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丰富环境对成年弱视小鼠视觉功能及突触可塑性的影响

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中华实验眼科杂志 2019年第7期37卷 508-513页

作者：罗瑜琳陶利娟刘政海罗诗诗高明吴小影涂艳琼湖南省儿童医院眼科长沙410007 南华大学应用解剖与生殖医学研究所衡阳421001 中南大学湘雅医院眼科长沙410008

目的探讨丰富环境(EE)在调控成年单眼剥夺(MD)弱视小鼠视觉功能恢复过程中的作用及可能的机制。方法采用随机数字表法将72只健康新生昆明小鼠分为正常对照组、MD组、MD+EE组和MD+氟西汀组。除正常对照组外,其余各组小鼠于出生后21d缝合... 详细信息

目的探讨丰富环境(EE)在调控成年单眼剥夺(MD)弱视小鼠视觉功能恢复过程中的作用及可能的机制。方法采用随机数字表法将72只健康新生昆明小鼠分为正常对照组、MD组、MD+EE组和MD+氟西汀组。除正常对照组外,其余各组小鼠于出生后21d缝合右侧眼睑建立MD弱视模型,根据分组分别在标准环境和EE中饲养4周。检测各组小鼠视敏度和闪光视觉诱发电位(F-VEP)。采用免疫组织化学检测各组小鼠视皮层中树突棘修剪相关标记物微管相关蛋白2(MAP2)的表达变化。Westernblot法检测各组小鼠视皮层中MAP2、突触囊泡素(SYP)和突触后致密蛋白95(PSD-95)的表达。结果各组小鼠剥夺眼视敏度总体比较,差异有统计学意义(F=114.632,P<0.001)。MD组小鼠剥夺眼视敏度明显低于正常对照组,差异有统计学意义(t=15.480,P<0.001);MD+EE组和MD+氟西汀组小鼠剥夺眼视敏度明显高于MD组,差异有统计学意义(t=15.071,P<0.001;t=14.841,P<0.001)。各组小鼠F-VEPP2波潜伏期及振幅总体比较,差异有统计学意义(F=36.510、F=34.140,均P=0.000)。与正常对照组比较,MD组小鼠剥夺眼闪光视觉诱发电位P2波潜伏期延长,振幅降低,差异有统计学意义(t=10.220,P=0.000;t=10.090,P=0.000);与MD组比较,MD+EE组小鼠剥夺眼闪光视觉诱发电位P2波潜伏期缩短,振幅增加,差异有统计学意义(t=7.051,P=0.003;t=5.030,P=0.000)。免疫组织化学染色结果显示,与正常对照组比较,MD组小鼠剥夺眼对侧视皮层神经元MAP2表达明显减少,棕褐色神经元突起难以分辨。MD+EE组和MD+氟西汀组视皮层区域可见明显棕褐色神经元突起,但MAP2表达强度弱于正常对照组。各组视皮层中MAP2蛋白相对表达总体比较,差异有统计学意义(F=18.142,P=0.000)。MD组小鼠视皮质MAP2相对表达量明显低于正常对照组,差异有统计学意义(t=3.056,P<0.01);MD+EE组和MD+氟西汀组小鼠视皮质MAP2蛋白相对表达较MD组显著增加,差异有统计学意义(t=2.541,P=0.031;t=2.157,P=0.017)。各组SYP及PSD-95蛋白表达量总体比较,差异有统计学意义(F=12.871、25.060,均P=0.000)。与正常对照组比较,MD组小鼠剥夺眼对侧视皮层中SYP和PSD-95的相对表达量明显下调,差异有统计学意义(t=6.054,P=0.000;t=8.631,P=0.000);MD+EE组小鼠剥夺眼对侧视皮层中SYP和PSD-95蛋白相对表达明显高于MD组,差异有统计学意义(t=2.088,P=0.046;t=3.766,P=0.002);MD+氟西汀组小鼠剥夺眼对侧视皮层中SYP和PSD-95蛋白相对表达明显高于MD组,差异有统计学意义(t=2.520,P=0.018;t=4.730,P=0.000)。结论EE可通过上调成年MD弱视小鼠视皮层中MAP2的表达促进视觉功能恢复,可能与MAP2促进突触相关蛋白PSD-95及SYP的表达,重塑神经可塑性有关。

