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浅析翻译控制肿瘤蛋白生理功能的研究近况

中外女性健康研究 2015年第6期 31-31,26页

作者：符瑞佳海南医学院热带医学与检验医学院 571101

翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）为肿瘤研究常涉及的一类高表达类蛋白质，又称P21、P23、Q23、组胺释放因子和Fortilin，同源性、保守性都很高，广泛存在于真核生物中。此类蛋白具有逆转肿瘤、调节细胞分化增殖、参与应急反应、对抗细胞凋亡... 详细信息

翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）为肿瘤研究常涉及的一类高表达类蛋白质，又称P21、P23、Q23、组胺释放因子和Fortilin，同源性、保守性都很高，广泛存在于真核生物中。此类蛋白具有逆转肿瘤、调节细胞分化增殖、参与应急反应、对抗细胞凋亡、抑制炎症反应的功能，还与糖尿病、真菌感染、寄生虫病的产生发展相关。本文结合近年来国内外关于翻译控制肿瘤蛋白功能的研究报道资料，对TCTP功能的研究进行了综述。

关键词：翻译控制肿瘤蛋白生理功能肿瘤进展

曼氏迭宫绦虫异柠檬酸脱氢酶的基因克隆、蛋白表达及其在裂头蚴阶段的转录水平检测分析

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中国病原生物学杂志 2022年第9期17卷 1030-1034页

作者：梁鹏张园元符瑞佳王大勇梁培海南医学院热带病转化医学教育部重点实验室海南海口571199 广州金域医学检验中心海南大学生命科学与药学院生物技术与分子药理学实验室

目的利用生物信息学方法识别和分析曼氏迭宫绦虫异柠檬酸脱氢酶(SmNAD-IDH)核苷酸序列及生物学特征;克隆该基因并诱导蛋白表达,分析其在裂头蚴阶段的转录水平。方法利用生物信息学在线分析工具对SmNAD-IDH基因的核苷酸序列进行识别,预... 详细信息

目的利用生物信息学方法识别和分析曼氏迭宫绦虫异柠檬酸脱氢酶(SmNAD-IDH)核苷酸序列及生物学特征;克隆该基因并诱导蛋白表达,分析其在裂头蚴阶段的转录水平。方法利用生物信息学在线分析工具对SmNAD-IDH基因的核苷酸序列进行识别,预测分析氨基酸序列的理化性质。分别以曼氏迭宫绦虫裂头蚴cDNA、孕节cDNA和成节cDNA作为模板PCR扩增目的基因,扩增产物与表达载体pET-30a重组后转化至BL21细胞中诱导蛋白表达。利用real time PCR技术分析裂头蚴阶段三羧酸循环中3个关键代谢酶的转录水平。结果BLASTx分析SmNAD-IDH基因全长1095 bp,编码蛋白由356个氨基酸组成。该基因与其他寄生虫同源基因核苷酸序列一致性>70%,与人类同源基因核苷酸序列一致性为51%。该蛋白的理论等电点为6.84,分子质量为40 ku,并且氨基酸序列中无信号肽和跨膜区,为脂溶性稳定的胞内蛋白。SmNAD-IDH在裂头蚴、成节、孕节中均有表达,在裂头蚴阶段三羧酸循环中的关键酶柠檬酸合成酶、酮戊二酸脱氢酶、SmNAD-IDH均有转录,以SmNAD-IDH的转录水平较高。结论成功重组SmNAD-IDH基因并诱导SmNAD-IDH蛋白表达,该蛋白对于曼氏迭宫绦虫,尤其是裂头蚴,是具有潜在研究价值的重要代谢酶。

关键词：曼氏迭宫绦虫 SmNAD-IDH 基因克隆蛋白表达转录水平

曼氏迭宫绦虫钙/钙调素依赖蛋白激酶I(SmCaMK I)基因的生物信息学分析与表达鉴定

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中国人兽共患病学报 2016年第12期32卷 1044-1050,1057页

作者：李奕基陈新新符瑞佳陈小静吕刚梁培海南医学院热带病转化医学教育部重点实验室海口571199 海南医学院热带医学与检验医学院海口571199 海南大学农学院海口570228

目的开展SmCaMK I(曼氏迭宫绦虫钙/钙调素依赖蛋白激酶I)的潜在生物学特征分析和功能研究。方法利用相关网站和软件对SmCaMK I的同源性核苷酸序列比对分析、保守位点预测、构建分子进化树、编码氨基酸的淋巴细胞表位进行分析预测。此外,... 详细信息

