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作者：竹攸汀上海海洋大学

学位级别：硕士

异育银鲫（Carassius auratus gibelio）是银鲫卵子与异源精子所产的后代。江苏省扬州地区是生产异育银鲫鱼苗鱼种的主要地区之一，每年为异育银鲫成鱼养殖地区提供大量的鱼苗和鱼种。异育银鲫繁殖期为每年的4月下旬至5月中旬，近几年的... 详细信息

异育银鲫（Carassius auratus gibelio）是银鲫卵子与异源精子所产的后代。江苏省扬州地区是生产异育银鲫鱼苗鱼种的主要地区之一，每年为异育银鲫成鱼养殖地区提供大量的鱼苗和鱼种。异育银鲫繁殖期为每年的4月下旬至5月中旬，近几年的6月上旬左右起，该地区培育过程中的异育银鲫鱼苗体表会出现一种由粘孢子虫寄生而出现孢囊的疾病，发病使得鱼体变形、消瘦、游动困难，严重时导致鱼苗大量死亡，累积死亡率约在10%-60%，鱼苗死亡以及病鱼销售困难给鱼苗养殖户带来巨大的经济损失。因此有必要开展该病的病原和病理研究，为进一步的研究和防治该病的发生提供基础。为了确定粘孢子虫在何种条件下进行形态学观察和测量时最精确，本文以引起该粘孢子虫病的病原粘孢子虫作为样本，将其新鲜成熟孢子用生理盐水制成的水浸片作为对照组，将蒸馏水制成的新鲜孢子水浸片，中性甲醛、70%酒精、95%酒精、Bouin’s液、2.5%戊二醛、A.F.F液和G.A.F液保存24小时后孢子的孢子长、宽、厚、极囊长和宽的测量数据分别与对照组进行统计学分析，结果表明，蒸馏水对孢子的形态略微膨胀，但影响不大;所有的固定液均会对孢子的形态产生影响，中性甲醛、酒精、Bouin’s液和2.5%戊二醛会使孢子产生一定收缩，95%酒精使孢子收缩最严重，70%酒精和Bouin’s液次之;2.5%戊二醛对于保存后的粘孢子虫的形态影响最小，最适于保存孢子;中性甲醛对孢子形态的影响稍大于2.5%戊二醛，但在没有条件使用2.5%戊二醛时，也可用中性甲醛替代。在确定了鉴定方法后，通过光镜、扫描电镜和18S rDNA序列对比，确定该病原粘孢子虫为武汉单极虫（Thelohanellus wuhanensis），并对其进行了形态学重描述和系统发育分析。成熟孢子壳面观为瓜子状，前端狭窄而尖锐，后部钝圆，两片壳瓣前端形状不对称，其中一个壳瓣前端有乳头状突起，缝面观为厚梭形，缝脊直，孢子壳瓣底部内侧有1-4个“V”形褶皱，部分孢子后部包围有膜状鞘，膜状鞘两侧起始的位置不同，离孢子前端的垂直距离为5.03-16.69（10.37±2.36）μm。极囊1个，近似球形，位于孢子前端，极丝7-10圈。2个圆形或近三角形的极囊核，分别位于极囊后部左右两侧。Lugol’s碘液染色后嗜碘泡呈棕黄色，形状为圆形或椭圆形。孢子的测量结果：孢子长21.92-26.93（24.55±0.95）μm，孢子宽11.43-15.48（13.72±0.98）μm，孢子厚10.83-14.14（11.80±0.45）μm;极囊长9.64-12.79（11.54±0.68）μm，极囊宽8.14-10.28（9.12±0.45）μm，极丝长158.49-179.22（170.71±5.67）μm（n=20），膜状鞘外表面距孢子壳瓣表面最远距离为1.73-4.39（2.73±0.60）μm。亚甲基蓝染色表明极丝为中空管状。获得了部分18S rDNA序列，GenBank登录号为JQ088179，经18S rDNA序列分析对比，与已报道的T. wuhanensis[HQ613410]和[AY165181]相似度分别为99.87%和97.36%。本文依据形态学以及18S rDNA序列信息确定了该孢子虫的分类地位。系统发育分析显示，单极虫与碘泡虫具有非常近的亲缘关系，将单极虫属与碘泡虫属二者归属于碘泡科的分类方法更合理。 5月下旬至6月中旬为发病初期，此时孢囊很小，仅导致皮肤微微隆起。随后孢囊开始增大，表面分布有少量黑色斑点。孢囊为椭圆形，位于皮肤真皮层的疏松结缔组织中，孢囊周围的疏松结缔组织增生，其中可见较多的黑色素细胞。孢囊膜为由结缔组织形成的非细胞结构。早期时，产孢体多位于孢囊膜附近，随着发展，产孢体进入孢囊内，位于内部的产孢体会比孢囊膜附近的产孢体更早地形成成熟孢子。成熟孢子由双产孢体或四核产孢体发育形成。7月中下旬至8月中旬为发病高峰期，此时孢囊饱满，表面有大而密集的黑色斑点，孢囊直径最大超过1.7mm，孢囊数最多可达30个以上。除皮肤和鳍外，其它组织器官未发现孢囊和孢子。较大的孢囊导致鳞片弯曲，有的孢囊也会受鳞片挤压而变形。有时两个孢囊相互靠近而融合。孢囊周围增生的疏松结缔组织中存在毛细血管增生现象。黑色素细胞较初期更多。孢囊附近存在一种未知的团状物。孢囊内存在大量成熟孢子，但孢囊膜附近仍存在产孢体。约8月中旬开始疾病进入消退期，孢囊开始逐渐萎缩、消失。此时孢囊周围存在较之前更多更密集的黑色素细胞，导致孢囊表面颜色变黑。孢囊中只有成熟孢子。随着疾病消退，孢囊膜消失，由上皮细胞取而代之。到消退晚期，上皮细胞膜出现缺口，孢子从缺口中流出。孢子消失后，孢囊仍然会存在一段时间。孢囊消失后，增生的结缔组织、黑色素细胞以及未知团状物仍存在。消退后，结缔组织

