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浅谈细胞产品开发用人诱导多能干细胞的建株要求

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中国新药杂志 2022年第21期31卷 2101-2108页

作者：张可华纳涛孟淑芳中国食品药品检定研究院生物制品检定所细胞资源保藏研究中心卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells, hiPSC)自从问世以来一直是干细胞和再生医学领域研究的热点,在国内干细胞产品临床转化研究高速发展的今天,随着hiPSC重编程技术、多能干细胞培养技术、干细胞诱导分化技术以及... 详细信息

人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells, hiPSC)自从问世以来一直是干细胞和再生医学领域研究的热点,在国内干细胞产品临床转化研究高速发展的今天,随着hiPSC重编程技术、多能干细胞培养技术、干细胞诱导分化技术以及多能干细胞质量研究技术的不断深化,以hiPSC为基础开发的衍生产品开始从实验室逐渐走向临床产品开发及研究阶段。本文以基于hiPSC开发药品为出发点和思路,参考相关法规和指南,简述hiPSC的建株以及细胞株的质量要求,为开发以hiPSCs为基础的细胞治疗产品提供参考,以期在细胞产品开发的重要源头hiPSC细胞株尽可能满足药品监管的要求。

关键词：细胞治疗干细胞治疗诱导多能干细胞建株质量控制

谷氨酰胺对骨肽药物促UMR106细胞增殖试验的影响

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中国生物制品学杂志 2022年第9期35卷 1060-1064页

作者：张媛纳涛吴彦霖杨泽岸高华中国食品药品检定研究院北京102629

目的考察谷氨酰胺对骨肽生物活性测定方法——UMR106细胞增殖试验的影响。方法使用液质联用测定骨肽原液中谷氨酰胺含量,采用CCK-8法检测谷氨酰胺对UMR106细胞增殖影响的浓度范围,以及骨肽原液对UMR106细胞的增殖作用。同时对骨肽原液... 详细信息

目的考察谷氨酰胺对骨肽生物活性测定方法——UMR106细胞增殖试验的影响。方法使用液质联用测定骨肽原液中谷氨酰胺含量,采用CCK-8法检测谷氨酰胺对UMR106细胞增殖影响的浓度范围,以及骨肽原液对UMR106细胞的增殖作用。同时对骨肽原液浓度与相应谷氨酰胺浓度,以及谷氨酰胺试验应用浓度(骨肽原液浓度1 mg/mL)与相应细胞增殖率进行相关性分析。结果骨肽原液中谷氨酰胺含量差异较大,且UMR106细胞对谷氨酰胺较为敏感。骨肽原液浓度与其相应谷氨酰胺含量、谷氨酰胺试验应用浓度与相应细胞增殖率均无显著相关性(r分别为0.1463和0.5471,P均>0.05)。结论骨肽原液中谷氨酰胺不会对骨肽生物活性测定方法——UMR106细胞增殖试验产生影响。

关键词：骨肽谷氨酰胺 UMR106细胞细胞增殖相关性

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外泌体在阿尔兹海默病中的应用研究进展

中国实验诊断学 2022年第12期26卷 1876-1880页

作者：侯雪佳孙鸽纳涛姜金兰吉林大学中日联谊医院科学研究中心吉林长春130033 吉林大学第二医院妇产科中国食品药品检定研究院

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种起病隐匿的神经系统退行性疾病。95%~99%的AD患者没有家族遗传史,这称为散发性AD。随着年龄的增长,AD发病的风险呈指数级增加。WHO最新报告统计,全世界有近3560万人患有痴呆症。当前,中国... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种起病隐匿的神经系统退行性疾病。95%~99%的AD患者没有家族遗传史,这称为散发性AD。随着年龄的增长,AD发病的风险呈指数级增加。WHO最新报告统计,全世界有近3560万人患有痴呆症。当前,中国的AD患者已超过1000万人,是新发病例全球增速最快的国家之一。AD的病因迄今未明,涉及多种因素的综合作用,如遗传因素、环境因素、免疫因素、生活方式等[1]。

关键词：家族遗传史外泌体阿尔兹海默病阿尔茨海默病未明新发病例 Alzheimer 遗传因素

间充质干细胞外泌体促进糖尿病皮肤创口愈合的研究进展

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中国实验诊断学 2022年第4期26卷 609-612页

作者：赵云李秀英纳涛姜金兰吉林大学中日联谊医院科研中心吉林长春130033 中国食品药品检定研究院北京102629

中国糖尿病患病率高达11%以上,糖尿病会导致创口不愈合,糖尿病足等,为糖尿病患者带来巨大的身体和精神创伤。在糖尿病患者中,延迟创口愈合一直是一个主要的问题,约15%的糖尿病患者常常伴有不愈合溃疡的风险,据估计,这些难愈合性糖尿病... 详细信息

