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川射干中鸢尾醛型三萜的分离与鉴定

川射干中鸢尾醛型三萜的分离与鉴定

作者：罗福康广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:川射干是鸢尾科鸢尾属植物鸢尾(Iris tectorum Maxim.)的干燥根茎,又名土知母,蓝蝴蝶,于2005年被中国药典收载,主要产于广东、广西、四川等地。在四川省,常用川射干代替射干入药。川射干具有清热解毒、祛痰、利咽的功效。临床上用... 详细信息

目的:川射干是鸢尾科鸢尾属植物鸢尾(Iris tectorum Maxim.)的干燥根茎,又名土知母,蓝蝴蝶,于2005年被中国药典收载,主要产于广东、广西、四川等地。在四川省,常用川射干代替射干入药。川射干具有清热解毒、祛痰、利咽的功效。临床上用于治疗病毒感染、炎症、咳嗽气喘。近几年,从传统中药川射干中,发现了一系列结构新颖的鸢尾醛型三萜。鸢尾醛型三萜是鸢尾科植物特有的代谢产物,包括单环、双环、螺环三种类型,具有抗炎、抗溃疡、抗疟、抗真菌、抗肿瘤、保护神经系统等多种生物活性。本课题主要对川射干中的化学成分进行研究,期望发现更多的结构新颖而且活性较好的鸢尾醛型三萜,为药理研究奠定基础。方法:70%的乙醇水提取部位首先用D101大孔树脂来富集鸢尾醛型三萜,再用硅胶柱、ODS柱、MCI柱等多种正反柱色谱进行分离,再用凝胶柱除去黄酮,最后用液相色谱,分离纯化鸢尾醛型三萜,根据质谱、核磁、红外、紫外、旋光、Mosher反应、Snatzke法等方法,确定化合物的结构。结果:从川射干70%的乙醇水提取部位分离得到31个化合物,分别是spiroiridal A(IT-1)、spiroiridal B(IT-2)、iritectol H(IT-3)、iritectol I(IT-4)、iritectol J(IT-5)、spirioiridotectal G(IT-6)、spirioiridotectal H(IT-7)、iritectol G(IT-8)、iristectorene I(IT-9)、iristectorene H(IT-10)、isoiridogermanal(IT-11)、iridobelamal A(IT-12)、iridal(IT-13)、iridal 26(IT-14)、iritectol F(IT-15)、22-epiiritectol F(IT-16)、iridojaponal C(IT-17)、iristectorenes B(IT-18)、Iristectorenes D(IT-19)、spirioiridotectal B(IT-20)、Spirioiridotectal A(IT-21)、polycycloiridal D(IT-22)、belamcanolide A(IT-23)、5,7-dihydroxy-8-(1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)ethyl)-3--(4-hydroxyphenyl)-6-methoxy-4H-chromen-4-one(IT-24)、5,7-dihydroxy-8-(1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)allyl)-3--(4-hydroxyphenyl)-6-methoxy-4H-chromen-4-one(IT-25)、Irilin D(IT-26)、tectorigenin(IT-27)、6-hydroxybiochanin A(IT-28)、genistein(IT-29)、dihydrokaempferol(IT-30)、4 ’-O-methyldihydroquercetin(IT-31)结论:其中IT-1～IT-10是新的鸢尾醛型三萜,IT-1和IT-2是螺环型鸢尾醛型三萜,其C-11侧链的C-17～C-19环化形成了 2-甲氧基环己-2,5-二烯-1,4-二酮。IT-3～IT-7是3对差向异构体。IT-24,IT-25是两个新的黄酮类化合物。

关键词：川射干鸢尾属鸢尾醛型三萜化学成分

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人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达

第三军医大学学报 2004年第14期26卷 1231-1234页

作者：罗福康郑红何凤田第三军医大学西南医院实验研究中心重庆400038 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的　构建趋化因子SLC(secondarylymphoid tissuechemokine)的硫氧还蛋白融合表达载体并表达融合蛋白。方法　从人扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增SLC成熟蛋白基因 ,并在 5’和 3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点 ,通过这两个... 详细信息

