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血浆可溶性血栓调节蛋白水平与缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的关系

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中国动脉硬化杂志 2022年第7期30卷 589-593页

作者：高振忠王艳李争争羊良旺陈泰学海南医学院第一附属医院神经外科海南省海口市570100

[目的]探讨血浆可溶性血栓调节蛋白(sTM)水平对缺血性卒中患者重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)静脉溶栓后早期神经功能恶化的预测价值。[方法]收集符合纳入标准的缺血性卒中患者183例作为研究对象,根据rt-PA静脉溶栓后24 h神经功能缺... 详细信息

[目的]探讨血浆可溶性血栓调节蛋白(sTM)水平对缺血性卒中患者重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)静脉溶栓后早期神经功能恶化的预测价值。[方法]收集符合纳入标准的缺血性卒中患者183例作为研究对象,根据rt-PA静脉溶栓后24 h神经功能缺损程度将患者分为神经功能恶化组31例和非神经功能恶化组152例。收集患者年龄、高敏C反应蛋白(hs-CRP)等一般临床资料,血浆sTM水平采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测;rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的缺血性卒中患者血浆sTM与一般资料的相关性采用Pearson法及Spearman法分析;血浆sTM对缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的预测价值采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析;采用多因素Logistic回归分析影响缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的因素。[结果]神经功能恶化组血浆sTM水平[(50.64±12.17)μg/L比(33.76±8.67)μg/L]及年龄[(67.34±10.87)岁比(60.22±11.05)岁]、hs-CRP[(12.59±3.23)mg/L比(4.92±1.13)mg/L]和空腹血糖[(7.31±1.96)mmol/L比(5.86±1.92)mmol/L]水平、糖尿病比例(32.26%比16.45%)显著高于非神经功能恶化组(P<0.05)。rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的缺血性卒中患者血浆sTM与年龄、hs-CRP、空腹血糖、糖尿病均呈正相关(P<0.05)。血浆sTM预测缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的ROC曲线下面积(AUC)为0.852,特异度为81.6%,灵敏度为80.6%。sTM、空腹血糖是缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后发生早期神经功能恶化的独立影响因素(P<0.05)。[结论]血浆sTM水平对缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化有重要预测价值。

关键词：缺血性卒中重组组织型纤溶酶原激活物静脉溶栓可溶性血栓调节蛋白早期神经功能恶化

LncRNA PVT1对脑胶质瘤中GLUT3表达及细胞增殖、侵袭的影响

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中华神经医学杂志 2021年第6期20卷 541-549页

作者：卓胜华张金本羊良旺陈申波张召腾李争争杨堃海南医学院第一附属医院神经外科海口570102

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)对脑胶质瘤中葡萄糖转运体3(GLUT3)表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法(1)下载中国脑胶质瘤基因组图谱数据库中mRNAseq_325数据集,应用R语言分析222例原发性脑胶质瘤样本中PVT1... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)对脑胶质瘤中葡萄糖转运体3(GLUT3)表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法(1)下载中国脑胶质瘤基因组图谱数据库中mRNAseq_325数据集,应用R语言分析222例原发性脑胶质瘤样本中PVT1与GLUT3基因表达的相关性以及二者对患者总生存期的影响。(2)收集海南医学院第一附属医院神经外科自2019年1月至2019年12月手术切除并经病理证实的8例低级别胶质瘤标本(低级别胶质瘤组)及7例胶质母细胞瘤标本(胶质母细胞瘤组),采用荧光原位杂交法检测PVT1的表达,免疫组化染色检测GLUT3蛋白的表达。(3)体外培养人星形胶质细胞NHA及胶质母细胞瘤细胞U87、LN229和U251(NHA组、U87组、LN229组、U251组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中PVT1、GLUT3 mRNA的表达,采用Western blotting实验检测GLUT3蛋白的表达。将U87、LN229细胞分别分为PVT1过表达质粒组与空白质粒组、PVT1短发夹RNA(shRNA)组与阴性对照shRNA组,分别构建慢病毒稳定转染过表达PVT1及其空白对照细胞系、敲低PVT1及其阴性对照细胞系,应用RT-qPCR和Western blotting实验检测各组细胞系中GLUT3 mRNA和蛋白的表达。(4)取PVT1 shRNA组与阴性对照shRNA组U87、LN229细胞,分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验、平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力。(5)将10只BALB/C-nu雌性裸鼠按随机数字表法分为实验组与对照组(n=5),分别移植PVT1 shRNA组与阴性对照shRNA组U87细胞以构建皮下移植瘤模型。移植4周后处死取瘤,称重及测量体积,并采用免疫组化染色检测肿瘤中Ki-67、GLUT3蛋白的表达。结果(1)mRNAseq_325数据集中222例原发性脑胶质瘤样本的PVT1与GLUT3基因表达呈正相关关系(r=0.514,P=0.000);与PVT1低表达组相比,PVT1高表达组的总生存期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);与GLUT3低表达组相比,GLUT3高表达组的总生存期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与低级别胶质瘤组标本相比,胶质母细胞瘤组标本中PVT1、GLUT3蛋白的表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与NHA组细胞相比,U87、LN229、U251组细胞中PVT1、GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白质粒组相比,PVT1过表达质粒组U87、LN229细胞中GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与阴性对照shRNA组相比,PVT1 shRNA组U87、LN229细胞中GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)与阴性对照shRNA组U87、LN229细胞相比,PVT1 shRNA组U87、LN229细胞的吸光度值、集落形成数和侵袭细胞数均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)与对照组裸鼠相比,实验组裸鼠的皮下移植瘤的体积明显减小、质量明显降低、Ki-67和GLUT3蛋白的表达也明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论下调PVT1可降低GLUT3的表达,从而抑制脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭能力。