中国糖尿病患病率高达11%以上,糖尿病会导致创口不愈合,糖尿病足等,为糖尿病患者带来巨大的身体和精神创伤。在糖尿病患者中,延迟创口愈合一直是一个主要的问题,约15%的糖尿病患者常常伴有不愈合溃疡的风险,据估计,这些难愈合性糖尿病皮肤创口的患者治疗成本每年约为100亿美元。由此可见,开展促进糖尿病皮肤损伤愈合的相关研究,对提高我国乃至世界的糖尿病患者生存质量、降低致残率有重要意义。

关键词：精神创伤外泌体生存质量损伤愈合创口愈合间充质干细胞糖尿病足创口不愈合

基于细胞色素b序列差异的细胞种属鉴别及种属间细胞交叉污染的快速检测方法

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药物分析杂志 2014年第11期34卷 2054-2059页

作者：纳涛袁宝珠中国食品药品检定研究院细胞资源保藏研究中心、卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的:建立一种优于传统方法的、简单快速和灵敏度高的细胞种属鉴别及种属间细胞交叉污染的PCR检测方法。方法:以细胞色素b(cytochrome b)作为研究内容,设计并优化针对10种不同动物种属的引物,进行单种属引物和混合种属引物PCR反应的比... 详细信息

目的:建立一种优于传统方法的、简单快速和灵敏度高的细胞种属鉴别及种属间细胞交叉污染的PCR检测方法。方法:以细胞色素b(cytochrome b)作为研究内容,设计并优化针对10种不同动物种属的引物,进行单种属引物和混合种属引物PCR反应的比较研究。结果:本文设计出可通过混合引物单PCR方式高效、敏感地检测10种常见动物种属细胞,并有效判断种属间细胞交叉污染的PCR检测方法。结论:本方法明显优于传统的细胞种属鉴定及种属间细胞交叉污染的方法,能显著提高对细胞资源库细胞、生产用细胞基质及治疗性细胞产品的质控能力。

关键词：种属鉴别细胞交叉污染细胞色素b PCR检测方法治疗性细胞产品生产用细胞基质快速检测方法研究

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硬化性苔藓样变性的诊断及病因学的研究进展

中国实验诊断学 2023年第1期27卷 108-111页

作者：何俊翔纳涛张海燕吕书悦张茁吉林大学中日联谊医院泌尿外科一病区吉林长春130033 中国食品药品检定研究院吉林大学中日联谊医院胃肠结直肠外科吉林大学中日联谊医院南湖神经内科

硬化性苔藓样变性(lichen sclerosus, LS)是由Hallopeau于1887年首次提出[1],男性硬化性苔藓样变性(MGLSc)早些年因其三大典型临床症状:表皮干燥、病变组织皮下动脉闭塞、龟头炎,Stuhmer又将其称为干燥闭塞性龟头炎(Balanitis xerotica ... 详细信息

硬化性苔藓样变性(lichen sclerosus, LS)是由Hallopeau于1887年首次提出[1],男性硬化性苔藓样变性(MGLSc)早些年因其三大典型临床症状:表皮干燥、病变组织皮下动脉闭塞、龟头炎,Stuhmer又将其称为干燥闭塞性龟头炎(Balanitis xerotica obliterans, BXO)[2]。而在1976年,“干燥闭塞性龟头炎”的疾病名称已被国际外阴疾病研究学会正式废除[3]。关于LS的病因、发病机制、诊断和治疗尚无定论[4-5],本文围绕以上方面作一综述。

关键词：典型临床症状龟头炎硬化性苔藓疾病名称闭塞性动脉闭塞外阴疾病病因学

尿酸、NLR、及A/G对结直肠癌诊断的应用价值分析

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中国实验诊断学 2022年第8期26卷 1250-1253页

作者：王荟费秉元孙鸽姜金兰金洪永纳涛吉林大学中日联谊医院吉林长春130033 吉林大学第二医院吉林长春130041 中国食品药品检定研究院北京100000

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是一种发病率及死亡率均较高的恶性疾病。据我国癌症中心公布的数据显示,2015年全国范围内CRC发病数为38.8万例,死亡数为18.7万例。研究证实早期治疗可显著提高患者术后生存率。结直肠疾病多遵循由腺瘤... 详细信息

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是一种发病率及死亡率均较高的恶性疾病。据我国癌症中心公布的数据显示,2015年全国范围内CRC发病数为38.8万例,死亡数为18.7万例。研究证实早期治疗可显著提高患者术后生存率。结直肠疾病多遵循由腺瘤发展到癌的演变规律,此过程可长达10-15年,为早期识别CRC并进行干预提供了一个重要的“窗口期”。因此如何早期识别CRC则成为了一个具有重要意义的问题。

