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开放式创新思维在医学图书出版中的应用

出版广角 2014年第19期 120-121页

作者：米蕊芳刘福生张昕北京市神经外科研究所首都医科大学附属北京天坛医院清华大学出版社

文章分析了开放式创新思维在医学图书出版中应用的必要性,即突破旧的管理模式、旧的图书内容组织形式和旧的营销模式。并总结了开放式创新思维在医学图书出版中的具体体现,包括协同创作、互动创作、协作翻译、开放出版、众筹出版、开放... 详细信息

文章分析了开放式创新思维在医学图书出版中应用的必要性,即突破旧的管理模式、旧的图书内容组织形式和旧的营销模式。并总结了开放式创新思维在医学图书出版中的具体体现,包括协同创作、互动创作、协作翻译、开放出版、众筹出版、开放获取出版和开放营销。这些具体举措将有助于传统医学图书出版进一步激发出版社转企改制的活力,完成数字化转型。

关键词：开放式创新医学图书数字出版

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雷帕霉素在免疫抑制和肿瘤抑制中的双重作用

基础医学与临床 2008年第12期28卷 1329-1331页

作者：米蕊芳张宏冰中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院北京100005

雷帕霉素(rapamycin)是近年来应用较多的免疫抑制剂,它在肿瘤治疗中也发挥重要作用。雷帕霉素(rapa-mycin)与FKBP12结合,形成Rapamycin-FKBP12复合物,这一复合物抑制mTOR的活性,进一步抑制mTOR下游的一系列分子的合成或功能。雷帕霉素... 详细信息

雷帕霉素(rapamycin)是近年来应用较多的免疫抑制剂,它在肿瘤治疗中也发挥重要作用。雷帕霉素(rapa-mycin)与FKBP12结合,形成Rapamycin-FKBP12复合物,这一复合物抑制mTOR的活性,进一步抑制mTOR下游的一系列分子的合成或功能。雷帕霉素可将免疫细胞滞留于G1期,阻止免疫细胞的增殖;抑制IL-2和其他的免疫分子的合成,从而发挥其免疫抑制作用。另一方面,对于肿瘤细胞,雷帕霉素抑制其生长和增殖,发挥肿瘤抑制作用。它的这一双重功能可应用在器官移植和肿瘤治疗的交叉领域。

关键词：雷帕霉素免疫抑制肿瘤抑制

植物血凝素-ECM830细胞融合法融合黑色素瘤细胞

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中国医学科学院学报 2013年第5期35卷 515-518页

作者：米蕊芳刘福生金贵善首都医科大学附属北京天坛医院北京市神经外科研究所脑肿瘤研究中心北京100050 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系北京100005

目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法。方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量。... 详细信息

目的以黑色素瘤细胞为模型,研究高效率肿瘤细胞融合方法。方法慢病毒荧光标记黑色素瘤细胞,ECM830电融合法及改良的植物血凝素(PHA)-ECM830电融合仪细胞融合法融合黑色素瘤细胞,流式分选黑色素瘤融合细胞,碘化亚啶染色法测定DNA含量。结果荧光标记带有绿色和红色荧光的黑色素瘤细胞,通过PHAECM830细胞融合法获得黑色素瘤融合细胞,细胞融合效率较ECM830电融合法从0.50%提升到7.18%,流式分选得到单一的黑色素瘤融合细胞,DNA含量分析显示黑色素瘤融合细胞的DNA含量翻倍,体内外实验表明黑色素瘤融合细胞增殖速度降低。结论运用改良的PHA-ECM830细胞融合法成功高效得到黑色素瘤融合细胞,黑色素瘤融合细胞增殖速度降低。

关键词：植物血凝素 ECM830 细胞融合法黑色素瘤细胞

荧光素酶标记胶质瘤细胞模型的构建及其在溶瘤病毒治疗中的应用

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中华神经外科杂志 2022年第8期38卷 843-848页

作者：胡跃东张梦梦张俊文米蕊芳首都医科大学北京市神经外科研究所北京100070

目的:构建荧光素酶标记的患者来源胶质瘤细胞模型,并探讨其在溶瘤1型单纯疱疹病毒(oHSV-1)及溶瘤腺病毒(oAD)治疗中的应用。方法:显微镜下观察前期建立的患者来源胶质瘤细胞(命名为U022细胞)的形态特征;通过胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫... 详细信息

