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新茶饮空间中盛唐禅意山水诗意境设计研究

新茶饮空间中盛唐禅意山水诗意境设计研究

作者：杨曦颖中南林业科技大学

学位级别：硕士

随着中国强势的崛起,强烈的民族自豪感开始促使我们回归自己的传统文化,中华文化自信已然成为每个中国人心中的关键词。故在这个“文化中心时代”,将中华文化中的精气神植入空间之中,结合古典美与现代美,打造传统文化与现代时尚并存的... 详细信息

随着中国强势的崛起,强烈的民族自豪感开始促使我们回归自己的传统文化,中华文化自信已然成为每个中国人心中的关键词。故在这个“文化中心时代”,将中华文化中的精气神植入空间之中,结合古典美与现代美,打造传统文化与现代时尚并存的室内空间,不仅符合当今室内设计的发展趋势,还顺应中国的文化大背景。而在中华浩瀚文化长河中,唐诗之美,美不胜收,盛唐禅意山水诗独特的艺术神韵,特有的美学价值和人文精神,是民族的,也是世界的,值得我们世代传承。论文基于盛唐禅意山水诗的诗歌意境,以新茶饮空间为研究对象,首先运用文献分析法以中国古典山水诗之形成作为线索,对盛唐时期以禅入诗的文化现象进行集中观照,探索盛唐禅意山水诗之内蕴。同时,对王维、孟浩然等诗人的作品进行素材解读,将盛唐禅意山水诗的审美意境提炼为不居之境、空灵之境及适意之境三类,运用交叉学科研究法,基于语义学理论,将其视觉元素提炼为流动简远的布局特征;简朴自然的形质特征以及清淡雅逸的色彩表现。其次,通过实地考察法及个案分析法,探讨了当代新茶饮空间的内涵,分析总结出其整体流畅、区块独立的布局特征;灵活可塑的形态特征;寓思于质的材质特征;素净雅致的色彩表现。再运用对比分析法,从精神文化及视觉审美要素两个层面分析盛唐禅意山水诗意境及新茶饮空间的契合点,从而提出盛唐禅意山水诗意境在新茶饮空间中的具体设计表现手法,即“不居之境”中的模糊界面、水光潋滟;“空灵之境”中的艺术留白、删繁就简以及“适意之境”中的以物喻心、依材写意。最后将设计表现手法作为理论指导依据,对实际的新茶饮空间进行创新设计,验证所提出的相关理论,最终使其满足审美与实用的需求。论文力图从传统诗歌美学文化中汲取养分,结合现代新茶饮空间,通过相应的设计营造手法和艺术表现形式,赋予空间以特殊的审美意境,从而营造出独具中华传统文化内涵的室内空间,进而激发设计师们的创新思维,并为盛唐禅意山水诗意境在新茶饮空间中的设计研究提供理论参考。

关键词：新茶饮空间盛唐禅意山水诗意境营造手法

中小板上市公司并购中对赌协议的风险及对策——以亚威股份为例

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中小板上市公司并购中对赌协议的风险及对策——以亚威股份为例

作者：杜京颖天津财经大学

学位级别：硕士

近年来,中国经济飞速发展,经济结构改革不断深入,我国中小板上市公司并购重组日趋活跃,为更好的解决信息不对称下交易双方对目标企业的估值产生的矛盾,“对赌协议”在中小板上市公司的并购中应用越来越广泛,随之暴露的风险也相应增加,... 详细信息