关键词：异育银鲫粘孢子虫形态学 18S rDNA 武汉单极虫组织病理变化

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武汉单极虫(粘体门,双壳目)的重描述及基于18S rDNA序列系统发育分析

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动物分类学报 2012年第4期37卷 681-686页

作者：竹攸汀陆宏达蔡水局上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306

通过光镜、扫描电镜和18SrDNA序列对比,对寄生于异育银鲫Carassius auratus gibelio体表的粘孢子虫进行了形态学和分子生物学研究,鉴定其为武汉单极虫Thelohanellus wuhanensis,并发现了形态学新特征:膜状鞘的起始位置不同,且仅包围孢... 详细信息

通过光镜、扫描电镜和18SrDNA序列对比,对寄生于异育银鲫Carassius auratus gibelio体表的粘孢子虫进行了形态学和分子生物学研究,鉴定其为武汉单极虫Thelohanellus wuhanensis,并发现了形态学新特征:膜状鞘的起始位置不同,且仅包围孢子后部;壳瓣底部内侧具"V"形褶皱;一片壳瓣前端有突起结构;缝脊直,突出明显;测得极丝全长为158.5～179.2(170.7±5.7)μm。经18S rDNA序列对比,与T. wuhanensis[HQ613410]的相似率为99.87%。系统发育分析表明,单极虫与碘泡虫具有非常近的亲缘关系,将单极虫属与碘泡虫属二者归属于碘泡科的分类方法更合理。

关键词：武汉单极虫光镜扫描电镜形态学 18S rDNA

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海假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)鞭毛蛋白对生物被膜形成及厚壳贻贝附着的影响

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海洋学报 2021年第4期43卷 75-83页

作者：蔡雨珊张秀坤竹攸汀杨金龙梁箫上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海201306 上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 南方海洋科学与工程广东省实验室(广州) 广东广州511458

大多数海洋无脊椎动物在发育过程中都经历浮游、底栖附着阶段,厚壳贻贝(Mytilus coruscus)作为海洋经济物种与大型污损生物,其附着机制受到广泛关注。为探究海洋细菌与厚壳贻贝附着的互作关系,选取了对厚壳贻贝稚贝附着具有较高诱导活... 详细信息

