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狼蛛优势种群的12SrRNA对长期农药胁迫的分子响应

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应用与环境生物学报 2006年第1期12卷 55-58页

作者：罗育发颜亨梅湖南师范大学生命科学学院动物系

应用12SrRNA基因序列分析探讨了狼蛛优势种群对长期农药胁迫的分子响应机制.研究显示:(1)拟水狼蛛Piratasubpiraticus和拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata在长期农药胁迫下的12SrRNA基因第三结构域序列均发生了明显改变,即碱基组成由315b... 详细信息

应用12SrRNA基因序列分析探讨了狼蛛优势种群对长期农药胁迫的分子响应机制.研究显示:(1)拟水狼蛛Piratasubpiraticus和拟环纹豹蛛Pardosapseudoannulata在长期农药胁迫下的12SrRNA基因第三结构域序列均发生了明显改变,即碱基组成由315bp和300bp分别减少为301bp和299bp,转换/颠换为17/5和11/10,核苷酸变异百分数达到0.095和0.083,同源性仅分别为85.8%和91.7%;(2)分子水平上表明拟水狼蛛较拟环纹豹蛛对农药的胁迫更为敏感;(3)供试两种狼蛛标本的基因组DNA的4个碱基对中以A和T的变异频率最高,属农药敏感型碱基对;(4)长期农药胁迫下供试两种狼蛛标本的12SrRNA基因片段的共同突变位点规律显示:192～228片段是其农药胁迫的敏感区.

关键词：狼蛛优势种群 12S rRNA 序列分析农药胁迫

中国狼蛛科（Lycosidae）主要类群的遗传多样性及分子系统发育研究

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中国狼蛛科（Lycosidae）主要类群的遗传多样性及分子系统发育研究

作者：罗育发湖南师范大学

学位级别：硕士

本研究应用RAPD、DNA序列分析等分子标记技术，根据有关种群遗传学和动物系统学原理与方法，对我国狼蛛科主要类群的遗传多样性、分子系统发育关系及其在农药胁迫下所引起的遗传分化和分子适应性机理等方面进行了初步研究，获得了以下... 详细信息

