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费氏中华根瘤菌共生质粒扩增对结瘤因子组分和共生固氮能力的影响

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应用生态学报 2003年第9期14卷 1517-1520页

作者：缪礼鸿周俊初华中农业大学教育部微生物重点实验室武汉430070

费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)YC4能在大豆(Glycine max)和野大豆(***)上形成正常固氮的根瘤。人工培养条件下用^(14)C标记的薄层层析(TLC)法检测根瘤菌产生的结瘤因子(LCOs)的结果表明,与其它4株费氏中华根瘤菌相比,YC4产生的L... 详细信息

费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)YC4能在大豆(Glycine max)和野大豆(***)上形成正常固氮的根瘤。人工培养条件下用^(14)C标记的薄层层析(TLC)法检测根瘤菌产生的结瘤因子(LCOs)的结果表明,与其它4株费氏中华根瘤菌相比,YC4产生的LCOs含有较多的疏水性基因。从YC4菌株中分离到1株共生质粒发生了扩增的自发突变株YSC3,其产生的LCOs中含有较野生型菌株多的1个疏水性组分,28℃培养条件下产生的LCOs量亦较YC4显著增加。结瘤试验结果表明,YSC3菌株只能在大豆和野大豆上形成无效的根瘤。

关键词：费氏中华根瘤菌共生质粒结瘤因子共生固氮

导入外源DNA的大豆根瘤菌22-10基因工程菌株的构建与分析

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华中农业大学学报 1993年第3期12卷 255-264页

作者：缪礼鸿周俊初华中农业大学生物技术中心武汉430070

通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株H... 详细信息

通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株HN5-1、HN5-2和HN22-2。采用反向杂交,将接合子HN5-2中的外源重组质粒转回到大肠杆菌中,提取质粒作EcoRI酶切。表明pLAFR1质粒载体上携带有大约20 kb大小的DNA片段。实验还证明,在含有从根瘤菌转移而来的pLAFR1质粒的大肠杆菌细胞中,常伴随有辅助性质粒pRK2013的存在,用四环素和卡那霉素两种选择性抗性可淘汰其中的pRK2013质粒而仅保留有来自根瘤菌的pLAFR1重组质粒。

关键词：大豆根瘤菌杂交

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根瘤菌竞争结瘤的研究进展

华中农业大学学报 2003年第1期22卷 84-89页

作者：缪礼鸿周俊初华中农业大学教育部农业微生物重点实验室武汉430070

近年来已通过自然选育或基因工程技术获得了不少具有高效固氮能力的菌株 ,并在人工控制的条件下证明它们能够使豆科作物显著增产。但由于人工接种剂与土著根瘤菌的竞争结瘤问题一直未得到很好解决 ,阻碍了这些高效固氮菌株田间应用效果... 详细信息

近年来已通过自然选育或基因工程技术获得了不少具有高效固氮能力的菌株 ,并在人工控制的条件下证明它们能够使豆科作物显著增产。但由于人工接种剂与土著根瘤菌的竞争结瘤问题一直未得到很好解决 ,阻碍了这些高效固氮菌株田间应用效果的发挥。尽管人们对这一问题已进行了大量的研究 ,但与根瘤菌结瘤基因的研究相比 ,我们对根瘤菌的竞争结瘤机制的认识仍非常有限。已有的研究结果表明 ,影响根瘤菌竞争结瘤的因素主要包括根瘤菌与宿主植物的遗传因素和生态学因素两个方面。

关键词：研究根瘤菌竞争结瘤影响因子

费氏中华根瘤菌共生质粒缺失对结瘤和固氮能力的影响

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华中农业大学学报 2002年第2期21卷 117-122页

作者：缪礼鸿马向东周俊初华中农业大学农业部农业微生物重点实验室武汉430070

费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01在大豆上的结瘤表现为非品种专一性,其共生质粒pSymHN01b在诱动转入另一非品种专一性结瘤菌株WWG18SR后,获得的转移接合子WWG18SRN1中的pSymHN01b缺失约40 kb。盆栽结瘤试验证明,pSymHN01b的... 详细信息