关键词：丰富环境单眼剥夺弱视视皮层可塑性

热量限制改善早期社会隔离诱导的小鼠认知功能障碍

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解剖学报 2019年第4期50卷 418-422页

作者：牛磊罗诗诗曾佳玉王贞徐杨陈熙曹文宇万炜南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001

目的探讨热量限制(CR)对早期社会隔离(SI)诱导的认知功能障碍的改善作用及其可能机制。方法3周龄昆明雄小鼠36只随机分成正常群居组(GH,n=12)、早期社会隔离组(SI,n=12)、热量限制干预组(SI+CR,n=12)。在相同条件下饲养GH组(6只/笼)和SI... 详细信息

目的探讨热量限制(CR)对早期社会隔离(SI)诱导的认知功能障碍的改善作用及其可能机制。方法3周龄昆明雄小鼠36只随机分成正常群居组(GH,n=12)、早期社会隔离组(SI,n=12)、热量限制干预组(SI+CR,n=12)。在相同条件下饲养GH组(6只/笼)和SI组(1只/笼),而SI+CR组(1只/笼)每隔1 d给予食物。采用旷场实验检测小鼠的活动度,新旧事物识别实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测小鼠海马区小胶质细胞标记物离子钙结合接头分子1(IBA-1)的表达;Western blotting方法检测海马组织小胶质细胞激活标记物CD68及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果在旷场实验中,3组小鼠的活动度无差异。在新旧事物识别实验中,与GH组相比,SI组新事物分辨率明显下降(P<0. 01),海马中IL-1β的表达显著上调(P<0. 01),此外,SI组在海马中表现出过度活化的小胶质细胞,表现为IBA-1阳性细胞数量增加,CD68高表达(P<0. 01);与SI组相比,SI+CR组新事物分辨率显著增加(P<0. 01),海马IL-1β的表达下调(P<0. 01),IBA-1阳性细胞的数量和CD68的表达显著减少(P<0. 01)。结论热量限制可缓解早期社会隔离诱导小鼠的认知功能损伤,其机制可能与抑制小胶质细胞的激活及炎症因子的释放有关。

关键词：早期社会隔离限制饮食认知功能障碍小胶质细胞海马免疫印迹法小鼠

丰富环境通过抑制NOD样受体蛋白3炎性小体活化缓解脂多糖小鼠的认知障碍

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解剖学报 2020年第2期51卷 172-177页

作者：牛磊罗诗诗李威罗丹刘志文曹文宇徐杨刘政海南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院肿瘤研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第二医院麻醉科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001

目的探讨丰富环境(EE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠认知功能障碍的影响及其可能机制。方法36只3周龄昆明小鼠进行8周的EE刺激或者标准环境(SE)饲养后分为以下3组:标准环境+生理盐水(SE+NS)组、标准环境+脂多糖(SE+LPS)组及丰富环境+脂多糖(E... 详细信息

目的探讨丰富环境(EE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠认知功能障碍的影响及其可能机制。方法36只3周龄昆明小鼠进行8周的EE刺激或者标准环境(SE)饲养后分为以下3组:标准环境+生理盐水(SE+NS)组、标准环境+脂多糖(SE+LPS)组及丰富环境+脂多糖(EE+LPS)组。采用旷场实验检测小鼠的活动度;新旧事物识别实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子1(IBA1)表达;Western blotting方法检测海马组织小胶质细胞激活标记物CD68及NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein3,NLRP3)炎性小体相关蛋白的表达。结果旷场实验中,各组小鼠穿越的总格数无明显差异。在新旧事物识别实验中,与SE+NS组相比,SE+LPS组新事物辨别指数明显下降(P<0.05);与SE+NS组相比,小胶质细胞标记物IBA1表达上调(P<0.05);SE+LPS组海马CD68及NLRP3炎性小体相关蛋白的表达明显上调(P<0.05);而丰富环境可以逆转上述改变(P<0.05)。结论丰富环境可缓解脂多糖诱导的认知功能损伤,其机制可能与抑制海马小胶质细胞激活及NLRP3炎性小体的产生有关。

