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低频脉冲超声对肿瘤细胞内化疗药物浓度影响的体外实验研究

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中国临床康复 2004年第2期8卷 268-269页

作者：邵泽勇翟宝进伍烽重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆市400010 医学超声工程研究所重庆市400016

目的:观察低频脉冲式超声波对肿瘤细胞内化疗药物浓度的影响并探讨其作用机制。方法:将肝癌细胞株HepG2与临床常用化疗药蒽环类抗生素阿霉素(adriamycin,ADM)共孵育,用不同条件的低频脉冲超声波处理,选不同时间点用流式细胞仪检测细胞内... 详细信息

目的:观察低频脉冲式超声波对肿瘤细胞内化疗药物浓度的影响并探讨其作用机制。方法:将肝癌细胞株HepG2与临床常用化疗药蒽环类抗生素阿霉素(adriamycin,ADM)共孵育,用不同条件的低频脉冲超声波处理,选不同时间点用流式细胞仪检测细胞内ADM荧光强度,荧光分光光度计测量细胞膜流动性。结果:低频脉冲超声波能显著提高肿瘤细胞HepG2内ADM浓度,且这种效应有明显的频率赖性,以0.8MHz的频率最为理想,细胞内ADM荧光强度最大可达145.12,细胞膜荧光偏振度值由原来的0.1985降至0.1624,改善细胞膜流动性。另外,细胞内药物浓度与细胞膜流动性呈正相关,提示超声波促进药物进入细胞内的作用是通过提高细胞膜的流动性来实现的。结论:低频脉冲超声可促进化疗药物进入肿瘤细胞内,这种效应有明显的频率敏感性,其机制与超声提高细胞膜的流动性有关。

关键词：低频脉冲超声肿瘤细胞化疗药物药物浓度生物学

人肝癌原发性耐药细胞亚系的建立及耐药机制的初步探讨

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肿瘤 2004年第5期24卷 455-458页

作者：邵泽勇沈鼎明伍烽翟宝进重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆400010 重庆医科大学

目的从人肝癌细胞系HepG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制。方法采用阿霉素(***)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术... 详细信息

目的从人肝癌细胞系HepG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制。方法采用阿霉素(***)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术分析细胞周期和检测耐药蛋白的表达。结果随冲击次数的增加,筛选出细胞的耐药指数(resistance index,RI)逐渐升高,筛选3次后对ADM的RI可达30.5;其形态学特点、生长特性及细胞周期分布与亲本细胞有明显差异,同时发现耐药蛋白P-gp、MRP和LRP表达增强。结论肝癌细胞系HepG2是个非均质的群体,其中存在着原发性耐药细胞株。

关键词：肝肿瘤细胞系HepG2 多药耐药阿霉素 P-糖蛋白

阿霉素诱导人肝癌细胞多药耐药株的建立及其生物学特性评价

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癌症 2004年第4期23卷 391-395页

作者：翟宝进伍烽邵泽勇胡凯王智彪重庆医科大学附属第二临床医院肿瘤中心重庆400016 重庆医科大学医学超声工程研究所重庆400010

背景与目的:多药耐药(multidrugresistance,MDR)是肿瘤治疗的主要障碍,为探讨体外逆转肿瘤MDR的新方法,本研究建立人肝癌细胞多药耐药模型HepG2/Adm,并研究其生物学特性。方法:以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,用阿霉素(adriamycin,ADM)... 详细信息

背景与目的:多药耐药(multidrugresistance,MDR)是肿瘤治疗的主要障碍,为探讨体外逆转肿瘤MDR的新方法,本研究建立人肝癌细胞多药耐药模型HepG2/Adm,并研究其生物学特性。方法:以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,用阿霉素(adriamycin,ADM)浓度梯度递增诱导法,建立HepG2/Adm。观察细胞的生长规律;用MTT法检测多药耐药性;流式细胞术检测细胞周期分布、细胞表面多药耐药基因(mdr1)的表达产物P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrugresistance-associatedprotein,MRP)、肺耐药蛋白(lung-relatedprotein,LRP)及谷胱甘肽S-转移酶(glutathioneS-transferase,GST)的表达;逆转录PCR半定量检测4种MDR基因mRNA表达量。结果:与HepG2细胞比较,HepG2/Adm细胞倍增时间延长30.01h,S期细胞减少(5.6±0.03)%,G1、G2期细胞增多犤(4.2±0.09)%,(1.5±0.08)%犦。该细胞对多种抗肿瘤药物耐药,HepG2/Adm对阿霉素的耐药指数是亲本细胞的26倍,细胞表面多药耐药蛋白P-gp、MRP及GST的表达显著增加,LRP表达有一定的增加;上述四种耐药蛋白基因的表达均明显增加。结论:HepG2/Adm细胞具有多药耐药特性,其耐药性与P-gp、MRP及GST的过表达有关。