目的开展SmCaMK I(曼氏迭宫绦虫钙/钙调素依赖蛋白激酶I)的潜在生物学特征分析和功能研究。方法利用相关网站和软件对SmCaMK I的同源性核苷酸序列比对分析、保守位点预测、构建分子进化树、编码氨基酸的淋巴细胞表位进行分析预测。此外,SmCaMK I进行扩增,并克隆到表达载体pET-28α(+)中进行蛋白的表达纯化,制备大鼠免疫血清进行虫体免疫组织定位分析。结果 SmCaMK I是一个全长基因,由1 068bp组成,编码355个氨基酸。SmCaMK I与细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫的CaMK I保守功能域的氨基酸序列一致性分别为89%和88%,与人的CaMK I氨基酸序列一致性仅仅只有44%。分子进化树分析中SmCaMK I与绦虫属的亲缘关系最近,与其他物种亲缘性较远。与人类CaMK I相比,淋巴细胞表位具有统计学差异。SmCaMK I能够定位在成虫的睾丸和虫卵,在裂头蚴中大量表达和特异定位于体表。结论SmCaMK I是参与虫体生长发育繁殖的重要蛋白分子,还可能是一个潜在的疫苗靶标蛋白。

关键词：曼氏迭宫绦虫 SmCaMK I 生物信息学分析原核表达免疫组织化学定位

人芽囊原虫在不同培养基及条件下的培养效果观察

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中国病原生物学杂志 2013年第4期8卷 336-338+349页

作者：伍玲园唐莉莉符瑞佳何姗姗卢作超刘登宇广西医科大学寄生虫教研室海南医学院热带医学与检验教研室

目的观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis,Bh)在IMDM、RPMI1640以及传统的洛克氏液-鸡蛋-血清(LES)培养基中的生长情况,应用正交试验筛选人芽囊原虫的最适培养基及培养条件。方法将门诊病人Bh阳性粪便标本调匀后作虫体计数,分别接种于I... 详细信息

目的观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis,Bh)在IMDM、RPMI1640以及传统的洛克氏液-鸡蛋-血清(LES)培养基中的生长情况,应用正交试验筛选人芽囊原虫的最适培养基及培养条件。方法将门诊病人Bh阳性粪便标本调匀后作虫体计数,分别接种于IMDM、RPMI1640及LES培养基进行培养,以正交试验分析培养基、血清浓度、pH值和接种虫体数4个因素对Bh体外培养效果的影响,以首次达虫体数量高峰时间、虫密度平均峰值、虫密度平均值的综合评分值K为指标,考核虫株的综合培养效果。结果对正交试验结果进行极差及方差分析,各因素对Bh培养效果的影响为:培养基>血清浓度>pH值>接种量。经SSR检验,IMDM、RPMI 1640及LES 3种培养基对Bh的培养效果差异有统计学意义(P0.05)。培养基中加入血清0.5、1、1.5ml时培养效果差异有统计学意义(P0.05)。结论含血清0.5ml、pH 7.5～8.0的IMDM单相培养基适宜Bh生长繁殖,可用于Bh体外长期培养。

关键词：人芽囊原虫体外培养正交试验

反向斑点杂交技术检测HBV基因型方法的评价

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检验医学 2010年第12期25卷 947-951页

作者：张韧王敏符瑞佳李娟陈建平何蕴韶广州中医药大学微生物与寄生虫教研室广东广州510006 广州市荔湾区疾病预防控制中心广东广州510176 中山大学达安基因诊断中心广东广州510080

目的评价用于检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型的反向斑点杂交(RDB)方法。方法应用RDB检测723例HBV阳性标本的HBV基因型。其中对423例HBV序列测序结果清晰可读的样本进一步使用NCBI在线数据库分析、系统进化法分析其HBV基因型,并与RDB法结... 详细信息

目的评价用于检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型的反向斑点杂交(RDB)方法。方法应用RDB检测723例HBV阳性标本的HBV基因型。其中对423例HBV序列测序结果清晰可读的样本进一步使用NCBI在线数据库分析、系统进化法分析其HBV基因型,并与RDB法结果进行比较。将样本HBV序列与所用的探针序列进行比对,以评价单个碱基突变对该方法的影响。结果 RDB法检测的检出率为97.6%。RDB检测结果与NCBI在线数据库分析法的一致性为98.8%;与系统进化分析法一致性为100%。与对应探针有1个碱基差异的HBV A型1例、B型12例、C型46例和D型1例均被成功检出。结论 RDB是一种灵敏、准确、有效,且具有很高临床应用价值的HBV基因型检测方法。单碱基的突变不会影响其对HBV的分型结果。