近年来,中国经济飞速发展,经济结构改革不断深入,我国中小板上市公司并购重组日趋活跃,为更好的解决信息不对称下交易双方对目标企业的估值产生的矛盾,“对赌协议”在中小板上市公司的并购中应用越来越广泛,随之暴露的风险也相应增加,对赌协议的完成质量较低,大部分对赌协议在签订后要么没有履行相应的义务,要么被并购方的经营业绩没有达标给并购方带来经济损失,如何理性的在并购中运用对赌协议成为了亟待解决的问题。首先、本文采用文献研究法和案例研究法,在已有学术研究的基础上,结合案例企业并购运用对赌协议所暴露的前期调查未尽职、收购方乐观估计导致估值扭曲、标的公司管理层无心经营、疏忽并购后的整合工作、标的企业无法履约等问题。其次、总结出中小板上市公司并购运用对赌协议的风险主要为估值虚高风险、商誉减值风险、对赌期整合风险、管理层道德风险和诉讼风险。最后,根据上述风险,本文认为可以通过谨慎选择标的公司、注重并购前的战略规划;理性确定估值价格、避免收购方盲目乐观;做好事前尽职调查;对价分期支付;引入业绩激励机制;设定标准多样化的弹性对赌标准;完善监督评价机制;加强对标的公司的合理管控等方法从战略层面、对赌协议设计层面、监督管理层面有效的规避风险。本文的研究能够对在并购交易中引入对赌协议的中小板上市公司,如何理性、科学的运用对赌协议,规避风险,降低交易成本,保障对赌协议顺利履行等方面提供参考和建议,并且为中小板上市公司并购实践中运用对赌协议的相关研究进行补充。

关键词：中小板对赌协议并购交易风险控制

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小分子化合物对白血病的作用及机制研究

小分子化合物对白血病的作用及机制研究

作者：卢虹颖上海交通大学

学位级别：硕士

第一部分槲皮素对慢性髓性白血病细胞增殖、凋亡影响及其机制研究慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)是克隆性的髓系造血干细胞增殖性疾病,占成人白血病的15%。CML患者以9号染色体和22号染色体平衡易位形成t(9;22)染色体... 详细信息

