检索结果-南通市图书馆

作者：耿仙河北医科大学

学位级别：硕士

G蛋白门控的内向整流钾离子通道(G protein gated inwardly rectifying K channels, GIRK)是内向整流钾通道家族中的一员,存在5种亚单位(GIRK1-5),它们与神经兴奋性和心率的调节有关,特别在维持神经元的静息电位及慢突触后抑制中起重要... 详细信息

G蛋白门控的内向整流钾离子通道(G protein gated inwardly rectifying K channels, GIRK)是内向整流钾通道家族中的一员,存在5种亚单位(GIRK1-5),它们与神经兴奋性和心率的调节有关,特别在维持神经元的静息电位及慢突触后抑制中起重要作用。GIRK通道的分子组成已经得到鉴定,是Kir3.x钾通道家族的成员。GIRK通道的功能除了受G蛋白的调节外,另外还受到磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2)、细胞内的钠、乙醇及机械性牵张作用的调节。GIRK1和GIRK4主要分布在心房和窦房结细胞中,在调节心脏兴奋性中起重要作用,由迷走神经释放的递质乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh)通过兴奋Ⅱ型毒蕈碱样受体(M2)以及下游的PTX敏感的Gi蛋白激活GIRK通道,引起膜动作电位超极化,减少动作电位的频率,减慢心率。GIRK2主要分布在中枢神经系统,许多神经递质如γ-氨基丁酸、多巴胺、5-羟色胺和阿片肽类等通过激活PTX敏感的Gi蛋白激活GIRK通道,调节神经细胞的兴奋性。已有研究表明,Gi/o偶联的受体激活后能够激活而Gq及Gs G蛋白偶联的受体激活后却不能激活GIRK通道,表明G蛋白偶联的受体在调节GIRK功能中有特异性。例如,在心肌组织中,只有与PTX敏感的G蛋白(Gi/Go)偶联的受体如M2毒蕈碱样受体,A1嘌呤能受体及EDG家族的神经鞘脂类受体能够激活GIRK通道,而与PTX不敏感的G蛋白(Gs)偶联的受体如β肾上腺素能受体却不能激活GIRK通道。研究表明Gi蛋白是通过激活后释放的Gβγ亚单位激活GIRK通道的,目前已发现了至少5种β亚单位和12种γ亚单位,然而,几乎所有不同组合形式的Gβγ亚单位均能激活GIRK通道,所以受体激活GIRK通道的选择性不能用Gβγ二聚体的不同组合类型来解释。我们前期工作表明Gα亚单位在受体激活GIRK通道的选择性中可能起重要的作用。本研究重点观察了Gα亚单位与GIRK通道的直接结合情况。在本实验中以非洲爪蟾卵母细胞为表达系统,研究了内源性Gα亚单位以及过表达Gα亚单位后Gα与GIRK4通道结合在一起。结果表明,爪蟾卵母细胞内源性Gαi/o亚单位确实与GIRK4通道相结合,而Gαq及Gαs亚单位却未与GIRK4通道结合。但当过表达Gαq及Gαs亚单位时,过表达的Gαq及Gαs能与GIRK4结合,本研究结果表明Gα亚单位可能是决定受体调节GIRK通道特异性的决定因素。一、FLAG标记的GIRK4通道的构建、表达及其对通道功能的影响目的:在GIRK4通道蛋白中加入FLAG标记短肽,表达于爪蟾卵母细胞。应用双电极电压钳技术检测标记有短肽的GIRK4的功能是否受到影响;应用免疫印迹技术进一步确认FLAG短肽是否成功加入GIRK4通道蛋白。方法:(1)构建重组质粒DNA:运用聚合酶链式反应(PCR)技术合成带有FLAG标记的GIRK4通道片段,产物大小约1300个碱基。使用限制性核酸内切酶SmaⅠ和EcoRⅠ对FLAG-GIRK4 DNA片段及pGEMHE载体质粒DNA分别进行双酶切,酶切产物经纯化后,按照插入片段(FLAG-GIRK4 DNA片段)与载体(pGEMHE质粒DNA)的摩尔比为10:1的比例进行连接。将连接产物转化Top 10大肠杆菌感受态细胞后铺于氨苄抗性阳性的LB琼脂平板上,之后将挑取的数个单克隆提取质粒DNA并使用SmaⅠ和EcoRⅠ对其进行双酶切鉴定。挑取双酶切产物片段大小正确的多个克隆送测序公司测序,最后得到一个测序结果完全正确的克隆。(2)FLAG-GIRK4表达于爪蟾卵母细胞:使用RibomaxTM Large Scale RNA Production Systems-T7 Kit体外转录得到FLAG-GIRK4、GIRK4和M2受体的cRNA,根据其表达情况按每个卵母细胞1-2ng/50nl注射,注射后的细胞在含2.5mM丙酮酸钠的ND96中19-20℃培养。使用双电极电压钳(two-microelectrode voltage clamp,TEVC)检测通道的表达情况。通道表达后,使用M2R激动剂乙酰胆碱(ACh)灌流,来检测其对GIRK4通道电流的激活程度。(3)验证FLAG标记确实与GIRK4通道蛋白融合: FLAG标记的GIRK4通道表达于爪蟾卵母细胞后,提取细胞膜蛋白并进行SDS-PAGE,通过使用抗-FLAG短肽的特异性抗体进行免疫印迹确认FLAG短肽已与GIRK4通道蛋白成功融合。结果:(1)成功构建重组质粒DNA,经过测序鉴定,确认FLAG标记短肽所对应的DNA碱基序列已经插入到GIRK4-pGEMHE的