关键词：乙型肝炎病毒基因型反向斑点杂交

海南省类鼻疽病151例流行病学特征及其病原菌耐药性

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中国热带医学 2023年第6期23卷 568-574页

作者：曾增罗晓曼符瑞佳张楠陈林陈少文林翀符生苗海南医学院附属海南医院医学检验中心海南海口570311 海南医学院第二附属医院检验科海南海口570216 海南医学院海南海口571199

目的分析海南省151例类鼻疽病例的流行病学特征及类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)耐药性情况,为类鼻疽病的诊断治疗以及合理预防提供依据。方法收集海南医学院第二附属医院2013年1月1日—2022年8月31日门诊就诊和住院... 详细信息

目的分析海南省151例类鼻疽病例的流行病学特征及类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)耐药性情况,为类鼻疽病的诊断治疗以及合理预防提供依据。方法收集海南医学院第二附属医院2013年1月1日—2022年8月31日门诊就诊和住院151患者和送检标本分离及鉴定的BP株类鼻疽病例的临床资料及其病原菌的耐药特性,并采用SPSS26.0软件进行统计学分析。结果151例BP感染患者中,男性138例(91.4%),女性13例(8.6%),45~<60岁患者最多,共74例(49.0%);类鼻疽病发病时间集中于10月(19.2%)、11月(19.2%)、8月(9.9%)、7月(8.6%),确诊人数呈上升趋势且确诊时间均<10 d。来自内科(31.1%)、外科(26.5%)和重症医学科(20.5%)是收治类鼻疽病常见的科室。血液(49.0%)、痰液(9.9%)、伤口分泌物(8.6%)是检出BP的主要临床标本。BP感染患者以肺部感染(68.2%)、脓毒血症(35.1%)、局部化脓性感染(23.8%)位居临床表现的前列。类鼻疽病治疗有效率为74.8%,肝功能异常是影响类鼻疽病疗效的危险因素(χ^(2)=5.010,P<0.05),BP菌株对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑(SXT)、多西环素(DOX)、亚胺培南(IPM)、头孢他啶(CAZ)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)和四环素(TCY)的敏感率分别为98.7%、97.2%、96.7%、94.0%、93.2%和90.7%。结论类鼻疽病容易造成误诊或漏诊,应加强本地区类鼻疽病流行性特征和危险因素的认识;BP对常用抗菌药物的敏感性呈现一定水平的下滑趋势,临床应规范用药并加强耐药性的监测,以提高类鼻疽病治疗的有效率。

关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌类鼻疽病肝功能异常耐药性

曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的真核表达、虫体组织和亚细胞定位及免疫保护效果评价

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中国病原生物学杂志 2017年第7期12卷 647-650,653页

作者：梁培尹飞飞夏乾峰范志刚吕刚符瑞佳海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571199

目的了解曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白(SmTCTP)的虫体组织定位,并以Vero细胞为代替模型观察其亚细胞定位,观察重组抗原在曼氏裂头蚴感染的小鼠中的免疫保护效果。方法构建pEGF-N1-SmTCTP真核表达质粒并转染Vero细胞,利用激光共聚焦荧... 详细信息

目的了解曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白(SmTCTP)的虫体组织定位,并以Vero细胞为代替模型观察其亚细胞定位,观察重组抗原在曼氏裂头蚴感染的小鼠中的免疫保护效果。方法构建pEGF-N1-SmTCTP真核表达质粒并转染Vero细胞,利用激光共聚焦荧光显微镜观察SmTCTP重组蛋白在Vero细胞中的分布及亚细胞定位;采用免疫组化法观察SmTCTP在曼氏迭宫绦虫成虫组织中的分布。利用重组抗原做动物免疫保护试验,免疫组小鼠注射重组SmTCTP与等体积完全佐剂混合物,空质粒对照组小鼠注射同重组SmTCTP蛋白等量的GST蛋白与等体积完全佐剂混合物,PBS对照组注射相同体积的PBS溶液。每组动物均免疫3次,采用腹腔内部注射,每次免疫注射量为100μl/只,抗原剂量为50μg/只。第3次免疫后的第2周,所有小鼠均经灌胃感染曼氏裂头蚴5条/只,感染后第6周处死并解剖,收集曼氏裂头蚴并计数,计算曼氏裂头蚴的减虫率。结果双酶切和DNA测序鉴定真核表达重组质粒pEGFN1-SmTCTP构建成功,激光共聚焦观察细胞质与细胞核中均有重组SmTCTP分布,但主要分布在细胞核;免疫组化检测SmTCTP主要分布于曼氏迭宫绦虫成虫的子宫、睾丸和卵黄腺处。动物实验显示,攻虫感染6周的重组质粒SmTCTP免疫小鼠检虫数为(1.00±0.816)条,空质粒组为(2.60±0.966)条,PBS对照组为(3.00±0.738)条,且重组SmTCTP免疫小鼠减虫率为66.7%。结论成功构建pEGF-N1-SmTCTP重组质粒,并在Vero细胞中获得了表达。SmTCTP主要定位于曼氏迭宫绦虫成虫的生殖系统,其引发的信号传递可能对曼氏迭宫绦虫生殖系统的发育和功能起调控作用。重组蛋白SmTCTP可诱导小鼠产生抗曼氏迭宫绦虫裂头蚴的免疫保护作用。