第一部分槲皮素对慢性髓性白血病细胞增殖、凋亡影响及其机制研究慢性髓性白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)是克隆性的髓系造血干细胞增殖性疾病,占成人白血病的15%。CML患者以9号染色体和22号染色体平衡易位形成t(9;22)染色体,即费城染色体(Philadelphia,Ph)为特征。甲磺酸伊马替尼是首个被批准用于一线治疗CML的酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKIs),可以与BCR-ABL的ATP结合位点靶向结合,阻断BCRABL的磷酸化作用,抑制其酪氨酸激酶活性,从而抑制细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。自问世以来,显著地改善了CML患者的预后。然而,在接受伊马替尼治疗的CML-CP患者中,约有15%-25%的患者因对伊马替尼耐药或不耐受而导致治疗失败,且进展期的患者中伊马替尼耐药比例更高。根据ELN2013版指南推荐,伊马替尼治疗失败的患者可以换用二代TKIs或考虑异基因干细胞移植。然而,二代TKIs药物及异基因干细胞移植费用均非常昂贵,许多患者难以承受。因此,易获得且毒副作用低下的新治疗药物具有重要的临床意义。槲皮素(1,3,4,5,7-五羟基黄酮,Ouercetin)是类黄酮化合物的一种,广泛分布于自然界的各类植物中。有研究认为,槲皮素对黑素瘤、肺癌等表现出抗肿瘤的活性,其作用与多个信号通路相关。我们的前期研究已经证实槲皮素联合低浓度伊马替尼可以诱导K562细胞凋亡。本研究中,我们选用伊马替尼敏感及耐药的人红白血病细胞株K562、K562R、K562G,利用细胞计数检测槲皮素单药对伊马替尼敏感及耐药细胞株增殖抑制作用;利用Annexin V-PI双染实验通过流式细胞术检测槲皮素单药对伊马替尼敏感及耐药细胞株的诱导凋亡作用;利用流式细胞术检测槲皮素作用后细胞周期分布;利用瑞氏染色检测槲皮素单药对作用后不同时间点的细胞形态变化;利用蛋白印迹(Western blot)检测相关通路蛋白变化。结果显示,槲皮素单药对伊马替尼敏感及耐药细胞株具有时间依赖性的增殖抑制作用;槲皮素单药可以显著抑制伊马替尼敏感及耐药细胞增殖;Annexin V-PI双重染色结果提示,槲皮素处理伊马替尼敏感及耐药细胞48小时后,凋亡细胞百分比较对照组显著增加,提示槲皮素可以诱导伊马替尼耐药细胞株的凋亡。同时,蛋白免疫印迹结果显示,槲皮素可以诱导caspase-3剪切,且并不诱导BCR-ABL的表达水平及激酶活性改变。为了进一步探究槲皮素诱导凋亡的机制,我们检测了槲皮素作用48小时后细胞的周期分布,结果显示,三株细胞G2/M期细胞百分比均明显升高,,另外,蛋白免疫印迹检测γ-H2AX、JNK,发现两者表达水平均升高,证明槲皮素诱导细胞周期阻滞的作用与DNA双链损伤及JNK通路活化相关。结论:槲皮素对慢性髓性白血病耐药细胞株具有增殖抑制和诱导凋亡作用,且不依赖于BCR-ABL的表达改变。槲皮素通过诱导细胞周期阻滞引起细胞凋亡,此作用可能与JNK通路活化、DNA双链损伤相关。第二部分Xnd-4对急性早幼粒细胞白血病耐药细胞株的诱导分化作用及机制研究急性早幼粒细胞白血病(Acute promyelocytic leukemia,APL)是一种侵袭性较强的白血病,约占急性髓性白血病(Acute myeloid leukemia,AML)的10%。APL的细胞遗传学特征为t(15;17)染色体易位,使得15q22的PML基因与17q21的RARα基因融合产生PML-RARα基因,从而编码PML-RARα融合癌蛋白。形成PML-RARα蛋白后,PML及RARα的功能被显性负干扰,PML的促分化、凋亡、抑制增殖的功能受抑制,RARα的信号转导过程被干扰,从而使粒系分化受阻,早幼粒细胞大量堆积,促使APL的发生。药理浓度(0.1～1μM)的ATRA可以通过蛋白酶体途径、自噬途径等诱导PML-RARα融合蛋白的降解,恢复PML的核定位,解除RARα的转录抑制,诱导早幼粒细胞分化,从而达到治疗APL的目的。目前,以全反式维甲酸(ATRA)为基础,联合蒽环类药物、亚砷酸或阿糖胞苷类药物的诱导疗法可以使患者的初治完全缓解(CR)率达到80%～90%。然而,ATRA的耐药问题也日益突出。据文献报道,约20～30%的原发性APL患者会产生ATRA耐药,在CR后3～6个月复发,复发后疗效较差,再次CR后三年生存率仅为50%左右。因此,寻找新的治疗药物,以克服APL患者对ATRA耐药具有重要的临床意义。黑种草(Nigella glandulifera Freyn)是毛莨科(Ranunculacease)黑种草属(Nigella)植物,是我国新疆维吾尔族的传统药材。近年来,有研究者运用现代医学的方法对黑种草的药理作用

关键词：伊马替尼耐药槲皮素慢性髓性白血病周期阻滞

基于微波光子的干涉型光纤水听器臂长差测量技术研究

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基于微波光子的干涉型光纤水听器臂长差测量技术研究

作者：杨钊颖北京邮电大学

学位级别：硕士

光纤水听器作为关键的声学测量仪器,具备声压灵敏度高和抗电磁干扰能力强的特性,为声呐系统提供了更加可靠的技术保障。干涉型光纤水听器作为一种水声光纤传感器,其臂差的确定关系着传感器在系统测量中的精确性。而目前针对光纤水听器... 详细信息