大多数海洋无脊椎动物在发育过程中都经历浮游、底栖附着阶段,厚壳贻贝(Mytilus coruscus)作为海洋经济物种与大型污损生物,其附着机制受到广泛关注。为探究海洋细菌与厚壳贻贝附着的互作关系,选取了对厚壳贻贝稚贝附着具有较高诱导活性的海洋细菌--海假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina),采用酸解超速离心法提取***的鞭毛蛋白。将提取的鞭毛蛋白与琼脂糖溶液混合,形成凝胶直接刺激稚贝;再用提取的鞭毛蛋白处理***生物被膜进行稚贝附着实验。通过共聚焦激光扫描分析形成的生物被膜上生物量、细菌密度和胞外产物含量的变化。结果表明:***鞭毛蛋白与琼脂糖形成的混合凝胶可显著促进厚壳贻贝稚贝的附着;鞭毛蛋白处理的生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的诱导活性显著提高;生物被膜上的生物量、细菌密度、膜厚、胞外β-多糖、脂质和蛋白浓度都有所增加。研究表明,鞭毛蛋白可以直接调控厚壳贻贝稚贝的附着,也可通过改变***生物被膜的生物学特性,间接影响厚壳贻贝稚贝的附着,为探究细菌鞭毛蛋白与厚壳贻贝附着互作机制提供理论依据。

关键词：生物被膜鞭毛蛋白厚壳贻贝稚贝附着

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厚壳贻贝(Mytilus coruscus)McNF-κB基因的克隆及其在发育中的作用

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海洋学报 2023年第9期45卷 141-151页

作者：任泓妤刘甜甜竹攸汀杨金龙梁箫上海海洋大学上海市水产动物良种创制与绿色养殖协同创新中心上海201306 上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海201306

核因子κB(Nuclear Factor kappa-B,NF-κB)具有免疫、炎症、凋亡、细胞增殖和发育的调节作用,目前NF-κB在脊椎动物和果蝇中的研究较为丰富,在贝类中的报道较少。为进一步探究NF-κB在厚壳贻贝(Mytilus coruscus)免疫和发育中的作用,... 详细信息

核因子κB(Nuclear Factor kappa-B,NF-κB)具有免疫、炎症、凋亡、细胞增殖和发育的调节作用,目前NF-κB在脊椎动物和果蝇中的研究较为丰富,在贝类中的报道较少。为进一步探究NF-κB在厚壳贻贝(Mytilus coruscus)免疫和发育中的作用,本研究克隆了厚壳贻贝McNF-κB基因的序列全长,其全长为4 087 bp,开放阅读框为2 613 bp,编码871个氨基酸,具有典型的锚蛋白重复序列(ankyrinrepeat, ANK)结构域和死亡结构域。氨基酸序列分析结果发现,该基因与欧洲贻贝(Mytilus edulis)和地中海贻贝(Mytilus galloprovincialis)分别具有72.76%和66.58%同源性,且在系统进化树中与欧洲贻贝和地中海贻贝聚为一支。经实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检验表明,McNF-κB基因于厚壳贻贝各组织均有分布,在鳃中表达最高;McNF-κB基因在厚壳贻贝眼点幼虫阶段和稚贝阶段均有表达,且在稚贝阶段表达量显著高于眼点幼虫阶段。利用RNA干扰技术沉默眼点幼虫McNF-κB基因后幼虫变态率显著下降,推测McNF-κB基因调控厚壳贻贝幼虫变态过程。本研究为探究McNF-κB基因如何调控厚壳贻贝发育奠定了基础。

关键词：厚壳贻贝 NF-κB 基因克隆幼虫变态

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厚壳贻贝(Mytilus coruscus)McCaspase 3-4基因的克隆及其在幼虫变态中的作用

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水生生物学报 2022年

作者：刘志显李嘉政梁邻利冯丹丹梁箫杨金龙竹攸汀上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室南方海洋科学与工程广东省实验室(广州)

细胞凋亡作为一种机体清除冗余组织和细胞的重要方式，目前已被发现在脊椎动物和昆虫变态过程中具有重要作用。然而迄今为止，细胞凋亡是否参与调控海洋贝类幼虫的变态却仍不十分清楚。为进一步了解细胞凋亡及其效应基因caspase-3在海...