目的:构建荧光素酶标记的患者来源胶质瘤细胞模型,并探讨其在溶瘤1型单纯疱疹病毒(oHSV-1)及溶瘤腺病毒(oAD)治疗中的应用。方法:显微镜下观察前期建立的患者来源胶质瘤细胞(命名为U022细胞)的形态特征;通过胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光实验对患者来源U022细胞进行鉴定;通过CCK-8实验测定细胞增殖曲线(n=4);通过慢病毒感染及嘌呤霉素筛选方法获得携带荧光素酶标记的患者来源U022细胞,设置阴性对照组和荧光素酶慢病毒感染组;通过活体成像系统(IVIS)及CCK-8实验测定oHSV-1和oAD对患者来源U022细胞的作用,根据不同的病毒感染复数(0、0.001、0.01、0.1、1、10,每组n=4)的梯度进行分组。结果:患者来源U022细胞符合胶质瘤细胞的形态特征;细胞增殖曲线分析显示,U022细胞增殖较快,细胞倍增时间为19.2 h;进一步行免疫荧光实验显示U022细胞中GFAP呈阳性表达。经嘌呤霉素筛选成功获得荧光素酶标记的胶质瘤细胞(U022-luc),并且荧光素酶发光实验显示细胞的荧光强度随着细胞数量的增加而增强,呈线性正相关(R2=0.97,P<0.001)。IVIS生物素发光实验及CCK-8实验检测显示,oHSV-1和oAD均对U022-luc细胞有显著的毒性作用,并且随着滴度的增加,病毒的作用加强(均P<0.01);当病毒感染复数等于10时,oHSV-1对U022-luc细胞的抑制率分别为(68.77±5.96)%和(66.27±4.89)%,而oAD对U022-luc细胞的抑制率分别为(64.34±3.13)%和(69.73±4.87)%。结论:体外可成功构建荧光素酶标记的患者来源胶质瘤细胞模型;该细胞模型可应用于oHSV-1和oAD治疗的定量研究中。

关键词：神经胶质瘤溶瘤病毒荧光素酶溶瘤1型单纯疱疹病毒溶瘤腺病毒

PI3K-AKT-mTOR信号通路在细胞分化中的作用

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基础医学与临床 2007年第12期27卷 1404-1408页

作者：孟艳米蕊芳赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理学系北京100005

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游分子AKT、TSC1/2和mTOR所组成的信号通路参与增殖、凋亡等多种细胞功能的调节。近年来发现,这一信号通路与细胞的分化密切相关。细胞分化的异常可以引起多种疾病,肿瘤就是一种分化异常的疾病,而PI3K-AKT-... 详细信息

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游分子AKT、TSC1/2和mTOR所组成的信号通路参与增殖、凋亡等多种细胞功能的调节。近年来发现,这一信号通路与细胞的分化密切相关。细胞分化的异常可以引起多种疾病,肿瘤就是一种分化异常的疾病,而PI3K-AKT-mTOR信号传递通路调节失常在肿瘤中最为常见,因此本文旨在综述PI3K-AKT-mTOR信号通路在细胞分化和肿瘤中的作用。

关键词： P13K PTEN TSC1/2 mTOR 分化

SiRNA干扰BTN3A3对脑胶质瘤细胞凋亡作用的研究

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中华神经外科杂志 2020年第9期36卷 951-956页

作者：张梦梦张俊文米蕊芳金贵善刘福生首都医科大学北京市神经外科研究所100070 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科 100070

目的探讨采用siRNA干扰嗜乳脂蛋白亚家族成员A3(BTN3A3)对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法实验采用胶质瘤细胞株(HS683、U251)以及原代胶质瘤细胞,均设立阴性对照组(NC组)以及转染不同序列siRNA的Si-1组(转染1序列)和Si-2组(转染2序列)。... 详细信息