目的　构建趋化因子SLC(secondarylymphoid tissuechemokine)的硫氧还蛋白融合表达载体并表达融合蛋白。方法　从人扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增SLC成熟蛋白基因 ,并在 5’和 3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点 ,通过这两个酶切位点重组于pET3 2a( +)载体上 ,转化E .coliDH5α ,筛选阳性克隆 ,酶切鉴定 ,DNA测序检测插入序列的正确性 ,经突变删除因NcoⅠ位点引入而在肠激酶位点和目的基因间多余的 3个氨基酸 ,DNA再测序检测突变结果 ,SDS PAGE分析其表达 ,并通过金属离子亲和层析、除盐、弱阳离子交换层析 ,得到纯化的融合蛋白 ,Westernblot验证纯化的融合蛋白。结果　成功构建了SLC天然蛋白的硫氧还蛋白融合表达载体 ,表达并纯化出融合蛋白 ,Westernblot证明该融合蛋白能与羊抗人SLC一抗结合。结论　构建的天然SLC硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式稳定表达SLC硫氧还蛋白。

关键词： SLC 突变融合表达载体蛋白纯化

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木棉花中的1个新的三萜苷元

中草药 2019年第7期50卷 1532-1534页

作者：罗福康陈芳廖国超吴鹏广州中医药大学中药学院中医药防治肿瘤转化医学研究国际合作联合实验室广东广州510006

目的研究木棉Bombax malabaricum花的化学成分。方法通过硅胶和凝胶柱色谱进行化合物的分离与纯化,结合波谱数据和X-ray单晶衍射的方法进行结构解析。结果从木棉花中分离得到1个新化合物,鉴定为3β-乙酰氧基-22α,30-二羟基熊果-20-烯... 详细信息

目的研究木棉Bombax malabaricum花的化学成分。方法通过硅胶和凝胶柱色谱进行化合物的分离与纯化,结合波谱数据和X-ray单晶衍射的方法进行结构解析。结果从木棉花中分离得到1个新化合物,鉴定为3β-乙酰氧基-22α,30-二羟基熊果-20-烯。结论化合物1是熊果烷型三萜类化合物,命名为木棉萜A。

关键词：木棉花木棉属三萜类木棉萜A X-ray单晶衍射

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人趋化因子ELC的克隆与表达

第三军医大学学报 2005年第12期27卷 1204-1207页

作者：罗福康沈大斌郑红第三军医大学新桥医院检验科重庆400037 第三军医大学西南医院实验研究中心重庆400038

目的　克隆人趋化因子ELC基因,表达并初步纯化ELC融合蛋白。方法　从扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增ELC成熟蛋白基因,并在5′和3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET3 2a(+ )载体上,转化E .coliDH5α... 详细信息

目的　克隆人趋化因子ELC基因,表达并初步纯化ELC融合蛋白。方法　从扁桃体中提取总RNA ,再进行RT PCR ,扩增ELC成熟蛋白基因,并在5′和3′分别添加NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET3 2a(+ )载体上,转化E .coliDH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,缺失突变获得ELC天然蛋白表达载体pET3 2a(+ ) ELC ,SDS PAGE分析其表达,Westernblot验证融合蛋白。大量表达并初步纯化ELC融合蛋白。结果　成功克隆了ELC基因,表达并初步纯化得到ELC融合蛋白。结论　构建的ELC硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式表达ELC硫氧还蛋白。

关键词： ELC 融合表达载体缺失突变 Western blotting 蛋白纯化

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Treg细胞与肿瘤免疫的关系

重庆医学 2016年第25期45卷 3567-3570页

作者：李晓英罗福康谢启超重庆市渝北区人民医院肿瘤科 401120 第三军医大学新桥医院检验科重庆400037 第三军医大学新桥医院肿瘤科重庆400037

肿瘤免疫逃逸是导致肿瘤发生、进展的核心机制。调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）作为调控机体免疫系统内稳态及人体自身免疫耐受的重机制，也在肿瘤免疫的调控中扮演着重角色，是目前该领域的研究热点。

关键词：调节性T细胞肿瘤免疫免疫调节

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心律平治疗心律失常30例

浙江医学 1988年第4期 246-247页

作者：罗福康舟山市人民医院

心律平(propafenone,Rytmonorm)化学名丙胺苯丙嗣,直接作用于细胞膜,能降低心肌细胞膜电位的最大上升速率,轻度延长动作电位时间及有效不应期,提高阈电位,是一种广谱抗心律失常新药,但目前对其作用及副作用报道尚少,我院自1985年11月开... 详细信息

心律平(propafenone,Rytmonorm)化学名丙胺苯丙嗣,直接作用于细胞膜,能降低心肌细胞膜电位的最大上升速率,轻度延长动作电位时间及有效不应期,提高阈电位,是一种广谱抗心律失常新药,但目前对其作用及副作用报道尚少,我院自1985年11月开始使用,兹将有系统观察记录的30例治疗结果报告如下。

