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卵叶牡丹花色苷合成相关基因bHLH的克隆与功能分析

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生物技术通报 2024年第8期40卷 174-185页

作者：李雨晴吴楠罗建让西北农林科技大学风景园林艺术学院杨凌712100

【目的】以卵叶牡丹(Paeonia qiui)为试验材料,研究PqbHLH1基因在叶片发育过程中对花色苷合成的调控机制。【方法】基于前期获得的卵叶牡丹叶片转录组数据设计引物,利用PCR技术从卵叶牡丹叶片中克隆得到bHLH1基因,采用生物信息学方法分... 详细信息

【目的】以卵叶牡丹(Paeonia qiui)为试验材料,研究PqbHLH1基因在叶片发育过程中对花色苷合成的调控机制。【方法】基于前期获得的卵叶牡丹叶片转录组数据设计引物,利用PCR技术从卵叶牡丹叶片中克隆得到bHLH1基因,采用生物信息学方法分析PqbHLH1基因的理化性质、亲疏水性、理论等电点、蛋白二级结构以及物种的进化关系。通过荧光定量PCR技术检测其在不同组织、不同时期的表达量。利用农杆菌介导法使其在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中过表达,检测过表达PqbHLH1对卵叶牡丹叶片花色苷的影响。【结果】PqbHLH1基因的编码区全长为1920 bp,编码639个氨基酸。PqbHLH1蛋白属于亲水性蛋白,同时不含有信号肽和跨膜结构,且定位在细胞核上。系统进化分析表明卵叶牡丹PqbHLH1蛋白与葡萄VvMYCA1的亲缘关系最近。荧光定量PCR分析表明PqbHLH1基因在卵叶牡丹叶片中的表达量呈先降低后增高的趋势,在叶片S6时期表达量显著,且花色苷合成结构基因PqCHS、PqF3'H、PqDFR和PqANS随着叶片发育其表达水平呈现出先上升后下降的趋势。PqbHLH1基因过表达的拟南芥株系中,与花色苷合成相关结构基因的表达量显著高于野生型拟南芥,且花色苷含量与结构基因AtCHI、AtF3'H和AtUFGT的表达趋势一致,黄酮醇含量与结构基因AtFLS的表达趋势一致。【结论】PqbHLH1基因通过调控花色苷合成相关基因的表达,从而正向调控卵叶牡丹叶片中花色苷和黄酮醇的合成。

关键词：卵叶牡丹 bHLH转录因子花色苷表达分析

卵叶牡丹PqDFR和PqANS及启动子克隆与功能分析

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园艺学报 2024年第6期51卷 1256-1272页

作者：李琴琴董山榕罗建让张延龙西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100

为探究卵叶牡丹(Paeoniaqiui)春色叶呈现紫红色的成因,从其叶片转录组数据中筛选出两个花青素合成关键基因PqDFR和PqANS进行克隆、表达模式分析、功能鉴定以及启动子活性分析。PqDFR开放阅读框为1 095 bp,编码364个氨基酸,含有NADPH保... 详细信息

为探究卵叶牡丹(Paeoniaqiui)春色叶呈现紫红色的成因,从其叶片转录组数据中筛选出两个花青素合成关键基因PqDFR和PqANS进行克隆、表达模式分析、功能鉴定以及启动子活性分析。PqDFR开放阅读框为1 095 bp,编码364个氨基酸,含有NADPH保守结构域和1个substract-binding结合位点;PqANS开放阅读框为1 065 bp,编码354个氨基酸,含有2OG-FeⅡ_Oxy和结合亚铁离子的保守氨基酸。实时荧光定量PCR结果表明,PqDFR和PqANS在叶片发育过程中表达量先上升再下降,与花青素的积累趋势基本一致。在卵叶牡丹叶盘中分别沉默PqDFR和PqANS基因后,叶盘的花青素含量均明显下降。稳定过表达试验表明转基因拟南芥幼苗相比野生型花青素积累更明显。PqDFR和PqANS启动子序列含有MYB转录因子结合序列,也含有光响应元件(G-box)、脱落酸响应元件(ABRE)、生长素响应元件(TGA-element)等顺式作用元件,GUS染色和定量结果显示启动子均具有良好的活性。研究结果表明PqDFR和PqANS可以促进卵叶牡丹叶片花青素合成。

关键词：卵叶牡丹叶片花青素结构基因启动子

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三种鲜食葡萄果实品质比较与评价

陕西农业科学 2024年第4期70卷 46-48页

作者：季晓莲罗建让杨凌职业技术学院生态环境工程学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100

对3种鲜食葡萄果实外观品质和理化指标进行了比较和评价。结果表明,‘华葡黑峰’的果粒纵横径分别为3.13 cm、2.64 cm,单果质量和果穗平均质量分别为10.8 g、553.5 g,均显著高于‘富通紫里红’和‘天工翠玉’。‘华葡黑峰’和‘天工翠... 详细信息

