检索结果-南通市图书馆

作者：罗娅莎广州中医药大学

学位级别：硕士

目的1整合以核酸扩增为原理的各种PCR技术(普通PCR、荧光定量PCR、多重PCR)和高通量基因测序技术,建立既能快速筛查常见病毒,又有能力发现新发病毒的临床病毒检测体系,满足医疗机构用于常规检验工作和公共卫生单位应对突发性公共卫生事... 详细信息

目的1整合以核酸扩增为原理的各种PCR技术(普通PCR、荧光定量PCR、多重PCR)和高通量基因测序技术,建立既能快速筛查常见病毒,又有能力发现新发病毒的临床病毒检测体系,满足医疗机构用于常规检验工作和公共卫生单位应对突发性公共卫生事件的需求。2建立常见呼吸道病毒筛查的多重PCR、病毒宏基因组学高通量基因测序平台、腺病毒核酸通用及分型PCR检测体系,探讨其在呼吸系统感染病原学诊断上的应用。3基于2014年广州发生的严重登革热疫情,自主建立登革病毒核酸检测及分型技术体系,分析本次疫情流行的登革病毒型别和基因进化特征、住院患者的临床表现和实验室检测结果,以了解本次疫情的流行病学特征;比较分子诊断技术和免疫学技术在登革热临床诊断中的应用效果,以指导临床合理选择检验项目。方法1呼吸道病毒分子诊断平台的建立及应用1.1呼吸道病毒多重PCR检测体系的建立及儿童急性鼻窦炎病毒谱的研究设计一套针对A型流感病毒(Influenza A, IFA)、B型流感病毒(Influenza B, IFB)、1-4型人副流感病毒(Human parainfluenza virus, HPIV),呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial virus, RSV),腺病毒(Adenovirus, ADV),鼻病毒(Rhinovirus, RV),肠道病毒(Enterovirus, EV),人偏肺病毒(Human metapneumovirus, HMPV),人博卡病毒(Human Bocavirus, HBoV),冠状病毒OC43(Coronavirus OC43),冠状病毒NL63 (CoronavirusNL63),冠状病毒229E(Coronavirus 229E)共15种常见呼吸道病毒的多重PCR检测体系,对259份儿科门诊急性鼻窦炎(Acute rhino sinusitis, ARS)患儿、219份急性上呼吸道感染(Acute upper respiratory tract infection, AURI)患儿、86份对照儿童鼻拭子标本进行呼吸道病毒检测。比较分析ARS组和AURI组患儿鼻部的呼吸道病毒分布情况,分析与急性鼻窦炎的相关性最高的病毒。统计学分析采用卡方检验。1.2呼吸道宏基因组高通量测序方法的建立及儿童重症肺炎病原学的研究建立基于Ion Torrent/Proton平台的呼吸道宏基因组高通量测序技术,并对9份重症肺炎患儿肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid, BALF)标本进行宏基因组测序。获得的测序读长用BLASTn与GeneBank数据库中的基因组序列进行比对,分析标本中存在的病毒种类及丰度,对标本中微生物的种类进行定性与定量检测。数据量足够时使用Trinity软件组装病毒的全基因组序列,使用TVC和GATK两种方法进行SNPs及InDel突变的检测,使用BioEdit7.0和MEGA6.0软件进一步做毒株的同源进化分析。并比较NGS技术与PCR扩增和传统培养鉴定结果的一致性。1.3腺病毒通用及分型PCR检测方法的建立及各亚型流行特征的研究设计针对腺病毒Hexon基因保守区的通用引物、探针以及3、4、7、14、21型腺病毒型特异性引物,建立人腺病毒检测及分型的普通PCR和荧光定量PCR方法,对105份腺病毒核酸检测阳性的儿童呼吸道感染标本进行基因分型,分析腺病毒各亚型在儿童呼吸道感染疾病中的分布情况。2登革热分子诊断技术的建立及评估2.1登革病毒PCR检测体系的建立及广州登革疫情的流行病学研究设计1-4型登革病毒通用及型特异性的普通PCR和荧光定量PCR引物、探针,建立登革病毒核酸检测及分型体系。并对2014年9月20日至2014年11年20日间于广州医科大学附属第一医院确诊的登革热住院患者的血清标本进行登革病毒检测及分型,对病毒分离株的E、NS 1基因序列做进化分析,开展登革病毒分子流行病学研究。2.2登革热分子诊断与免疫学检验方法的比较根据WHO诊断标准,收集138名登革热确诊住院患者的254份血清样本,并进行病毒核酸(荧光定量PCR技术)和登革病毒NS1抗原(ELISA).特异性抗体(层析免疫分析法)检测。对诊断登革热的分子生物学与免疫学方法进行比较,观察不同检测指标在病程中的变化规律,为合理使用登革热实验室诊断项目提供依据。2.32014年广州登革热住院患者临床特征与检验结果的分析收集138名登革热住院患者的临床资料,按照其感染的登革病毒血清型、发病程度(普通或重症登革热)进行分组,比较不同组间皮疹、肌肉痛、恶心呕吐、腹痛腹泻等症状,白细胞、血小板、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等多项临床检验指标的差异及其在发病期间的动态变化规律。成果1呼吸道病毒分子诊断整合平