细胞凋亡作为一种机体清除冗余组织和细胞的重要方式，目前已被发现在脊椎动物和昆虫变态过程中具有重要作用。然而迄今为止，细胞凋亡是否参与调控海洋贝类幼虫的变态却仍不十分清楚。为进一步了解细胞凋亡及其效应基因caspase-3在海洋贝类厚壳贻贝（Mytilus coruscus）变态中的作用，本研究通过RACE技术克隆并鉴定了一个厚壳贻贝caspase-3基因的cDNA全长，并对该基因在幼虫变态中的作用进行了研究。碱基序列和氨基酸序列特征分析显示，该基因编码的蛋白质具有典型的caspase P20和P10结构域，但核心半胱氨酸活性位点QACXG五肽保守序列发生了突变。系统进化分析结果显示该基因与无脊椎动物Caspase-3蛋白聚在一起，并与地中海贻贝（Mytilus galloprovincialis）caspase 3/7-4相似度最高，因此将该基因命名为McCaspase 3-4。随后，通过实时荧光定量PCR技术对该基因在成贝不同组织及幼虫变态不同时间点的表达水平进行了分析。分析结果显示，McCaspase 3-4 mRNA在成贝外套膜和唇瓣中的表达量显著高于其他组织。肾上腺素诱导眼点幼虫变态12h后，McCaspase 3-4 mRNA的表达水平出现显著上升，并在刺激24h后达到最高，表明该基因可能在幼虫变态早期发挥作用。利用RNA干扰技术敲降眼点幼虫McCaspase 3-4基因表达后的结果显示，肾上腺素对眼点幼虫变态的诱导作用显著下降，表明该基因在调控厚壳贻贝变态过程中具有重要作用。上述研究结果将有助于理解细胞凋亡在厚壳贻贝幼虫变态中的作用以及贝类变态的分子机制。

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异育银鲫瓶囊碘泡虫病组织病理学和血液学研究

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广东农业科学 2012年第20期39卷 121-124,F0004页

作者：蔡水局陆宏达竹攸汀上海海洋大学水产与生命学院上海201306

对患瓶囊碘泡虫病的异育银鲫的组织病理学和血液学进行了初步研究。组织病理研究结果表明,孢囊寄生于异育银鲫咽腔部的结缔组织中,疾病初期孢囊较小且以营养体为主,孢囊壁附近分布较多营养体,孢囊内只有少量的成熟孢子,表明孢囊成熟孢... 详细信息

对患瓶囊碘泡虫病的异育银鲫的组织病理学和血液学进行了初步研究。组织病理研究结果表明,孢囊寄生于异育银鲫咽腔部的结缔组织中,疾病初期孢囊较小且以营养体为主,孢囊壁附近分布较多营养体,孢囊内只有少量的成熟孢子,表明孢囊成熟孢子的形成是从孢囊中间逐渐向周围发展,此阶段引起异育银鲫咽腔部上皮组织扩张、坏死;疾病发展期孢囊逐渐扩大,孢子发育成熟,孢囊壁周围已无营养体,单层柱状上皮扩张明显;有些上皮组织发生肿胀、变性、坏死、脱落、粘液细胞增多等;疾病消退期孢囊内已无孢子,孢囊内物质形成空状,咽腔组织病理表现为单层柱状上皮脱落、消失。血液病理研究表明,病鱼的红细胞长径和短径均比健康鱼红细胞的要小,但无显著性差异。与健康鱼相比,病鱼的血细胞数目变化明显,表现为红细胞数显著降低,而白细胞数极显著升高,即病鱼的粒细胞、单核细胞、淋巴细胞及血栓细胞均极显著升高。

关键词：瓶囊碘泡虫异育银鲫组织病理血液病理

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引起池养异育银鲫高死亡率的粘孢子虫新种咽碘泡虫形态和分子分析

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海洋渔业 2012年第4期34卷 406-416页

作者：陆宏达蔡水局竹攸汀毛毛上海海洋大学水产与生命学院上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306

对近几年发生在江苏省盐城地区引起池养异育银鲫大批死亡的粘孢子虫进行了形态和分子等方面分析研究,发现该粘孢子虫主要特点是:孢子梨形,部分孢子后部外周包围有透明无色的膜状鞘和壳瓣底部内侧呈现1～6个"V"形缺刻,两个极囊大小不等,... 详细信息