对3种鲜食葡萄果实外观品质和理化指标进行了比较和评价。结果表明,‘华葡黑峰’的果粒纵横径分别为3.13 cm、2.64 cm,单果质量和果穗平均质量分别为10.8 g、553.5 g,均显著高于‘富通紫里红’和‘天工翠玉’。‘华葡黑峰’和‘天工翠玉’的可溶性糖和可溶性固形物含量高于‘富通紫里红’,且‘华葡黑峰’的花色苷最高,为40.87 g/kg,表明具有较好的抗氧化性。运用主成分分析对果实品质进行综合得分评价,‘华葡黑峰’得分最高为3.13,其次为‘天工翠玉’和‘富通紫里红’。综合来看,‘华葡黑峰’和‘天工翠玉’具有果粒大、品相好、丰产性好、含糖量高等特性,品质优良。

关键词：鲜食葡萄外观品质理化指标主成分分析

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葡萄灰霉病分生孢子扩散及气象流行因子研究

陕西农业科学 2024年第8期70卷 104-108页

作者：季晓莲罗建让杨凌职业技术学院生态环境工程学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100

为了解陕西关中渭北台塬地区葡萄灰霉病的发病规律及流行因子,于2022年5月至10月在渭北地区3个县区葡萄园,采取孢子捕捉仪和气象设备监测病菌分生孢子的发生动态及气候因子,并调查田间葡萄病情指数。结果表明,葡萄灰霉病分生孢子扩散动... 详细信息

为了解陕西关中渭北台塬地区葡萄灰霉病的发病规律及流行因子,于2022年5月至10月在渭北地区3个县区葡萄园,采取孢子捕捉仪和气象设备监测病菌分生孢子的发生动态及气候因子,并调查田间葡萄病情指数。结果表明,葡萄灰霉病分生孢子扩散动态呈先升高后降低趋势,高峰期出现在8月25日前后,病情指数动态变化呈“逻辑斯蒂模型”,高峰期在9月27日左右;日平均温度和日平均湿度是影响葡萄灰霉病分生孢子扩散的主要气象因子,日平均温度25℃左右、相对湿度达90%~95%时,分生孢子密度最大。分生孢子扩散高峰早于病情指数高峰约一个月,表明可通过监测灰霉病分生孢子扩散动态与气象因子,预测葡萄灰霉病的田间发生,为病害预报和防控提供理论依据。

关键词：葡萄灰霉病分生孢子扩散病情指数气象因子

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百合交配亲和性及其不亲和性克服方法的研究

百合交配亲和性及其不亲和性克服方法的研究

作者：罗建让西北农林科技大学

学位级别：硕士

针对百合交配亲和性的问题，对野百合(Lilium brownii)、宜昌百合(***)、卷丹(***)、细叶百合(Lilium tenuifolium)、兰州百合(Lilium var unicolor)5个野生百合及Prato、Pollyanna、Siberia、Barbaresco、Snow Queen等10个栽培品种的自交(包括自花、同株异花、品种和种内异株异花授粉)和杂交(包括杂种系内、系间和种间杂交)的亲和性进行了研究，主要结果如下：野百合(Lilium brownii)、宜昌百合(***)、细叶百合(Lilium tenuifolium)、兰州百合(Lilium var unicolor)、Pollyanna、Elite、Snow Queen、Siberia、 Sisii自交结实，其他种类自交不结实。 Elite×Prato、Pollyanna×Prato、Prato×Nove Cento交配的亲和性较高，Elite×Snow Queen交配的亲和性较差。座果率、有胚种子率、子房膨大率、有胚胚珠率、蒴果维系时间长短均可以作为判断百合交配亲和性高低的指标。通过26种授粉方法和4种胚挽救方法对百合自交及杂交障碍影响的研究，发现：蕾期多次授粉和延迟多次授粉对克服百合自交的受精障碍效果较好;切割花柱授粉(结合涂抹花粉培养液)和离体授粉对克服百合杂交的受精前障碍较为有效;胚珠培养和胚珠切割培养对克服百合受精后障碍具有一定效果;外源激素可诱导子房的膨大。通过对花粉萌发培养基的筛选和对花粉的培养，得出：(1)适宜百合花粉萌发的培养基为：12％蔗糖+20mg／L硼酸+10 mg／L氯化钙，琼脂0.6％，pH=5.8;(2)通常情况下，野生百合的花粉萌发力＞麝香百合的花粉萌发力＞亚洲百合的花粉萌发力＞东方百合的花粉萌发力，且随着花粉贮藏时间的延长，花粉萌发力逐渐下降。