关键词： GIRK G蛋白 Gα Gβγ 结合

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记数与离散动力系统

记数与离散动力系统

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作者：耿仙金华中科技大学

学位级别：硕士

本文针对离散动力系统，旨在给出几种经典记数系统一种动态的、以计算为导向的展式，这种动力系统能提供简单的算法生成过程，数字的统计信息，平均值信息以及周期扩展的信息等等．具体的，在第１章中我们给出动力系统的产生背景以及... 详细信息

本文针对离散动力系统，旨在给出几种经典记数系统一种动态的、以计算为导向的展式，这种动力系统能提供简单的算法生成过程，数字的统计信息，平均值信息以及周期扩展的信息等等．具体的，在第１章中我们给出动力系统的产生背景以及离散动力系统在记数方面的应用;在第2章中，我们将会说明描述周期轨道的动力学方法的应用，这样产生了Galois类的理论;在第3章中，我们将利用高斯映射和连分数展式引入并讨论遍历性概念、度量概念以及通过浮点型高斯映射的方法对动力系统的数值模拟的概念;第4章中主要讨论经典Loch理论，这可以阐述为以下的结论：在表示实数方面，连分数展式并不比十进制展式更高效;在第5章中，我们将会对高维高斯映射的情况作下简单的探讨．在本文中，我们从更广泛的意义上去考虑记数动力系统，也就是说，数字的表示系统也应该包括连分数展式．这些记数系统有的可能只是一种设想，提出的展式有的是唯一的，有的未必是唯一的．需要特别引起关注的是记数(考虑在1的情况下，任何一个数都可以展成一个正实数的相应形式），连分数以及记数系统的Lyapounov指数．特别的，通过对Loch定理以及其推论的讨论，再考虑有效数字从一种展式到另外一种展式的变换，我们对不同的表示系统做了优劣比较．

关键词：离散动力系统记数系统连分数 Lyapounov指数 Loch定理

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复方鳖甲方对IPF大鼠血清IL-8和TNF-α含量的影响