费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01在大豆上的结瘤表现为非品种专一性,其共生质粒pSymHN01b在诱动转入另一非品种专一性结瘤菌株WWG18SR后,获得的转移接合子WWG18SRN1中的pSymHN01b缺失约40 kb。盆栽结瘤试验证明,pSymHN01b的缺失导致WWG18SRN1由非品种结瘤菌株转变为大豆品种专一性结瘤菌株,并失去了在所有供试的大豆品种上固氮的能力。在获得了完整的pSymHN01b的转移接合子WWG18SRN2存在时,WWG18SRN1在黑农33上的结瘤受到抑制。

关键词：费氏中华根瘤菌共生质粒缺失结瘤固氮能力

豌豆根瘤菌共生基因在***中的表达及共生质粒间的相互作用

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武汉大学学报（理学版） 2001年第4期47卷 498-502页

作者：缪礼鸿周俊初华中农业大学农业部农业微生物重点实验室湖北武汉430070

通过两亲本接合转移 ,将豌豆根瘤菌 ( Rhizobium leguminosarum bv. viciae) 12 2 9的约 2 5 5 0 kb的共生质粒 p Sym12 2 9分别转入费氏中华根瘤菌 ( Sinorhizobium fredii) HN0 1SR及其消除了共生质粒的菌株 HND10 0中 .在人工培养条... 详细信息

通过两亲本接合转移 ,将豌豆根瘤菌 ( Rhizobium leguminosarum bv. viciae) 12 2 9的约 2 5 5 0 kb的共生质粒 p Sym12 2 9分别转入费氏中华根瘤菌 ( Sinorhizobium fredii) HN0 1SR及其消除了共生质粒的菌株 HND10 0中 .在人工培养条件下 ,用 1 4C标记的薄层层析 ( TL C)技术检测转移接合子的结瘤因子 ( L COs)的结果表明 ,转移接合子 HND10 0 ( p Sym12 2 9)产生的 L COs与豌豆根瘤菌 12 2 9相同 .植物盆栽结瘤试验结果表明 ,HND10 0( p Sym 12 2 9)能够在豌豆品种 Nigra上形成白色球状的无效根瘤 ,而豌豆根瘤菌 12 2 9则形成正常的长圆柱状的有效根瘤 .将 p Sym 12 2 9转入 HN 0 1SR后 ,部分接合子表现出与 HND10 0 ( p Sym 12 2 9)相同的结瘤性状 ,而另一部分接合子的结瘤性状与 HN0 1SR相同 ,显示了 HN0 1SR与 12 2 9两菌株异源共生质粒之间结瘤功能的抑制关系 .

关键词：共生质粒费氏中华根瘤菌结瘤因子豌豆根瘤菌基因表达接合子

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根瘤菌质粒的研究进展

华中农业大学学报 2007年第3期26卷 428-434页

作者：缪礼鸿周俊初武汉工业学院生物工程与技术实验室武汉430023 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

快生型根瘤菌中普遍存在1到多个数量不等的内源质粒(indigenous plasmid)。其中,含有根瘤菌结瘤和共生固氮所必需的基因的质粒被称之为共生质粒(pSym);其它的质粒被称为非共生质粒(non-pSym)。根瘤菌的内源质粒一般都非常稳定,能够在不... 详细信息

快生型根瘤菌中普遍存在1到多个数量不等的内源质粒(indigenous plasmid)。其中,含有根瘤菌结瘤和共生固氮所必需的基因的质粒被称之为共生质粒(pSym);其它的质粒被称为非共生质粒(non-pSym)。根瘤菌的内源质粒一般都非常稳定,能够在不同种属的根瘤菌之间和土壤杆菌中进行转移。根瘤菌质粒在转移、复制过程中可能发生重组等现象。本文综述了根瘤菌共生质粒和非共生质粒的功能,以及根瘤菌质粒的转移、复制等特性。