关键词：临床病毒学高通量基因测序病毒宏基因组学呼吸道病毒登革热

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广州地区阴沟肠杆菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因的检测及分析

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临床检验杂志 2012年第9期30卷 704-705页

作者：周强罗娅莎邓晨晖张文黎孟枫曹开源广州中医药大学第二附属医院检验科广州510105 中山大学临床检验标准化研究中心广州510089

目的了解广州地区临床分离的阴沟肠杆菌的耐药现状,以及质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因qnrA,qnrB,qnrC,qnrS,qepA,aac(6')-Ib-cr的流行情况。方法纸片扩散法进行药敏试验;PCR法扩增PMQR基因并将阳性产物测序分析;分析PMQR基因在环丙沙星(... 详细信息

目的了解广州地区临床分离的阴沟肠杆菌的耐药现状,以及质粒介导喹诺酮耐药(PMQR)基因qnrA,qnrB,qnrC,qnrS,qepA,aac(6')-Ib-cr的流行情况。方法纸片扩散法进行药敏试验;PCR法扩增PMQR基因并将阳性产物测序分析;分析PMQR基因在环丙沙星(CIP)敏感及耐药株中的分布差异。结果 226株阴沟肠杆菌耐药率75%的药物有5种,其中CIP耐药率62.8%。63株(27.4%)检出PMQR基因,qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ib-cr的检出率分别3.1%、7.5%、4.4%和15.0%,有5株存在两种PMQR基因,未检出qnrC和qepA基因。qnrA、qnrB、qnrS及aac(6')-Ib-cr基因在CIP敏感株与耐药株中的分布经χ2检验,χ2分别为2.79,10.87,4.63和23.55,P分别>0.05、<0.01、<0.05及<0.01。结论本地区阴沟肠杆菌呈现多重耐药,qnrA、qnrB、qnrS及aac(6')-Ib-cr基因在广州地区均有流行,且这几种基因与环丙沙星等药物的耐药率有一定相关性。

关键词：阴沟肠杆菌质粒介导喹诺酮耐药 qnr aac(6')-Ib-cr

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病毒宏基因组高通量测序在临床感染性疾病诊断中的应用

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临床检验杂志 2014年第12期32卷 903-905页

作者：罗娅莎林勇平宋金龙梁颖周强卢妙莲广州中医药大学第二临床医学院广州510120 广州医科大学附属第一医院检验科广州510120 广东省中医院检验科广州510120

