检索结果-南通市图书馆

作者：罗海水第三军医大学

学位级别：硕士

目的 1.从人包皮组织获得角朊细胞,将其进行体外无血清培养,探索其体外培养的生长特点。利于免疫磁珠细胞分选法(Magnetic Activated Cell Sorting,MACS)结合人胎盘Ⅳ型胶原粘附法从角朊细胞中分离出角朊干细胞后进行无血清培养,寻求一... 详细信息

目的 1.从人包皮组织获得角朊细胞,将其进行体外无血清培养,探索其体外培养的生长特点。利于免疫磁珠细胞分选法(Magnetic Activated Cell Sorting,MACS)结合人胎盘Ⅳ型胶原粘附法从角朊细胞中分离出角朊干细胞后进行无血清培养,寻求一种理想有效的人角朊干细胞体外分离培养技术。 2.在本课题组前期已经成功构建两种人CCL20基因特异性小干扰RNA (small interference RNA,siRNA)重组慢病毒表达载体的基础上,补充测序鉴定出一种人CCL20基因特异性siRNA重组慢病毒阴性对照载体。同时,将构建的重组慢病毒载体以包装细胞293FT包装生产,最后以慢病毒颗粒感染人角朊细胞株HaCaT细胞和角朊干细胞,并初步检测siRNA对于角朊细胞表达CCL20的干扰效果。方法 1.按照Dispase酶-胰酶两步消化法从人包皮组织获得角朊细胞(Keratinocyte,KC),以人胎盘Ⅳ型胶原按照5μg/cm2的密度包被培养瓶,将角朊细胞以无血清培养基(defined keratinocyte-serum free medium,DK-SFM)进行体外原代及传代培养,并观察其生长形态变化、克隆形成,并对原代培养的KC中的KSC以细胞表面分子CD49f(整合素α6)、CD71(转铁蛋白受体)、CD29 (整合素β1)做表型检测。 2.以免疫磁珠法对KC细胞中的角朊干细胞(keratinocyte stem cells,KSC)进行分选,分析其分选的纯度和比例,再结合人胎盘Ⅳ型胶原粘附法将分选所得的细胞进行体外无血清培养,观察其生长情况及克隆形成。 3.将含有CCCL20-siRNA慢病毒载体重组质粒的大肠杆菌(escherichia coli, ***)的菌液以划线法接种于含有Amp 60μg/ml的LB平板上,筛选出阳性菌落、扩增后提取质粒,进行DNA测序鉴定。 4.重组慢病毒表达载体质粒pHSER-CCL20-siRNA-GFP-SIN、慢病毒包装质粒Lentipack和慢病毒包膜蛋白质粒Lentienv按照一定比例混合,与转染试剂jetPEI一同转染包装细胞293FT,24h后观察其荧光表达情况,并分别在48h、72h、96h后,收集含有慢病毒颗粒的培养基上清液,并保存在-80℃。 5.分别将慢病毒颗粒加入至培养至50-60%融合的HaCaT和人角朊干细胞,并设立空白对照组。24 h后,并在所有细胞中加入刺激因子TNF-α、IL-1β和DK-SFM的混合液,使TNF-α和IL-1β的终浓度均为100ng/ml。48h后收集细胞上清液,进行人CCL20的酶联免疫吸附测定(Enzyme linked-immuno-sorbent assay ,ELISA),在酶标仪上检测其OD450值。根据试剂盒中标准品的浓度-OD450值,求出其拟合曲线和方程,将样品OD450值代入方程,得到样品中CCL20的蛋白浓度。比较几种慢病毒颗粒和对照组的CCL20浓度,初步评价siRNA干扰对于TNF-α和IL-1β共同刺激下的人角朊细胞株HaCaT和角朊干细胞表达CCL20的下调作用。结果 1.角朊细胞以无血清培养基可在体外稳定培养35.13±7.59天,传3.87±0.83代,原代细胞克隆形成时间为5.75±0.90天。原代与传代细胞的克隆形成时间和传代时间差异不明显(P>0.05),细胞经传代培养后细胞数无明显增加。 2. CD49f、CD71直接免疫荧光双重标记的原代培养角朊细胞中CD49fbriCD71dim细胞的比例为46.6±2.1%,CD29直接免疫荧光标记原代培养角朊细胞的阳性率为65.8±2.3%。 3.新鲜的人角朊细胞悬液经MACS法分选后所得的CD49fbriCD71dim细胞比率达(12.2±7.1)%。CD49fbriCD71dim细胞经培养可见细胞为典型的上皮样特征,呈铺路石样形态,高核浆比例,细胞紧密排列,轮廓清楚,折光性好,并可在5-7天左右可形成全克隆,符合角朊干细胞的特点。 4.构建的1种重组慢病毒阴性对照载体通过测序验证载体构建成功。 5.成功利用293FT细胞包装已经构建成功的重组载体质粒,生产出慢病毒颗粒,观察到其有较高的感染效应。慢病毒颗粒感染HaCaT和角朊干细胞后通过人CCL20酶联免疫吸附测定实验,初步观察到两种人CCL20基因特异性siRNA重组慢病毒表达载体对于人角朊细胞表达CCL20有一定的下调作用。结论 1.对人KC的体外无血清培养方法进行了观察,探索出了其体外无血清培养的生长特性和规律。 2.将MACS分选法与人胎盘Ⅳ型胶原粘附法相结合从皮肤组织的表皮细胞悬液中直接分离出较高比例的干细胞,在如何对KSC进行大量纯化的方法学上做了一次新的探索,为

