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嗜酸乳杆菌表达载体的构建及其甘露聚糖酶的表达

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中国酿造 2024年第1期43卷 136-140页

作者：顾斌涛郭建军曾静聂俊辉王通熊大维袁林江西省科学院微生物研究所江西南昌330096

为获得产甘露聚糖酶的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)菌株,该研究构建甘露聚糖酶表达载体并转化嗜酸乳杆菌,分析重组嗜酸乳杆菌产甘露聚糖酶的酶学性质,并测定重组嗜酸乳杆菌的耐酸性及甘露聚糖酶的抗蛋白酶活性。结果表明,重... 详细信息

为获得产甘露聚糖酶的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)菌株,该研究构建甘露聚糖酶表达载体并转化嗜酸乳杆菌,分析重组嗜酸乳杆菌产甘露聚糖酶的酶学性质,并测定重组嗜酸乳杆菌的耐酸性及甘露聚糖酶的抗蛋白酶活性。结果表明,重组嗜酸乳杆菌发酵24 h,其所产甘露聚糖酶活性为353 U/m L。甘露聚糖酶的最适催化pH值为5.5,最适催化温度为55℃。重组嗜酸乳杆菌在pH 2.0~4.5有一定的耐酸性,在pH 2.0条件下2 h的存活率为77.3%。甘露聚糖酶液用胃蛋白酶、胰蛋白酶处理160 min后,甘露聚糖酶的相对酶活分别为65%、28%。表明该甘露聚糖酶具有一定的抗胃蛋白酶和部分抗胰蛋白酶降解能力。

关键词：甘露聚糖酶嗜酸乳杆菌质粒构建酶学性质

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嗜酸乳杆菌质粒的分析和穿梭载体的构建

食品工业科技 2023年第13期44卷 127-133页

作者：顾斌涛郭建军曾静聂俊辉王通熊大维魏国汶袁林江西省科学院微生物研究所江西南昌330096

为分析嗜酸乳杆菌内源性质粒pDX,并基于该质粒构建大肠杆菌-嗜酸乳杆菌穿梭载体。本研究从嗜酸乳杆菌XW118中分离获得内源性的质粒pDX,对其进行序列测定及功能分析,然后利用质粒pDX的复制子构建了能在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭的载体,并... 详细信息

为分析嗜酸乳杆菌内源性质粒pDX,并基于该质粒构建大肠杆菌-嗜酸乳杆菌穿梭载体。本研究从嗜酸乳杆菌XW118中分离获得内源性的质粒pDX,对其进行序列测定及功能分析,然后利用质粒pDX的复制子构建了能在大肠杆菌和乳酸菌中穿梭的载体,并研究嗜酸乳杆菌的内源性质粒启动子在大肠杆菌中的活性和穿梭载体在乳酸菌中宿主的范围、转化效率和传代稳定性。结果显示嗜酸乳杆菌质粒pDX大小为2062 bp,GC含量为38.2%,包含4个开放阅读框(Open Reading Frame,ORF),推定为滚环复制质粒。质粒pDX在嗜酸乳杆菌中的拷贝数最高为31.05。本研究构建了基于质粒pDX复制子和启动子的大肠杆菌-乳酸菌穿梭载体。该载体可转化多种类型的乳酸菌,转化效率在0.24×10^(2)~2.75×10^(3)CFU/μg(质粒量)之间,质粒丢失率在25.45%~48.36%之间。本研究通过构建获得能在大肠杆菌-乳酸菌穿梭的载体,并获得了在大肠杆菌中具有活性的乳酸菌内源性质粒的启动子,为乳酸菌基因工程和大肠杆菌代谢工程提供了新的操作途径。

关键词：穿梭载体嗜酸乳杆菌质粒乳酸菌转化效率

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快速凝固高硅铝合金加热过程中的组织转变

金属热处理 2020年第5期45卷 45-50页

作者：邬小萍聂俊辉国合通用测试评价认证股份公司北京100088 有研工程技术研究院有限公司北京101400

利用气雾化法制备高硅铝合金粉末,采用光学显微镜(OM)、扫描电镜(SEM)等现代测试手段,分析快速凝固高硅铝合金不同粒度粉末微观组织和结构特征,研究在不同加热温度和保温时间条件下针状富铁相的转变特性及β-Si相的粗化行为。结果表明:... 详细信息

利用气雾化法制备高硅铝合金粉末,采用光学显微镜(OM)、扫描电镜(SEM)等现代测试手段,分析快速凝固高硅铝合金不同粒度粉末微观组织和结构特征,研究在不同加热温度和保温时间条件下针状富铁相的转变特性及β-Si相的粗化行为。结果表明:快速凝固高硅铝合金组织主要以基体上分布有大量细小的颗粒状和针状相为特征,合金粉末在加热过程中,随着温度的升高和保温时间的延长,颗粒β-Si相有粗化趋势,针状非平衡富铁相转变为棒状或颗粒状平衡相。通过台阶式连续加热模拟试验可获得针状相基本消失且颗粒β-Si相未发生明显粗化的组织。

