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中国中药杂志 2005年第2期30卷 96-99页

作者：罗昌国张瑞贤江西中医学院江西南昌330000 中国中医研究院中药研究所北京100700

附子之大剂量应用,古已有之.如唐代就有记载用附子达"四两"者(合今约130 g,按五版所载古今度量衡换算法),近人祝味菊、吴佩衡等都能善用大剂量附子屡起沉疴.……

关键词：附子超大剂量《千金要方》《方剂学》医家祝味菊近20年应用概况记载中毒

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对附子大剂量应用毒性问题的探讨

中国中药杂志 2009年第18期34卷 2423-2424页

作者：罗昌国张瑞贤广西中医学院附属瑞康医院广西南宁530011 中国中医科学院中药研究所北京100700

附子为有毒中药,其使用剂量理当严格限制。但自古以来,时有大剂量附子应用记载,也有医家因善用大剂量附子而扬名。因而,附子大剂量应用的安全性和必要性就颇值得探讨。本文通过文献研究,对这一问题进行初步研究。

关键词：附子大剂量毒性

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基于转录组测序的湖北海棠抗白粉病机制分析

园艺学报 2021年第5期48卷 860-872页

作者：兰黎明罗昌国王三红南京农业大学园艺学院果树生物技术实验室南京210018 贵州省农业科学院果树科学研究所贵阳550006

为研究湖北海棠[Malus hupehensis(Pamp)Rehd.]响应白粉病菌胁迫过程中相关基因的表达及分子机制,取同一时期爆发白粉病的‘青砧1号’、‘青砧1号’/湖北海棠嫁接苗的接穗部分和湖北海棠等3份材料的叶片,使用BGISEQ-500测序技术对其进... 详细信息

为研究湖北海棠[Malus hupehensis(Pamp)Rehd.]响应白粉病菌胁迫过程中相关基因的表达及分子机制,取同一时期爆发白粉病的‘青砧1号’、‘青砧1号’/湖北海棠嫁接苗的接穗部分和湖北海棠等3份材料的叶片,使用BGISEQ-500测序技术对其进行转录组测序分析。结果表明:青砧1号、青砧1号/湖北海棠和湖北海棠对白粉病的抗性依次增加;GO富集显示代谢过程和催化活性相关的GO term在青砧1号、青砧1号/湖北海棠和湖北海棠中被显著富集;KEGG分析显示亚油酸代谢、植物病原体相互作用、磷酸肌醇代谢、油菜素类固醇生物合成和磷脂酰肌醇信号系统等5条代谢途径在‘青砧1号’/湖北海棠和湖北海棠中均显著富集,碳代谢途径只在抗性强的湖北海棠中显著富集。与白粉病抗性相关基因家族表达分析显示,WRKY70、WRKY33、NPR3和WRKY40等转录因子基因在青砧1号/湖北海棠和湖北海棠中较青砧1号显著上调表达。实时荧光定量PCR结果证实了转录组测序结果的准确性。

关键词：苹果湖北海棠砧木砧穗互作白粉病转录组差异表达

苹果转录因子MdWRKY40b抗白粉病的机理

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中国农业科学 2021年第24期54卷 5220-5229页

作者：沙仁和兰黎明王三红罗昌国南京农业大学园艺学院贵州省农业科学院果树科学研究所

【目的】探究苹果白粉病相关基因MdWRKY40b调控苹果抗白粉病的机理,为苹果白粉病的抗性育种提供理论依据。【方法】以苹果品种‘嘎拉’叶片为材料提取总RNA,并以cDNA为模板克隆MdWRKY40b 552 bp特异性片段,采用Gateway技术将该基因片段... 详细信息