关键词：角朊干细胞 HaCaT细胞 CCL20 小RNA干扰慢病毒载体

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基因修饰角质形成细胞及角质形成干细胞的研究进展

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中华烧伤杂志 2008年第3期24卷 228-230页

作者：罗海水彭代智第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

角质形成细胞（keratinocytes，KC）是构成皮肤表皮的主要细胞，其中的角质形成干细胞（keratinoeyte stem cell，KSC）在表皮形成过程中起重要作用。近年来，随着对KC尤其是KSC特性的深入了解，其分离培养技术的日益成熟，各种基因修... 详细信息

角质形成细胞（keratinocytes，KC）是构成皮肤表皮的主要细胞，其中的角质形成干细胞（keratinoeyte stem cell，KSC）在表皮形成过程中起重要作用。近年来，随着对KC尤其是KSC特性的深入了解，其分离培养技术的日益成熟，各种基因修饰方法的不断改进，越来越多的目的基因被用于修饰KC及KSC。目前，基因修饰的KC及KSC已被广泛用于皮肤创面修复、

关键词：角质形成细胞基因修饰干细胞皮肤表皮分离培养技术 KSC cell 修饰方法

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论人教版高中英语课文对学生阅读能力的影响

论人教版高中英语课文对学生阅读能力的影响

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作者：罗海水宁波大学

学位级别：硕士

在《普通高级中学英语课程标准(实验稿)》的基础上修订而成的人教版高中英语教材体现了全新的教学理念和教学方法，英语教材的内容贴近学生的日常生活，富有时代特征，注重发展学生的综合语言能力。同时教材课文的选材遵循了语言材料的... 详细信息