目的以1例恶性胸腺瘤并发外阴部感染患者溃疡部位拭子标本为模型,建立适用于临床病毒检测的宏基因测序平台。方法提取该患者外阴部水疱液中的全部核酸,通过不依赖序列的单引物扩增(SISPA)后进行Ion Torrent PGM高通量测序,筛选出与病毒... 详细信息

目的以1例恶性胸腺瘤并发外阴部感染患者溃疡部位拭子标本为模型,建立适用于临床病毒检测的宏基因测序平台。方法提取该患者外阴部水疱液中的全部核酸,通过不依赖序列的单引物扩增(SISPA)后进行Ion Torrent PGM高通量测序,筛选出与病毒相关的测序读长(reads)与NCBI数据库中的序列进行比对,分析标本中病毒核酸的种类及丰度,并与荧光定量PCR法比较。结果共获得320 049条读长,4 288条(1.3%)与病毒相关,其中2 629条为噬菌体基因,其余1 659条读长中与人类疾病相关的有单纯疱疹病毒2型(HSV-2)14条(0.84%)、指环病毒属(Anellovirus)1 361条(82.0%)、多瘤病毒属(Polyomavirus)19条(1.14%)、乳头瘤病毒属101(Papillomavirus 101)6条(0.40%),反转录病毒科80条(4.82%)、痘病毒科45条(2.7%)、其他病毒如植物、鱼类、禽类病毒117条(7.05%)、未分类病毒17条(1.02%);疱疹病毒序列鉴定结果表明,14条读长注释为HSV-2(NC_001798),且用荧光定量PCR确认为HSV-2阳性,两法结果一致;噬菌体序列分析发现2 629条读长为噬菌体基因,其中1 251条为肠杆菌噬菌体(占47.6%),1 331条为葡萄球菌噬菌体(占50.6%)。结论初步建立了基于Ion Torrent PGM的病毒宏基因组测序平台并成功检测出HSV-2,为其在临床中的应用提供了实验依据。

关键词：病毒宏基因组高通量测序临床诊断

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眼部蠕形螨感染与蔬菜芽胞杆菌蛋白免疫反应的相关关系

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国际眼科杂志 2015年第6期15卷 1054-1056页

作者：黎健菁林振德林勇平罗娅莎林翎广州医科大学附属第一医院眼科中国广东省广州市510120 中山大学中山眼科中心中国广东省广州市510060 中国广东省广州市红十字会医院眼科 510220

目的:研究人眼蠕形螨感染与其血清免疫反应的关系。方法:观察68例住院患者眼部蠕形螨感染情况,收集每例患者双眼上下睑共8条睫毛,进行蠕形螨计数,分别记录毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨数量。用Western blot分析从蔬菜芽胞杆菌分离出来的两种... 详细信息

目的:研究人眼蠕形螨感染与其血清免疫反应的关系。方法:观察68例住院患者眼部蠕形螨感染情况,收集每例患者双眼上下睑共8条睫毛,进行蠕形螨计数,分别记录毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨数量。用Western blot分析从蔬菜芽胞杆菌分离出来的两种蛋白62-kDa和83-kDa与患者血清的免疫反应情况。结果:所有68例患者无面部红斑痤疮,无眼睑炎,按血清反应分阳性和阴性两组,年龄匹配(P=0.888),性别匹配(P=0.595);按睫毛蠕形螨感染分阳性和阴性两组,年龄匹配(P=0.590),性别匹配(P=0.329)。血清免疫反应与眼部蠕形螨感染无统计学相关关系(P=0.925),在蠕形螨感染阳性组38例中27例(71%)血清反应阳性,在蠕形螨感染阴性组30例中,血清反应阳性21例(70%)。与蠕形螨计数也无统计学相关关系(P=0.758)。结论:当眼部感染蠕形螨但不发病时,血清检查不必要,但当眼部出现眼睑炎时,建议查睫毛螨虫和血清免疫反应,一旦两者均阳性,全力除虫实属必要。