【目的】探究苹果白粉病相关基因MdWRKY40b调控苹果抗白粉病的机理,为苹果白粉病的抗性育种提供理论依据。【方法】以苹果品种‘嘎拉’叶片为材料提取总RNA,并以cDNA为模板克隆MdWRKY40b 552 bp特异性片段,采用Gateway技术将该基因片段的正反向序列构建入RNAi表达载体pB7GWIWG2(Ⅱ)中,然后利用农杆菌介导法对苹果叶片进行转化获得转基因植株,苹果叶片选用组培苗茎尖处幼嫩叶片;利用RT-qPCR技术对转基因植株中MdWRKY40b、超氧化物歧化酶基因(SOD)、过氧化氢酶基因(CAT)、过氧化物酶基因(POD)以及β-1,3-葡聚糖酶基因(β-1,3-glucanase)的表达量进行分析;进一步以1年生植株为材料,通过白粉病菌(Podosphaera leucotricha)接种试验,分析转基因植株对白粉病的抗病性;然后以接种白粉病菌后0、5、10、15、20 d的转基因植株及其对照植株叶片为材料,进行氯化硝基四氮唑蓝液(NBT)和二氨基联苯胺法(DAB)染色来分析病菌侵染期间植物材料中超氧阴离子和过氧化氢的积累量,进一步对病菌侵染期间植株中SOD、POD、CAT和β-1,3-葡聚糖酶等酶活性进行测定。【结果】经过PCR检测,确定获得3个MdWRKY40b基因沉默株系,分别为RNAi-1、RNAi-2和RNAi-3;RT-qPCR结果显示3个转基因株系MdWRKY40b基因沉默效率分别为95.2%、92.2%、79.8%,转基因植株中SOD、CAT、β-1,3-glucanase的表达量相较野生型显著上调;人工接种白粉病菌后发现,与野生型植株相比,转基因植株叶片中的粉状病斑显著减少,超氧阴离子和过氧化氢的积累量显著降低,SOD、CAT、POD等调节植物超氧阴离子代谢的抗氧化酶以及抗病相关的β-1,3-葡聚糖酶的活性显著增强。【结论】MdWRKY40b的沉默使得苹果植株对白粉病的抗病性增强,推测转基因植株中SOD、CAT、β-1,3-glucanase的上调表达提高了苹果植株对白粉病的基础抗性,导致植物对超氧阴离子的清除能力增加,维持了植物体在响应病菌侵染过程中的低浓度超氧阴离子含量,从而减少高浓度超氧阴离子对植物的损伤。

关键词：苹果白粉病 MdWRKY40b 转基因活性氧抗氧化酶

不同苹果品种白粉病田间抗性与遗传多样性分析

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江苏农业科学 2023年第6期51卷 107-113页

作者：郑伟吴亚维宋莎罗昌国王彬贵州省农业科学院果树科学研究所贵州贵阳550006

为探究贵州苹果栽培品种亲缘关系,筛选优异抗源材料,挖掘优良抗性基因,利用ISSR分子标记技术,通过DNA提取、PCR扩增、电泳检测、引物选择、数据分析等,对16份栽培苹果品种进行亲缘关系分析,建立供试种质的DNA指纹图谱数据库,并分析各品... 详细信息

为探究贵州苹果栽培品种亲缘关系,筛选优异抗源材料,挖掘优良抗性基因,利用ISSR分子标记技术,通过DNA提取、PCR扩增、电泳检测、引物选择、数据分析等,对16份栽培苹果品种进行亲缘关系分析,建立供试种质的DNA指纹图谱数据库,并分析各品种亲缘关系与白粉病田间抗性的相关性。遗传分析结果表明,在标记检测范围内,16份苹果样品表现出遗传差异性,其遗传距离在0.56~0.93。聚类分析显示,以相似系数0.63为标准,可将供试的16份苹果品种划分为2大类,第1类只有1份材料,为翠秋;第2类包括15份材料,其中以遗传距离0.72为阈值,该类分为5小类,其中凉香的季节与王富的遗传距离最小,亲缘关系最近,相似系数为0.93;脆秋与王林的遗传距离最大,亲缘关系最远,相似系数为0.56。ISSR分子标记技术可用于苹果不同品种间的遗传多样性分析,鉴定16个苹果品种的遗传相似性,筛选出的ISSR引物具有一定的代表性,可为之后苹果的品种资源多态性及抗病性的鉴定提供一定的参考。而不同品种田间抗性的调查数据和亲缘关系的分析数据显示,不同苹果品种对白粉病的抗性与亲缘关系的远近没有太大的相关性。

关键词：苹果白粉病田间抗性遗传多样性 DNA指纹图谱聚类分析相关性

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桃的种植历史与价值

大众科学 2018年第12期: 56-57卷 56-57页

作者：罗昌国不详

“园有桃,其实之殽。心之忧矣,我歌且谣。”“桃之夭夭,灼灼其华。之子于归,宜其室家。桃之夭夭,有蕡其实。之子于归,宜其家室。桃之夭夭,其叶蓁蓁。之子于归,宜其家人。”等《诗经》的诗句中可以得证,早在2500年前,桃在中国已经得到了... 详细信息