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广东医学 2007年第1期28卷 44-46页

作者：孙晓芳段斐耿仙河北大学医学部组胚教研室河北保定071000 河北大学医学部药理教研室河北保定071000

目的观察复方鳖甲方对肺纤维化(IPF)大鼠血清IL-8和TNF-α含量的影响。方法采用BLM-A5致IPF动物模型,将大鼠随机分为6组,假手术组、模型对照组、阳性药物对照组、复方鳖甲方高、中、低剂量组,术后28d,腹主动脉取血5ml,应用双抗体夹心EL... 详细信息

目的观察复方鳖甲方对肺纤维化(IPF)大鼠血清IL-8和TNF-α含量的影响。方法采用BLM-A5致IPF动物模型,将大鼠随机分为6组,假手术组、模型对照组、阳性药物对照组、复方鳖甲方高、中、低剂量组,术后28d,腹主动脉取血5ml,应用双抗体夹心ELISA法检测血清中IL-8和TNF-α水平。结果模型组血清中IL-8的含量明显高于假手术组(P<0.05),复方鳖甲方高剂量组与低剂量组的含量明显低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠血清中的TNF-α含量比假手术组高,差异无显著性,复方鳖甲方高、中、低剂量组的含量低于模型组,差异无显著性。结论复方鳖甲方有明显降低IPF大鼠血清IL-8的作用,但无明显降低IPF大鼠血清TNF-α的作用。

关键词：复方鳖甲方肺纤维化白细胞介素-8 肿瘤坏死因子-α

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G蛋白及其研究进展

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河北职工医学院学报 2006年第4期23卷 38-41页

作者：耿仙河北大学医学部药理教研室河北保定071000

鸟苷酸结合调节蛋白，即G蛋白，是细胞内一类重要的信号传导蛋白。哺乳动物体内绝大多数受体通过与G蛋白偶联而将信号传导到细胞内。许多激素、神经递质、神经冲动、光、药物等通过膜受体与G蛋白偶联，从而将信息传递至细胞内而发挥作... 详细信息

鸟苷酸结合调节蛋白，即G蛋白，是细胞内一类重要的信号传导蛋白。哺乳动物体内绝大多数受体通过与G蛋白偶联而将信号传导到细胞内。许多激素、神经递质、神经冲动、光、药物等通过膜受体与G蛋白偶联，从而将信息传递至细胞内而发挥作用。这一高度特异性的传导能够调节多种信号传导通路的活性从而产生各式各样的生物学效应。本文主要介绍G蛋白分类、结构与功能的关系，以及关于G蛋白信号通路的一些新的进展。

关键词：信号传导蛋白 G蛋白偶联白及信号传导通路调节蛋白生物学效应细胞内动物体内

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双苯氟嗪对爪蟾卵母细胞上表达的hERG钾通道电流的影响

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中国药理学通报 2009年第1期25卷 39-44页

作者：张国红耿仙张璇杨冀杰张海林河北医科大学药理学教研室河北石家庄050017 河北大学医学部药理学教研室河北保定071000

目的研究双苯氟嗪对hERG钾通道电流的影响,探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法以非洲爪蟾卵母细胞作为表达系统,采用双电极电压钳技术观察双苯氟嗪对hERG钾通道电流的影响。结果双苯氟嗪(8 ***-1~5μmol.L-1)浓度依赖性地抑制hERG电... 详细信息

目的研究双苯氟嗪对hERG钾通道电流的影响,探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法以非洲爪蟾卵母细胞作为表达系统,采用双电极电压钳技术观察双苯氟嗪对hERG钾通道电流的影响。结果双苯氟嗪(8 ***-1~5μmol.L-1)浓度依赖性地抑制hERG电流,IC50为98.0nmol.L-1;在-10 mV^40 mV范围内双苯氟嗪对hERG电流的抑制作用具有电压依赖性;双苯氟嗪1μmol.L-1对半数激活电压无明显影响,但可降低激活时间常数和去活时间常数,加快hERG电流的激活去活。结论双苯氟嗪降低hERG钾通道电流并改变其动力学特征,提示双苯氟嗪抗心律失常的作用可能与此有关。

