检索结果-南通市图书馆

作者：罗万和华中农业大学

学位级别：硕士

由猪胞内劳森菌(Lawsonia Intracellularis,***)所引起的猪增生性肠炎(Porcine proliferative enteritis,PPE)给国内外养猪业带来了巨大的损失。替米考星因其对胞内劳森菌具有较强的抗菌活性和优异的细胞膜渗透性,已作为临床治疗猪增生... 详细信息

由猪胞内劳森菌(Lawsonia Intracellularis,***)所引起的猪增生性肠炎(Porcine proliferative enteritis,PPE)给国内外养猪业带来了巨大的损失。替米考星因其对胞内劳森菌具有较强的抗菌活性和优异的细胞膜渗透性,已作为临床治疗猪增生性肠炎的重要药物之一。为了科学规范替米考星在猪增生性肠炎治疗上的应用并避免其耐药性的产生,利用药动学-药效学(Pharmacokinetic-Pharmacodynamic,PK-PD)同步模型制定替米考星对猪胞内劳森菌的合理给药方案尤为重要,同时也为胞内菌PK-PD同步模型的研究提供参考。本课题拟在建立胞内劳森菌分离培养鉴定体系的基础上,利用PK-PD同步模型制定出前期研发出的适口性好、作用时间长的替米考星混悬剂对猪胞内劳森菌的合理给药方案,以期在取得最佳疗效的同时,又避免细菌耐药性的产生,为有效防控猪胞内劳森菌提供了新的治疗方案,充分发挥替米考星混悬剂的临床应用价值和促进养殖业健康发展具有重要意义。1 猪胞内劳森菌的分离、培养和鉴定体系的建立利用猪胞内劳森菌活疫苗作为模式菌株,建立聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、实时荧光定量PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction,Real-time PCR)和过氧化物酶细胞单层染色法(Immunoperoxidase Monolayer Assay,IPMA)等三种猪胞内劳森菌的鉴定和检测方法;通过对样品中细菌数量、消化孵育时间和滤膜孔径等方面优化分离体系;通过对感染剂量和感染时间等方面优化培养体系,并从仔猪回肠末端分离猪胞内劳森菌。结果显示,所建立的三种猪胞内劳森菌检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好。细菌分离培养时,当感染剂量为5×***/m L,感染时间为3 h时具有最佳的感染效率。猪胞内劳森菌在猪空肠上皮细胞(Intestinal porcine epithelial cell,IPEC-J2)中的生长曲线显示:猪胞内劳森菌在第0-1 d、第2-5 d、第6 d和第7-8 d分别处于迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期。回肠中的猪胞内劳森菌数量越多、消化孵育的时间为30 min以及滤膜孔径依次为5、1.2和0.65μm时,分离成功率更高。PCR扩增分离临床菌株的大小为319bp目的条带,根据实时荧光定量PCR扩增出的动力学曲线计算出所分离菌株浓度为5×***/m L,IPMA将IPEC-J2细胞中劳森菌染色为红色荧光,上述三种鉴定方法均表明所分离菌株为猪胞内劳森菌。2 替米考星对猪胞内劳森菌的抗菌作用研究对猪胞内劳森菌的临床分离株进行抗菌作用研究,分别测定替米考星对猪胞内劳森菌胞内和胞外最低抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)、体外和半体内胞内杀菌曲线、防突变浓度(Mutant Prevention Concentration,MPC)以及抗菌后效应(Post-antibiotic effect,PAE)。通过四甲基偶氮唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测替米考星对IPEC-J2细胞活力的影响,结果表明,64μg/m L的替米考星与IPEC-J2细胞培养3 d时,细胞存活率降至79.5%;32μg/m L替米考星与IPEC-J2细胞培养4 d时,细胞存活率降到79.1%。替米考星对猪胞内劳森菌的胞内MIC、胞外MIC和MPC分别为2、4和6.4μg/m L,故耐药突变选择窗(Mutant selection window,MSW)范围为2-6.4μg/m L。替米考星与胞内劳森菌共同孵育1 h和2 h的PAE分别为0.82-5.03 h和2.53-6.92 h。体外和半体内胞内杀菌曲线呈现显著的浓度依赖性。因此,最终选择药时曲线下面积与最小抑菌浓度的比值(Area under the concentration-time by MIC,AUC/MIC)作为PK-PD拟合参数。3 替米考星预混剂和混悬剂在猪血浆和回肠中的药动学研究试验选取24头体重22 kg左右的健康断奶三元杂交仔猪,随机分为4组,每组6 头。在回肠段安装T型瘘管,建立仔猪回肠瘘管模型。采用胞内劳森菌临床分离株建立人工感染的仔猪增生性肠炎模型。感染组和健康组仔猪均按10 mg/kg的剂量分别被灌服替米考星预混剂和混悬剂,分别于给药后0、0.5、1、2、3、4、5、6、8、10、12、24和48 h采集血液和回肠内容物,用高效液相色谱方法(High performance liquid