在《普通高级中学英语课程标准(实验稿)》的基础上修订而成的人教版高中英语教材体现了全新的教学理念和教学方法，英语教材的内容贴近学生的日常生活，富有时代特征，注重发展学生的综合语言能力。同时教材课文的选材遵循了语言材料的代表性，真实性和人文性。长期以来，在高中英语教育中教师对教材课文的使用存在偏差：不重视教材课文或过度过分注重教材课文的词汇和语法。很多教师偏爱利用教辅资料或网络上的课外阅读材料，以题海战术的方式来提高学生的阅读能力，让教材课文成为鸡肋。这种重复而机械的海量阅读习题不仅磨灭了学生的阅读兴趣，而且由于材料质量良莠不齐，耗费了学生有限的精力。同时部分基础较弱的学校虽然重视课文阅读，但是在课文的讲解中偏爱词汇和语法的讲解，忽视了文化背景和文章体裁的补充和分析，深层次的批判性阅读和人文性思考不够，欠缺对学生阅读能力的培养，并没有真正利用好教材课文。通过对某高中学校学生的问卷调查发现：学生的阅读能力受到多方面的影响，尤其是词汇量，很大程度上影响了学生的阅读速度和对文章主旨的把握。同时由于欠缺文化背景知识的积累和体裁特点的把握，学生阅读能力的提升受到阻碍。所以本文拟就人教版教材课文在话题词汇，文化背景知识和文章体裁三方面的影响展开论述。实验研究表明人教版教材课文在话题词汇，文化背景知识和文章体裁方面对学生阅读能力有着积极的影响：教材课文的词汇是学生的阅读材料中的核心词汇。课文中的词汇在学生脑海中围绕某个话题形成概念图或主题知识，最终促进学生阅读能力的提高。学生对课文中渗透的大量的文化背景知识印象更为深刻，这些知识的积累可以帮助学生理解某个细节，也能了解文章的隐藏含义,其中包括作者的立场观点和写作意图。教材课文中涵盖了记叙文，说明文，议论文，诗歌，戏剧，应用文等常见阅读体裁。理解了各种体裁的文体特点和文章结构，学生能在不同体裁的文章中采用不同的阅读策略，提要阅读能力。本研究对于教师在使用人教版教材时，如何在话题词汇，文化背景知识和文章体裁方面改善教学效果，以提高学生阅读能力有一定的教学启发。

关键词：人教版高中英语课文话题词汇文化背景知识文章体裁阅读能力

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新疆克州边境民族地区旅游扶贫模式研究

新疆克州边境民族地区旅游扶贫模式研究

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作者：罗海水新疆大学

学位级别：硕士

近年来,旅游的大力发展对消除贫困的作用越来越得到认可。旅游扶贫是通过发展旅游业,兴办旅游经济实体,带动贫困地区和欠发达地区实现脱贫致富的重要扶贫手段。与内陆地区相比,边境民族地区在自然条件、经济基础、公共服务、人口质量等... 详细信息

近年来,旅游的大力发展对消除贫困的作用越来越得到认可。旅游扶贫是通过发展旅游业,兴办旅游经济实体,带动贫困地区和欠发达地区实现脱贫致富的重要扶贫手段。与内陆地区相比,边境民族地区在自然条件、经济基础、公共服务、人口质量等方面存在很大差距,犹如全国小康社会建设中的一块“洼地”。然而,边境民族地区在自然资源、民族文化方面又具有旅游“高地”的特性。克州作为典型的边境民族地区,地处我国西部边陲,为国家深度贫困“三区三州”之一,其辖三县一市全部为国家贫困县。同时,克州具有地貌雄浑、雪山冰川奇丽、柯尔克孜族民俗独具魅力、历史文化丰富等特点,且与吉尔吉斯斯坦、塔吉克斯坦等国家交界,旅游行业发展潜力巨大。旅游扶贫成为克州经济社会发展的必然选择。本文选取克州作为研究对象,以旅游乘数理论、比较优势理论等为基础,基于克州独具丰富的自然和人文旅游资源的特点,通过文献研究法、实地调查法、SWOT分析法等研究方法,对克州旅游业发展的优势、劣势、威胁和机遇进行了综合的梳理与分析。一方面,本文根据旅游资源的禀赋特点,将克州归纳为世界独特地貌聚集地、古丝绸之路交汇地、典型柯尔克孜族文化汇聚地、中国西部边境口岸地这四种类型的核心旅游资源的融汇地。另一方面,从着力提高旅游扶贫的覆盖广度和深度的角度来说,将扶贫攻坚和旅游发展结合起来能够使贫困人口最大程度分享旅游扶贫带来的红利并提高参与旅游扶贫开发的能力和积极性。针对克州旅游扶贫模式现状以及存在问题,本文提出了相应的景区带动、古迹遗址、民俗非遗、口岸贸易四种旅游扶贫模式,并明确了各自不同的开发利用主体和贫困群众参与机会的方式。最后,本文从组织职能、管理机制、产业结构、配套体系四个方面提出了保障体系,解析边境民族地区旅游扶贫的模式类型及其创新,探讨少数民族地区旅游扶贫的机制及其优化,并在此基础上提出有关政策建议。总的来说,本研究在一定程度上丰富了边境民族地区旅游扶贫开发模式的理论系统,具有一定的理论意义,也为其他边境民族地区开展旅游扶贫提供理论研究支持和决策参考。同时,本文以实现克州旅游发展与消除贫困的双赢为研究目标,具有较强的可操作性,对克州民族贫困地区及其他地区具有一定的实践指导和借鉴意义。

