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Brahma相关基因-1调控乏氧诱导因子-1α参与结直肠癌血管生成

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中华实验外科杂志 2022年第11期39卷 2146-2148页

作者：兰静芩张根山饶泽君罗学来李海杰华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠肿瘤研究所武汉430030

目的观察交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)复合体调节亚基Brahma相关基因-1(Brg-1)对结直肠癌血管生成的影响。方法对结肠癌细胞系LoVo细胞感染sh-Brg-1慢病毒(Lenti-sh-Brg-1组)和对照病毒(Lenti-con组),通过蛋白质印迹法(Western blot... 详细信息

目的观察交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)复合体调节亚基Brahma相关基因-1(Brg-1)对结直肠癌血管生成的影响。方法对结肠癌细胞系LoVo细胞感染sh-Brg-1慢病毒(Lenti-sh-Brg-1组)和对照病毒(Lenti-con组),通过蛋白质印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测常氧及乏氧状态下乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的蛋白和mRNA水平的变化,运用体外微管形成实验观察低表达Brg-1对结直肠癌血管形成的影响,组间比较采用t检验。结果Western blot结果证明,与Lenti-con组比较,Lenti-sh-Brg-1组细胞中Brg-1蛋白表达量明显降低。在常氧及乏氧状态下低表达Brg-1可以明显降低HIF-1α及VEGF-A在蛋白表达量。在常氧状态下,Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0比sh-Brg-10.53±0.08,t=5.292,P<0.01),HIF-1α(con 1.00±0比sh-Brg-10.61±0.07,t=5.380,P<0.01),VEGF-A mRNA水平低于Lenti-con组(con 1.00±0比sh-Brg-10.38±0.10,t=6.169,P<0.01);在乏氧状态下,Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0比sh-Brg-10.07±0.02,t=44.680,P<0.01),HIF-1α(con 1.00±0比sh-Brg-10.21±0.05,t=14.280,P<0.01),VEGF-A mRNA水平低于Lenti-con组(con 1.00±0比sh-Brg-10.15±0.06,t=13.960,P<0.01)。最后证实在常氧和乏氧条件下,Brg-1低表达细胞条件培养基组的人脐静脉内皮细胞体外成管数目低于对照组(常氧,con 55.67±7.22比sh-Brg-122.33±5.36,t=3.706,P<0.05;乏氧,con 66.33±7.62比sh-Brg-135.68±4.91,t=3.382,P<0.05)。结论在LoVo细胞系中低表达Brg-1可以通过下调HIF-1α抑制血管形成。

关键词：结直肠癌 Brahma相关基因-1 血管形成血管内皮生长因子

口腔黏膜细胞凋亡率与患者手术前后营养状况的关系

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中华实验外科杂志 2006年第6期23卷 670-672页

作者：周毅罗学来杨传永吴在德裘法祖龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心肿瘤研究所武汉430030

目的通过对比一组胃肠道手术患者手术前、后口腔黏膜细胞凋亡率和一系列传统的营养状况评价指标的动态变化,探讨口腔黏膜细胞凋亡率与人营养状况的相关性。方法连续观察一组经胃肠道手术患者。手术前至手术后一段时间内连续检测患者口... 详细信息

目的通过对比一组胃肠道手术患者手术前、后口腔黏膜细胞凋亡率和一系列传统的营养状况评价指标的动态变化,探讨口腔黏膜细胞凋亡率与人营养状况的相关性。方法连续观察一组经胃肠道手术患者。手术前至手术后一段时间内连续检测患者口腔黏膜细胞凋亡率,同时在术前、术后第3、7天测定总淋巴细胞计数、前白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、白蛋白。结果术后首先观察到口腔黏膜细胞凋亡率显著下降(P＜0．01),约在术后7 d后口腔黏膜凋亡率逐渐上升(P＜0．01),这变化同我们测量的各营养指标的变化是基本一致的。结果证明口腔黏膜细胞凋亡率同淋巴细胞计数、转铁蛋白、前白蛋白等传统的营养指标具有显著相关性(P＜0．05)。结论口腔黏膜细胞凋亡率随着机体营养状况的改变而变化。口腔黏膜细胞凋亡率有可能成为一个新的评价,监测甚至预测机体营养状况的评价指标。