关键词：蠕形螨眼红斑痤疮免疫反应

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引起儿童急性发热的呼吸道病毒谱分析

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广东医学 2016年第4期37卷 544-546页

作者：麦艾罗娅莎钟帼钰卫凤桂陈德辉魏小平周强林勇平广州医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科广州510120 广东省妇幼保健院检验科广州511442 广州医科大学附属第一医院儿科广州510120 广州医科大学附属第一医院检验科广州510120 广东省中医院检验科广州510120

目的了解引起门诊儿童发热的常见呼吸道病毒感染谱的特征。方法收集864例儿科门诊上呼吸道感染患儿的鼻腔黏膜拭子标本,发热者206例,无发热者658例,用PCR或RT-PCR方法进行流感病毒A、B(IFA、IFB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、... 详细信息

目的了解引起门诊儿童发热的常见呼吸道病毒感染谱的特征。方法收集864例儿科门诊上呼吸道感染患儿的鼻腔黏膜拭子标本,发热者206例,无发热者658例,用PCR或RT-PCR方法进行流感病毒A、B(IFA、IFB)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、鼻病毒(RV)等15种病毒的筛查,同时分析患儿超敏C反应蛋白(hs-CRP)和外周血白细胞计数的结果。结果共检出呼吸道病毒275株(31.8%),发热者(43.2%)和无发热者(28.3%)检出率的差异有统计学意义(P<0.001,RR=1.93)。ADV和RSV是发热者检出率最高的病毒(8.3%),但只有ADV在发热者的构成比明显高于无发热者(P<0.001)。病毒感染的发热患儿hs-CRP水平为10.00(6.30,18.90)mg/L,外周血白细胞计数为9.76(7.78,12.70)×109·L-1,与非病毒感染患儿比较差异有统计学意义。感染呼吸道病毒的患儿出现发热的危险性与未感染病毒的患儿比较将增加1.93倍。结论在儿科门诊发热病例中,RSV和ADV是最常见的病毒,而ADV感染更容易引起小儿高热。呼吸道病毒感染引起的发热病例中hs-CRP和白细胞升高不明显。

关键词：发热儿童门诊患者呼吸道病毒感染

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HE4和CA_(125)联合检测在卵巢癌诊断及预后评估中的价值研究

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中国妇幼保健 2014年第33期29卷 5492-5494页

作者：尚陈宇刘冬冬徐建华黄景春罗娅莎林馥嘉马骥石文丁海明广东省中医院检验科广东广州510105

目的:探讨人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)与CA125联合检测在卵巢癌的鉴别诊断以及预后评估中的研究价值。方法:189例女性分为卵巢癌患者50例(卵巢癌组),盆腔良性疾病患者99例(良性疾病组),健康女性40例(健康组),计算卵巢恶性肿瘤风险模型值(R... 详细信息

目的:探讨人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)与CA125联合检测在卵巢癌的鉴别诊断以及预后评估中的研究价值。方法:189例女性分为卵巢癌患者50例(卵巢癌组),盆腔良性疾病患者99例(良性疾病组),健康女性40例(健康组),计算卵巢恶性肿瘤风险模型值(ROMA),比较3组HE4、CA125水平,比较HE4、CA125、ROMA 3种指标的灵敏度、特异性及比较15例卵巢癌患者术前术后的HE4、CA125的水平。结果:卵巢癌病变组的HE4与CA125水平明显高于良性病变组和健康对照组(P0.05)。卵巢癌组术前术后CA125与HE4水平差异有统计学意义(P<0.05)。HE4、CA125和ROMA诊断卵巢癌的特异性分别为86.90%、87.90%、90.90%;阳性似然比分别为8.10、4.54、10.33;诊断符合率分别为53.69%、83.89%、87.25%。结论:单项HE4对于卵巢癌的早期诊断以及与盆腔良性疾病的鉴别诊断优于CA125,且术后评估价值高于CA125,HE4与CA125联合检测ROMA值可提高对卵巢癌诊断符合率。