光纤水听器作为关键的声学测量仪器,具备声压灵敏度高和抗电磁干扰能力强的特性,为声呐系统提供了更加可靠的技术保障。干涉型光纤水听器作为一种水声光纤传感器,其臂差的确定关系着传感器在系统测量中的精确性。而目前针对光纤水听器臂长差的测量还没有更为便捷的方法,因此降低臂长差测量难度及成本具有重要意义。论文基于微波光子学的思想,提出并设计实现了一种干涉型光纤水听器臂长差测量系统,该系统适用于以Michelson型和Mach-Zehnder型干涉仪为基本结构的光纤水听器,同时能够自适应具有不同反射率的光纤水听器,依据光载射频信号在耦合器中发生光的干涉现象并通过数据处理来提取臂长差信息。论文针对系统中各功能模块如光发射模块、射频合成模块、光电探测模块、功率检波模块和控制模块等进行了相关功能和电路设计,并集成于一块电路板上完成臂长差测量系统的搭建。在数据处理上不仅通过提高硬件的指标来提高精度,同时利用已有测量数据通过插值法和粒子群优化算法提高数据测量精度,简化了臂长差实际测量过程、降低了测试系统成本。论文对提出的光纤水听器臂长差测量系统进行了性能测试,各模块性能均满足系统要求且系统在61～700MHz范围内响应平坦。最终利用测量系统对Michelson型光纤水听器进行臂长差测量,测量数据经过处理后臂长差数值达到6位有效数字,测量精度达到了μm量级。

关键词：光纤水听器微波光子学臂长差测量粒子群优化算法

互联网旅游公司消费金融产品研究 ——以L公司先游后付产品为例

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互联网旅游公司消费金融产品研究 ——以L公司先游后付产品为例

作者：方倩颖上海财经大学

学位级别：硕士

自从我国开始步入新时代以来,随着我国市场经济和信息科技的迅猛发展,人民对旅游的需求也日渐增长,与此同时,当前全球旅游经济的发展和增速整体亦是远远超过了全球经济的平均增长率,使得旅游行业逐步发展壮大,并成为了新时期全球最重要... 详细信息

自从我国开始步入新时代以来,随着我国市场经济和信息科技的迅猛发展,人民对旅游的需求也日渐增长,与此同时,当前全球旅游经济的发展和增速整体亦是远远超过了全球经济的平均增长率,使得旅游行业逐步发展壮大,并成为了新时期全球最重要的新兴产业。随着科学技术的飞速发展,国内的在线旅游交易市场业务成交规模不断增加,移动在线旅游用户和在线旅游交易额快速增长,这为金融业嵌入旅游市场提供了丰富的场景。各大银行类、非银类金融公司都积极参与构建旅游金融服务体系,根据旅游项目的风险和经营情况创新出的旅游消费金融产品也是层出不穷。在步入新时代后,国家采取各项新的政策来大力发展旅游业和金融业,在这一大发展背景下,各大互联网旅游平台都积极与金融机构对接,想通过发展互联网金融业务,来丰富旅游平台业务,构建一个能提供金融服务的新型综合旅游平台,为游客提供方便快捷综合旅游金融服务。同时随着我国市场化进程的不断推进,互联网旅游公司与金融公司的不断深入融合发展,部分商业银行、消费金融公司均聚焦于旅游消费金融行业,并相继推出各类旅游消费金融产品。本文以金融创新理论、消费金融理论、产品融合理论作为理论基础,分析了国内互联网旅游平台消费金融的发展背景、优势、模式及存在的问题。据悉互联网旅游平台在发展消费金融业务方面具有天然优势,其新进的技术、丰富的场景能普惠到各类人群,更好的满足人民群众的金融需求,也是消费金融领域的一大创新点。但是目前我国互联网旅游平台消费分期存在着产品单一,发展不充分,风险控制能力弱、场景融合度不高等问题。通过对L公司“先游后付”产品的设计背景、产品形态、运营情况、风险控制、存在问题及意见建议的研究,具体的案例来切入,来揭示了当下互联网平台消费金融产品的发展情况,是响应国家的旅游+发展战略,更好的研究产融结合相关问,希望能为其他的互联网旅游平台提供相关借鉴建议,创新出更符合当下客户消费习惯的旅游消费金融产品,并且让产品能更好的服务目标客户。互联网旅游平台通过多年的发展积累了大量的客户旅游数据,这些数据在场景化旅游金融产品设计过程中能发挥巨大作用,借助于当下比较先进的人工智能、智能风控等新技术,在做旅游消费分期产品的时候要更结合场景,拓宽风控维度,建立以大数据为基础的多维度风险控制模型。同时应重点关注旅游消费金融产品的研发需求,力求设计出贴合客户需求、顺应时代发展的新型旅游消费金融产品,建立一揽子多元化的旅游金融产品体系,并明确好未来旅游金融市场的发展方向,以此来面对激烈的市场竞争,寻求更好的发展。