关键词：心律平剂量利他脉用药量抗心律失常药

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趋化因子与移植排斥反应

华南国防医学杂志 2005年第1期19卷 33-37页

作者：罗福康郑红第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学西南医院综合实验研究中心

趋化因子是由小分子分泌蛋白组成的一个大的细胞因子超家族,近年来,不断有新的趋化因子和受体被发现.趋化因子是能够诱导白细胞做定向运动的细胞因子,在病原体的清除、炎症反应、移植排斥、造血、血管生成、肿瘤发生、HIV感染等过程中... 详细信息

趋化因子是由小分子分泌蛋白组成的一个大的细胞因子超家族,近年来,不断有新的趋化因子和受体被发现.趋化因子是能够诱导白细胞做定向运动的细胞因子,在病原体的清除、炎症反应、移植排斥、造血、血管生成、肿瘤发生、HIV感染等过程中也发挥着重要作用.本文概述了与移植排斥相关的趋化因子和受体的研究进展.

关键词：趋化因子移植排斥反应细胞因子 HIV感染分泌蛋白炎症反应血管生成肿瘤发生超家族小分子白细胞病原体

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免疫散射比浊法测定CRP

局解手术学杂志 2005年第3期14卷 155-156页

作者：罗福康姚磊第三军医大学附属新桥医院检验科重庆400037

目的本文对比浊法测定血清CRP(C反应蛋白)进行方法学评价。方法采用免疫散射比浊法检测100例患者和30例健康正常人血清CRP含量,同时与乳胶凝集法结果对比。结果批内、批间变异系数分别为1.41%和4.66%,定量检测具有满意的线性响应(r=0.98... 详细信息

目的本文对比浊法测定血清CRP(C反应蛋白)进行方法学评价。方法采用免疫散射比浊法检测100例患者和30例健康正常人血清CRP含量,同时与乳胶凝集法结果对比。结果批内、批间变异系数分别为1.41%和4.66%,定量检测具有满意的线性响应(r=0.987),免疫比浊法阳性率为35%,乳胶法为18%,比浊法阳性率明显高于乳胶法。结论本方法的重复性、准确性、稳定性、特异性均较好,脂血、黄疸无明显影响,具有较高的临床推广价值。

关键词：散射比浊法乳胶凝集法 C-反应蛋白

2017-2021年重庆某三甲医院HIV感染临床流行病学特征分析

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国际检验医学杂志 2022年第22期43卷 2786-2792页

作者：唐伟张霞罗福康重庆市第九人民医院医学检验科重庆400700

目的分析人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的临床流行病学资料,了解重庆某三甲医院HIV感染现状及趋势,为制订有针对性的艾滋病(AIDS)防治措施提供科学依据。方法回顾性分析该院2017-2021年HIV抗体初筛阳性并经重庆市北碚区疾病预防控制中... 详细信息

目的分析人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的临床流行病学资料,了解重庆某三甲医院HIV感染现状及趋势,为制订有针对性的艾滋病(AIDS)防治措施提供科学依据。方法回顾性分析该院2017-2021年HIV抗体初筛阳性并经重庆市北碚区疾病预防控制中心AIDS确诊实验室确认的HIV感染者/AIDS患者的临床资料,并分析HIV感染的临床流行病学特征。结果 2017-2021年筛查125 814例患者,HIV感染确诊者共928例,总阳性率为0.74%;各年HIV阳性率分别为0.88%、0.76%、0.60%、0.73%、0.72%,差异有统计学意义(χ^(2)=3.983,P=0.046)。928例确诊HIV感染者/AIDS患者中男663例,女265例,男女比例为2.50∶1.00;≥50岁的中老年患者占72.20%,各年构成比分别为66.98%、75.76%、74.85%、68.97%、75.28%,差异无统计学意义(χ^(2)=0.180,P=0.671);已婚患者占64.66%;患者职业以无固定职业、农民为主,占59.48%;患者文化程度以小学、初中为主,占73.06%;患者户籍及常住人口以城区为主,占71.18%;传播途径以性传播为主;HIV感染时间≥8年的患者占48.35%,各年构成比分别为38.42%、48.55%、48.23%、55.56%、53.12%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.482,P=0.019);HIV感染时间<3年的患者占11.75%,各年构成比分别为17.89%、11.56%、12.06%、9.15%、6.88%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.884,P=0.015);临床分期以Ⅲ期为主。结论 5年来该院监测的HIV总体感染趋势有所下降,感染的主体为50岁及以上中老年人群,感染发现时间较晚,临床分期以Ⅲ期为主。

关键词：人类免疫缺陷病毒艾滋病临床流行病学趋势

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