关键词：卵巢癌人附睾上皮分泌蛋白4 糖类抗原CA125 卵巢恶性肿瘤风险模型

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脑小血管病变脑白质疏松与中医体质相关性研究

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新中医 2015年第8期47卷 23-25页

作者：钟经馨张峰招远祺李小燕张莹罗娅莎莫秀云广东省中医院广东广州510120

目的:探讨脑小血管病变(SVD)患者中医体质分布特点及其与脑白质疏松的关系。方法:纳入126例SVD患者,分析其中医体质类型分布,采用美国国立卫生所卒中量表(NIHSS)评分,脑白质疏松采用Wohlon分级标准。结果:SVD中医体质以痰湿质、瘀血质... 详细信息

目的:探讨脑小血管病变(SVD)患者中医体质分布特点及其与脑白质疏松的关系。方法:纳入126例SVD患者,分析其中医体质类型分布,采用美国国立卫生所卒中量表(NIHSS)评分,脑白质疏松采用Wohlon分级标准。结果:SVD中医体质以痰湿质、瘀血质和气虚质最多,分别占42.9%、40.5%和15.9%;其中,痰湿质和瘀血质在脑白质疏松分级中,各级比较,差异均有统计学意义(P<0.05);单因素分析显示脑白质疏松的主要危险因素有年龄、高血压及瘀血质;多变量Logistic回归分析发现,脑白质疏松与年龄和高血压密切相关。结论:SVD的中医体质以痰湿质和瘀血质为主;脑白质疏松危险因素有年龄、高血压和瘀血质;年龄和高血压与脑白质疏松密切相关。调控血压、改善病理体质类型,或许对降低SVD的发病率大有裨益。

关键词：脑小血管病变中医体质脑白质疏松

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围产期孕妇生殖道分泌物无乳链球菌的分布及耐药分析

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中华临床实验室管理电子杂志 2021年第1期9卷 50-52页

作者：刘成义唐玲玲罗娅莎穆小萍广东省妇幼保健院广州511400

目的分析围产期孕妇生殖道分泌物中无乳链球菌的分布情况及耐药性,为临床预防和合理使用抗生素提供依据。方法对2016年1月-2019年12月本院产科围产期孕妇送检的24244例宫颈分泌物进行细菌培养鉴定和药敏试验,对分离出的无乳链球菌进行... 详细信息

目的分析围产期孕妇生殖道分泌物中无乳链球菌的分布情况及耐药性,为临床预防和合理使用抗生素提供依据。方法对2016年1月-2019年12月本院产科围产期孕妇送检的24244例宫颈分泌物进行细菌培养鉴定和药敏试验,对分离出的无乳链球菌进行药敏分析。结果从24244例围产期孕妇宫颈分泌物中分离细菌764例,阳性率为3.15%,其中革兰氏阳性菌占81.6%,主要以无乳链球菌(73.0%)为主;革兰氏性阴性菌占18.4%,主要以大肠埃希菌(14.0%)、肺炎克雷伯菌(1.4%)、产气肠杆菌(1.0%)为主。无乳链球菌对青霉素、头孢唑啉、头孢呋辛、氨苄西林、万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺敏感率是100%,对克林霉素、四环素的耐药率在80%以上。结论本地区围产期孕妇生殖道中主要是以无乳链球菌为主。针对无乳链球菌的预防用药可以首选青霉素,对于青霉素过敏者及其他细菌感染可根据药敏结果选用合适抗生素。围产期宫颈分泌物细菌培养对于临床医师及时进行抗感染控制,减少母婴传播有重要意义。