关键词：互联网旅游平台消费金融旅游消费金融先游后付风险控制

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5E教学模式在中职《涉税会计》的应用研究

5E教学模式在中职《涉税会计》的应用研究

作者：胡冬颖广东技术师范大学

学位级别：硕士

由于数字化、大智移云的到来,简单的“为会计准则而学,为会计规范而做”的会计教学,已经不能满足会计人才培养的需要,特别是广东制造业已经迈向高质量发展,更加要求学生迎合现代经济发展的势态,帮助企业解决会计业务中技术问题。把5E教... 详细信息

由于数字化、大智移云的到来,简单的“为会计准则而学,为会计规范而做”的会计教学,已经不能满足会计人才培养的需要,特别是广东制造业已经迈向高质量发展,更加要求学生迎合现代经济发展的势态,帮助企业解决会计业务中技术问题。把5E教学模式设计与应用于会计专业的《涉税会计》课程中,以期促进学生的多方面发展,特别是现代经济要求的、会计教学标准人才规格中明确的创新精神、思维能力的培养。尝试运用5E教学模式在中职会计专业的《涉税会计》课程中,无疑是会计人才培养中的一个重大突破,也更加符合现代人才培养的规格。首先,通过对文献的查找与梳理,发现采用5E教学模式能够优化现存教学,并且发现虽说中职会计类专业一直想要培养具有自我发展能力的人才,但在教育的实质上未做出应有的改变。其次,由于5E教学模式与我们会计人才培养的要求具有高度一致,加上这种模式具有一定的灵活性与适切性,能够根据教师教学的需要进行相应调整,因而尝试采用新生崛起5E教学模式,对《涉税会计》这门课程围绕“吸引”、“探究”、“解释”、“迁移”、“评价”5个环节展开设计并应用,并且加入“线上+线下”的元素,基于学习通平台满足教学多样化与现代化的需要。最后,采用问卷调查法与实验研究法,通过对比实验班与对照实验前后的成绩的变化,可以发现实验班成绩比对照班成绩略高一点,这可能是5E教学模式更能激发学生进行深度学习,对知识的理解与应用得更好一些。在实施5E教学模式后,中职学生在学习兴趣、学习态度都有所转变,学习过程区别于之前。在实施5E教学模式后,学生的专业能力、方法能力、社会能力都有一定的提高。因此,由实验的结果得出以下启示:5E教学模式有利于培养全面发展的学生;5E教学模式可以培养学生对知识深耕的精神;5E教学模式有助于中职会计专业学生树立学习信心,发挥学生的潜能。但由于课程与教育实验规模局限,在未来的教育实验与研究中,可以加大教育实验的规模,并且丰富课程的类型。

关键词： 5E教学模式混合式教学涉税会计中等职业学校

AAV9介导hIGF-1基因过表达对mdx小鼠的影响

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AAV9介导hIGF-1基因过表达对mdx小鼠的影响

作者：崔红颖河北医科大学

学位级别：硕士

目的:杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是肌营养不良性肌病中最严重的一种,是一种X连锁隐形遗传病,发病率最高,约为1/3500男婴。主要为编码dystrophin蛋白的基因发生突变,dystrophin蛋白生成缺陷,致使细胞膜结构不稳定... 详细信息

