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电影文学 2024年第8期 141-144页

作者：纪元元张仕春大连交通大学艺术设计学院辽宁大连116028 大连海洋大学海洋法律与人文学院辽宁大连116023

张艺谋导演的又一现实主义力作《第二十条》聚焦《刑法》第20条展开有关“正当防卫”的边界问题的讨论,用传统的三线并行的方式构建叙事场域,生产具有社会效力的“情动-影像”。德勒兹将“情动”的内涵释义为“存在之力”,这也是其有关... 详细信息

张艺谋导演的又一现实主义力作《第二十条》聚焦《刑法》第20条展开有关“正当防卫”的边界问题的讨论,用传统的三线并行的方式构建叙事场域,生产具有社会效力的“情动-影像”。德勒兹将“情动”的内涵释义为“存在之力”,这也是其有关主体性生成的哲学谱系的重要概念之一,在“情动-影像”的理论构架下,影片注重对情感的实质状态的特写表达,通过积极的情感参与确认受众的主体性地位,达到影片的社会批判效果与宣教属性。

关键词：张艺谋现实主义情动影像情感体验美学范式

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食淀粉乳杆菌干预PoRV对肠组织细胞GSNO、GDNF调节ZO-1的作用

食淀粉乳杆菌干预PoRV对肠组织细胞GSNO、GDNF调节ZO-1的作用

引用

作者：纪元元东北农业大学

学位级别：硕士

猪轮状病毒（Porcine Rotavirus,PoRV）是引起哺乳仔猪腹泻的主要病毒之一,主要通过感染肠上皮细胞,破坏肠上皮屏障（Intestinal Epithelial Barrier,IEB）。在感染过程中,轮状病毒可刺激肠嗜铬细胞（EC细胞）产生5-羟色胺（5-hydroxytr... 详细信息

猪轮状病毒（Porcine Rotavirus,PoRV）是引起哺乳仔猪腹泻的主要病毒之一,主要通过感染肠上皮细胞,破坏肠上皮屏障（Intestinal Epithelial Barrier,IEB）。在感染过程中,轮状病毒可刺激肠嗜铬细胞（EC细胞）产生5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）,激活肠神经胶质细胞（Enteric Glial Cells,EGC）分泌神经营养因子（Glial Cell Derived Neurotrophic factor,GDNF）,导致肠上皮细胞间ZO-1表达增加,改变肠上皮细胞间ZO-1的分布,破坏IEB完整性。EGCs分泌S-亚硝基谷胱甘肽（S-nitrosoglutathione,GSNO）促进紧密连接相关蛋白的表达,改善紧密连接蛋白的定位参与维持IEB完整性。IEB作为机体肠道抵抗病原体重要的屏障,包括肠上皮细胞表面的理化屏障、上皮细胞层、上皮细胞间的紧密连接蛋白,其中ZO-1蛋白作为细胞支架骨架,起到细胞间连接、黏附作用。食淀粉乳杆菌（Lactobacillus amylovorus）是乳酸菌中的一员,可在肠道定植并形成稳定菌群,已知来源于肠道的乳酸杆菌菌株能抑制病原体破坏IEB完整性,维持上皮屏障紧密连接蛋白的正常分布,但是否通过激活EGCs分泌GDNF和GSNO促进ZO-1表达改善肠上皮屏障,干预PoRV破坏肠上皮屏障的机制还未可知。据此,本研究分别利用IPEC-J2细胞和2日龄中国昆明鼠乳鼠建立模型,在细胞水平与乳鼠空肠水平上探索食淀粉乳杆菌及其分泌上清对PoRV破坏肠上皮屏障的保护作用或修复能力。食淀粉乳杆菌及其分泌上清调节GDNF的结果显示,在动物实验中L.a组的5-HT含量随时间降低,但在各时间段表达量均最高,BI组和AI组的5-HT含量高于RV组,BI组随时间降低,AI组呈先上升后下降的趋势,RV组的5-HT含量比对照组高。GDNF mRNA相对表达量结果显示,L.a组呈一直上升的趋势且在各时间段均最高,BI组和AI组呈先上升后下降的趋势,RV组呈一直下降的趋势,BI组整体水平高于AI组和RV组,RV组整体水平均低于对照组。ZO-1 mRNA相对表达量整体趋势与GDNF mRNA相对表达量一致。在蛋白水平上,ZO-1、GFAP、GDNF蛋白的表达整体趋势相似,L.a组的ZO-1蛋白表达量在各时间段均最高,GFAP和GDNF蛋白表达量除感染PoRV后第3 d外均最高;RV组的三种蛋白表达量在各时间段均较低,在感染PoRV后第3 d,BI组GFAP蛋白表达量最高,AI组GDNF蛋白表达量最高。免疫组化结果显示,L.a组、BI组GDNF蛋白的平均光强度值差异不明显（P＞0.05）,高于RV组和AI组。L.a组ZO-1蛋白表达量最高,RV组表达量高于对照组（P＞0.05）,BI组的ZO-1蛋白表达量比AI组和RV组高;BI组的GFAP蛋白表达量最高,L.a组的GFAP蛋白表达量比AI组和RV组高。细胞实验中,ZO-1和GDNF mRNA相对表达量整体趋势与动物实验相似。在蛋白水平上,在感染PoRV前期,S.BI组、L.a.S组和S.AI组的ZO-1蛋白和GDNF蛋白表达量高于RV组,后期RV组ZO-1蛋白和GDNF蛋白表达量有所增加。免疫荧光结果显示,S.BI组和S.AI组GNDF蛋白荧光强度明显高于RV组（P＜0.01）,L.a.S组的GDNF蛋白荧光强度与对照组无明显差异（P＞0.05）。ZO-1蛋白荧光强度无明显差异,L.a.S组的蛋白表达量高于其他组,RV组则最低。食淀粉乳杆菌对GSNO对ZO-1调节探究结果分为两部分:1.内源性GSNO对ZO-1调节作用。动物实验中L.a组的GSNO含量呈一直上升趋势且均显著高于其他组（P＜0.01）,RV组、BI组和AI组的GSNO含量整体变化趋势相似,均是先上升后下降,BI组和AI组的含量整体高于RV组,RV组的GSNO含量整体水平均低于对照组。2.外源性GSNO对ZO-1调节作用,在细胞实验与动物实验中GSNO治疗组与食淀粉乳杆菌及其分泌上清治疗组的ZO-1 mRNA相对表达量趋势无明显差别（P＞0.05）。蛋白水平上,细胞实验中G.AI组和S.AI组ZO-1蛋白表达量趋势相似,均是随时间下降;动物实验中,G.AI组和RV组的ZO-1蛋白表达量随时间下降,AI组则是先上升后下降,前期G.AI组ZO-1蛋白表达量高于AI组,后期相反,而AI组除感染PoRV后第1 d外均高于RV组。动物实验免疫组化结果显示,GDNF、GFAP和ZO-1蛋白表达量:G.AI组高于AI组和RV组。食淀粉乳杆菌抗氧化结果显示:L.a组的NO含量和MDA含量整体水平无明显变化,表达量均较低,CAT、SOD、GSH和GSH-Px含量很高,基本高于其他组,RV组的NO含量和MDA含量整体水平很高,明显高于其他组（P＜0.05）,

关键词：食淀粉乳杆菌轮状病毒 GSNO GDNF ZO-1

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