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烟夜蛾（Helicoverpa assulta）与甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）钠离子通道基因片段的克隆和测序

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烟夜蛾（Helicoverpa assulta）与甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）...

作者：纠敏河南农业大学

学位级别：硕士

应用PCR(polymerase chain reaction)技术克隆并测序了室内经氰戊菊酯筛选7代的烟夜蛾(Helicoverpa assulta)抗性、敏感种群以及甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)自然种群的钠离子通道部分基因序列，并将三者相应的核苷酸及编码的氨基酸序... 详细信息

应用PCR(polymerase chain reaction)技术克隆并测序了室内经氰戊菊酯筛选7代的烟夜蛾(Helicoverpa assulta)抗性、敏感种群以及甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)自然种群的钠离子通道部分基因序列，并将三者相应的核苷酸及编码的氨基酸序列进行了比较，试图从分子水平上来考察烟夜蛾和甜菜夜蛾自然种群对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性机制是否与击倒抗性(knockdown resistance，简称kdr)有关。对钠离子通道部分基因测序结果的分析表明，供试烟夜蛾抗性种群和敏感种群钠离子通道的核苷酸序列同源性为89.62％，而所编码的氨基酸序列同源性为100％。钠离子通道ⅡS6片段1014同源位点上，二者的氨基酸皆为目前所知的所有昆虫敏感种群中所具有的保守Leu残基，而未发现所知昆虫抗性种群中存在的保守Leu(CTT)→Phe(TTT)点突变，这表明烟夜蛾抗性种群对拟除虫菊酯的抗药性机制可能与kdr无关。所测定的甜菜夜蛾自然种群核苷酸序列与烟夜蛾抗性、敏感种群间的同源性分别为89.62％和98.91％，所编码的氨基酸序列与烟夜蛾两种种群的同源性均为98.36％。在甜菜夜蛾自然种群的钠离子通道ⅡS6的1014同源位点上，其氨基酸是Phe(TTT)，而不是所有已知昆虫敏感种群中的保守Leu残基，且这一位点的变化与抗性家蝇(Musca domestica)中存在的点突变完全相同[Leu(CTT)→Phe(TTT)]，说明甜菜夜蛾自然种群的钠离子通道基因序列在ⅡS6的1014同源位点上发生了突变，即该自然种群对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗药性机制与kdr可能是有关的。对烟夜蛾抗性、敏感种群和甜菜夜蛾自然种群与其他昆虫钠离子通道ⅡS6的核苷酸序列同源性分析发现，鳞翅目昆虫之间钠离子通道ⅡS6片段核苷酸序列的同源性都在88％以上，而鳞翅目昆虫与双翅目的果蝇Pa。11 S6的核昔酸序列同源性在 80％左右，与蜚蠕目的德国小螨（Blattellagsrmanica）敏感种群的同源性仅70＊左右，双翅目的果蝇Pa。与蜚蛾目的德国小镰敏感种群的同源性也仅70％左右。这表明同目昆虫钠离于通道11 S6片段的核昔酸序列同源性较高，而不同目的同源性较低。对烟夜蛾（抗性、敏感种群）和甜菜夜蛾自然种群与其他不同昆虫钠离子通道＊ S6片段氨基酸序列同源性比较发现，烟夜蛾敏感种群钠离于通道＊ S6的氨基酸序列与 Para、CPB、PA－HL． CoPPer和 Hpki等敏感种群的同源性皆为 100忆山此可知，钠离子通道＊ S6的氨基酸序列在昆虫敏感种群中是高度保守的，这为抗性种群突变位点的比较鉴定提供了非常便利的条件。研究结果还表明，烟夜蛾（抗性、敏感种群）和甜菜夜蛾自然种群钠离子通道 11 S6的氨基酸序列与 p6一的同源性分别为 100％和 96．43见而与 RS’x’’的同源性分别为 60．71＊和 64．28儿这两种昆虫钠离于通道 11S6的氨基酸序列与pa。的同源性皆远大于与flstTI的同源性这一事实说明，所扩增的序列都是与尸a。同源的。在分子水平上对烟夜蛾和甜菜夜蛾自然种群对拟除虫菊酯类杀虫剂＿的抗性机制的这项研究，为抗性预测和抗性治理提供了理论依据。

关键词：烟夜蛾甜菜夜蛾击倒抗性钠离子通道突变

抗同翅目昆虫的相关基因及其转基因抗虫植物研究进展

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中国生物防治 2004年第4期20卷 228-233页

作者：纠敏刘树生浙江大学应用昆虫学研究所杭州310029

植物抗虫基因工程为控制害虫的危害提供了新的途径。目前,对同翅目害虫具抗虫活性的基因有三种来源,(1)植物:如植物凝集素基因、番茄抗线虫基因Mi等;(2)微生物:如异戊烯转移酶抗性基因;(3)动物:如来自一些昆虫的蛋白酶抑制素基因。其中... 详细信息