关键词：神经胶质瘤浆细胞瘤变异易位1 葡萄糖转运蛋白3

脑胶质瘤中miR-29b-3p核心靶基因的鉴定与分析

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海南医学院学报 2022年第4期28卷 258-262,268页

作者：卓胜华羊良旺陈申波张金本张召腾李争争杨堃海南医学院第一附属医院神经外科海南海口570102

目的:探讨miR-29b-3p在脑胶质瘤中的核心靶基因,并分析核心靶基因的临床意义。方法:采用生物信息学分析方法预测、筛选miR-29b-3p的靶基因;使用STRING、Cytoscape软件分析靶基因的蛋白间互相作用(protein-protein interaction,PPI);用GE... 详细信息

目的:探讨miR-29b-3p在脑胶质瘤中的核心靶基因,并分析核心靶基因的临床意义。方法:采用生物信息学分析方法预测、筛选miR-29b-3p的靶基因;使用STRING、Cytoscape软件分析靶基因的蛋白间互相作用(protein-protein interaction,PPI);用GEPIA、CGGA分析其在胶质瘤中的不同状态下的表达差异及生存预后,单因素、多因素Cox比例风险回归模型分析影响预后的独立因素。结果:通过LinkedOmics、miRDB、miRTarBase、TargetScan和starbase数据库预测出22个miR-29b-3p的靶基因,通过构建PPI网络,去除未参与网络关系的基因,综合GEPIA与CGGA数据库分析,剔除COL2A1、DNMT3A和DNMT3B,进一步通过多因素Cox比例风险回归模型分析,最终确定3个核心靶基因:SERPINH1、LOXL2、CDK6。结论:生物信息学分析显示miR-29b-3p在脑胶质瘤中靶向SERPINH1、LOXL2、CDK6基因,各基因的表达量在正常脑组织与肿瘤组织间、肿瘤不同级别间、IDH突变状态和1p/19q共缺失状态下存在差异,其高表达对总生存预后、无复发生存预后存在不良影响,且可作为独立预后因素。

关键词：脑胶质瘤 miR-29b-3p 靶基因预后生物信息学

颅内压监测和脑氧监测在颅脑损伤中应用的研究进展

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中国临床神经外科杂志 2024年第1期29卷 54-57页

作者：梁云衡卓胜华羊良旺(综述) 杨堃(审校) 海南医学院第一附属医院神经外科海口570102

颅脑损伤(TBI)的发病率、致残率及病死率高。继发颅内亚(ICP)增高和脑缺血缺氧严重影响TBI病人的预后。与单纯ICP监测相比,ICP联合脑氧监测可更好地评估病人脑血流灌注及脑组织氧合情况,能为矫正病人脑氧代谢失衡提供及时、准确的依据... 详细信息