关键词：炎性小体脂多糖认知功能障碍小胶质细胞海马免疫印迹法小鼠

小鼠视觉发育关键期外侧膝状体胰岛素样生长因子2的动态表达

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解剖学报 2020年第3期51卷 338-343页

作者：罗诗诗苏强孙秋敏徐菁曹文宇徐杨刘政海万炜南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 益阳医学高等专科学校护理系湖南益阳413000 南华大学医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001

目的探讨视觉发育关键期外侧膝状体(LGB)胰岛素样生长因子2(IGF2)的动态表达变化。方法选取3组不同年龄段的昆明小鼠进行试验,分别为3周龄组,5周龄组,7周龄组,每组12只。采用前爪触地反射实验检测各组小鼠的视觉功能是否正常;采用免疫... 详细信息

目的探讨视觉发育关键期外侧膝状体(LGB)胰岛素样生长因子2(IGF2)的动态表达变化。方法选取3组不同年龄段的昆明小鼠进行试验,分别为3周龄组,5周龄组,7周龄组,每组12只。采用前爪触地反射实验检测各组小鼠的视觉功能是否正常;采用免疫组织化学技术检测小鼠出生后3、5和7周外侧膝状体IGF2蛋白及其受体的表达水平,分析IGF2蛋白在LGB各局部及其受体的表达变化模式。结果3~7周的发育过程中,在小鼠LGB背侧核IGF2蛋白表达5周时显著减少,7周时显著增加,腹侧核IGF2蛋白表达随时间逐渐增加。LGB背侧核及腹侧核IGF2受体蛋白表达5周时显著增加,7周时减少至3周时水平。结论视觉发育关键期小鼠外侧膝状体IGF2及其受体的表达存在随时间的动态改变,且各局部的表达模式不完全一致,IGF2及其受体可能与小鼠视觉发育可塑性有关。

关键词：视觉关键期外侧膝状体胰岛素样生长因子2 神经可塑性免疫组织化学小鼠

海马sortilin在链脲佐菌素诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用

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解剖学报 2020年第1期51卷 9-14页

作者：罗丹杨惠罗诗诗牛磊李威宋光明谢靓哲徐杨曹文宇何洁南华大学衡阳医学院肿瘤研究所肿瘤细胞和分子病理学湖南省重点实验室湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001

目的探讨海马sortilin在链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用。方法 24只成年雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组(NS)和实验组(STZ)。STZ腹腔注射诱导糖尿病认知损伤动物模型,注射后用血糖仪检测血糖改变,注射后第8周采用新... 详细信息

目的探讨海马sortilin在链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用。方法 24只成年雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组(NS)和实验组(STZ)。STZ腹腔注射诱导糖尿病认知损伤动物模型,注射后用血糖仪检测血糖改变,注射后第8周采用新旧事物识别实验检测各组小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测sortilin免疫阳性产物表达变化;Western blotting和Real-time PCR方法检测各组小鼠海马sortilin和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白及mRNA表达变化。结果与NS组相比,STZ组小鼠空腹血糖显著增高(P<0. 01);在新旧事物识别实验中新事物辨别指数明显降低(P<0. 05);海马区sortilin的免疫阳性产物(P<0. 05)、蛋白(P<0. 01)以及mRNA(P<0. 05)表达均显著下调;海马区BDNF mRNA(P<0. 01)及蛋白(P<0. 05)表达均明显降低。结论 STZ诱导的糖尿病小鼠认知损伤可能与海马sortilin的表达下调有关。

关键词：链脲佐菌素海马糖尿病认知损伤 Sortilin 免疫组织化学小鼠

NLRP3炎性小体抑制剂MCC950对辐射所致认知障碍的保护作用

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中华放射医学与防护杂志 2020年第10期40卷 733-739页

作者：刘政海罗诗诗王贞徐杨何洁王五洲何淑雅艾小红李彩曹文宇南华大学衡阳医学院应用解剖与生殖医学研究所 421001 南华大学衡阳医学院生理教研室 421001 南华大学衡阳医学院病理教研室 421001 南华大学公共卫生学院衡阳421001 南华大学附属第一医院肿瘤放疗科衡阳421001

目的探讨MCC950对辐射所致小鼠认知障碍的影响及可能机制。方法小鼠按随机数表法分为健康对照(NS)组、全身照射(IR)组和照射后MCC950干预(IR+MCC950)组,每组15只。IR组和IR+MCC950组小鼠给予137Cs单次4.0 Gy照射,吸收剂量率为1.118 Gy/m... 详细信息

