸水 T细胞

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McAb共刺激PBLs介导肝癌细胞凋亡

中国免疫学杂志 1998年第2期14卷 154-156页

作者：黄树林罗利琼肖兰凤崔徐江伍思琪广东药学院分子生物学研究室

用ＭｃＡｂ，抗ＣＤ３，ＣＤ３＋ＣＤ２８和ＣＤ２８＋ＣＤ８０激活健康人ＰＢＬｓ，作用于肝癌细胞（ＢＥＬ－７４０２），透射电镜观察其超微结构，发现除抗ＣＤ３可引起部分淋巴细胞诱导性凋亡外，其他组都可介导肝癌细胞凋亡。结果... 详细信息

用ＭｃＡｂ，抗ＣＤ３，ＣＤ３＋ＣＤ２８和ＣＤ２８＋ＣＤ８０激活健康人ＰＢＬｓ，作用于肝癌细胞（ＢＥＬ－７４０２），透射电镜观察其超微结构，发现除抗ＣＤ３可引起部分淋巴细胞诱导性凋亡外，其他组都可介导肝癌细胞凋亡。结果提示ＭｃＡｂ共刺激能促进肿瘤免疫治疗的研究。

关键词：单克隆抗体共刺激肝癌透射电镜细胞凋亡

免疫治疗与放、化疗联合疗法的淋巴细胞表型及临床疗效研究

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中国免疫学杂志 2001年第7期17卷 371-374页

作者：贾筠罗利琼阮雪玲成奇峰熊莲花王彤肖兰凤东莞市人民医院东莞523000 广东药学院广州510000

目的 :探讨恶性肿瘤患者进行放、化疗联合免疫治疗对淋巴细胞表型的影响及其与临床表现的关系。方法 :共42例晚期肿瘤病人 ,其中 2 2例在放、化疗的同时输入共刺激的正常人外周血淋巴细胞 (PBLs)进行免疫治疗 ,每周 2次 ,8次为一疗程。... 详细信息

目的 :探讨恶性肿瘤患者进行放、化疗联合免疫治疗对淋巴细胞表型的影响及其与临床表现的关系。方法 :共42例晚期肿瘤病人 ,其中 2 2例在放、化疗的同时输入共刺激的正常人外周血淋巴细胞 (PBLs)进行免疫治疗 ,每周 2次 ,8次为一疗程。另 2 0例病人作为对照组 ,仅接受放、化疗。治疗前后用流式细胞仪检测淋巴细胞表型并观察临床症状。结果 :放、化疗联合免疫治疗组 2 2例病人的淋巴细胞表型与治疗前比较CD+ 3 、CD+ 4、CD+ 4/CD+ 8有升高 ,CD+ 8降低 ,但无显著差异 ,PS评分改善 ,P <0 0 5 ;与 2 0例对照组比较 ,淋巴细胞表型治疗前后均无显著差异 ,但治疗后PS评分改善 ,P <0 0 5。放、化疗联合免疫治疗组病人中有 15例 (6 8 18% )的淋巴细胞表型明显改善 ,CD+ 3 、CD+ 4治疗后明显升高 ,与治疗前比较 P <0 0 5 ,CD+ 95升高 ,P <0 0 2 ,PS评分改善 ,P <0 0 1;与 2 0例对照组相比 ,治疗前各项无显著差异 ,治疗后CD+ 4升高 ,P <0 0 5 ,PS评分改善 ,P <0 0 5 ;放化疗联合免疫治疗病人中有 7例 (31 82 % )的淋巴细胞表型改善不明显 ,与治疗前及对照组比较 ,均无显著差异 ,但PS评分改善 ,P <0 0 2。对照组淋巴细胞表型与临床症状改变均不明显。结论 :免疫治疗与放化疗联合治疗 ,可能有利于减轻放化疗?