关键词：口腔黏膜细胞脱噬作用营养

小干扰RNA沉默赖氨酸去甲基化酶2A对结肠癌细胞增殖及侵袭能力的影响

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中华实验外科杂志 2015年第12期32卷 3046-3048页

作者：谢二娟李海杰罗学来方华湖北省医学会武汉430071 华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科

目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默赖氨酸去甲基化酶2A（KDM2A）基因对结肠癌细胞株LoVo增殖及侵袭能力的影响。方法构建针对KDM2A的特异性siRNA（siKDM2A），瞬时转染LoVo细胞，利用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）技术和Westernb... 详细信息

目的观察小干扰RNA（siRNA）沉默赖氨酸去甲基化酶2A（KDM2A）基因对结肠癌细胞株LoVo增殖及侵袭能力的影响。方法构建针对KDM2A的特异性siRNA（siKDM2A），瞬时转染LoVo细胞，利用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）技术和Westernblot技术检测LoVo细胞中KDM2A基因表达；细胞计数试剂盒（CCK_8）增殖实验检测LoVo细胞转染siKDM2A后细胞增殖能力的变化；侵袭实验观察低表达KDM2A对LoVo细胞侵袭能力的影响；Westernblot法检测LoVo细胞低表达KDM2A后增殖细胞核抗原（PCNA）表达。结果Real—timePCR和Westernblot法验证siKDM2A转染成功；CCK一8增殖实验中，KDM2A低表达可抑制LoVo细胞的增殖能力；侵袭实验中低表达KDM2A细胞穿膜数目（33．0±3．3）个，较Blank组[（91．0±3．3）个]和siControl[（87．7±2．9）个]明显减少（P〈0．05）；低表达KDM2A细胞中PCNA表达量较对照组明显降低。结论低表达KDM2A基因可抑制结肠癌细胞株LoVo的增殖能力和侵袭能力。

关键词：赖氨酸去甲基化酶2A 结肠癌增殖侵袭

5-氟尿嘧啶不同容量腹腔化疗的药代动力学及活性炭应用对其的影响

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中华实验外科杂志 2004年第1期21卷 33-34页

作者：罗学来杨传永曾凡波龚建平华中科技大学同济医院附属同济医院普外科武汉430030 华中科技大学同济医学院药学院

目的　探讨不同药物浓度及缓释剂应用对 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)药代动力学的影响。方法　以家兔为模型 ,用高效液相色谱法 ,检测相同 5 Fu剂量下 (10 0mg/kg) ,大容量腹腔化疗、小容量腹腔化疗、小容量缓释腹腔化疗 (加入活性炭 )在不同... 详细信息

目的　探讨不同药物浓度及缓释剂应用对 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)药代动力学的影响。方法　以家兔为模型 ,用高效液相色谱法 ,检测相同 5 Fu剂量下 (10 0mg/kg) ,大容量腹腔化疗、小容量腹腔化疗、小容量缓释腹腔化疗 (加入活性炭 )在不同时间点的药物浓度 ,计算药代动力学参数。结果　大容量腹腔化疗峰浓度 69.75 3mg/L ,半衰期 0 .80 1h。小容量腹腔化疗峰浓度略低大容量腹腔化疗 60 .3 65mg/L ,半衰期 1.10 8h ,作用时间较长。小容量缓释腹腔化疗 ,虽然浓度较小2 0 .693mg/L ,但半衰期 19.10 2h ,作用时间最长。结论　从药代动力学的角度 ,小容量腹腔化疗是一种较为理想的化疗方式。加入活性炭以后可以更进一步增加药物的作用时间。