目的探讨MCC950对辐射所致小鼠认知障碍的影响及可能机制。方法小鼠按随机数表法分为健康对照(NS)组、全身照射(IR)组和照射后MCC950干预(IR+MCC950)组,每组15只。IR组和IR+MCC950组小鼠给予137Cs单次4.0 Gy照射,吸收剂量率为1.118 Gy/min,NS组不接受照射。IR+MCC950组小鼠从照射后3周开始腹腔注射MCC950,每日1次,每次10 mg/kg。新旧事物识别等方法检测小鼠认知功能;免疫组织化学法检测小鼠海马CA3区NeuN蛋白的表达;PCR及Western blot检测NLRP3炎性小体相关蛋白的表达。结果与NS组相比,IR组小鼠短时及长期新旧事物识别指数显著降低(t=4.321、5.473,P<0.01),IR组小鼠社会认知识别指数显著降低(t=2.097,P<0.05)。MCC950治疗逆转以上改变(短时及长期新旧事物识别测验:t=5.860、4.598,P<0.05;新旧位置识别测验:t=3.040,P<0.05;社会认知测验:t=4.021,P<0.01)。IR组小鼠海马NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达明显高于NS组(t=2.699、8.515、3.340、3.950,P<0.05);与NS组相比,辐射显著上调了海马BAX、Caspase-3和PARP1的表达(t=3.887、2.742、3.287,P<0.05),而MCC950显著降低了其表达(t=2.852、4.090、9.614,P<0.05)。结论NLRP3炎性小体抑制剂MCC950可能是通过降低辐射所致的海马炎症反应及神经元凋亡,从而减轻辐射所致认知损伤。

关键词：辐射认知损伤 NLRP3炎性小体小鼠

IGF-1介导的丰富环境对成年弱视小鼠视皮层可塑性的影响

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国际眼科杂志 2020年第2期20卷 224-229页

作者：罗瑜琳罗诗诗刘政海王曦琅陶利娟吴小影涂艳琼湖南省儿童医院眼科湖南省长沙市410007 南华大学医学院临床应用解剖与生殖研究所湖南省衡阳市421001 中南大学湘雅医院眼科湖南省长沙市410008

目的:检测丰富环境干预对单眼剥夺成年弱视小鼠视皮质中IGF-1及其受体的表达变化,初步探讨其对成年弱视小鼠初级视皮质突触可塑性的影响及分子机制。方法:将正常新生昆明小鼠随机分为正常组(Nor),单眼剥夺+标准环境组(MD+SE),单眼剥夺+... 详细信息

目的:检测丰富环境干预对单眼剥夺成年弱视小鼠视皮质中IGF-1及其受体的表达变化,初步探讨其对成年弱视小鼠初级视皮质突触可塑性的影响及分子机制。方法:将正常新生昆明小鼠随机分为正常组(Nor),单眼剥夺+标准环境组(MD+SE),单眼剥夺+丰富环境组(MD+EE),单眼剥夺+氟西汀组(MD+FLX)。在小鼠21日龄时构建单眼剥夺模型,确定模型建立成功后,每组选取18只小鼠按照预先分组放置在标准环境或丰富环境中饲养4wk,单眼剥夺+氟西汀组小鼠饮水中加入氟西汀。通过前爪触地反射实验检测小鼠视敏度,闪光视觉诱发电位检测客观视功能;小鼠处死后取材,使用电镜检测视皮层神经元的突触间隙宽度、突触活性区长度及突触后致密物厚度,Western Blot法检测视皮层中IGF-1、IGF-1R及IGFBP5蛋白表达。结果:(1)视敏度检测结果:MD+SE组小鼠前爪触地成功率明显低于Nor组(P0.05)。(3)电镜检测视皮层神经细胞突触超微结构:与N or组比较,M D+SE组小鼠剥夺眼对侧视皮层神经细胞突触间隙增宽(P 0.05)。(4)Western blot检测视皮层中IGF-1、IGF-1R及IGFBP5蛋白表达:MD+SE组小鼠IGF-1及IGF-1R蛋白表达明显低于Nor组(均P0.05)。结论:丰富环境能重新激活成年单眼剥夺弱视小鼠视皮质可塑性,改善弱视小鼠视觉功能,其机制可能与调控IGF-1及受体的表达有关。