关键词：替米考星预混剂混悬剂胞内劳森菌 PK-PD模型给药方案

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新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的药物敏感性研究

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黑龙江畜牧兽医 2023年第17期 122-127,133,141页

作者：冷楠楠任强陈伟罗万和塔里木大学动物科学与技术学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300

为了探索新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的敏感性,试验采用微量肉汤稀释法测定了氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC),对表皮葡萄球菌生长、生物被膜形成的抑制作用... 详细信息

为了探索新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的敏感性,试验采用微量肉汤稀释法测定了氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC),对表皮葡萄球菌生长、生物被膜形成的抑制作用及表面疏水性的影响,测定了氟苯尼考注射液的体外抑菌效果及其对表皮葡萄球菌细胞膜完整性的影响。结果表明:氟苯尼考注射液对表皮葡萄球菌ATCC 35984和临床分离株的MIC值分别为4,2μg/mL,MBC值分别为16,8μg/mL。与未加氟苯尼考注射液的菌液相比,0.5μg/mL氟苯尼考注射液可显著抑制表皮葡萄球菌生长,0.25μg/mL氟苯尼考可显著抑制其生物被膜的形成(P2μg/mL时抑制效果极显著(P1/2 MIC时,其可损伤表皮葡萄球菌的细胞膜完整性。说明新疆南疆地区表皮葡萄球菌对氟苯尼考注射液的药物敏感性较好,氟苯尼考可能是通过降低表皮葡萄球菌细胞表面疏水性和损伤表皮葡萄球菌的细胞膜完整性来发挥抑菌和杀菌作用的。

关键词：新疆南疆地区表皮葡萄球菌氟苯尼考注射液药物敏感性抗菌活性生物被膜

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从西岩名牌崛起看市场开拓的战略

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南方农村 1998年第2期14卷 43-44页

作者：罗万和广东省大埔县农委

一、西岩名牌的崛起西岩茶产于大埔县枫朗镇东南部海拨1256米的西岩山麓,早在清朝久负盛名销往东南亚国家和地区。西岩山产茶历史悠久、源远流长,产品以其:清、香、甘、滑、醇的质量特点并以西岩山的寺名“西竺”作为注册商标投放国内... 详细信息

一、西岩名牌的崛起西岩茶产于大埔县枫朗镇东南部海拨1256米的西岩山麓,早在清朝久负盛名销往东南亚国家和地区。西岩山产茶历史悠久、源远流长,产品以其:清、香、甘、滑、醇的质量特点并以西岩山的寺名“西竺”作为注册商标投放国内外市场。西岩山茶食之使人提神醒脑,常饮能延年益寿。

关键词：市场开拓西岩茶叶生产大埔县经济效益和社会效益白叶单丛名牌效应优质高产产茶历史注册商标

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槲皮素-替米考星混合物纳米粒的制备及对金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性研究

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中国畜牧兽医 2022年第4期49卷 1470-1478页