关键词：阿霉素肝癌细胞多药耐药株 MDR 生物学肿瘤

症状性脑动脉狭窄支架置入前预应用兴奋性氨基酸的作用

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第9期12卷 1625-1628页

作者：王毅杨芳翟宝进焦德让武警医学院附属医院神经外科天津医科大学天津市300070 武警云南总队医院外二科

目的:实验拟观察经皮血管成形支架置入前静脉应用乙酰谷酰胺注射液对患者血浆中兴奋性氨基酸浓度变化的影响。方法:选择2005-01/2006-06武警医学院附属医院采用经皮血管成形支架置入治疗的颅内或颈部动脉狭窄患者32例,平均64.5岁。狭窄... 详细信息

目的:实验拟观察经皮血管成形支架置入前静脉应用乙酰谷酰胺注射液对患者血浆中兴奋性氨基酸浓度变化的影响。方法:选择2005-01/2006-06武警医学院附属医院采用经皮血管成形支架置入治疗的颅内或颈部动脉狭窄患者32例,平均64.5岁。狭窄段长度8～18mm,平均(12.2±4.5)mm。将患者随机分为治疗组16例及对照组16例,对照组采用常规治疗,治疗组入院后静脉点滴乙酰谷酰胺注射液20mL+生理盐水250mL,1次/d,7d。入院时、术前及术后30min内采血高效液相色谱分析检测血浆谷氨酸及天冬氨酸含量。结果:①术后数字减影血管造影显示两组的狭窄率均下降(P<0.01)。②术前治疗组和对照组的谷氨酸及天冬氨酸含量均低于入院时,治疗组低于对照组(P<0.05);术后治疗组的谷氨酸及天冬氨酸含量低于对照组(P<0.01)。③32例患者均在狭窄段成功置入支架,技术成功率为96.86%。6个月后,随访复查经颅多普勒超声,大部分病例(28/32,87.50%)狭窄段血流速度下降;对照组中3例(3/32,2.74%)血流速度较术后增加,虽未经血管造影证实,但考虑有再狭窄发生。结论:经皮血管成形支架置入前采用乙酰谷酰胺注射液静脉点滴能够减少血浆兴奋性氨基酸含量,从而降低支架置入后再灌注损伤的风险。

关键词：经皮血管成形支架置入症状性脑动脉狭窄兴奋性氨基酸再灌注损伤医学植入体

人肝癌移植瘤多药耐药模型的建立及耐药机制的探讨

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癌症 2004年第8期23卷 905-909页

作者：翟宝进伍烽邵泽勇胡凯赵纯亮王智彪重庆医科大学生物医学工程系医学超声工程研究所重庆400016

背景与目的肿瘤多药耐药是肿瘤化疗的主要障碍和研究热点,本研究拟建立人肝癌裸小鼠皮下及肝原位移植多药耐药模型,探讨其生物学特性和耐药机制的异同,为研究体内逆转肿瘤多药耐药提供理想的动物模型。方法人肝癌细胞系HepG2裸鼠肝原位... 详细信息

背景与目的肿瘤多药耐药是肿瘤化疗的主要障碍和研究热点,本研究拟建立人肝癌裸小鼠皮下及肝原位移植多药耐药模型,探讨其生物学特性和耐药机制的异同,为研究体内逆转肿瘤多药耐药提供理想的动物模型。方法人肝癌细胞系HepG2裸鼠肝原位、皮下移植后,用阿霉素腹腔注射诱导耐药。MTT法检测耐药细胞对抗肿瘤药的敏感性,流式细胞仪检测癌细胞膜蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)的表达和细胞对罗丹明(R123)的外排作用,逆转录PCR检测耐药细胞中三种膜蛋白mRNA的表达。结果肝原位和皮下移植瘤耐药细胞形态及生物学行为符合人肝癌特征;对多种药物产生较明显的耐药性,其中对阿霉素的耐药倍数分别为26.4和24.6;肝皮下移植和原位移植组耐药细胞膜蛋白P-gp、MRP和LRP的阳性率均增高,分别为(77.3±2.1)%和(78.1±1.9)%,(72.1±4.3)%和(72.7±5.1)%,(31.1±1.0)%和(32.2±1.4)%。多药耐药基因的阳性率也明显增高,细胞对R123的外排作用增强;肝原位移植瘤组与皮下移植瘤组比较,多药耐药性差异没有统计学意义(P>0.05)。结论所建立的裸鼠肝原位及皮下移植瘤多药耐药模型符合人肿瘤多药耐药特征,为研究体内逆转多药耐药提供了理想的动物模型。