关键词：交配亲和性授粉方法胚挽救方法判断指标

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水生植物在园林中的应用

西北林学院学报 2007年第6期22卷 180-182页

作者：田志平罗建让西安市市容园林局陕西西安710077 西北农林科技大学园艺学院陕西杨陵712100

分析了水生植物的观赏特点,阐述了水生植物的配置原则、水生植物在园林中的应用形式及其种植要求,以期为水生植物在园林水景中的应用提供参考。

关键词：水生植物园林水景

麝香百合×亚洲百合(LA,Longiflorum×Asiatic)百合杂种F_1代镰刀菌抗性的快速鉴定

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北方园艺 2015年第6期 90-94页

作者：罗建让谢松林西北农林科技大学林学院陕西杨凌712100 欧中现代农业技术研发中心福建漳州363123

以99个百合远缘杂种F1代-麝香百合×亚洲百合(LA)杂种为试材,采用栽培基质接种病原菌的方法对杂种后代的镰刀菌抗性进行了鉴定。结果表明:百合无性系温室人工接种技术成功应用于该远缘杂种,其母本麝香百合‘White Fox’对镰刀菌表现出高... 详细信息

以99个百合远缘杂种F1代-麝香百合×亚洲百合(LA)杂种为试材,采用栽培基质接种病原菌的方法对杂种后代的镰刀菌抗性进行了鉴定。结果表明:百合无性系温室人工接种技术成功应用于该远缘杂种,其母本麝香百合‘White Fox’对镰刀菌表现出高感,而父本亚洲百合‘Connecticut King’具有较强抗性,并成功遗传给杂种后代,在后代基因型中实现一系列分离;在后代杂种群体中,大部分基因型对镰刀菌表现出不同程度的抗性,F1代镰刀菌抗性基因表达率为70.1%。表明镰刀菌抗性由数量基因控制,通过杂种系间杂交实现百合镰刀菌抗性的渐渗育种切实可行。

关键词：百合杂种镰刀菌无性系抗性

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3种百合鳞茎中多酚类物质的抗氧化活性分析

西北植物学报 2014年第5期34卷 995-1001页

作者：靳磊张延龙牛立新罗建让西北农林科技大学园艺学院陕西杨陵712100 西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100

以野生百合渥丹、山丹和传统食用的兰州百合为研究对象,对其鳞茎中多酚类物质、11种单体酚的含量及抗氧化活性(ABTS自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除能力,铜离子还原能力以及抑制脂质过氧化活性)进行了分析。结果表明:两种野生百合... 详细信息

以野生百合渥丹、山丹和传统食用的兰州百合为研究对象,对其鳞茎中多酚类物质、11种单体酚的含量及抗氧化活性(ABTS自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除能力,铜离子还原能力以及抑制脂质过氧化活性)进行了分析。结果表明:两种野生百合鳞茎中的多酚类物质含量及抗氧化活性均显著高于兰州百合。3种百合鳞茎中单体酚的种类也有所不同,但均含有没食子酸、矢车菊素-3-芸香糖苷、儿茶素、表儿茶素、杨梅酮、芦丁、对香豆酸、山奈酚。相关性分析显示,除对羟自由基的清除力外,各酚类物质总量与不同抗氧化指标之间呈显著正相关关系。试验结果认为,野生百合鳞茎可作为天然抗氧化资源应用于食品和医药业,具有一定的开发应用前景。

关键词：百合多酚类物质抗氧化活性

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基于专用目标的紫斑牡丹单株评价与筛选

北方园艺 2023年第10期 65-73页

作者：司宝华罗建让张延龙西北农林科技大学风景园林艺术学院陕西杨凌712100

以64株紫斑牡丹为试材,对22个性状进行测定,采用层次分析法建立科学合理的紫斑牡丹观赏评价体系和油用评价体系,筛选出适合观赏、油用和油观两用的单株,以期为紫斑牡丹的科学利用提供参考依据。结果表明:观赏评价体系中I级(优)花朵直立... 详细信息

以64株紫斑牡丹为试材,对22个性状进行测定,采用层次分析法建立科学合理的紫斑牡丹观赏评价体系和油用评价体系,筛选出适合观赏、油用和油观两用的单株,以期为紫斑牡丹的科学利用提供参考依据。结果表明:观赏评价体系中I级(优)花朵直立,长势旺盛,各性状表现优良,观赏评价值高,包括12株;Ⅱ级(良)有16株,整体性状良好,适合观赏;Ⅲ级(一般)包括22株,观赏价值较低;Ⅳ级(差)有14株,各性状表现较差,不建议使用。在油用评价体系中,Ⅰ级优良单株有效蓇葖果多,单株产量和含油率高,有10株;Ⅱ级较优单株包含11株,某项性状比较突出,选择性使用;Ⅲ级一般单株有27株,建议保守使用;Ⅳ级劣势植株有8株,综合得分低,不建议使用。最终得到7株油观两用牡丹,5株观赏价值较高牡丹和3株油用价值较高的紫斑牡丹,为高大型牡丹或油观两用牡丹新品种培育提供材料基础。该研究中构建的评价体系,基本能满足生活中对紫斑牡丹观赏和油用的要求,可以有效地指导紫斑牡丹在园林中的应用。

关键词：紫斑牡丹观赏评价体系油用评价体系层次分析法