“园有桃,其实之殽。心之忧矣,我歌且谣。”“桃之夭夭,灼灼其华。之子于归,宜其室家。桃之夭夭,有蕡其实。之子于归,宜其家室。桃之夭夭,其叶蓁蓁。之子于归,宜其家人。”等《诗经》的诗句中可以得证,早在2500年前,桃在中国已经得到了人工种植。而在北魏时期的《齐民要术》、明清时期的《水蜜桃谱》等古书就有了桃栽培的详细技术。这些资料充分的说明:中国西部地区是桃的起源中心。目前我国仍有野生桃、光核桃、山桃、甘肃桃、新疆桃、陕甘山桃、榆叶梅、长柄扁桃、西康扁桃、蒙古扁桃、野扁桃、扁桃等桃属植物自然群体分布。

关键词：水蜜桃种植历史中国西部地区价值《齐民要术》长柄扁桃《诗经》人工种植

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矮生一品红大棚栽培技术

广西园艺 2004年第4期15卷 50-52页

作者：袁启凤罗昌国贵州省柑桔科学研究所贵州罗甸550100

一品红为大戟科大戟属常绿灌木,原产于中美洲,国内早期多作为庭园栽植用,但其弱点是植株较高,分枝性较弱,花苞小.矮生一品红是经过人工选育的优良盆栽花卉,近年在国内外掀起了消费的热潮,其植株矮化紧凑,分枝性强,花型比较大,花色比较丰... 详细信息

一品红为大戟科大戟属常绿灌木,原产于中美洲,国内早期多作为庭园栽植用,但其弱点是植株较高,分枝性较弱,花苞小.矮生一品红是经过人工选育的优良盆栽花卉,近年在国内外掀起了消费的热潮,其植株矮化紧凑,分枝性强,花型比较大,花色比较丰富,观赏价值比较高,耐荫性强等特点,使矮生一品红生产成为了投资少、见效快、收益高的农业投资项目.矮生一品红在南方一般使用大棚进行生产,但在栽培过程中,如何进行温度、水肥、光照、病虫害等的管理,又不得不让种植者畏惧而不敢轻易地大批量生产,使用大棚栽培可以缩短其生产周期,便于病虫害防治、水肥管理等.

关键词：矮生一品红大棚栽培技术扦插繁殖

李园杂草管理方式对土壤细菌群落和生态功能的影响

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经济林研究 2024年第1期42卷 304-316页

作者：罗昌国袁启凤陈守一田晓慧贵州省农业科学院果树科学研究所贵州贵阳550006

【目的】分析不同杂草管理方式对位于国家重点生态功能县的李园细菌群落结构和生态功能的影响,为李园土壤健康管理提供参考。【方法】以自然生草、人工生草、除草剂除草的李园和邻近天然槲栎次生林土壤为研究对象,提取土壤细菌DNA,对其... 详细信息

【目的】分析不同杂草管理方式对位于国家重点生态功能县的李园细菌群落结构和生态功能的影响,为李园土壤健康管理提供参考。【方法】以自然生草、人工生草、除草剂除草的李园和邻近天然槲栎次生林土壤为研究对象,提取土壤细菌DNA,对其ITS基因进行扩增,采用高通量测序和功能预测的方法研究细菌的多样性、群落结构及生态功能。【结果】不同处理OTU数量为2012~3522,细菌种类33门、108纲、242目、383科、667属。绿弯菌门、放线菌门、变形菌门和酸杆菌门为主要门类,在各处理中4个门的总丰度达到80%以上。多样性分析显示,天然林Ace和Chao指数显著低于李园的3个处理。群落组成和差异分析显示,天然林土壤酸杆菌优势比较大,病害细菌少,并有少量的有益细菌蛭弧菌;李园的鞘脂单胞菌相关病害的风险大,生草可在一定程度上提高芽孢杆菌等有益细菌的丰度,尤其自然生草比较明显。人工生草还有利于提高李园细菌的多样性,尤其是芽单胞菌的富集比较明显。使用除草剂的李园则主要富集了绿弯菌门的种类,而降低了苔藓杆菌的丰度。功能预测分析显示,土壤细菌新陈代谢最活跃,主要包括碳水化合物代谢和氨基酸代谢等,涉及化能异养、纤维素分解、固氮作用等功能。与其他处理比较,人工生草李园土壤硝酸还原功能较强、天然林土壤的木质素分解功能较强、除草剂处理的李园土壤甲基营养功能较强。【结论】天然林Ace和Chao指数显著低于李园,表现为土壤酸杆菌优势明显。不同杂草管理方式对李园土壤细菌群落结构和功能的影响较大,生草有利于李园有益细菌群落的建立。