关键词：肝肿瘤裸小鼠多药耐药种植阿霉素

两种方法建立的人肝癌细胞多药耐药模型的比较

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肿瘤 2005年第1期25卷 51-54页

作者：邵泽勇沈鼎明伍烽翟宝进王智彪重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆400010 重庆医科大学医学超声工程研究所

目的　比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性。方法　分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2 /ADMs和HepG2 /ADMi。MTT法检测两种细... 详细信息

目的　比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性。方法　分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2 /ADMs和HepG2 /ADMi。MTT法检测两种细胞对多种化疗药的敏感性,细胞计数法绘制生长曲线并用公式法计算倍增时间,流式细胞术检测细胞周期以及细胞对药物的摄入和外排。并将细胞接种于裸鼠,观察成瘤率及瘤体大小。结果　以含1μg/mLADM的培养液进行筛选,3个月共筛选4次,所得细胞亚系命名为HepG2 /ADMs,其对ADM的耐药指数为30.5。浓度梯度递增法诱导3个月后,细胞可以在含0.4μg/mLADM的培养液中正常生长增殖,对ADM的耐药指数为51,将该细胞亚系命名为HepG2 /ADMi; MTT法检测显示,两种细胞系不仅对ADM耐药,而且对其它化疗药也有抗性,呈现多药耐药特性,但HepG2 /ADMs对药物的敏感性普遍高于HepG2 /ADMi。与HepG2 /ADMi相比,HepG2 /ADMs的倍增时间相对较短,G0 /G1期细胞相对较少,G2 /M期细胞相对较多,细胞对ADM的摄入较多,外排较少,表现为药物的滞留率较高。动物实验发现HepG2 /ADMs的成瘤率明显高于HepG2 /ADMi(90% vs3.33% ),且肿瘤生长速度较快,体积较大。

关键词：细胞系HepG2 多药耐药阿霉素

超声波体内逆转肿瘤多药耐药基因表达的实验研究

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中国肿瘤临床 2007年第19期34卷 1092-1096页

作者：翟宝进郭玉棉左保廷王志宏伍烽重庆医科大学生物医学工程系省部共建重点实验室重庆市400016 武警医学院附属医院

目的:探讨超声波体内逆转肿瘤多药耐药的有效性及其逆转机制。方法:70只HepG2/ADM移植瘤裸鼠随机分成对照组(10只),ADM组(20只),超声组(20只),ADM联合超声组(20只),治疗28天后收集标本。应用RT-PCR法和免疫组织化学法检测多药耐药相关... 详细信息

目的:探讨超声波体内逆转肿瘤多药耐药的有效性及其逆转机制。方法:70只HepG2/ADM移植瘤裸鼠随机分成对照组(10只),ADM组(20只),超声组(20只),ADM联合超声组(20只),治疗28天后收集标本。应用RT-PCR法和免疫组织化学法检测多药耐药相关基因和蛋白(MDR1,MRP和LRP)表达。结果:超声治疗组能显著逆转裸鼠HepG2/ADM移植瘤多药耐药基因的表达。免疫组化结果显示,超声治疗组和ADM联合超声组的P-gp,MRP阳性表达显著降低;与对照组相比,在超声治疗组和ADM联合超声治疗组P-gp,MRP水平明显降低。RT-PCR结果显示,超声组和ADM联合超声组能明显降低HepG2/ADM移植瘤细胞MDR1 mRNA和MRP mRNA的表达。结论:多种机制参与超声波逆转肿瘤多药耐药,超声波通过下调MDR1和MRP mRNA和蛋白表达水平,增加细胞内药物浓度等途径逆转肿瘤多药耐药。