颅脑损伤(TBI)的发病率、致残率及病死率高。继发颅内亚(ICP)增高和脑缺血缺氧严重影响TBI病人的预后。与单纯ICP监测相比,ICP联合脑氧监测可更好地评估病人脑血流灌注及脑组织氧合情况,能为矫正病人脑氧代谢失衡提供及时、准确的依据。本文将简述TBI继发ICP增高和脑缺血缺氧的机制,并就近年来ICP监测和脑氧监测在TBI病人诊疗中单独及联合应用进展进行综述,以期为TBI病人的临床诊治及神经多模态监测研究提供参考。

关键词：颅脑损伤颅内压监测脑氧监测多模态监测

METTL21B在人脑胶质瘤中的表达与临床意义

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中国临床神经外科杂志 2020年第10期25卷 692-695页

作者：卓胜华张金本羊良旺陈申波张召腾李争争杨堃海南医学院第一附属医院神经外科海口570102

目的探讨脑胶质瘤METTL21B的表达及其与病人预后的关系。方法采用生物信息学分析方法,运用GEPIA、On⁃comine、HPA和CGGA等多个数据库分析METTL21B在脑胶质瘤中的表达及其与病人预后的关系,使用CGGA数据库309个样本分析其表达与临床特征... 详细信息

目的探讨脑胶质瘤METTL21B的表达及其与病人预后的关系。方法采用生物信息学分析方法,运用GEPIA、On⁃comine、HPA和CGGA等多个数据库分析METTL21B在脑胶质瘤中的表达及其与病人预后的关系,使用CGGA数据库309个样本分析其表达与临床特征的关系及影响脑胶质瘤的预后因素。在LinkedOmics数据库分析与METTL21B正相关的基因,并使用R编程语言进行GO和KEGG注释。结果脑胶质瘤METTL21B的mRNA和蛋白表达上调,且高表达病人总生存期和无复发生存期明显缩短。METTL21B高表达是胶质瘤病人预后不良的独立危险因素。结论METTL21B可能是脑胶质瘤一种新型的重要临床预后生物标志物,METTL21B的表达水平与胶质瘤恶性程度呈正相关,与脑胶质瘤病人生存期呈负相关。

关键词：脑胶质瘤蛋白赖氨酸甲基转移酶 METTL21B 预后

青稞种质资源对大麦黄矮病毒的抗性鉴定和生理分析

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植物遗传资源学报 2023年第4期24卷 1007-1015页

作者：向思琪羊海珍旺姆省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室拉萨850002 西藏农牧学院林芝860000

为明确青稞种质资源对大麦黄矮病毒(BYDV,barley yellow dwarf virus)的抗性水平,本研究采用田间人工接种法,对245份青稞材料进行了连续3年抗病性鉴定。供试材料中仅有08-1280表现为高抗黄矮病,6份材料(ZYM1289、北青6号、ZDM4409、甘青... 详细信息

为明确青稞种质资源对大麦黄矮病毒(BYDV,barley yellow dwarf virus)的抗性水平,本研究采用田间人工接种法,对245份青稞材料进行了连续3年抗病性鉴定。供试材料中仅有08-1280表现为高抗黄矮病,6份材料(ZYM1289、北青6号、ZDM4409、甘青2号、藏青3000、ZYM1853)表现为抗病,中抗、感病、高感材料分别有47份、173份、18份。分子标记检测结果显示08-1280携带Yd2抗性基因。为了解大麦黄矮病毒侵染对青稞抗性生理指标的影响,分析了接种病毒后高抗材料08-1280、高感材料康青3号中总酚、脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量的变化差异。接种后10 d,高抗材料总酚、脯氨酸含量增加幅度显著高于高感材料。接种后30 d时,高抗材料总酚含量增加幅度高于高感材料,可溶性糖含量增加幅度显著低于高感材料;与对照组相比,高抗材料可溶性蛋白显著下降,高感材料显著上升。本研究为青稞抗病品种培育和抗性机制研究提供了优异资源和理论参考。

关键词：青稞大麦黄矮病毒抗性鉴定抗性生理

半夏泻心汤联合西格列汀治疗老年2型糖尿病的临床效果

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中国老年学杂志 2022年第16期42卷 3927-3929页

作者：王玮莉赵静陈邢玉羊德旺三亚市人民医院中医科海南三亚572000 武汉市中医医院内分泌科三亚市人民医院内分泌科三亚市人民医院老年病科

目的探讨半夏泻心汤联合西格列汀治疗老年2型糖尿病患者的临床效果。方法106例2型糖尿病患者根据随机数字表法分为观察组和对照组各53例。对照组服用西格列汀治疗,观察组服用半夏泻心汤联合西格列汀治疗。分别观察两组血糖、胰岛功能及... 详细信息