目的:杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是肌营养不良性肌病中最严重的一种,是一种X连锁隐形遗传病,发病率最高,约为1/3500男婴。主要为编码dystrophin蛋白的基因发生突变,dystrophin蛋白生成缺陷,致使细胞膜结构不稳定,在外部机械力的作用下极易发生损伤,导致肌细胞坏死,伴随炎症细胞的浸润吞噬坏死细胞过程,而肌肉本身的再生修复能力不足以弥补其坏死的程度,纤维结缔组织和脂肪组织便随后替代坏死的区域。DMD的病人肌肉损伤持续性进展,无力逐渐加重,通常于20岁左右死于呼吸、循环衰竭。对于此病,目前尚无有效的治疗办法。Mdx小鼠是研究DMD的一种经典的模型鼠。此种小鼠表现为高CK血症及和人类肌营养不良相似的肌肉病理情况。对于mdx小鼠的治疗,有各种各样的方法。目前,利用载体将正常的dystrophin基因导入生物体内或修复其突变成为一大热点,但dystrophin基因过于庞大,成为这一方法的一大阻碍。近年来,很多人将目光放在肌营养不良肌病的各种症状上,利用各种生长因子,通过不同的信号途径促进肌细胞的再生,从而改善肌病的状况。胰岛素样生长因子-1(Insulin like growth factor-1,IGF-1)已成为治疗DMD的一个重要备选方向。IGF-1也被称作"促生长因子"(即somatomedin C),是一种在分子结构上与胰岛素类似的多肽蛋白物质。IGF-1在婴儿的生长和在成人体内持续进行合成代谢作用上具有重要意义。它是人体内肝细胞、肾细胞、脾细胞等十几种细胞自分泌和旁分泌的产物。具有降血糖、降血脂、舒张血管等作用,同时还是人体内非常重要的细胞有丝分裂促进剂,其对维持与细胞分化有关的蛋白质水平十分重要,与一些生长因子合用能促进细胞分化成熟。目前关于IGF-1对于mdx小鼠的研究,主要为两方面:一是mdx/m IGF-1转基因小鼠的观察,另一个是IGF-1蛋白对mdx小鼠的作用的研究。两种方法虽然均有效果,但第一种不适宜向临床推广,第二种在蛋白入血后有较多副作用,且需长期持续给药,操作费时费力。在本实验中,我们以腺相关病毒血清型9(Adeno-associated virus serotype 9,AAV9)为载体携带人胰岛素样生长因子-1(human insulin like growth factor-1,hIGF-1)hIGF-1基因,首先局部注射入胫前肌,观察此种方法的具体作用,其次经尾静脉注射入小鼠全身,观察是否可在全身的骨骼肌中发挥作用。方法:我们的实验分为两个阶段:首先是局部注射的方法,将病毒直接注射入小鼠右侧胫前肌,一定时间后观察;其次是通过尾静脉注射入病毒,一定时间后观察。1通过局部注射的方法观察以AAV9为载体携带hIGF-1基因是否对mdx小鼠肌肉产生作用选取4周龄、体重相近的雄性mdx小鼠8只,分为2组。4只于右侧胫前肌注射AAV9携带的绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)基因(20μl/只1×10 vg/m L),分2点注射,每点约注射10μl,4只于右侧胫前肌注射AAV9-hIGF-1(20μl/只1×10 vg/m L),同样分2点注射,每点约注射10μl。另选取4只4周龄、体重相近的雄性C57BL/10小鼠作为对照。8周后(即小鼠12周龄时)将小鼠麻醉后在右侧胫前肌进行肌力测试,随后摘眼球取血,留取血清样本测CK值,最后完整分离右侧胫前肌称重,并包埋,进行冰冻切片的处理,以及各种指标的检测。2通过尾静脉注射的方法观察以AAV9为载体携带hIGF-1基因是否对mdx小鼠全身骨骼肌产生作用选取6周龄、体重相近的雄性mdx小鼠6只,分为2组。3只经尾静脉注射AAV9-GFP(200μl/只1×10 vg/ml),3只经尾静脉注射AAV9-hIGF-1(20μl/只1×10 vg/ml)。另选取3只4周龄、体重相近的雄性C57BL/10小鼠3只作为对照。6周后(即小鼠12周龄时)将9只小鼠麻醉后取材,进行同样的评估。另同时分离两侧股四头肌、腓肠肌、肱三头肌,右侧所有肌肉包埋,进行冰冻切片的处理,随后进行各种指标的检测。应用spss13.0系统对数据进行分析。结果:1局部胫前肌注射AAV9介导hIGF-1基因过表达改善了mdx小鼠的肌肉病理及肌肉功能1.1 mdx小鼠经局部胫前肌注射AAV9-GFP后,观察到其肌肉组织中有绿色荧光蛋白的表达。验证了在本实验室条件下AAV9可以成功的转染肌细胞并表达所携带的基因;1.2免疫荧光结果表明与C57BL/10组、GFP组相比,只有hIGF-1组小鼠胫前肌中表达hIGF-1;1.3 hIGF-1组、GFP组、C57BL/10组右侧胫前肌重量比较,hIGF-1组最大