关键词： 5-氟尿嘧啶腹腔化疗药代动力学活性炭胃肠道恶性肿瘤

GRIM-19及其靶基因产物STAT3与结直肠癌恶性程度的关系

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癌症 2007年第7期26卷 683-687页

作者：龚龙波罗学来刘双又陶德定龚建平胡俊波华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤研究所/胃肠外科湖北武汉430030

背景与目的:干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因(gene associated with retinoid-interferon-induced mortality-19,GRIM-19)属转录信号转导子与激活子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)特异性抑制蛋白,STAT3及其介导的信号转导通路参与调节细胞的增殖、凋亡与分化,并介导细胞的恶性转化。本研究分析GRIM-19及其靶基因STAT3在结直肠癌组织中的表达情况,探讨GRIM-19及其靶基因产物在结直肠癌发病中的作用。方法:采用免疫组织化学染色及Western blot检测40例结直肠正常组织及癌组织中GRIM-19、STAT3、p-STAT3蛋白表达,对各表达情况与不同临床病理特征进行统计学分析。采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法及测序检测结肠癌细胞系SW480及23例结直肠正常组织及癌组织中GRIM-19mRNA有无基因突变及在mRNA的表达情况。结果:在结直肠癌组织中STAT3及p-STAT3蛋白均高表达,而GRIM-19mRNA及蛋白表达在癌组织中明显低于正常组织,且GRIM-19蛋白表达水平与结直肠癌分化程度和临床分期相关(P<0.05)。GRIM-19与STAT3和p-STAT3在结直肠癌组织中表达情况呈负相关,GRIM-19基因阳性时,STAT3基因趋向阴性(χ2=9.95,P<0.01),p-STAT3基因也趋向阴性(χ2=5.10,P=0.02)。结直肠癌组织中GRIM-19mRNA无基因突变情况。结论:GRIM-19蛋白在结直肠癌组织中的低表达或缺失与结直肠癌的发生、发展及侵袭性相关,而与基因突变无关。在结直肠癌组织中存在STAT3的持续高表达和GRIM-19的低表达共存现象,可能与细胞更易发生恶性转化和异常增殖,促进了结直肠癌的发生发展相关。

关键词：结直肠肿瘤 GRIM-19基因信号转导通路病理学

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直肠癌辅助治疗进展

腹部外科 2003年第1期16卷 59-60页

作者：罗学来华中科技大学同济医学院附属同济医院普外Ⅱ科武汉430032

直肠癌是我国常见的肿瘤之一.手术在直肠癌治疗中占着主导地位,但手术后局部复发率高达20%～50%[1].因此辅助治疗在直肠癌的治疗中具有重要性.本文将对此作一综述.

关键词：直肠癌辅助治疗综述静脉化疗腹腔化疗术后放疗

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猪圆环病毒病的特点与防控技术分析

农民致富之友 2016年第13期 158-159页

作者：罗学来阳春市马水镇畜牧兽医站

猪圆环病毒病是一种重大猪类传染疾病,由德国科学家在1974年发现的,但是当时并没有太过重视,直到1991年在加拿大发生了大面积的猪群死亡现象,才引起了科研人员对于猪圆环病毒病的重视。我国的首次案例是发生于2000年。根据科研人员对猪... 详细信息

猪圆环病毒病是一种重大猪类传染疾病,由德国科学家在1974年发现的,但是当时并没有太过重视,直到1991年在加拿大发生了大面积的猪群死亡现象,才引起了科研人员对于猪圆环病毒病的重视。我国的首次案例是发生于2000年。根据科研人员对猪圆环病毒病的多年研究分析,得到了一些关于猪圆环病毒病特点与防控的研究成果,通过这篇文章希望与同行业进行很好的交流。

关键词：猪圆环病毒病特点防控技术

miR-19a通过抑制c-MET的表达逆转HCC827细胞吉非替尼耐药

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华中科技大学学报（医学版） 2019年第2期48卷 168-171页