植物抗虫基因工程为控制害虫的危害提供了新的途径。目前,对同翅目害虫具抗虫活性的基因有三种来源,(1)植物:如植物凝集素基因、番茄抗线虫基因Mi等;(2)微生物:如异戊烯转移酶抗性基因;(3)动物:如来自一些昆虫的蛋白酶抑制素基因。其中一些基因已被成功地转入植物体内,并且获得的转基因抗虫植物对同翅目害虫的生长、发育、繁殖能力等方面都具有一定的抑制作用,表现出这些抗虫基因在防治这类害虫中的应用潜力。雪花莲凝集素可通过人工饲料或转基因作物进入昆虫体内,并通过营养级传递于天敌,进而对天敌造成直接或间接的影响。

关键词：同翅目昆虫抗性基因转基因植物

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害虫对苏云金芽孢杆菌的抗性及其延缓措施

安徽农业科学 2005年第8期33卷 1378-1379页

作者：汪伦记纠敏河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 浙江大学应用昆虫学研究所浙江杭州310029

苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)在害虫防治中发挥着重要作用。现已表明,有近20种昆虫可对Bt生物制剂产生抗性,转Bt基因作物的释放更加剧了害虫的抗性进化。开展害虫的抗性研究,加强对Bt基因的保护,对持续利用Bt生物制剂... 详细信息

苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)在害虫防治中发挥着重要作用。现已表明,有近20种昆虫可对Bt生物制剂产生抗性,转Bt基因作物的释放更加剧了害虫的抗性进化。开展害虫的抗性研究,加强对Bt基因的保护,对持续利用Bt生物制剂和转Bt基因作物具有非常重要的意义。

关键词：苏云金芽孢杆菌抗性延缓措施

马克斯克鲁维酵母菊粉酶的分离纯化和酶学性质研究

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食品科学 2010年第3期31卷 198-202页

作者：纠敏汪伦记河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003

马克斯克鲁维酵母产生的孢外菊粉酶经超滤浓缩、DEAE-Cellulose阴离子交换色谱、SephadexG-100凝胶色谱分离纯化,得到两个菊粉酶组分ExoⅠ和ExoⅡ,I/S值分别为0.0249和0.0253,均属外切菊粉酶。ExoⅠ经聚丙烯酰胺凝胶鉴定为均一组分,分... 详细信息

马克斯克鲁维酵母产生的孢外菊粉酶经超滤浓缩、DEAE-Cellulose阴离子交换色谱、SephadexG-100凝胶色谱分离纯化,得到两个菊粉酶组分ExoⅠ和ExoⅡ,I/S值分别为0.0249和0.0253,均属外切菊粉酶。ExoⅠ经聚丙烯酰胺凝胶鉴定为均一组分,分子量为85kD。ExoⅠ最适pH值为4.0,最适温度为60℃,Mn2+和Mg2+对酶活力有促进作用,而Cu2+、Fe2+对酶活力有抑制作用,ExoⅠ水解菊粉溶液的产物为果糖和少量葡萄糖。

关键词：马克斯克鲁维酵母菊粉酶纯化酶学性质

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警惕外来入侵害虫——B型烟粉虱

河南农业科学 2007年第8期36卷 55-56页

作者：纠敏汪伦记董钧锋河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 河南科技大学林学院河南洛阳471003

烟粉虱[Bemisia tabaci(Gennadius)] 属同翅目,粉虱科,小粉虱属,广泛分布于除南极洲外各大洲的90多个国家和地区,是棉花、蔬菜和园林花卉等植物的主要害虫之一.

关键词： B型烟粉虱外来入侵害虫植物病毒病园林花卉经济作物生物型同翅目粉虱科

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皮状丝孢酵母菌发酵菊粉产油脂的研究

食品工业科技 2012年第15期33卷 174-177页

作者：贾闪闪纠敏张峰齐汪伦记河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003

因皮状丝孢酵母是一株高产油脂酵母,对皮状丝孢酵母发酵菊粉产油脂进行了研究。考察了盐酸水解、菊粉酶水解及菊粉酶添加量对皮状丝孢酵母发酵菊粉产油脂的影响,实验结果表明:酶解菊粉的方法优于酸解,当菊粉酶添加量为80U/50mL发酵液时... 详细信息

因皮状丝孢酵母是一株高产油脂酵母,对皮状丝孢酵母发酵菊粉产油脂进行了研究。考察了盐酸水解、菊粉酶水解及菊粉酶添加量对皮状丝孢酵母发酵菊粉产油脂的影响,实验结果表明:酶解菊粉的方法优于酸解,当菊粉酶添加量为80U/50mL发酵液时,皮状丝孢酵母生物量和油脂含量最高,分别达到13.49g/L和5.26g/L,油脂得率达到39%。皮状丝孢酵母发酵菊粉产的油脂中脂肪酸成分以含16和18个碳原子的长链脂肪酸为主,其中80.5%以上是C16:0、C18:1和C18:2,尤其是C18:1(53.1%)。因此,皮状丝孢酵母发酵菊粉生产的油脂可作制备生物柴油的替代原料。