关键词：旅游扶贫模式民族地区边境克州

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依法执政必须正确把握和处理好几个关系

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党史文苑 2009年第18期 63-64页

作者：罗海水上塘镇人民政府

党的十六届四中全会明确提出必须坚持依法执政,这是中国共产党在总结历史经验、借鉴其他国家的执政党执政经验的基础上提出来的。能否做到依法执政对于法治政府的建设具有极其重大的意义,我们应当正确把握依法执政与依法治国、党与政、... 详细信息

党的十六届四中全会明确提出必须坚持依法执政,这是中国共产党在总结历史经验、借鉴其他国家的执政党执政经验的基础上提出来的。能否做到依法执政对于法治政府的建设具有极其重大的意义,我们应当正确把握依法执政与依法治国、党与政、党与法等之间的关系,在此基础上才能进一步促进依法执政的实现。

关键词：中国共产党依法执政依法治国法律

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900MHz电磁辐射对体外培养的大鼠海马神经干细胞超微结构和凋亡的影响

900MHz电磁辐射对体外培养的大鼠海马神经干细胞超微结构和凋亡的...

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中华医学会神经外科学分会第九次学术会议

作者：罗海水第三军医大学西南医院神经外科

目的研究900MHz电磁辐射对体外培养的大鼠海马神经干细胞超微结构及细胞凋亡的影响,为900MHz电磁波对中枢神经系统的生物学效应提供基础资料。方法将体外培养的新生大鼠海马神经干细胞暴露于900MHz的电磁辐射(功率密度分别为0mw/cm、1mw...

目的研究900MHz电磁辐射对体外培养的大鼠海马神经干细胞超微结构及细胞凋亡的影响,为900MHz电磁波对中枢神经系统的生物学效应提供基础资料。方法将体外培养的新生大鼠海马神经干细胞暴露于900MHz的电磁辐射(功率密度分别为0mw/cm、1mw/cm和3mw/cm),每天暴露2h,连续6d,及一次性12h暴露,原子力显微镜(AFM)观察细胞表面超微结构的变化,透射电镜(TEM)观察胞内超微结构的变化,以Annexin V-FITC/PI试剂盒染色后经流式细胞仪检测细胞凋亡的比例。结果 900MHz电磁辐射后,与对照组(0mw/cm)相比,辐照组(1mw/cm和3mw/cm组)神经干细胞表面粗糙,有"孔洞"、"裂隙"样等改变,胞内细胞质均匀化改变,细胞器结构明显改变,出现空泡样变、溶酶体增多,细胞核形态结构破坏,核膜消失,染色质固缩、边集,这些表现在3mw/cm处理组更加明显;无论是间断辐照还是连续12h辐照,与对照组相比,1mw/cm和3mw/cm组的细胞凋亡比例均明显增加(P<0.01),而且在间断辐照时,3mw/cm也比1mw/cm组的细胞凋亡比例增加(P<0.05)。结论 900MHz电磁辐射可致体外培养的神经干细胞超微结构的发生明显的凋亡改变,其凋亡程度与微波辐照的剂量可能有一定的关系。