本研究应用RAPD、DNA序列分析等分子标记技术，根据有关种群遗传学和动物系统学原理与方法，对我国狼蛛科主要类群的遗传多样性、分子系统发育关系及其在农药胁迫下所引起的遗传分化和分子适应性机理等方面进行了初步研究，获得了以下结果： 1 进行了RAPD技术在蜘蛛遗传多样性研究中的方法探讨。利用蜘蛛的附肢作为其基因组DNA抽提的材料，且该改进的方法所抽提的蜘蛛基因组DNA的产量与纯度足以满足RAPD分析的要求;通过优化RAPD-PCR反应条件，可以获得清晰度高，重复性好的RAPD图谱以用于蜘蛛(如拟水狼蛛Pirata subpraticus拟环玟豹蛛(Pardosa pseudoan nulata)武昌獾蛛Trochosa wuchangensis等)的遗传多样性研究;在不投食饲养武昌獾蛛一个月以上的前提下，用随机引物S(5′CAGCTCACGA 3′)比较分析了武昌獾蛛的头胸部与其附肢各自的RAPD图谱的差异，差异不显著(P＞0.05)。结果表明：蜘蛛的附肢和头胸部均可作为其遗传多样性研究材料，但以前者为材料可以有效防止异源DNA的干扰。因而，其基因组DNA在作为蜘蛛遗传多样性的RAPD分析模板时要优于头胸部。 2 根据蜘蛛外生殖器结构特征和RAPD分子标记分析的结果表明：武昌獾蛛Trochosa wuchangensis自然种群存在明显种群内遗传变异现象。即使同一地理种群的武昌獾蛛也有多种变异类型，且该种内变异并不完全是因分布地域不同而产生的。尹长民教授等(1997)所报道的武昌獾蛛外生殖器结构可明显分为三大类型：(ⅰ)两垂兜间合抱部分梨形，长≦宽;纳精囊远端分叶时内叶稍短于外叶。(ⅱ)两垂兜间合抱部分梨形，长＞宽;内叶明显短于外叶。(ⅲ)两垂兜间合抱部分窄长，长＞宽;外叶明显细。作者实验中所获得的武昌獾蛛雌性成体RAPD谱带特征与尹老师以外生殖器形态特征为依据所划分的三种变异类型基本一致。同时对ⅰ型和ⅱ型内个体间的遗传相似度进行方差分析表明，ⅱ型内个体间不存在显著差异，但ⅰ型内个体间存在显著差异(P＜0.05)。研究还表明性别不同的武昌獾蛛，其成体的RAPD谱带也有差异，即随机引物592扩增的结果在不同性别的武昌灌蛛相互间显示种的特异性，并发现所扩增的253 bp带为雄性武昌灌蛛的种的特异性谱带。引物552和引物52，对不同生长发育期的武昌灌蛛样本的RAPD一PCR扩增中都显示其相互间存在不一致的谱带特征。经统计分析发现成熟个体的谱带类型稳定，变化较小;未成熟个体的谱带类型不稳定，变异较大。 3应用1 ZSr洲A基因序列分析探讨了狼蛛优势种群对长期农药胁迫的分子响应机制。通过对12SrRNA基因第三结构域的序列比对分析，研究显示:(i)拟水狼蛛厂丫了刀tasu如了了刁tfcus在长期农药胁迫下的12SrRNA基因第三结构域序列发生了明显改变，即碱基组成由 315 bp减少为300 bp，转换/颠换为17/5，核昔酸变异百分数(p一 distance=序列差异/序列大小)达到0.095，同源性仅为85.8%;(ii) 拟环纹豹蛛儿厂由sa pse“由a朋u1二ta在长期农药胁迫下的12SrRNA 基因第三结构域序列也发生改变，即碱基组成由301 bp减少为299 bp，转换/颠换为11/10，核昔酸变异百分数为0.083，同源性为91 .7%;(iii)比较拟水狼蛛和拟环纹豹蛛在长期农药胁迫下，其12SrRNA基因第三结构域的序列所发生的改变，以拟水狼蛛所受的影响最明显，可见连续丢失几段4一10以上bp的片段，说明拟水狼蛛对农药的胁迫更为敏感，(iv)供试两种狼蛛标本的基因组DNA的四个碱基对中以A 和T的变异频率最高，属农药敏感型碱基对。(v)根据拟水狼蛛和拟环纹豹蛛12SrRNA基因片段的碱基共同突变位点的规律，发现 192一228片段中有37个位点是长期农药胁迫下狼蛛的12SrRNA基因片段中共同突变位点频率最高的区域。作者认为这就是该2种狼蛛对农药胁迫的敏感区。同时，发现在无直接农药胁迫的环境中，这两个狼蛛种群中的12SrRNA在192一咒8该狭窄区域内的相似性明显增加，其原因有待进一步研究。 4将自测的我国蜘蛛目狼蛛科5属6个种和从互联网Genbank 中检索到相关物种的线粒体基因组12SrDNA的序列进行同源性比较，计算核昔酸使用频率。然后据此进行分子分析，利用2个外群(漏斗蛛科的机敏漏斗A群了eI7adz’几P1’叮了z’s和缘漏斗刀gelena了2初右at)和 2种建树方法(邻近法Neighbour Joining，NJ和最大简约法MaxiParsimony，MP)分析我国狼蛛科内的亲缘关系。获得平均为291.6bP 的序列中，A+T平均含量为

关键词：蜘蛛目狼蛛科(Lycosidae) 遗传多样性亲缘关系 RAPD DNA序列分析

由12S rDNA序列探讨中国狼蛛科主要类群的分子系统发育关系

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四川动物 2006年第3期25卷 445-450页

作者：罗育发颜亨梅湖南师范大学生命科学学院动物系

将自测的我国蜘蛛目狼蛛科4属6个种和从互联网GenBank中检索到相关物种的线粒体基因组12SrDNA的序列进行同源性比较,计算核苷酸使用频率。然后据此进行分子分析,利用2个外群(漏斗蛛科的机敏漏斗蛛Agelena difficilis和缘漏斗蛛Agelena l... 详细信息