关键词： DMD AAV9 HIGF-1 Mdx小鼠肌肉病理肌力

理筋手法干预兔骨骼肌损伤修复中炎症及细胞凋亡的作用机制

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中国组织工程研究 2025年第20期29卷 4215-4222页

作者：李开颖魏晓歌宋斐赵振宁杨楠李泓钰赵丽丽王燕穆静马惠昇宁夏医科大学中医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004

背景:骨骼肌细胞的过度凋亡将破坏肌细胞数量的动态平衡,导致骨骼肌病理性损伤。理筋手法治疗骨骼肌损伤疗效确切,但是否能抑制细胞凋亡从而促进损伤骨骼肌的修复尚未可知。目的:探究理筋手法对兔骨骼肌损伤修复过程中减少炎症和细胞凋... 详细信息

背景:骨骼肌细胞的过度凋亡将破坏肌细胞数量的动态平衡,导致骨骼肌病理性损伤。理筋手法治疗骨骼肌损伤疗效确切,但是否能抑制细胞凋亡从而促进损伤骨骼肌的修复尚未可知。目的:探究理筋手法对兔骨骼肌损伤修复过程中减少炎症和细胞凋亡的作用机制。方法:选用45只成年健康日本大耳兔,随机分为空白组、模型组和理筋组。其中空白组不做处理,模型组和理筋组均造成腓肠肌损伤模型;造模后模型组不予治疗,理筋组于第3天开始对损伤腓肠肌进行理筋手法操作,1次/d,15 min/次。各组兔分别于造模后的第7,14,21天取材,苏木精-伊红染色观察腓肠肌一般形态,透射电镜观察腓肠肌超微结构,TUNEL染色观察腓肠肌细胞凋亡情况,ELISA检测腓肠肌白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10的表达,Western blot检测腓肠肌BAX、BCL-2、Caspase3的蛋白表达,RT-PCR检测BAX、BCL-2 mRNA的表达。结果与结论:(1)苏木精-伊红染色结果显示:与模型组比较,各观察点理筋组炎性细胞减少、肌细胞数量增多、肌组织逐渐愈合;(2)透射电镜结果显示:与模型组比较,各观察点理筋组肌纤维排列逐渐整齐、线粒体逐渐完整、Z线排列逐渐趋于规则,游离核糖体聚集;(3)TUNEL染色结果显示:与模型组比较,各观察点理筋组细胞凋亡率逐渐降低(P <0.05);(4)ELISA结果显示,与模型组比较,理筋组白细胞介素1β、白细胞介素6表达持续降低(P <0.05),而白细胞介素10在造模后第7天时升高,随后呈下降趋势(P <0.05);(5)Western blot结果显示:理筋组各观察点BCL-2/BAX蛋白的表达相较于模型组显著升高(P <0.05);Caspase3的蛋白表达均显著降低(P <0.001),且逐渐与空白组相近;(6)RT-PCR结果显示:理筋组各观察点BCL-2/BAX mRNA的表达较模型组均显著升高(P <0.05);(7)结果说明:理筋手法能够抑制炎症、减少细胞凋亡,促进损伤骨骼肌的修复。