目的探讨半夏泻心汤联合西格列汀治疗老年2型糖尿病患者的临床效果。方法106例2型糖尿病患者根据随机数字表法分为观察组和对照组各53例。对照组服用西格列汀治疗,观察组服用半夏泻心汤联合西格列汀治疗。分别观察两组血糖、胰岛功能及血脂指标、中医证候问卷评分及腹痛、恶心、肝酶升高、低血糖不良反应发生情况。结果两组治疗后与治疗前相比,空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白水平均明显降低(P良反应发生率显著低于对照组(P良反应的发生。

关键词：半夏泻心汤西格列汀 2型糖尿病

我国生物安全刑法保障制度的现实检视与完善路径

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我国生物安全刑法保障制度的现实检视与完善路径

作者：沙良旺西南政法大学

学位级别：硕士

生物科学技术的发展和全球化趋势的加强,使得现代社会面临的生物安全风险日趋复杂紧迫,传统的生物安全威胁和新型的生物安全威胁相交织,内部的生物安全威胁与外部的生物安全威胁相杂糅,不断刺激着生物安全威胁因子的膨胀和扩散,严重威... 详细信息

生物科学技术的发展和全球化趋势的加强,使得现代社会面临的生物安全风险日趋复杂紧迫,传统的生物安全威胁和新型的生物安全威胁相交织,内部的生物安全威胁与外部的生物安全威胁相杂糅,不断刺激着生物安全威胁因子的膨胀和扩散,严重威胁我国的国家安全和全人类的生命健康。2020年10月17日,我国生物安全领域第一部基础性、统领性法律——《生物安全法》出台,《生物安全法》的颁布施行正式拉开了我国生物安全法治保障体系建设的序幕,刑法作为社会防卫的最后一道防线,在生物安全保障中的理应占有一席之地,这也是刑法的保护机能在生物安全领域的贯彻。但现阶段我国生物安全的刑法保障制度还存在保护法益不明、保护范围不周延、保护体系不协调等问题,亟待完善。因此,为进一步完善我国生物安全的刑法保障制度,论文立足于国内外的生物安全形势,对我国生物安全刑法保障所存在的问题进行了深刻剖析,并以科学的刑法理念为指导,对我国生物安全刑法保障制度的完善提出一些建议。除引言和结语外,全文分为五个部分,共计五万五千余字。第一部分:生物安全的基本界定与价值考察。明确生物安全的基本内涵及其时代价值,是生物安全刑法保障制度研究的基础和前提。首先,生物安全是指自然或者人为因素导致的,可能对于人体、动植物、环境等造成侵害,关系到人类生命健康、生态环境、国家安全的一种安全形态;其次,生物安全主要包括但不限于外来物种入侵、生物恐怖主义、重大传染性疾病、生物科学技术、生物资源安全、生态环境保护六种类型;最后,生物安全是关系到人民健康生存、国家安全、国际竞争的重要领域。第二部分:生物安全刑法保障的立法沿革及现状。从历史轨迹上看,自1979年《刑法》开始,我国就逐步重视生物安全的刑法保障,1997年《刑法》之后,以刑法修正案的修法形式,通过增设新罪、扩张犯罪构成、提前刑法介入时间等方式逐步加强了对生物安全的保护;从保护现状上看,我国生物安全的刑法保障主要是由刑法典和生物安全行政法律规范构成,在刑法典中有数十个相关罪名,在众多生物安全行政法律规范也出现了刑事条款。总的来说,当前我国生物安全的刑法保障,已经涵盖了公共卫生、生物科学技术、人类遗传资源、野生动植物、生态环境保护等众多领域。第三部分:生物安全刑法保障的问题考察。当前,我国生物安全的刑法保障主要存在以下问题:一是保护法益缺乏明确性,虽有许多生物安全罪名用以保护生物安全,但在整个刑法保护体系中,生物安全法益并未明确;二是规制范围缺乏全面性,有些危害生物安全行为未纳入刑法规制范围,生物安全的刑法保障不够严密;三是刑法介入缺乏预防性,难以有效防控生物安全风险;四是保护体系缺乏系统性,使得生物安全保护体系不协调甚至相互冲突。第四部分:生物安全刑法保障的基本理念。生物安全问题扩张化、复杂化的趋势推动着刑法理念的变革和相关制度的完善,而生物安全刑法保障制度的完善,必须坚守其基本理念。首先,技术与风险如影随形,技术的双刃性要求解决好发展与安全问题,因此必须要以风险预防原则缓和技术风险;其次,生物安全的特性要求刑法积极参与到风险防控中来,通过增设新罪、扩张犯罪构成等方式对风险进行提前预防,以周延地保护生物安全,同时也必须有所限制,因此必须要以刑法谦抑性理念限定刑法干预;最后,生物安全的复杂性决定了生物安全法治保障的多元性,多元的法治保障手段要相互补充、前后衔接,尽量避免错位或冲突,因此必须要以法秩序统一原理畅通保护体系。第五部分:生物安全刑法保障制度的完善路径。在深刻剖析我国生物安全刑法保障制度的现实问题,明确完善生物安全刑法保障制度所应当坚守的立场理念的基础之上,本部分就生物安全刑法保障制度的完善路径提出一些建议。一是要树立生物安全法益观,夯实生物安全刑法保障制度的基础,以此指导生物安全犯罪的罪刑设置、体例结构、司法适用等;二是要周延保护我国的生物安全,调整罪名,严密法网,重视生物安全风险的事前预防,防患于未然;三是要重视罪刑谦抑,入罪要更加谨慎,出罪途径要更加畅通,刑罚要更加轻缓,以此平衡生物安全刑事立法的扩张;四是要强化生物安全刑法保护的体系性,调整生物安全罪名的体例结构,畅通行刑衔接。