将自测的我国蜘蛛目狼蛛科4属6个种和从互联网GenBank中检索到相关物种的线粒体基因组12SrDNA的序列进行同源性比较,计算核苷酸使用频率。然后据此进行分子分析,利用2个外群(漏斗蛛科的机敏漏斗蛛Agelena difficilis和缘漏斗蛛Agelena limbat)和2种建树方法(邻近法Neighbour Joining,NJ和最大简约法Maximum Parsimony,MP)分析我国狼蛛科内的亲缘关系。获得平均为291.6 bp的序列中,A+T平均含量为78.13%,而G+C含量只要21.87%,颠换取代(tranversion)的速度多数大于或接近转换取代(transition)的速度,其中161个核苷酸位点存在变异。研究结果表明:在蜘蛛目狼蛛科有差异的161 bp中,属内种间仅为1.08%,狼蛛科属间为6.85%~14.80%。所构建的分子系统树表明:科内的属和属内的种均优先聚在一起;狼蛛科现行分类系统中各亚科的演化关系顺序为:马蛛亚科→狼蛛亚科→豹蛛亚科;狼蛛科各属的演化关系顺序为:水狼蛛属→马蛛属(或水狼蛛属和马蛛属)→獾蛛属→狼蛛属→豹蛛属;水狼蛛属为最早分出的一支或者水狼蛛属和马蛛属...

关键词：蜘蛛目狼蛛科 12S rDNA 分子系统发育

亚洲柑橘木虱传播黄龙病菌的特性与机制研究进展

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环境昆虫学报 2017年第4期39卷 955-962页

作者：宋杨罗育发赣南师范大学生命与环境科学学院江西赣州341000 国家脐橙工程技术研究中心江西赣州341000

黄龙病Huanglongbing(HLB)是世界性的重大柑橘病害,在中国主要由亚洲柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama传播。该害虫的传病特性与机制一直是相关研究热点之一。本文综述了近些年该领域的研究成果,包括亚洲柑橘木虱传播黄龙病的方式、... 详细信息

黄龙病Huanglongbing(HLB)是世界性的重大柑橘病害,在中国主要由亚洲柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama传播。该害虫的传病特性与机制一直是相关研究热点之一。本文综述了近些年该领域的研究成果,包括亚洲柑橘木虱传播黄龙病的方式、传病过程与机制,以及影响传病效率的因素等方面,为该木虱及黄龙病的防控与深入研究提供参考。

关键词：亚洲柑橘木虱黄龙病共生菌互作过程传病机制

巴氏新小绥螨和尼氏真绥螨的耐饥能力及饥饿对其雌成螨捕食作用的影响

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中国南方果树 2012年第1期41卷 1-6页

作者：罗育发钟八莲赣南师范学院生命与环境科学学院/江西省脐橙工程技术研究中心赣州341000

室内测定巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri Hughes和尼氏真绥螨Euseius nicholsi Ehara etLee的耐饥饿能力,并分析了饥饿程度对两种捕食螨雌成螨捕食朱砂叶螨Tetranychus cinnabari-nus Boisduval若螨的功能反应和捕食速度的影响。结果表... 详细信息

室内测定巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri Hughes和尼氏真绥螨Euseius nicholsi Ehara etLee的耐饥饿能力,并分析了饥饿程度对两种捕食螨雌成螨捕食朱砂叶螨Tetranychus cinnabari-nus Boisduval若螨的功能反应和捕食速度的影响。结果表明:两种捕食螨各螨态的耐饥时间与发育历期呈显著正相关(P发生较大改变;饥饿24小时的巴氏新小绥螨和尼氏真绥螨雌成螨在取食朱砂叶螨若螨的24小时内,其捕食作用主要集中在前8小时阶段,未经饥饿处理的两种捕食螨雌成螨捕食速度在24小时内各阶段的差异不大。

关键词：巴氏新小绥螨尼氏真绥螨朱砂叶螨耐饥能力功能反应捕食速度

赣南脐橙园蜘蛛优势种群发生动态及相关气象因子分析

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中国南方果树 2012年第4期41卷 14-17页

作者：罗育发钟八莲赣南师范学院生命与环境科学学院/江西省脐橙工程技术研究中心赣州341000

在江西省赣州市章贡区蟠龙镇一个集中连片面积达32hm2且管理粗放的11年生"纽荷尔"脐橙园调查发现,脐橙园蜘蛛分属13科38种。脐橙园树冠层蜘蛛优势种有3种:草间钻头蛛Hylyphantes graminicola全年以5—6月及9—10月的发生数量最大;斑管巢... 详细信息