关键词：快速凝固高硅铝合金组织转变

航空用SiCp/Al复合材料热变形行为与环轧工艺研究

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粉末冶金技术 2022年第6期40卷 541-548页

作者：李宏伟王若达魏少华杨志宇聂俊辉航空工业哈尔滨飞机工业集团有限公司哈尔滨150066 中国电子信息产业发展研究院北京100048 有研金属复材技术有限公司北京101407

为了研究航空用高强韧碳化硅颗粒增强铝基复合材料(SiCp/Al)的热变形行为,为环轧制备航空用大尺寸环件提供工艺依据,采用粉末冶金工艺制备了17%SiCp/Al复合材料(体积分数)。通过不同温度与不同变形速率的热压缩实验,获得了复合材料在不... 详细信息

为了研究航空用高强韧碳化硅颗粒增强铝基复合材料(SiCp/Al)的热变形行为,为环轧制备航空用大尺寸环件提供工艺依据,采用粉末冶金工艺制备了17%SiCp/Al复合材料(体积分数)。通过不同温度与不同变形速率的热压缩实验,获得了复合材料在不同热变形条件下的应力应变关系,并根据这一关系建立了复合材料的热加工图。研究结果表明,SiCp/Al复合材料随着变形量的增加,在低于440℃或高于490℃以及高于0.100 s^(‒1)的变形速率下易发生失稳变形。SiCp/Al复合材料在变形温度与变形速率不适宜时,除了发生传统金属的失稳变形等工艺缺陷外,还会出现颗粒损伤引起的表面开裂,这种开裂无法通过机加工去除,应予以避免。最后,在热加工图的指导以及环轧实验验证下,给出了适宜SiCp/Al复合材料环轧成型的工艺参数,完成了外径达1200 mm的SiCp/Al复合材料环件制备。

关键词：粉末冶金颗粒增强铝基复合材料热变形行为环轧

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屎肠球菌自溶的基因表达差异分析

中国饲料 2022年第23期 32-39页

作者：聂俊辉郭浩王通郭建军曾静袁林江西省科学院微生物研究所江西南昌330096 上饶市农林水科学研究中心江西上饶334000 江西鑫维生物技术有限公司江西南昌330096

为探讨屎肠球菌自溶状态下基因表达变化,利用高通量测序技术进行RNA-Seq分析。差异基因分析显示,自溶状态下共有783个基因表达出现差异,其中在自溶状态下上调和下调的基因分别为689和94个。GO功能聚类分析显示,差异基因主要富集在细胞... 详细信息

为探讨屎肠球菌自溶状态下基因表达变化,利用高通量测序技术进行RNA-Seq分析。差异基因分析显示,自溶状态下共有783个基因表达出现差异,其中在自溶状态下上调和下调的基因分别为689和94个。GO功能聚类分析显示,差异基因主要富集在细胞、细胞组分、生物合成、有机物质生物合成几个方面。KEGG富集分析发现,差异基因主要参与了核糖体、氨基酰基-tRNA生物合成、嘌呤代谢、肽聚糖生物合成、嘧啶代谢、同源重组、氨基酸合成等通路,且下调的差异基因主要富集在碳代谢、糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢等能量代谢相关通路。说明屎肠球菌自溶状态下代谢出现了明显改变,对碳源的利用不足和合成能力的下降可能是导致屎肠球菌自溶发生的重要原因。通过分析屎肠球菌自溶状态下基因的表达情况,得到了充分的基因数据,为进一步研究屎肠球菌的自溶发生机制提供了基础。

关键词：屎肠球菌自溶转录组差异表达基因 GO功能

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生物发酵饲料对仔猪生长的影响

中国饲料 2023年第17期 118-123页

作者：聂俊辉王通岳斯源袁林曾静郭建军江西省科学院微生物研究所江西南昌330096

本试验探究并分析使用嗜酸乳杆菌、酿酒酵母及丁酸梭菌混合菌剂发酵饲料后的营养成分变化,以及发酵饲料对仔猪生长性能、肠道菌群以及血液代谢物的影响。结果表明:经生物发酵后的饲料中小肽含量上升78.89%(P<0.05),维生素A提高了4.54 mg... 详细信息

本试验探究并分析使用嗜酸乳杆菌、酿酒酵母及丁酸梭菌混合菌剂发酵饲料后的营养成分变化,以及发酵饲料对仔猪生长性能、肠道菌群以及血液代谢物的影响。结果表明:经生物发酵后的饲料中小肽含量上升78.89%(P<0.05),维生素A提高了4.54 mg/kg(P<0.05);相比于常规饲料,使用发酵饲料喂养仔猪后仔猪平均增重增加了2.62 kg(P<0.05),料肉比降低0.29(P<0.05),腹泻率降低89.91%(P<0.05),仔猪生长性能和健康状态得到改善;经生物发酵饲料喂养后仔猪的肠道菌群中厚壁菌门占比上升,变形菌门占比下降,肠道健康得到改善;对仔猪血液代谢产物进一步分析发现,两组仔猪血液差异代谢产物共71种,其中下调代谢产物10种,上调代谢产物61种。对差异代谢物进行通路分析,差异代谢物主要富集通路为色氨酸代谢、初级胆汁酸合成、苯丙氨酸代谢以及氨基酸合成通路。综上,生物发酵饲料能够调节仔猪肠道菌群和消化吸收功能,有效提高仔猪生长性能和改善仔猪健康状况。