关键词：癌症中心术后生存率结直肠疾病早期识别结直肠癌数据显示窗口期应用价值分析

基于吲哚胺2,3-双加氧酶1活性评价人间充质干细胞免疫调控功能的吸光光度法的建立及优化

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中国生物制品学杂志 2016年第9期29卷 954-960页

作者：纳涛王盼刘静张可华袁宝珠中国食品药品检定研究院生物制品检定所细胞保藏及研究中心卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室北京100050

目的建立一种基于吲哚胺2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)的活性快速评价人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,h MSCs)免疫调控功能的吸光光度法,并进行优化。方法以含干扰素γ(interferonγ,IFNγ)的完全... 详细信息

目的建立一种基于吲哚胺2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)的活性快速评价人间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,h MSCs)免疫调控功能的吸光光度法,并进行优化。方法以含干扰素γ(interferonγ,IFNγ)的完全培养基激活hMSCs,收集hMSCs培养上清,与三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)和对二甲氨基苯甲醛(paradimethylaminobenzaldehyde,PDAB)反应,检测A492值,通过标准曲线计算样品中色氨酸代谢产物犬尿氨酸(kynurenine)的含量,以反映h MSCs所分泌IDO1的酶代谢活性,并对方法中的培养体系(6、12、24、48、96孔板)、IFNγ处理时间(4、8、12、24 h)、培养基使用量(150、200、250、300、350、400、450及500μl)及IFNγ作用浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、5.0及10.0 ng/ml)进行优化。同时验证方法的特异性,并检测样品保存条件及液氮冻存后不同复苏时间对kynurenine浓度的影响。采用优化后的方法分析不同来源、不同代次的hMSCs分泌IDO1的能力。结果确定最佳检测条件为:培养体系为48孔体系,IFNγ处理时间为24 h,培养基使用体积为200μl,IFNγ作用浓度为10.0 ng/ml。该方法可特异性检测IDO1的活性;除常温外,其他样品保存条件对检测结果影响较小;液氮冻存后复苏24 h可检测到与冻存前水平相当的kynurenine。该方法可有效判断不同供体来源的hMSCs在分泌IDO1功能上的差异。结论该方法可快速、特异、稳定地检测hMSCs分泌IDO1的水平,且操作简便,可用于快速评价h MSCs的免疫调控功能。

关键词：吲哚胺2,3-双加氧酶1 间充质干细胞免疫调控功能吸光光度法犬尿氨酸

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达肝素钠和肝素钠对小鼠毒性的比较

中国药理学与毒理学杂志 2016年第11期30卷 1172-1175页

作者：张媛纳涛吴彦霖游赣花刘倩贺庆高华中国食品药品检定研究院药理室北京100050 中国食品药品检定研究院细胞资源保藏研究中心北京100050 贵州食品药品检验所药理室贵州贵阳550004

目的比较达肝素钠和肝素钠对小鼠毒性的差异。方法采用半数致死量(LD_(50))法测定两药对小鼠的急性毒性,达肝素钠设6个剂量组,最低剂量为2.54×10~5U·kg^(-1);肝素钠设5个剂量组,最低剂量为2.05×10~5U·kg^(-1);剂量间距均为1.25;达... 详细信息

目的比较达肝素钠和肝素钠对小鼠毒性的差异。方法采用半数致死量(LD_(50))法测定两药对小鼠的急性毒性,达肝素钠设6个剂量组,最低剂量为2.54×10~5U·kg^(-1);肝素钠设5个剂量组,最低剂量为2.05×10~5U·kg^(-1);剂量间距均为1.25;达肝素钠和肝素钠干预L-929细胞48 h,CCK-8法检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC_(50)),达肝素钠设7个浓度,最低浓度为0.78×10~5U·L^(-1),肝素钠设6个浓度,最低浓度为0.39×10~5U·L^(-1);剂量间距均为2;采用碘化丙啶染色用流式细胞仪对L-929细胞进行细胞周期分析。结果达肝素钠和肝素钠对小鼠的LD_(50)分别为4.44×10~5和3.68×10~5U·kg^(-1);对L-929细胞的IC_(50)分别为1.42×10~6和3.54×10~5U·L^(-1)。L-929细胞经达肝素钠处理后,G_2/M期细胞百分率增加137.6%(P<0.01);经肝素钠处理后,G_0/G_1期细胞百分率增加33.8%(P<0.01)。结论达肝素钠对小鼠及L-929细胞的毒性均小于肝素钠,达肝素钠和肝素钠对细胞周期的影响分别阻滞在G_2/M期和G_0/G_1期。

关键词：达肝素钠肝素钠急性毒性细胞毒性细胞周期