在江西省赣州市章贡区蟠龙镇一个集中连片面积达32hm2且管理粗放的11年生"纽荷尔"脐橙园调查发现,脐橙园蜘蛛分属13科38种。脐橙园树冠层蜘蛛优势种有3种:草间钻头蛛Hylyphantes graminicola全年以5—6月及9—10月的发生数量最大;斑管巢蛛Clubiona deletrix在7—9月发生量较大,2—3月的数量明显减少;鳞纹蟏蛸Tetragnatha squamata在4月和11—12月的种群数量较多,6—9月较少见到。脐橙园地面层蜘蛛优势种有2种:草间钻头蛛的季节消长同样具有两个高峰期,但时间跨度较短,仅在6月和10月出现;拟水狼蛛Pirata subpiraticus种群数量在3月达到最高峰,在12月处于低谷。脐橙园树冠层草间钻头蛛和斑管巢蛛的发生数量都与平均气温和日照时数呈显著或极显著正相关,鳞纹蟏蛸的发生数量则与平均气温间呈显著负相关;地面层拟水狼蛛的发生数量与相对湿度和降雨量间表现出极显著的正相关性。

关键词：赣南脐橙园蜘蛛发生动态气象因子

广州市冶金系统生产性粉尘作业危害程度普查情况

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职业医学 1991年第5期18卷 315-316页

作者：罗育发广州市冶金工业总公司安环处

一九八八年,市冶金系统在企业中进行生产性粉尘(以下简称粉尘)作业危害程度分级普查,旨在为企业今后定期检测、分析提供重要科学依据。方法根据中华人民共和国国标(简称国标)《生产性粉尘作业危害程度分级》GB5817—86与《作业场所空气... 详细信息

一九八八年,市冶金系统在企业中进行生产性粉尘(以下简称粉尘)作业危害程度分级普查,旨在为企业今后定期检测、分析提供重要科学依据。方法根据中华人民共和国国标(简称国标)《生产性粉尘作业危害程度分级》GB5817—86与《作业场所空气中粉尘测定方法》GB5748—85,以粉尘中游离二氧化硅含量、工人接尘时间肺总通气量以及粉尘浓度超标倍数三项指标。

关键词：生产性粉尘危害

广州市冶金系统建立工业卫生档案和健康监护档案试点工作情况介绍

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中国职业医学 1990年第3期 184-185页

作者：罗育发广州市冶金工业总公司安动处

广州市冶金工业总公司根据市经委等部门《关于建立与健全市属工厂(矿)工业卫生档案和健康监护档案的通知》精神,结合企业实际与特点,确定了在本系统开展了试点工作。由于各级领导的重视及厂企各部门协调工作,预期圆满地完成了试点工作任... 详细信息

广州市冶金工业总公司根据市经委等部门《关于建立与健全市属工厂(矿)工业卫生档案和健康监护档案的通知》精神,结合企业实际与特点,确定了在本系统开展了试点工作。由于各级领导的重视及厂企各部门协调工作,预期圆满地完成了试点工作任务,经市经委等部门验收全部合格。其中广州钢铁厂、广州锌片厂、广州镀锌铁丝厂和市冶金工业总公司被广州市经济委员会授予“两档”建设试点工作先进单位。现将“两档”建设试点工作情况介绍于下。

关键词：健康监护总公司广州市广州钢铁厂物理因素尘毒职业卫生劳动卫生档案

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菠萝过敏所致急性喉头水肿一例

新医药通讯 1980年第2期 27-28页

作者：罗育发广州市岭头疗养院

男,28岁,于1979年8月5日上午10时许,因空腹食未经盐水浸泡的菠萝约斤半,嗣后约一小时,自觉头晕、眼花、心悸,气促、视力模糊,全身皮肤搔痒,腹剧痛,呕吐少量胃内液状物一次,大便稀烂二

关键词：毫米汞柱菠萝凤梨属肌注