关键词：发酵饲料仔猪嗜酸乳杆菌肠道菌群代谢组

抽气负压发酵法对丁酸梭菌生长及芽孢形成的影响

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中国饲料 2022年第5期1卷 23-27页

作者：聂俊辉王通曾静袁林郭建军王振希江西省科学院微生物研究所江西南昌330096 南昌工程学院理学院江西南昌330099

针对丁酸梭菌(Clostridium butyricum)培养环境改善和厌氧发酵的需求,本研究通过采用抽气负压发酵法进行厌氧环境的制造和有害代谢物的排除,以提高发酵效率和芽孢转化率。研究结果显示:相比于传统通氮气正压发酵法,抽气负压发酵法能够... 详细信息

针对丁酸梭菌(Clostridium butyricum)培养环境改善和厌氧发酵的需求,本研究通过采用抽气负压发酵法进行厌氧环境的制造和有害代谢物的排除,以提高发酵效率和芽孢转化率。研究结果显示:相比于传统通氮气正压发酵法,抽气负压发酵法能够创造严格厌氧环境,减少培养环境中甲酸、乙醛、乙醇、丁酸的含量,显著降低有害代谢物及氧气对丁酸梭菌的生长抑制作用。丁酸梭菌菌体浓度达到3.56×10^(9)cfu/mL,芽孢浓度达到3.52×10^(9)cfu/mL,分别较传统通氮气正压法提高了5倍和10倍。本研究为实现丁酸梭菌的高密度发酵提供了有价值的科学指导。

关键词：丁酸梭菌负压发酵液态发酵抽气

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镍覆膜碳纤维的制备与性能研究

功能材料 2012年第13期43卷 1688-1691,1695页

作者：李一聂俊辉李楠柳学全贾成厂北京科技大学材料科学与工程学院北京100083 钢铁研究总院北京100081

以Ni(CO)4为前驱体,通过羰基金属化学气相沉积工艺在碳纤维表面沉积连续镍膜,从而制得镍覆膜碳纤维材料。实验给出了镍覆膜碳纤维的较佳制备工艺条件。借助SEM、EDX、XRD、冷热循环实验、断裂强度分析、差热分析等多种分析测试手段研究... 详细信息

以Ni(CO)4为前驱体,通过羰基金属化学气相沉积工艺在碳纤维表面沉积连续镍膜,从而制得镍覆膜碳纤维材料。实验给出了镍覆膜碳纤维的较佳制备工艺条件。借助SEM、EDX、XRD、冷热循环实验、断裂强度分析、差热分析等多种分析测试手段研究了镍覆膜碳纤维的性能。结果表明碳纤维表面沉积的膜层为纯镍相,连续致密,与碳纤维基底结合良好,可经受4次冷热循环而不脱落;碳纤维表面沉积连续镍膜后,其断裂强度提高了34.9%;差热分析显示沉积连续镍膜后可有效提高碳纤维的抗氧化性能。

关键词：四羰基镍金属有机化学气相沉积 (MOCVD) 碳纤维镍膜

镀W碳纳米管增强Mg基复合材料的力学和电学性能

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粉末冶金技术 2012年第3期30卷 171-176页

作者：吴琼贾成厂聂俊辉北京科技大学材料科学与工程学院粉末冶金研究所北京100083 北京有色金属研究总院北京100088

以羰基钨为前驱体,采用金属有机化学气相沉积在碳纳米管表面镀覆了金属W。利用磁力搅拌混粉和放电等离子体烧结制备了镀W碳纳米管(W-CNTs)/Mg复合材料,并研究了W-CNTs含量对材料力学性能和电导率的影响。结果表明:W-CNTs含量为0.75%(质... 详细信息

以羰基钨为前驱体,采用金属有机化学气相沉积在碳纳米管表面镀覆了金属W。利用磁力搅拌混粉和放电等离子体烧结制备了镀W碳纳米管(W-CNTs)/Mg复合材料,并研究了W-CNTs含量对材料力学性能和电导率的影响。结果表明:W-CNTs含量为0.75%(质量分数,下同)时,复合材料抗拉强度和维氏硬度最大,较纯Mg增加了40.1%和35.1%;基体中添加W-CNTs虽然使复合材料电导率下降,但0.75%W-CNTs/Mg复合材料电导率仍可达到纯Mg的94.8%;W-CNTs/Mg复合材料的力学性能和电导率均高于CNTs/Mg复合材料。

关键词：碳纳米管镀W Mg 力学性能电导率