关键词：根瘤菌共生质粒非共生质粒

费氏中华根瘤菌内源质粒和大豆品种对菌株竞争结瘤能力及固氮效率的影响

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中国农业科学 2002年第7期35卷 802-808页

作者：缪礼鸿周俊初郑慧芬农业部农业微生物重点实验室华中农业大学农业部农业微生物重点实验室华中农业大学武汉430070

采用发光酶基因 (luxAB)标记技术 ,在无菌砂培条件下测定了费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii)内源质粒和大豆品种对供试菌株竞争结瘤和固氮效率的影响。结果表明 ,供试菌株的固氮效率主要由共生质粒所决定 ;而竞争结瘤能力主要取决... 详细信息

采用发光酶基因 (luxAB)标记技术 ,在无菌砂培条件下测定了费氏中华根瘤菌 (Sinorhizobiumfredii)内源质粒和大豆品种对供试菌株竞争结瘤和固氮效率的影响。结果表明 ,供试菌株的固氮效率主要由共生质粒所决定 ;而竞争结瘤能力主要取决于其染色体所携带的基因 ,内源质粒 (包括共生质粒和非共生质粒 )对供试菌株竞争结瘤能力没有明显的影响。菌株的竞争结瘤能力对供试的大豆品种依赖性较小 ,品种对不同组合中的菌株竞争结瘤能力影响效果不同

关键词：费氏中华根瘤菌质粒大豆竞争结瘤固氮效率

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耐高温酵母菌的筛选及其乙醇发酵特性

食品科学 2016年第19期37卷 128-134页

作者：刘超帝缪礼鸿陈瑾刘蒲临武汉轻工大学生物与制药工程学院湖北武汉430023

采用平板分离法,从29份新鲜采集的土样中分离获得64株耐高温酵母菌株,并对其在高温条件下的乙醇发酵性能进行了分析比较。26S r DNA D1/D2区域序列测定和生理特征分析结果表明,这些酵母菌株在亲缘关系上可归类于6个属7个种,分别为热带... 详细信息

采用平板分离法,从29份新鲜采集的土样中分离获得64株耐高温酵母菌株,并对其在高温条件下的乙醇发酵性能进行了分析比较。26S r DNA D1/D2区域序列测定和生理特征分析结果表明,这些酵母菌株在亲缘关系上可归类于6个属7个种,分别为热带假丝酵母(Candida tropicalis)(占总分离株的39.1%)、马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)(占23.4%)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)(占29.7%)、季也蒙毕赤酵母(***)(占1.6%)、Kazachstania bovina(占1.6%)、Candida palmioleophila(占1.6%)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)(占3.1%)。其中,马克斯克鲁维酵母的耐高温能力和乙醇发酵能力最强;40℃条件下发酵72 h后,发酵液中乙醇体积分数最高可达6.56%,显著高于相同条件下其他耐高温酵母的乙醇产量。上述结果表明,马克斯克鲁维酵母在高温乙醇发酵过程中具有明显优势,可作为利用生物质发酵生产乙醇的优良候选菌株。

关键词：耐高温酵母菌生物多样性 26SrDNA 乙醇发酵

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棉浆黑液生物处理工程改造及运行

环境工程 2007年第3期25卷 87-89页

作者：李芙蓉缪礼鸿武汉工业学院武汉430023

介绍了某化纤厂黑液生物处理系统的工艺改造及运行情况。通过采取对废水进行清污分流,提高进水CODCr,延长废水水力停留时间,并将原“厌氧→好氧”工艺改为“好氧→厌氧”工艺等改造措施,实现了黑液生物处理系统的稳定运行;厌氧池由半瘫... 详细信息

介绍了某化纤厂黑液生物处理系统的工艺改造及运行情况。通过采取对废水进行清污分流,提高进水CODCr,延长废水水力停留时间,并将原“厌氧→好氧”工艺改为“好氧→厌氧”工艺等改造措施,实现了黑液生物处理系统的稳定运行;厌氧池由半瘫痪状态转入正常运行,并有大量沼气产出,CODCr总去除率达55%;取消无轴锥筛,停止硫酸、尿素和磷酸的投入,使运行费用降至原来的1/3。系统改造取得了较好的效果。

关键词：棉浆黑液生物处理工艺改造