作者：刘金环张珊玲宋玮罗万和陈伟塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室阿拉尔843300

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、... 详细信息

【目的】制备一种适用于治疗由金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)引起奶牛乳腺炎感染的槲皮素-替米考星混合物纳米粒,评价其对SASCVs菌株的抗菌活性。【方法】通过对槲皮素(0.05、0.10、0.15和0.20 g)和替米考星原料药用量(0.2、0.3、0.4和0.5 g)及转速(500、1000、1500 r/min)、反应时间(0.5、1.0、2.0 h)、反应温度(25、50、75℃)、溶剂浓度(5.0%、7.5%、10.0%)进行考察,以外观性状为指标,筛选槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优配方和制备条件;以微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径和Zeta电位为指标,对制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒表征;通过琼脂扩散法、微量肉汤稀释法和体外杀菌曲线,对比槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抗菌活性,评价槲皮素-替米考星混合物纳米粒的优势。【结果】当替米考星为0.4 g、槲皮素为0.1 g、溶剂为20 mL 7.5%的聚乙二醇溶液,在转速为1000 r/min、反应时间为1 h、反应温度为50℃时,所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒最优,其溶液外观性状显示颜色清亮,无沉淀和絮状物;微观形态显示该混合物纳米粒分布均匀,颗粒大小一致;沉降体积比为1,再分散性良好,平均粒径为741.9 nm,Zeta电位为-7.69 mV。替米考星标准品、槲皮素-替米考星混合物纳米粒和市售替米考星溶液对SASCVs菌株的抑菌圈直径分别为2.54、1.51和1.38 cm,对SASCVs菌株的最低抑菌浓度分别为1、1和2μg/mL;体外杀菌曲线表明,槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株表现出明显的浓度依赖性。【结论】本研究所制备的槲皮素-替米考星混合物纳米粒对SASCVs菌株具有较强杀菌能力,可为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供基础研究资料。

关键词：槲皮素替米考星混合物纳米粒金黄色葡萄球菌小菌落变异株抗菌活性

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替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的抗菌活性

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中国兽医杂志 2023年第12期59卷 71-76页

作者：鞠牧洁刘金环蒋永涛冷楠楠罗万和新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300

为探究大环内酯类药物替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的抗菌活性,本试验以金黄色葡萄球菌ATCC 29213为靶细菌,以小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)为载体细胞,构建金黄色葡萄球菌胞内感染体系,绘制胞内金黄色葡萄球菌的生长曲线,测定替米考星... 详细信息

为探究大环内酯类药物替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的抗菌活性,本试验以金黄色葡萄球菌ATCC 29213为靶细菌,以小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)为载体细胞,构建金黄色葡萄球菌胞内感染体系,绘制胞内金黄色葡萄球菌的生长曲线,测定替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度、防突变浓度、耐药突变选择窗、抗菌后效应和杀菌曲线。结果显示,胞内金黄色葡萄球菌在0~4、4~18、18~24和24~48 h分别处于迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期。最低抑菌浓度、最低杀菌浓度、防突变浓度和耐药突变选择窗分别为4、8、12.8和4~12.8μg/mL。抗菌后效应和杀菌曲线结果显示,替米考星对胞内金黄色葡萄球菌的杀菌特点表现出明显的时间依赖性。结果表明,替米考星对胞内金黄色葡萄球菌表现出较强的抗菌活性,可为治疗由胞内金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳腺炎制定合理给药方案提供参考依据。

关键词：替米考星奶牛乳房炎胞内金黄色葡萄球菌抗菌活性 RAW264.7细胞

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新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及对氟苯尼考纳米凝胶的药物敏感性研究

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黑龙江畜牧兽医 2024年第6期 59-65页

作者：冷楠楠刘燕窦蕊鞠牧洁刘金环陈伟罗万和塔里木大学动物科学与技术学院新疆阿拉尔843300 塔里木大学新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 塔里木大学新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300