作者：来森艳曹小年吴维李国东胡发涌罗学来华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院胸外科武汉430030

目的明确miR-19a在调控HCC827细胞吉非替尼耐药中的作用及机制,探索miR-19a作为非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼耐药新靶点的理论依据。方法收集非小细胞肺癌患者15例在吉非替尼耐药前后的外周血,通过Real-time PCR检测其中miR-19a的表... 详细信息

目的明确miR-19a在调控HCC827细胞吉非替尼耐药中的作用及机制,探索miR-19a作为非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼耐药新靶点的理论依据。方法收集非小细胞肺癌患者15例在吉非替尼耐药前后的外周血,通过Real-time PCR检测其中miR-19a的表达;在吉非替尼敏感的HCC827细胞中降低miR-19a表达,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在构建成功的HCC827吉非替尼耐药细胞株(HCC827GR)中过表达miR-19a,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在HCC827及HCC827GR细胞中分别降低或过表达miR-19a,通过Western blot检测c-MET蛋白表达水平;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度吉非替尼,通过CCK8法检测各组细胞活力。结果在吉非替尼耐药的NSCLC患者外周血中,miR-19a呈明显低表达状态;在HCC827细胞中降低miR-19a表达,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显下降(P<0.01);在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显增强(P<0.01);在HCC827细胞中降低miR-19a表达,能明显促进c-MET蛋白的表达;相反,在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,则明显抑制c-MET蛋白的表达;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度的吉非替尼,低表达c-MET能够抵消miR-19a对细胞活力的影响。结论 miR-19a在非小细胞肺癌细胞HCC827吉非替尼耐药中发挥着重要作用,其机制可能是通过抑制c-MET蛋白水平的表达。

关键词： HCC827细胞 miR-19a 吉非替尼耐药 c-MET

磷脂酰肌醇-3激酶p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用

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癌症 2008年第10期27卷 1034-1038页

作者：王桂华罗学来孙黎邓豫李小兰陶德定胡俊波龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院第二临床学院湖北武汉430030

背景与目的:p55γ是磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)的调节亚单位之一,在调节PI3K活性上具有重要的作用。本研究旨在观察PI3K的一个调节亚基p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用。方法:构建含有PI3K-p55γ-... 详细信息

背景与目的:p55γ是磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)的调节亚单位之一,在调节PI3K活性上具有重要的作用。本研究旨在观察PI3K的一个调节亚基p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用。方法:构建含有PI3K-p55γ-N末端24个氨基酸的腺病毒载体Ad-N24p55-GFP及对照病毒Ad-GFP,以其感染结肠癌HT29细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程,应用BrdU掺入法检测其对细胞DNA合成的影响,通过建立体内肿瘤裸鼠移植瘤模型进一步证实Ad-N24p55-GFP的抗肿瘤作用。结果:对照腺病毒Ad-GFP感染的细胞中G0/G1期细胞为65.11%,S期和G2/M期细胞数分别为17.37%和17.51%;而带有插入目的基因的腺病毒Ad-N24p55-GFP感染后的细胞G0/G1期细胞增至73.39%,S期和G2/M期细胞减少至15.08%和11.13%。BrdU掺入法结果显示BrdU阳性的细胞数由24.82%降至9.27%(P<0.05)。HT29细胞裸鼠移植瘤模型局部应用Ad-N24p55-GFP后肿瘤生长显著减慢,其瘤重明显低于空白对照组和腺病毒对照组[(0.32±0.08)gvs.(0.67±0.30)g,(0.72±0.28)g,P<0.05]。结论:过表达PI3K-p55γ-N末端24个氨基酸可有效阻滞HT29细胞周期进程,抑制细胞DNA合成;并可有效抑制结肠癌裸鼠移植瘤模型的肿瘤生长。

关键词：结肠肿瘤 HT29细胞腺病毒 BrdU掺入磷脂酰肌醇-3激酶细胞周期 DNA合成