关键词：生物安全刑法保障风险防控周延保护罪刑谦抑

β肾上腺素能受体在人舌鳞癌细胞系CAL-27中的表达及β阻滞剂对其增殖迁移侵袭的作用

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β肾上腺素能受体在人舌鳞癌细胞系CAL-27中的表达及β阻滞剂对其...

作者：羊良慧广西医科大学

学位级别：硕士

目的:研究β受体在人舌鳞癌细胞系CAL-27的表达以及β-AR阻滞剂对CAL-27增殖、迁移侵袭的作用。方法:应用消化法进行正常口腔黏膜上皮细胞(分别来源于唇、腭、牙龈黏膜)原代培养及免疫荧光法鉴定。运用免疫组织化学法及qRT-PCR法检测CAL... 详细信息

目的:研究β受体在人舌鳞癌细胞系CAL-27的表达以及β-AR阻滞剂对CAL-27增殖、迁移侵袭的作用。方法:应用消化法进行正常口腔黏膜上皮细胞(分别来源于唇、腭、牙龈黏膜)原代培养及免疫荧光法鉴定。运用免疫组织化学法及qRT-PCR法检测CAL-27及正常口腔黏膜上皮细胞β-AR的表达,CCK-8法检测不同浓度的普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞增殖影响,细胞划痕实验检测不同浓度的普萘洛尔及美托洛尔对细胞的迁移影响,以及Transwell实验检测不同浓度的普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞侵袭影响。结果:免疫组化法提示了CAL-27β1-AR、β2-AR的表达量均高于正常口腔黏膜上皮细胞组(P50μM时,普萘洛尔抑制细胞增殖活力的效果更好(F=19.550,P<0.05);两种药物均随浓度升高对CAL-27细胞增殖活力的抑制增强(趋势P<0.05);细胞划痕实验结果示当药物浓度为2.5μM/L及以上时,两种药物对CAL-27细胞迁移抑制作用与0μM/L比较,差异均有统计学意义(F=7.83,P<0.05),普萘洛尔对CAL-27细胞迁移抑制更强。两种药物均随浓度升高对CAL-27细胞迁移的抑制作用增强,趋势P<0.05;Transwell实验结果示当药物浓度为1.0μM及以上时,两种药物对CAL-27细胞侵袭抑制作用与0μM/L比较,差异均有统计学意义(F=16.11,P<0.05),普萘洛尔对CAL-27细胞迁移抑制更强。两种药物均随浓度升高对CAL-27细胞侵袭抑制作用增强,趋势P<0.05。结论:细胞系CAL-27β1-AR的表达高于正常口腔黏膜上皮细胞,而β2-AR的表达低于正常口腔黏膜上皮细胞;低浓度普萘洛尔及美托洛尔对CAL-27细胞的增殖无明显调节作用,但能抑制CAL-27迁移和侵袭能力。

关键词： β-AR 人舌鳞癌细胞系 CAL-27 美托洛尔普萘洛尔