关键词：胰岛素样生长因子-1 丰富环境弱视视皮层可塑性

氟西汀通过上调海马内溴结构域蛋白4的表达改善慢性束缚应激所致小鼠的抑郁样行为

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解剖学报 2019年第1期50卷 18-23页

作者：王贞黄怡佳乃爱桃牛磊罗诗诗万炜刘政海陈熙徐杨曹文宇南华大学医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院肿瘤放疗科湖南衡阳421001 南华大学医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001

目的探讨氟西汀(FLX)对慢性束缚应激(CRS)所致小鼠抑郁样行为及海马内溴结构域蛋白4(BRD4)表达的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照(NS)组、抑郁模型(CRS)组、氟西汀干预(CRS+FLX)组。慢性束缚应激3周建立小鼠抑郁模型,... 详细信息

目的探讨氟西汀(FLX)对慢性束缚应激(CRS)所致小鼠抑郁样行为及海马内溴结构域蛋白4(BRD4)表达的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照(NS)组、抑郁模型(CRS)组、氟西汀干预(CRS+FLX)组。慢性束缚应激3周建立小鼠抑郁模型,应激的第8天至第21天CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射氟西汀(10 mg/kg),NS组及CRS组注射等体积生理盐水。采用糖水偏好实验、喷糖实验、强迫游泳实验、新旧事物识别实验和旷场实验检测各组小鼠行为变化;采用Western blotting及Real-time PCR法检测小鼠海马BRD4蛋白和mRNA的表达情况。结果与NS组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低(P<0.01),喷糖实验舔糖时间缩短(P<0.05),强迫游泳不动时间增加(P<0.01),新事物辨别指数降低(P<0.0001),抗抑郁药FLX干预可逆转CRS所诱导的上述抑郁样行为表现(P<0.05);与NS组相比,CRS组小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达明显下调(1.0000±0.04577比0.08337±0.01658; 1.0000±0.04379比0.6672±0.03193,P<0.05),而FLX可上调抑郁小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达(0.08337±0.01658比0.4983±0.08574; 0.6672±0.03193比0.8572±0.03181,P<0.05)。结论氟西汀可能通过上调海马BRD4的表达改善小鼠抑郁样行为。

关键词：氟西汀慢性束缚应激抑郁症溴结构域蛋白4 海马实时定量聚合酶链反应小鼠

三七总皂苷对脂多糖诱导小鼠抑郁样行为及脑内小胶质细胞表达的影响

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解剖学报 2018年第2期49卷 166-171页

作者：曾佳玉王贞牛磊罗诗诗刘政海曹文宇徐杨万炜陈熙南华大学医学院应用解剖学与生殖医学研究所湖南衡阳421001 南华大学医学院生理学教研室和神经科学研究所湖南衡阳421001

目的探讨三七总皂苷(PNS)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠抑郁样行为及脑内小胶质细胞活化的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为溶媒对照(NS)组、LPS组、三七总皂苷预处理(PNS+LPS)组,采用新奇环境抑制摄食实验、糖水偏好实验、悬尾实验、强... 详细信息

目的探讨三七总皂苷(PNS)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠抑郁样行为及脑内小胶质细胞活化的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为溶媒对照(NS)组、LPS组、三七总皂苷预处理(PNS+LPS)组,采用新奇环境抑制摄食实验、糖水偏好实验、悬尾实验、强迫游泳实验观察小鼠的抑郁样行为;采用免疫组织化学法检测海马、杏仁核小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子1(IBA-1)的表达变化。结果 LPS导致小鼠出现抑郁样行为,包括新奇环境摄食潜伏期延长(P<0.05),糖水偏好百分比下降(P<0.05),悬尾不动时间延长(P<0.05),强迫游泳不动时间增加(P<0.01),PNS干预可逆转上述抑郁行为表现(P<0.05);LPS导致小鼠海马和杏仁核IBA-1阳性细胞数目显著增多(P<0.0001),PNS预处理能明显减少IBA-1的阳性细胞数(P<0.05)。结论三七总皂苷能有效缓解LPS诱导的小鼠抑郁行为,其机制可能与抑制脑内小胶质细胞活化有关。

关键词：三七总皂苷脂多糖抑郁炎症小胶质细胞免疫组织化学小鼠