关键词：皮状丝孢酵母菊粉发酵油脂

重金属全细胞微生物传感器：设计原理、优化策略及监测应用

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微生物学报 2024年

作者：王明月许玫英纠敏陈杏娟河南科技大学食品与生物工程学院广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室

重金属由于其毒性、持久性、生物蓄积性以及抗性基因潜在贡献性等特点，已引起了人们越来越多的关注。环境中对重金属准确、快速、高效和灵敏的监测对于保护环境和人体健康具有重要的意义。全细胞微生物传感器作为一种集成生物识别模块... 详细信息

重金属由于其毒性、持久性、生物蓄积性以及抗性基因潜在贡献性等特点，已引起了人们越来越多的关注。环境中对重金属准确、快速、高效和灵敏的监测对于保护环境和人体健康具有重要的意义。全细胞微生物传感器作为一种集成生物识别模块与传感处理模块的生物监测技术，为环境重金属污染的监测提供了新的解决方案。近年来，基于转录因子的全细胞微生物传感器在重金属的监测应用方面取得了重大进展。本文综述了重金属全细胞微生物传感器的基本组成及设计原理，总结了近年来研发的重金属全细胞微生物传感器的构建及应用，分析了通过合成生物学技术优化重金属全细胞微生物传感器检测性能的应用实例，并展望了该领域面临的挑战和未来可能的研究方向，有望为环境中重金属污染的高效监测与有效防控提供重要参考。

关键词：重金属全细胞微生物传感器设计优化应用

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多菌种固态发酵菊芋糟渣生产蛋白饲料的研究

饲料研究 2012年第2期35卷 77-80页

作者：汪伦记吉艳青纠敏董英河南科技大学食品与生物工程学院洛阳市第四职业高中江苏大学食品与生物工程学院

对菊芋糟渣固态发酵生产蛋白饲料进行了研究。试验采用马克斯克鲁维酵母、白地霉和产朊假丝酵母组合发酵生产蛋白饲料效果较好。单因素和正交试验优化的固态发酵培养条件为最适麸皮添加量10%,最适初始pH为5.5,加水比为1:1.7,尿素含量为... 详细信息

对菊芋糟渣固态发酵生产蛋白饲料进行了研究。试验采用马克斯克鲁维酵母、白地霉和产朊假丝酵母组合发酵生产蛋白饲料效果较好。单因素和正交试验优化的固态发酵培养条件为最适麸皮添加量10%,最适初始pH为5.5,加水比为1:1.7,尿素含量为2%,接种量为9%,在此条件下30℃培养5 d,粗蛋白含量达到32.09%,比培养基初始粗蛋白含量提高了超过90%。在此基础上,对固态发酵糟渣生产蛋白饲料进行了扩大试验,粗蛋白含量达到27.92%。

关键词：菊芋糟渣固态发酵蛋白饲料

多光谱和分子对接模拟法研究冬凌草甲素与胃蛋白酶的相互作用

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食品与发酵工业 2023年第12期49卷 258-263页

作者：汪伦记郭晓松高婷白雪纠敏河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471023

通过多光谱和分子对接模拟法研究了冬凌草甲素(Oridonin,ORI)和胃蛋白酶(pepsin,PEP)的互作机制。不同温度下的荧光光谱分析发现ORI以非辐射能量转移的静态猝灭方式猝灭PEP的荧光。结合位点数n值接近于1,表明ORI与PEP之间以1∶1形式结... 详细信息

通过多光谱和分子对接模拟法研究了冬凌草甲素(Oridonin,ORI)和胃蛋白酶(pepsin,PEP)的互作机制。不同温度下的荧光光谱分析发现ORI以非辐射能量转移的静态猝灭方式猝灭PEP的荧光。结合位点数n值接近于1,表明ORI与PEP之间以1∶1形式结合。热力学分析表明ORI与PEP的作用力主要是氢键和范德华力,二者的作用是自发过程。紫外吸收光谱、同步荧光光谱和三维荧光光谱分析表明,ORI的加入影响了PEP中的色氨酸残基周围的微环境,导致PEP构象发生改变。傅里叶变换红外光谱结果表明,ORI使PEP的二级结构发生了变化。分子对接模拟结果进一步表明,ORI结合在PEP的活性中心凹槽内,5个氨基酸残基参与了ORI的结合。该研究结果有助于了解ORI与PEP的结合机理,为合理使用ORI提供依据。

关键词：多光谱分子对接模拟冬凌草甲素胃蛋白酶相互作用