为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼... 详细信息

为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌圈直径(DIZ)、最小抑菌浓度(MIC)和抑菌曲线分析氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果。结果表明:从乳样中分离到一株细菌,该分离株革兰氏染色、镜检后呈蓝紫色并排列成葡萄串状,触酶、血浆凝固酶和甘露醇发酵试验结果均为阳性,其基因组DNA中能扩增出金黄色葡萄球菌耐热核酸酶(nuc)基因,16S rDNA基因序列与金黄色葡萄球菌的相似性为99.7%,判断该分离菌为金黄色葡萄球菌。氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株均产生抑菌作用,DIZ大小为氟苯尼考纳米凝胶>氟苯尼考注射液>氟苯尼考原料药,均表现为高度敏感,其中氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株的DIZ均显著高于氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液(P<0.05)。3种药物对金黄色葡萄球菌分离株的MIC分别为4μg/mL、2μg/mL和4μg/mL。1μg/mL氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果与2μg/mL氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液相当,当氟苯尼考纳米凝胶的浓度为4μg/mL时金黄色葡萄球菌分离株不再生长。说明从新疆南疆地区成功分离出一株乳源金黄色葡萄球菌;相比于氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液,氟苯尼考纳米凝胶对该分离株具有较好的抑菌效果。

关键词：金黄色葡萄球菌氟苯尼考纳米凝胶抑菌活性奶牛乳房炎菌株分离

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HPLC法检测替米考星纳米内服混饮剂含量的方法学研究

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黑龙江畜牧兽医 2019年第15期 124-127页

作者：李超赵海旭周凯翔王志霞罗万和谢书宇华中农业大学国家兽药残留基准实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为了验证检测替米考星纳米内服混饮剂中替米考星含量的高效液相色谱法(HPLC法)的方法学可靠性,试验用乙腈水(1∶1)200倍稀释替米考星纳米内服混饮剂,水浴10min,12000r/min离心30min,用磷酸稀释液稀释1000倍;用AgilentSBC18(250mm×4.6mm... 详细信息

为了验证检测替米考星纳米内服混饮剂中替米考星含量的高效液相色谱法(HPLC法)的方法学可靠性,试验用乙腈水(1∶1)200倍稀释替米考星纳米内服混饮剂,水浴10min,12000r/min离心30min,用磷酸稀释液稀释1000倍;用AgilentSBC18(250mm×4.6mm×5μm)色谱柱,以865mL超纯水、55mL乙腈、55mL四氢呋喃、25mL磷酸二丁胺缓冲液为流动相,流速1.0mL/min,检测波长280nm,用HPLC法进行含量测定的方法学验证。结果表明:建立的替米考星纳米内服混饮剂含量测定的HPLC法标准曲线方程为:A=7808.8C+2314.6,R^2=0.9999,替米考星在5~100μg/mL浓度范围内线性关系良好;平均回收率为(100.03±0.52)%,RSD为0.88%;日内稳定性的RSD为1.29%,日间稳定性的RSD为0.26%;样品平均含量为4.81%。表明所建立的方法专属性强、简便、可行,可用于替米考星纳米内服混饮剂中替米考星含量的测定。

关键词：替米考星纳米内服混饮剂前处理方法学验证含量测定高效液相色谱法

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纳米抗菌药物抗金黄色葡萄球菌感染研究进展

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畜牧与兽医 2022年第7期54卷 140-144页

作者：鲁壮壮刘金环张珊玲鞠牧洁罗万和陈伟新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室/塔里木大学动物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300

金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus耐药性问题日益严重,由其引起的奶牛乳腺炎的临床治疗面临着严峻的挑战。通过新型纳米载体系统所制备的纳米抗菌药物治疗金葡菌感染尤为重要。通过总结金葡菌感染机制、常规药物及纳米抗菌药物在治... 详细信息

金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus耐药性问题日益严重,由其引起的奶牛乳腺炎的临床治疗面临着严峻的挑战。通过新型纳米载体系统所制备的纳米抗菌药物治疗金葡菌感染尤为重要。通过总结金葡菌感染机制、常规药物及纳米抗菌药物在治疗金葡菌感染中的应用,讨论并分析纳米抗菌药物在兽医临床上治疗金葡菌感染所面临的挑战,对纳米抗菌药物治疗金葡菌感染的应用前景进行展望。