关键词：理筋筋伤骨骼肌修复炎症细胞凋亡

青蒿琥酯通过NKG2C/HLA-E增加K562细胞对NK细胞的杀伤敏感性

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青蒿琥酯通过NKG2C/HLA-E增加K562细胞对NK细胞的杀伤敏感性

作者：马欣颖济宁医学院

学位级别：硕士

目的:近些年来,对白血病发病机制的深入研究,目前免疫疗法的应用成为其重要治疗手段,在消除微小残留灶、减少复发以及耐药性等方面效果更显著。因免疫治疗不与放化疗产生重叠的毒副作用,缺乏长期毒性的有点,为白血病治疗提供了新的途径... 详细信息

目的:近些年来,对白血病发病机制的深入研究,目前免疫疗法的应用成为其重要治疗手段,在消除微小残留灶、减少复发以及耐药性等方面效果更显著。因免疫治疗不与放化疗产生重叠的毒副作用,缺乏长期毒性的有点,为白血病治疗提供了新的途径。NK细胞作为免疫环境中的第一道杀伤防线,具有广泛的抗肿瘤作用。NK细胞的功能和数量的减弱与恶性肿瘤的发展相关,因此增强NK细胞的抗肿瘤杀伤作用是目前研究的热点。青蒿琥酯作为一种高效且低毒的抗疟疾药物,是由青蒿素衍生而来,具有良好水溶性的一种半琥珀酸酯。随着近年来的一些研究发现青蒿琥酯具有抗肿瘤活性,本研究以此为依据,研究青蒿琥酯对NK细胞杀伤白血病细胞活性的影响及其机制探究。方法:采集健康志愿者的外周血,分离出外周血单个核细胞(PBMCs),通过磁珠分选筛选CD56+CD3-的NK细胞在体外大量扩增,在RPMI培养基中以1.5×10/ml的密度培养,14d后通过流式细胞术鉴定NK细胞纯度。分别以0、1.0、1.2?mol/L不同浓度的青蒿琥酯预处理K562细胞株48h,与NK细胞按不同效靶比5:1、10:1、20:1共培养,并设置未经青蒿琥酯预处理K562细胞为对照组,采用流式细胞术检测靶细胞的凋亡率。用青蒿琥酯预处理NK细胞48h,然后与K562靶细胞以5:1、10:1、20:1的不同比例进行共培养,并用流式细胞仪检测靶细胞凋亡比例。用流式细胞术测定青蒿琥酯预处理前后白血病细胞表面的NKG2C配体HLA-E与NKG2D配体MICA/MICB,测定二者的平均荧光强度(MFI)。结果:与阴性对照组相比,青蒿琥酯对K562细胞及NK细胞均无明显毒性作用(P>0.05)。与药物未处理组相比,青蒿琥酯预处理NK细胞后,NK细胞的杀伤活性未受到影响(P>0.05)。与药物未处理组相比,青蒿琥酯预处理白血病细胞株K562可明显增强NK细胞的杀伤作用(P<0.05),同时青蒿琥酯可明显上调K562细胞表面NKG2C配体HLA-E的表达(P<0.05)。而对NKG2D配体MICA/MICB则无影响。结论:青蒿琥酯可有效提高K562细胞对NK细胞的杀伤敏感性,其机制可能与青蒿琥酯上调K562细胞表面的NKG2C配体HLA-E有关,这一发现提示青蒿琥酯可能有助于增强NK细胞对白血病的疗效,为青蒿琥酯作为潜在的NK细胞抗髓系白血病的增效药物提供了实验依据。

关键词：青蒿琥酯白血病 NK细胞 NKG2C配体