关键词：双苯氟嗪钾通道双电极电压钳电流

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胶北乳山金矿含金石英脉中稀土矿物的发现及其意义

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南京大学学报（自然科学版） 2002年第3期38卷 446-456页

作者：孙国曦胡文瑄胡受奚张文兰张光辉耿仙湖南京大学地球科学系内生金属矿床成矿作用国家重点实验室南京210093 江苏省地质调查研究院山东乳山264500 山东金洲集团乳山金矿

通过显微分析和电子探针测试 ,对乳山金矿石英脉中首次发现的稀土矿物独居石等进行了系统研究 ,发现石英脉中独居石与钾化花岗岩围岩中的独居石既有相似性 ,又有一定差异 ,前者LREE更为富集 ,说明在成矿流体演化过程中LREE得到进一步集... 详细信息

通过显微分析和电子探针测试 ,对乳山金矿石英脉中首次发现的稀土矿物独居石等进行了系统研究 ,发现石英脉中独居石与钾化花岗岩围岩中的独居石既有相似性 ,又有一定差异 ,前者LREE更为富集 ,说明在成矿流体演化过程中LREE得到进一步集中 .与不同地区、不同成因独居石的化学成分和稀土元素配分模式的对比分析表明 ,乳山金矿石英脉中独居石LREE最高 ,尤其以La最为显著 .对含金石英脉、钾化花岗岩、煌斑岩和变质岩的稀土元素分析发现 ,前两者关系密切 ,与煌斑岩也有一定联系 ,但与变质岩关系不大 .在统一的深部构造背景下 ,通过花岗岩钾化蚀变作用形成了含金成矿流体。

关键词：金矿含金石英脉稀土矿物独居石成矿流体

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宫内感染弓形虫儿童生长发育追踪

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中国妇幼保健 2007年第4期22卷 479-481页

作者：苑文英马凯耿仙戎瑞雪张伟伟刘润启河北大学医学部寄生虫室河北保定071000 河北省疾病预防控制中心

目的：了解宫内感染弓形虫对儿童身体、智力发育的影响。方法：以1990—1996年保定市级医院弓形虫检测阳性的167例婴儿为出生阳性组，同期弓形虫检测阴性的160例婴儿为出生阴性组，用比内、韦氏智力量表测定其智商值（IQ值）；以全国9... 详细信息

目的：了解宫内感染弓形虫对儿童身体、智力发育的影响。方法：以1990—1996年保定市级医院弓形虫检测阳性的167例婴儿为出生阳性组，同期弓形虫检测阴性的160例婴儿为出生阴性组，用比内、韦氏智力量表测定其智商值（IQ值）；以全国9市城区和郊区健康儿童体格发育测量值为标准，分析弓形虫感染与儿童智力、身体发育的关系，观察干预措施效果。结果：宫内感染弓形虫儿童智力发育明显偏低，视力发育差，而对身高、体重无明显影响；给予合理的干预措施能使智力得到改善与提高。结论：宫内感染弓形虫儿童出生后应进行系统抗弓形虫治疗，减轻其对脑部、眼部的损害；给予合理的干预措施可提高儿童智力水平，促进其健康发育成长。

关键词：弓形虫感染发育身体智力

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双苯氟嗪对表达于爪蟾卵母细胞上的KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2007年第1期21卷 11-16页

作者：张国红耿仙赵志英王娜贝俊杰张海林河北医科大学药理学教研室河北石家庄050017

目的研究双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响,以探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法采用双电极电压钳技术,观察双苯氟嗪对表达于非洲爪蟾卵母细胞上的KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响。结果双苯氟嗪(0.3～30μmol.L-1)浓度依赖性地... 详细信息