关键词：曼氏迭宫绦虫翻译控制肿瘤蛋白真核表达亚细胞定位组织定位免疫保护性

人芽囊原虫感染小鼠肠黏膜IL-17和IL-23的表达及意义

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第6期24卷 676-680,I0002页

作者：伍玲园符瑞佳卢作超唐莉莉张璠刘登宇广西医科大学人体寄生虫学教研室南宁530021 海南医学院广西医科大学基础医学院

目的观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis)感染小鼠肠道组织中白细胞介素17(IL-17)和IL-23的表达情况。方法30只BABL/c小鼠随机分为实验组、免疫抑制剂组和对照组,实验组和免疫抑制剂组小鼠腹腔注射地塞米松2 mg/只,日1次,连续5 d;对... 详细信息

目的观察人芽囊原虫(Blastocystis hominis)感染小鼠肠道组织中白细胞介素17(IL-17)和IL-23的表达情况。方法30只BABL/c小鼠随机分为实验组、免疫抑制剂组和对照组,实验组和免疫抑制剂组小鼠腹腔注射地塞米松2 mg/只,日1次,连续5 d;对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.2 ml/只。实验组每鼠经口感染107个人芽囊原虫,免疫抑制组和对照组每鼠经口灌服0.5 ml生理盐水。感染人芽囊原虫5 d后,剖杀小鼠,分别取十二指肠、空肠、回肠和结肠制作成组织切片,HE染色检查小鼠肠黏膜病变,免疫组化法检测各肠黏膜中IL-17和IL-23的表达水平。结果HE染色显示,肠道黏膜有不同程度炎症改变。IL-17和IL-23在实验组小鼠不同肠黏膜中的表达均显著高于免疫抑制剂组和对照组(P0.05)。IL-17在实验组小鼠十二指肠、空肠、结肠黏膜中的表达水平均显著高于回肠黏膜(P<0.05),IL-23在实验组小鼠十二指肠、空肠黏膜中的表达水平显著高于回肠和结肠黏膜(P<0.05)。结论IL-17和IL-23参与人芽囊原虫感染的免疫反应,且IL-17与IL-23在人芽囊原虫感染的免疫应答过程中有一定的相互调节作用。

关键词：人芽囊原虫白介素17 白介素23 肠黏膜小鼠

细粒棘球绦虫14-3-3zeta蛋白的生物信息学分析

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分子诊断与治疗杂志 2015年第3期7卷 151-155,175页

作者：符瑞佳吕刚尹飞飞梁培海南医学院热带医学与检验医学院海南海口571101

目的应用生物信息学技术对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)14-3-3zeta蛋白的结构和功能进行预测和分析,为进一步的实验研究提供依据。方法利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://***/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家... 详细信息

目的应用生物信息学技术对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)14-3-3zeta蛋白的结构和功能进行预测和分析,为进一步的实验研究提供依据。方法利用美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://***/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://***/)提供的各种有关基因和蛋白序列、结构信息分析的工具,并结合其它生物信息学分析软件,对该蛋白质的结构和功能进行预测和分析。结果该基因全长为771 bp,编码256个氨基酸,其编码的蛋白相对分子量理论预测值和等电点分别是29.4 kDa和5.04。预测该蛋白无信号肽和跨膜区,二级结构含8个α-螺旋和12个β-折叠股,氨基酸序列中有9个潜在抗原表位。结论初步认识了细粒棘球绦虫14.3-3zeta蛋白的基本特征,为深入研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。

关键词：细粒棘球绦虫 14-3-3zeta蛋白生物信息学结构功能