关键词：基因超声治疗机制多药耐药肿痛

人肝癌多药耐药细胞株的建立及超声波诱导凋亡的研究

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中华肝脏病杂志 2004年第2期12卷 95-98页

作者：翟宝进伍烽邵泽勇胡凯赵纯亮王智彪重庆医科大学附属第二医院肿瘤中心 400010 重庆医科大学医学超声工程研究所

目的建立人肝癌细胞系HepG2多药耐药模型并探讨低频脉冲式超声对其凋亡的影响及其机制。方法以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,用阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法,建立人肝癌细胞多药耐药模型(简称HepG2/ADM)。将研究对象分为HepG2/ADM... 详细信息

目的建立人肝癌细胞系HepG2多药耐药模型并探讨低频脉冲式超声对其凋亡的影响及其机制。方法以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,用阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法,建立人肝癌细胞多药耐药模型(简称HepG2/ADM)。将研究对象分为HepG2/ADM、HepG2/ADM+ADM、HepG2/ADM+超声波、HepG2/ADM+ADM+超声波4组,以频率为0.8 MHz,声强为0.5 w/cm2,时间10 min的脉冲式超声波作用于研究对象。荧光显微镜观察细胞变化;DNA片段化分析检测染色体断裂情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 HepG2/ADM细胞对多种化疗药耐药,对阿霉素的耐药倍数为26,其耐药性与P-糖蛋白(P-GP)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)及谷胱甘肽转移酶(GST)的过表达相关。实验组经超声波作用10 min后,HepG2/ADM细胞死亡具有细胞凋亡的形态学特征;HepG2/ADM+ADM和HepG2/ADM+超声波组细胞凋亡率分别为3.47％和12.23％;HepG2/ADM+ADM+超声波联合治疗能显著增加细胞凋亡率,为18.81％,与对照组比较差异有显著性,t值分别为1.46、2.67、5.36,P<0.01。结论人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM具有多药耐药特性;低频脉冲式超声可诱导人肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM凋亡,联合化疗药物治疗,可显著增加细胞凋亡比例。

关键词：肝癌多药耐药超声波肿瘤细胞细胞凋亡

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缺血性脑血管病DSA分析

介入放射学杂志 2012年第6期21卷 451-455页

作者：殷志锋翟宝进焦德让常斌鸽河北省迁安市人民医院神经外科 064400 广东医学院附属南山医院神经外科武警医学院附属医院神经外科天津市第一中心医院

目的探讨缺血性脑血管病患者脑动脉狭窄或闭塞的分布特征及危险因素。方法回顾性分析2006年6月至2010年12月收治的495例缺血性脑血管病患者的DSA资料.按年龄大小分为青中年组(28～59岁)和老年组(≥60岁)。所有患者均经CTA或MRA检查证实... 详细信息

目的探讨缺血性脑血管病患者脑动脉狭窄或闭塞的分布特征及危险因素。方法回顾性分析2006年6月至2010年12月收治的495例缺血性脑血管病患者的DSA资料.按年龄大小分为青中年组(28～59岁)和老年组(≥60岁)。所有患者均经CTA或MRA检查证实为脑动脉狭窄或闭塞,最后经DSA检查验证。结果 495例缺血性脑血管病患者中,452例经DSA检查确诊为动脉粥样硬化性狭窄或闭塞,其中35.2%(159例)为颅内动脉病变,31.8%(144例)为颅外动脉病变,33.0%(149例)为颅内、外病变并存;颅内动脉病变的发生率为68.1%(308例),稍高于颅外动脉的64.8%(293例)。青中年组单纯颅内动脉病变的比例明显高于老年组(95比64,P<0.01);老年组颅外动脉病变的发生率明显高于青中年组(80比64,P<0.01),后循环病变的发生率亦高于青中年组(155比112,P<0.05)。高血压、高龄、糖尿病是颅外动脉病变的独立危险因素,高血压、糖尿病是颅内动脉病变的独立危险因素。颅外病变组高龄患者的比例高于颅内病变组(P<0.05)。结论在缺血性脑血管病患者中,颅内动脉粥样硬化性病变的发生率高于颅外段,随着年龄的增长,单纯颅内动脉病变逐渐减少,颅外病变及后循环病变增多。颅外病变组高龄者多于颅内病变组。

关键词：脑缺血脑动脉狭窄危险因素脑血管造影术