关键词：果园杂草管理土壤健康细菌多样性群落结构生态功能

湖北海棠MhWRKY42基因克隆及表达分析

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南京农业大学学报 2013年第3期36卷 29-35页

作者：罗昌国乔玉山渠慎春张计育王三红王宏刘丹章镇南京农业大学园艺学院江苏南京210095 贵州省农业科学院果树科学研究所贵州贵阳550006 江苏省中国科学院植物研究所江苏南京210014

从湖北海棠上克隆到1个WRKY基因,开放阅读框(ORF)长度为1 818个核苷酸,编码606个氨基酸。该基因氨基酸序列与拟南芥AtWRKY42的一致性为39.38%,具有WRKY基因家族典型保守结构域,即N端为WRKYGQK,C端为Cx4-5Cx22-23HxH;蛋白三级结构和拟南... 详细信息

从湖北海棠上克隆到1个WRKY基因,开放阅读框(ORF)长度为1 818个核苷酸,编码606个氨基酸。该基因氨基酸序列与拟南芥AtWRKY42的一致性为39.38%,具有WRKY基因家族典型保守结构域,即N端为WRKYGQK,C端为Cx4-5Cx22-23HxH;蛋白三级结构和拟南芥AtWRKY42相似,具有4个β折叠;系统进化树上与AtWRKY42聚在同一分支,属于WRKY基因家族GroupⅡb成员,命名为MhWRKY42(GenBank登录号:JX112905)。实时荧光定量RT-PCR分析表明,MhWRKY42基因在各个器官中都有表达,其中在果实中表达量最高,根和总花次之;在花中,以花萼表达量最高,子房和雄蕊次之;其受盐、低温、苹果白粉病诱导表达;外源IAA处理诱导其下调表达;而MhWRKY42基因表达受ABA、水分胁迫的影响小。

关键词：湖北海棠 WRKY转录因子基因克隆表达胁迫

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湖北海棠5A基因进化与表达分析

西北植物学报 2011年第12期31卷 2380-2388页

作者：罗昌国乔玉山张计育薛华柏高志红渠慎春章镇南京农业大学园艺学院南京210095 贵州省农业科学院果树科学研究所贵阳550006 江苏省中国科学院植物研究所南京210014 中国农业科学院郑州果树研究所郑州450009

以水杨酸(SA)诱导的湖北海棠双链cDNA为模板,克隆湖北海棠5A基因并对其序列进行比对分析,用邻位法构建进化树;以根、茎、叶等器官的单链cDNA为模板、以半定量及NCBI数据库相关EST分析研究其5A基因的表达特性,以探讨湖北海棠真核生物蛋... 详细信息

以水杨酸(SA)诱导的湖北海棠双链cDNA为模板,克隆湖北海棠5A基因并对其序列进行比对分析,用邻位法构建进化树;以根、茎、叶等器官的单链cDNA为模板、以半定量及NCBI数据库相关EST分析研究其5A基因的表达特性,以探讨湖北海棠真核生物蛋白翻译起始因子5A基因序列、表达及进化的相关信息。结果表明:(1)湖北海棠5A基因编码框长度为477个核苷酸,编码159个氨基酸,其序列与部分已报道的双子叶植物一致性达91%,与单子叶植物、细菌、古细菌、藻类一致性分别为96%、55%、70%、63%。(2)蛋白的三级结构显示湖北海棠5A蛋白与拟南芥5A蛋白也十分相似;基因进化分析显示湖北海棠5A基因沿着细菌、古细菌、藻类的进化路径,最后与月季聚在同一分枝中。(3)基因表达分析表明,湖北海棠5A基因不仅在根、茎、叶、花、果实、种子等器官中表达,而且在不同的发育时期和各种胁迫条件下表达,具有组成性表达的特点。

关键词：湖北海棠 5A基因基因进化基因表达