关键词：围产期宫颈分泌物无乳链球菌药敏试验

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围生期李斯特菌感染母婴结局的比较分析

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广东医学 2019年第S1期40卷 306-308页

作者：罗娅莎王惠丽赖卫明黄瑞玉黎霏霏穆小萍广东省妇幼保健院检验科广东广州511442 东莞市南城医院检验科广东东莞523072

目的提高对李斯特菌感染的临床特点、病程进展及实验室诊断方法的认识,减少漏诊率,提高新生儿存活率。方法回顾分析136例病例中不同妊娠结局的发生率,实验室检查结果、不同临床症状及体征的发生率,通过χ~2检验比较其在流产(或死胎)病... 详细信息

目的提高对李斯特菌感染的临床特点、病程进展及实验室诊断方法的认识,减少漏诊率,提高新生儿存活率。方法回顾分析136例病例中不同妊娠结局的发生率,实验室检查结果、不同临床症状及体征的发生率,通过χ~2检验比较其在流产(或死胎)病例与成功分娩病例中、新生儿死亡与新生儿治愈病例中是否有统计学差异。结果85.3%的孕产妇以发热为首驱症状,有16.8%发生死胎或流产。分娩的新生儿中95.1%都会获得垂直感染,且86.6%会发生血流感染,其中26.9%抢救无效死亡,早产、低体重、胎儿宫内窘迫、羊水浑浊的发生率为40%~60%,它们在新生儿死亡与治愈病例间比较均差异有统计学意义(P<0.05)。结论围生期李斯特菌感染缺乏特异的临床表现,易误诊和漏诊,可导致胎死宫内、流产、早产、新生儿败血症、肺炎或脑膜炎等严重影响。致病菌对头孢菌素天然耐药,故实验室早期、准确地鉴定病原体是临床用药极为重要的依据,将直接影响到患者的妊娠结局。

关键词：围生期李斯特菌新生儿

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肺炎患儿支气管肺泡灌洗液的病原学研究

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中华临床实验室管理电子杂志 2020年第3期8卷 153-157页

作者：彭经纶罗娅莎郭军飞李欢黄研穆小萍广东省妇幼保健院检验科广州510000

目的回顾分析我院肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中常见病毒、细菌及真菌的分布情况,为小儿肺炎经验性用药提供病原学依据。方法纳入2019年1月至2019年12月期间在广东省妇幼保健院住院诊疗的肺炎患儿,分析患儿支气管肺泡灌洗液中常见病毒、... 详细信息

目的回顾分析我院肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中常见病毒、细菌及真菌的分布情况,为小儿肺炎经验性用药提供病原学依据。方法纳入2019年1月至2019年12月期间在广东省妇幼保健院住院诊疗的肺炎患儿,分析患儿支气管肺泡灌洗液中常见病毒、细菌及真菌的检出率在不同年龄组、重症和非重症肺炎之间分布是否存在差异。结果共纳入782例患儿,其中重症组190例,非重症组592例。所有患儿中检测出一种及一种以上病原体的病例有628人(80.3%),共检出1044株病原体,其中病毒678株(64.9%),肺炎支原体238株(22.8%),细菌118株(11.3%),真菌10株(1.0%)。检出率最高的病原体为巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV) (30.8%)、其次为肺炎支原体(Mycoplasma Pneumoniae,MP)(30.4%)、EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)(19.1%)、呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)(18.3%)、鼻病毒(Rhinovirus,RV)(11.9%)、人博卡病毒(Human Boca Virus,HBoV)(6.3%)。细菌中检出率最高是肺炎链球菌(20株,2.6%)、大肠埃希菌(18株,2.3%)和金黄色葡萄球菌(18株,2.3%)。结论小儿肺炎主要由病毒引起,HCMV和RSV是婴儿期肺炎的主要病毒病原,肺炎链球菌为首要细菌病原,MP在不同年龄段出现阶梯式增长,学龄组检出率最高。HCMV、RSV 和肺炎克雷伯杆菌是重症肺炎重要病原体。

关键词：小儿肺炎支气管肺泡灌洗液病原体实时荧光定量PCR

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