目的探讨采用siRNA干扰嗜乳脂蛋白亚家族成员A3(BTN3A3)对脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法实验采用胶质瘤细胞株(HS683、U251)以及原代胶质瘤细胞,均设立阴性对照组(NC组)以及转染不同序列siRNA的Si-1组(转染1序列)和Si-2组(转染2序列)。应用蛋白质免疫印迹方法分析不同胶质瘤细胞株、小胶质细胞株(HMC3)中BTN3A3的表达情况。通过转染siRNA敲减BTN3A3后,采用流术细胞术分析各细胞株中细胞凋亡的变化情况。分离培养手术切除的脑胶质瘤组织,获得原代胶质瘤细胞后,采用蛋白质免疫印迹方法分析原代细胞中BTN3A3的表达水平;通过转染siRNA敲减BTN3A3后,采用流式细胞术分析原代细胞的细胞凋亡变化情况。结果 BTN3A3在HS683(1.12±0.03)和U87-MG细胞(1.08±0.05)中的表达水平显著高于HMC3细胞(0.66±0.02)(均P<0.01)。U251细胞Si-1组、Si-2组BTN3A3的表达水平分别为0.11±0.01、0.12±0.01,均低于NC组(0.21±0.01)(均P<0.01);HS683细胞Si-1组、Si-2组BTN3A3的表达水平分别为0.77±0.03、0.78±0.04,均低于NC组(1.01±0.03)(均P<0.01)。敲减BTN3A3后,与NC组相比,HS683细胞的早期凋亡比率(NC组:31.6%,Si-1组:53.7%,Si-2组:63.3%)、U251细胞的晚期凋亡比率(NC组:10.4%,Si-1组:18.9%,Si-2组:26.5%)升高。BTN3A3在原代胶质瘤细胞中的表达水平高于HMC3细胞(分别为0.75±0.07和0.55±0.06,P<0.05)。采用siRNA敲减后,原代胶质瘤细胞中BTN3A3的表达水平降低(NC组:0.90±0.01,Si-1组:0.44±0.01,Si-2组:0.49±0.02,Si-1组和Si-2组与NC组相比,均P<0.01),晚期细胞凋亡比率升高(NC组:12.3%,Si-1组:22.6%,Si-2组:18.2%)。结论采用siRNA干扰BTN3A3可促进胶质瘤细胞株、原代胶质瘤细胞的凋亡。

关键词：神经胶质瘤细胞凋亡嗜乳脂蛋白嗜乳脂蛋白亚家族成员A3

脑胶质瘤U251多倍体巨细胞的构建及其对替莫唑胺的耐药性研究

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中华神经外科杂志 2021年第2期37卷 193-197页

作者：米蕊芳季佳宇王启俨方胜田毅夫刘福生首都医科大学北京市神经外科研究所100070 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科 100070

目的探讨脑胶质瘤U251多倍体巨细胞的体外构建方法并研究其对替莫唑胺的耐药性。方法通过慢病毒感染实验观察带有不同荧光标记的人脑胶质瘤U251细胞;采用植物血凝素-聚乙二醇融合法进行细胞融合;通过流式细胞分选实验检测体外携带双色... 详细信息

目的探讨脑胶质瘤U251多倍体巨细胞的体外构建方法并研究其对替莫唑胺的耐药性。方法通过慢病毒感染实验观察带有不同荧光标记的人脑胶质瘤U251细胞;采用植物血凝素-聚乙二醇融合法进行细胞融合;通过流式细胞分选实验检测体外携带双色荧光标记的胶质瘤多倍体巨细胞;采用碘化丙啶染色方法测定U251融合克隆细胞的DNA含量;通过CCK-8实验评价细胞的增殖率以及加入替莫唑胺后细胞的存活率。结果慢病毒感染实验成功获得分别带有绿色和红色荧光标记的胶质瘤U251细胞;细胞融合后显微镜下可见携带双色荧光的胶质瘤融合细胞,并且与聚乙二醇细胞融合法比较,植物血凝素-聚乙二醇细胞融合法的细胞融合率明显提高(自5%)。流式细胞分选获得胶质瘤U251融合细胞单克隆株。DNA含量的检测结果显示,U251融合克隆细胞的DNA含量自之前的2N/4N提高至4N/8N。CCK-8实验结果显示,U251细胞接种后1、2、3、4及5 d的细胞增殖率分别为(99.5±2.6)%、(236.7±4.7)%、(348.9±8.8)%、(656.5±18.5)%及(715.7±48.2)%;而U251-C1多倍体巨细胞的细胞增殖率分别为(100.6±2.1)%、(114.5±1.3)%、(138.4±1.7)%、(316.7±23.1)%及(347.7±13.1)%,U251-C2多倍体巨细胞的细胞增殖率分别为(100.3±1.2)%、(114.7±1.2)%、(186.4±0.6)%、(307.1±9.5)%及(432.9±37.7)%,相较于胶质瘤U251细胞,U251多倍体巨细胞的不同克隆株(U251-C1、U251-C2)的增殖速度均明显减慢(均P<0.05)。替莫唑胺作用下,U251细胞和U251多倍体巨细胞(U251-C1、U251-C2)的细胞存活率均下降(均P<0.01),而与U251细胞组比较,不同U251多倍体巨细胞株(U251-C1、U251-C2)的细胞存活率均更高(均P<0.01)。结论植物血凝素-聚乙二醇细胞融合法可在体外成功构建脑胶质瘤U251多倍体巨细胞;胶质瘤U251多倍体巨细胞可能对替莫唑胺的耐药性发挥重要作用。