关键词：肿瘤免疫治疗放射治疗化学治疗淋巴细胞表型临床表现

翅片型中置式光伏Trombe墙性能的数值模拟

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工程热物理学报 2024年第7期45卷 1917-1923页

作者：肖兰张雨晴吴双应徐世杰重庆大学低品位能源利用技术及系统教育部重点实验室重庆400044 重庆大学能源与动力工程学院重庆400044

提出一种带有竖直翅片的中置式光伏Trombe墙,基于热力学第一和第二定律,数值研究翅片间距和高度对其性能的影响,并与无翅片的中置式光伏Trombe墙进行性能对比。结果表明:在一定的翅片间距和翅片高度范围内,热效率可以得到有效提高;减小... 详细信息

提出一种带有竖直翅片的中置式光伏Trombe墙,基于热力学第一和第二定律,数值研究翅片间距和高度对其性能的影响,并与无翅片的中置式光伏Trombe墙进行性能对比。结果表明:在一定的翅片间距和翅片高度范围内,热效率可以得到有效提高;减小翅片间距和增大翅片高度能够提升电效率。引入综合效率计算发现,相比于热能,获得的电能在整体能效中占主导地位。在较大的翅片高度下,存在最佳翅片间距使综合效率最大化,且翅片高度的增大提升了系统的综合效率。翅片型中置式光伏Trombe墙在翅片间距和高度分别为15.625 mm和45 mm时的综合效率达到了12.74%,相对于无翅片的系统提高了11.29%,具有很大的应用潜力。

关键词：翅片中置式光伏Trombe墙自然对流性能评价

肿瘤抗原活化T细胞体外模型的建立及其免疫效应研究

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中国医药生物技术 2008年第1期3卷 19-24页

作者：李晓明吴凤麟邵红伟黄树林肖兰凤广东药学院生命科学与生物制药学院广州510006 广东药学院生命科学与生物制药学院/生物制药研究所广东药学院临床医学院

目的建立体外肿瘤抗原活化T细胞模型,研究活化后T细胞的功能特点与分化方向。方法将肝癌BEL-7402细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)和协同刺激分子抗CD3、CD28单抗共培养(初次刺激组),或与经肝癌细胞刺激的PBMC共培养(再次刺激组),共... 详细信息

目的建立体外肿瘤抗原活化T细胞模型,研究活化后T细胞的功能特点与分化方向。方法将肝癌BEL-7402细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)和协同刺激分子抗CD3、CD28单抗共培养(初次刺激组),或与经肝癌细胞刺激的PBMC共培养(再次刺激组),共培养时间分别为24、48、72h。另设靶细胞对照组和PBMC对照组。各组实验均设6孔。以流式细胞仪分析PBMC经肝癌细胞刺激后CD45RO+T细胞比例变化;MTT法检测活化T细胞对肝癌细胞的杀伤率;双抗体夹心ELISA法检测活化T细胞IFN-γ和IL-4分泌水平;流式细胞仪分析T细胞表面Fas配体表达和T细胞受体(TCR)Vβ亚家族表达水平,并比较初次刺激组与再次刺激组T细胞免疫效应的差异。结果健康人PBMC在肿瘤抗原和协同刺激分子作用下,CD45RO+T细胞比例逐渐上升,共培养72h时为(16.1±0.9)%,明显高于PBMC对照组[(2.4±0.3)%,P<0.05]。活化T细胞对肝癌细胞的杀伤率随共培养时间的延长而增大[24h为(28.4±6.7)%、48h为(60.4±6.2)%、72h为(78.0±9.3)%];IFN-γ分泌水平升高,共培养48h时为(932±117)ng/L,明显高于PBMC对照组[(157±30)ng/L,P<0.05];T细胞表面FasL表达增加至(8.1±1.8)%,明显高于PBMC对照组[(0.5±0.2)%,P<0.01];肿瘤抗原刺激后,TCRVβ的表达水平与PBMC对照组相比有所增加。再次刺激组CD45RO+T细胞比例、对肝癌细胞的杀伤率、IFN-γ分泌水平及FasL表达水平均明显高于初次刺激组。结论成功建立了体外肿瘤抗原活化T细胞模型。活化T细胞具有明显的免疫效应,并向Th1和Tc1方向分化;再次接触相同抗原时,其免疫效应更为迅速、强烈,表现出一定的记忆特性。

关键词：抗原肿瘤 T淋巴细胞肿瘤细胞培养的免疫效应