目的研究双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响,以探讨其抗心律失常作用的可能机制。方法采用双电极电压钳技术,观察双苯氟嗪对表达于非洲爪蟾卵母细胞上的KCNQ1/KCNE1钾通道电流的影响。结果双苯氟嗪(0.3～30μmol.L-1)浓度依赖性地抑制KCNQ1/KCNE1电流,IC50为(8.9±1.8)μmol.L-1。在-10～90mV范围内双苯氟嗪对KCNQ1/KCNE1电流的抑制作用具有电压依赖性。双苯氟嗪10μmol.L-1使KCNQ1/KCNE1电流的半数激活电压右移3mV,增大激活时间常数,减慢KCNQ1/KCNE1电流的激活;降低慢去活时间常数和快去活时间常数,加速KCNQ1/KCNE1电流的去活。结论双苯氟嗪降低KCNQ1/KCNE1钾通道电流并改变其动力学特征,提示双苯氟嗪抗心律失常的作用可能与其有关。

关键词：双苯氟嗪钾通道电压钳技术爪蟾属卵母细胞

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孕期感染弓形虫的妊娠结局及存活儿的随访观察

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中国妇幼保健 2009年第31期24卷 4416-4417页

作者：苑文英刘秀华于朝云赵盛赵清耿仙唐志远薛娟河北大学医学部寄生虫教研室河北保定071000

目的:了解母亲孕期感染弓形虫的妊娠结局及出生活婴的体格、智力发育情况。方法:孕妇按静脉血弓形虫IgM或CAg阳性/阴性分感染组和非感染组,将小儿按脐血弓形虫检测结果分组,观察发育情况。结果:母亲感染组异常妊娠结局高于正常非感染组... 详细信息

目的:了解母亲孕期感染弓形虫的妊娠结局及出生活婴的体格、智力发育情况。方法:孕妇按静脉血弓形虫IgM或CAg阳性/阴性分感染组和非感染组,将小儿按脐血弓形虫检测结果分组,观察发育情况。结果:母亲感染组异常妊娠结局高于正常非感染组;孕期感染弓形虫出生子代发育受到明显影响,体重、智力显著降低,但对身高无明显影响。结论:孕期感染弓形虫可以透过胎盘将病原体传给子代,母亲孕期感染弓形虫不仅脐血阳性子代发育指标明显降低,脐血阴性者也低于非感染组。

关键词：弓形虫婴儿发育妊娠结局

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喉癌手术切缘中Survivin和Caspase-3及p53的表达意义及相关性研究

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2008年第3期22卷 117-118,121页

作者：杜锦朵孙晓芳田从哲耿仙苏雅静河北大学附属医院耳鼻咽喉科河北保定071000 河北大学医学部组胚教研室河北大学医学部药理教研室河北满城县医院耳鼻咽喉科

目的：研究Survivin、Caspase-3及p53在喉鳞状细胞癌手术切缘中的表达意义及相关性。方法：116例患者术后按肿瘤复发情况分成4组,分别为：复发≤1年组,〉1～3年组,〉3～〈5年组,≥5年组（包括5年后无复发）,应用免疫组织化学方法检测手... 详细信息

目的：研究Survivin、Caspase-3及p53在喉鳞状细胞癌手术切缘中的表达意义及相关性。方法：116例患者术后按肿瘤复发情况分成4组,分别为：复发≤1年组,〉1～3年组,〉3～〈5年组,≥5年组（包括5年后无复发）,应用免疫组织化学方法检测手术切缘Survivin、Caspase-3及p53的表达情况。结果：Survivin在4组中的表达分别为92.9%、85.0%、50.0%及21.1%（P〈0.01）;Caspase-3在4组中的表达分别为50.0%、50.0%、66.7%及89.5%（P〈0.01）;p53在4组中的表达分别为57.1%、37.5%、45.8%及18.4%（P〈0.05）;Survivin、Caspase-3及p53在4组的表达均有统计学意义。结论：喉癌手术切缘中Survivin、Caspase-3及p53的表达在喉鳞状细胞癌的发生、发展中可能起重要作用,并对喉鳞状细胞癌的早期诊断和预后判断有意义。

关键词：喉肿瘤癌,鳞状细胞 Survivin蛋白 Caspase-3蛋白 p53蛋白

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