关键词：金黄色葡萄球菌感染机制小菌落变异体纳米抗菌药物纳米载体系统

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硫酸头孢喹肟纳米凝胶的制备及疗效初步评价

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中国兽医学报 2021年第9期41卷 1796-1801页

作者：董贵孟凡艳鲁壮壮贺建忠陶大勇陈伟罗万和塔里木大学动物科学学院/新疆生产建设兵团塔里木动物疫病诊断与防控工程实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室新疆阿拉尔843300

制备一种适用于治疗金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)感染的硫酸头孢喹肟纳米凝胶。在离子交联剂作用下,通过凝胶材料之间静电作用自组装形成硫酸头孢喹肟纳米凝胶,以外观性状、微观形... 详细信息

制备一种适用于治疗金黄色葡萄球菌小菌落变异株(Staphylococcus aureus small colony variants,SASCVs)感染的硫酸头孢喹肟纳米凝胶。在离子交联剂作用下,通过凝胶材料之间静电作用自组装形成硫酸头孢喹肟纳米凝胶,以外观性状、微观形态、沉降体积比、再分散性、粒径、Zeta电位为指标筛选最优配方后,对比硫酸头孢喹肟纳米凝胶与其商品化注射液治疗SASCVs感染小鼠模型的结果,对硫酸头孢喹肟纳米凝胶进行评价。结果显示,当三聚磷酸钠、明胶和海藻酸钠的质量浓度分别为0.25,25,15 g/L时为最优配方。最优硫酸头孢喹肟纳米凝胶外观性状显示无沉淀和絮状物,颜色清亮;微观形态显示药物被明胶和海藻酸钠所形成的网络结构所包裹;沉降体积比为1;再分散性良好;包封率(EE)和载药量(LC)分别为(71.2±1.32)%,(16.3±0.45)%;平均粒径为(23.01±1.14)nm;Zeta电位为(-25.4±0.91)mV。硫酸头孢喹肟纳米凝胶和其商品化注射液的治愈率分别为90.0%,86.7%,表明硫酸头孢喹肟纳米凝胶治疗SASCVs感染小鼠的效果略优于硫酸头孢喹肟注射液。本研究将为治疗由SASCVs菌株引起的奶牛乳腺炎提供依据。

关键词：硫酸头孢喹肟纳米凝胶金黄色葡萄球菌小菌落变异株制备评价

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包衣技术提高药物药学性能的研究进展

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中国畜牧兽医 2018年第11期45卷 3271-3278页

作者：李超罗万和周凯翔陈冬梅潘源虎陶燕飞谢书宇华中农业大学国家兽药残留基准实验室武汉430070

兽药对畜牧生产中的疾病防控和健康养殖意义重大,但由于某些药物味苦、对胃黏膜刺激性大、稳定性差和药理作用部位靶向性差等限制了其在临床上的使用。包衣技术在改善药物适口性、提高药物稳定性和实现药物控缓释和靶向性等方面具有显... 详细信息

兽药对畜牧生产中的疾病防控和健康养殖意义重大,但由于某些药物味苦、对胃黏膜刺激性大、稳定性差和药理作用部位靶向性差等限制了其在临床上的使用。包衣技术在改善药物适口性、提高药物稳定性和实现药物控缓释和靶向性等方面具有显著优势。作者总结了国内外关于包衣技术在改善药物适口性、提高药物稳定性、制备控缓释剂型和高效靶向释药剂型方面的研究进展,分析了包衣膜的形成原理,剖析了几种常见包衣技术的优缺点和其产业化面临的挑战,在此基础上展望了包衣技术在兽药领域的应用前景,以期为基于包衣技术的兽药新制剂的开发提供新思路。

关键词：包衣技术药物适口性控缓释靶向

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