关键词：神经胶质瘤细胞融合多倍体巨细胞替莫唑胺耐药性

基础医学学科研究生创新思维能力培养方法探讨

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医学教育管理 2017年第A1期3卷 76-78,87页

作者：米蕊芳刘福生首都医科大学附属北京天坛医院北京市神经外科研究所北京100050

基础医学学科研究生具备医学知识的同时更倾向于医学科研问题的发现及解决。这个过程中最重要的是运用创新的思维来提出问题并找到解决的方法,进而运用科学的思维及方法推理验证。创新思维也是人类最高层次的思维,是现今教育的核心。作... 详细信息

基础医学学科研究生具备医学知识的同时更倾向于医学科研问题的发现及解决。这个过程中最重要的是运用创新的思维来提出问题并找到解决的方法,进而运用科学的思维及方法推理验证。创新思维也是人类最高层次的思维,是现今教育的核心。作为基础医学学科研究生,在学业完成时具备创新思维的意识以及创新思维能力就显得尤为重要。本文就基础医学学科研究生创新思维意识的确立过程、关键点以及创新思维培养的技巧做一探讨。

关键词：基础医学研究生创新思维培养方法

胶质瘤-巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力影响的实验研究

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中华神经外科杂志 2024年第5期40卷 512-518页

作者：胡跃东王佩文张梦梦周贤喆刘福生米蕊芳首都医科大学北京市神经外科研究所北京100070 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科学中心北京100070

目的通过建立胶质瘤细胞与巨噬细胞的融合细胞模型,探究胶质瘤-巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的影响。方法应用小鼠来源的胶质瘤细胞GL261和巨噬细胞RAW264.7构建并筛选GL261xRAW264.7融合细胞。分别培... 详细信息

目的通过建立胶质瘤细胞与巨噬细胞的融合细胞模型,探究胶质瘤-巨噬融合细胞的巨噬细胞极化特征及其对胶质瘤细胞增殖、侵袭能力的影响。方法应用小鼠来源的胶质瘤细胞GL261和巨噬细胞RAW264.7构建并筛选GL261xRAW264.7融合细胞。分别培养GL261、RAW264.7、GL261xRAW264.7融合细胞,收集细胞上清获得相应的条件培养基(CM,即GL261-CM、RAW264.7-CM、GL261xRAW264.7-CM)。采用流式细胞术检测GL261xRAW264.7融合细胞的染色体含量及其与RAW264.7细胞的巨噬细胞标志物CD86、CD206的表达量;通过CCK-8、Transwell或划痕实验评估GL261xRAW264.7融合细胞与亲代细胞(即GL261、RAW264.7细胞)增殖、迁移能力的差异,以及GL261xRAW264.7-CM与亲代细胞CM培养的GL261细胞增殖、迁移、侵袭能力的差异;通过免疫磁珠-流式细胞术检测RAW264.7与RAW264.7xGL261融合细胞分泌巨噬细胞M1型细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和IL-23及M2型细胞因子IL-10、转化生长因子β1(TGF-β)的差异。结果成功构建了GL261xRAW264.7融合细胞,且经流式细胞术证实GL261xRAW264.7融合细胞的染色体含量明显增加(G_(1)和G_(2)/M峰均较亲代细胞右移)。CCK-8增殖实验结果显示,GL261xRAW264.7融合细胞的增殖能力较GL261细胞强,但较RAW264.7细胞弱,差异均有统计学意义(均P0.05]。免疫磁珠-流式细胞术检测结果显示,GL261xRAW264.7融合细胞与RAW264.7相比,IL-10、TGF-β表达增多,TNF-α、IL-1β减少,差异均有统计学意义(均P0.05)。CCK-8、Transwell及划痕实验均显示,GL261xRAW264.7-CM较亲代细胞CM培养的GL261细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论体外构建的GL261xRAW264.7融合细胞具有M2型巨噬细胞的免疫特征,且可促进胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力。

关键词：神经胶质瘤细胞融合细胞增殖肿瘤相关巨噬细胞细胞侵袭