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依法执政必须正确把握和处理好几个关系

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党史文苑（学术版） 2009年第9期 63-64页

作者：罗海水上塘镇人民政府江西丰城331100

党的十六届四中全会明确提出必须坚持依法执政,这是中国共产党在总结历史经验、借鉴其他国家的执政党执政经验的基础上提出来的.能否做到依法执政对于法治政府的建设具有极其重大的意义,我们应当正确把握依法执政与依法治国、党与政、... 详细信息

党的十六届四中全会明确提出必须坚持依法执政,这是中国共产党在总结历史经验、借鉴其他国家的执政党执政经验的基础上提出来的.能否做到依法执政对于法治政府的建设具有极其重大的意义,我们应当正确把握依法执政与依法治国、党与政、党与法等之间的关系,在此基础上才能进一步促进依法执政的实现.

关键词：中国共产党依法执政依法治国法律

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抗血管生成抑制剂疗法研究进展

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医学信息（医学与计算机应用） 2001年第1期14卷 57-58页

作者：罗海水王强卞修武第三军医大学学员旅三队 400038 第三军医大学基础部病理教研室

1抗血管生成抑制剂的研究肿瘤血管形成的主要过程目前认为是:诱发因素→肿瘤细胞被活化分泌可能性血管生成刺激因子,如VEGF(血管内皮生长因子)、FGF(成纤维细胞生长因子)→激活内皮细胞和金属蛋白酶→基底膜被破坏,内皮细胞收缩,趋化,迁... 详细信息

1抗血管生成抑制剂的研究肿瘤血管形成的主要过程目前认为是:诱发因素→肿瘤细胞被活化分泌可能性血管生成刺激因子,如VEGF(血管内皮生长因子)、FGF(成纤维细胞生长因子)→激活内皮细胞和金属蛋白酶→基底膜被破坏,内皮细胞收缩,趋化,迁移,增殖,形成血管芽→血管芽吻合成血管.因为肿瘤血管及其生长过程的某些特殊性使得其更有利于肿瘤生长和转移,而抗血管生成的所有方法都是靶定内皮细胞而不是肿瘤细胞,这样使得抗血管疗法具有不产生耐药性,而广泛性、毒副作用小等优点.目前抗血管生成抑制剂疗法主要有三种:

关键词：抗血管生成抑制剂肿瘤治疗

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我市“互联网+第四方物流”供销集配体系实现县域全覆盖 001

我市“互联网+第四方物流”供销集配体系实现县域全覆盖

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宜春日报

作者：罗海水李勇

本报讯罗海水记者李勇报道：为降低物流成本，提高流通效率，着力解决农产品进城“最先一公里”和工业品下乡“最后一公里”问题，近年来，我市供销系统全力推进“互联网+第四方物流”供销集配体系建设。近日，记者从市供销联社获悉... 详细信息

本报讯罗海水记者李勇报道：为降低物流成本，提高流通效率，着力解决农产品进城“最先一公里”和工业品下乡“最后一公里”问题，近年来，我市供销系统全力推进“互联网+第四方物流”供销集配体系建设。近日，记者从市供销联社获悉，目前，我市“互联网+第四方物流”供销集?

关键词：第四方物流

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几个抗根腐病高产红薯品种试验示范报告

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湖北农业科学 1981年第6期 12-14页

作者：周茂繁徐鹏志罗海水华中农学院黄石市农林局大冶县农业局

红薯是大冶县主要粮食作物之一,常年种植面积7—8万亩,总产4,000—5,500万斤(折粮)。目前的当家品种是1954年引进的

关键词：抗根腐病品种(系) 人工接种胜利红薯自然病圃

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