对近几年发生在江苏省盐城地区引起池养异育银鲫大批死亡的粘孢子虫进行了形态和分子等方面分析研究,发现该粘孢子虫主要特点是:孢子梨形,部分孢子后部外周包围有透明无色的膜状鞘和壳瓣底部内侧呈现1～6个"V"形缺刻,两个极囊大小不等,孢子前端内侧两个极囊间有一个细长的囊间突起,胚质中无嗜碘泡,孢囊大小10～25 mm,孢子长16.82±0.43(16.03～17.69)μm,孢子宽10.26±0.43(9.12～10.88)μm,孢子厚8.09±0.29(7.50～8.75)μm,孢子长宽比1.64±0.09(1.50～1.93);大极囊长8.66±0.25(8.25～9.16)μm、宽3.65±0.25(3.01～4.19)μm,小极囊长8.35±0.28(7.60～8.85)μm、宽3.58±0.23(3.09～4.11)μm,囊间突起长1.80±0.12(1.59～2.00)μm。特异性地寄生在异育银鲫的口咽腔上颚的咽组织内、具有寄主和寄生在咽部的专一性,PCR扩增得到1 576 bp的18S rDNA序列,GenBank登录号为JQ726700。该粘孢子虫与相近的其它粘孢子虫比较,孢子长分别与白鲟碘泡虫(Myxobolus psephurusi)和扭曲碘泡虫(***)无显著差异(P>0.05),与***、***和鳙碘泡虫(***)分别有显著差异(P<0.05);孢子宽和厚、极囊长和宽分别与***、***、白鲟碘孢虫(***)、鳙碘泡虫(***)和扭曲碘孢虫(***)有显著差异(P<0.05);分子系统树分析结果显示,与***在同一个分支中,亲缘关系最近。从孢子形态学、寄主的特异性、寄生部位的专一性以及18SrDNA序列等特点综合比较分析,表明该粘孢子虫为一新种,命名为咽碘泡虫Myxobolus pharynae ***.。

关键词：咽碘泡虫异育银鲫形态学 18S rDNA 分子系统树

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藻酸盐对海假交替单胞菌生物被膜形成及厚壳贻贝附着变态的影响

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大连海洋大学学报 2022年第4期37卷 620-626页

作者：陈慧娥贺康贺楚晗竹攸汀杨金龙梁箫上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海201306 上海市水产动物良种创制与绿色养殖协同创新中心上海201306 南方海洋科学与工程广东省实验室(广州) 广东广州511458

为探究藻酸盐对海假交替单胞菌Pseudoalteromonas marina生物被膜形成及厚壳贻贝Mytilus coruscus幼虫附着变态的影响,以海假交替单胞菌生物被膜为对照组,将终质量浓度为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L的藻酸盐标准品溶液,分别添加到海... 详细信息

为探究藻酸盐对海假交替单胞菌Pseudoalteromonas marina生物被膜形成及厚壳贻贝Mytilus coruscus幼虫附着变态的影响,以海假交替单胞菌生物被膜为对照组,将终质量浓度为0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L的藻酸盐标准品溶液,分别添加到海假交替单胞菌菌液中共同形成生物被膜,检测生物被膜对厚壳贻贝幼虫附着变态的影响,并分析了藻酸盐对生物被膜的膜厚及胞外产物的影响。结果表明:生物被膜的细菌密度随添加藻酸盐质量浓度的增加而增加;当添加藻酸盐质量浓度为0.5 mg/L时,共同形成的生物被膜的膜厚和胞外多糖均显著增加(P<0.05),诱导厚壳贻贝幼虫附着变态的能力增强。研究表明,添加藻酸盐能够促进***生物被膜的形成,且可拉酸等其他胞外多糖含量的增加促进了生物被膜对厚壳贻贝幼虫附着变态的诱导能力,藻酸盐的适宜添加量为0.5 mg/L。

关键词：厚壳贻贝藻酸盐生物被膜幼虫附着变态

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细菌运动性对生物被膜的动态演替及其对厚壳贻贝附着的影响

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渔业科学进展 2023年第3期44卷 200-208页

作者：牟嘉仪胡晓梦彭莉华竹攸汀梁箫杨金龙上海海洋大学海洋生物科学国际联合研究中心上海201306 上海市水产动物良种创制与绿色养殖协同创新中心上海201306 南方海洋科学与工程广东省实验室广东广州511458

为研究海洋细菌的运动性在生物被膜形成和贝类附着过程中的作用,本研究以厚壳贻贝(Mytilus coruscus)为研究对象,开展了海洋假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)野生型菌株和ΔcheW菌株不同时间段的运动性能分析,调查了运动性能不... 详细信息

为研究海洋细菌的运动性在生物被膜形成和贝类附着过程中的作用,本研究以厚壳贻贝(Mytilus coruscus)为研究对象,开展了海洋假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)野生型菌株和ΔcheW菌株不同时间段的运动性能分析,调查了运动性能不同的细菌形成生物被膜的膜厚、细菌密度以及胞外产物的动态变化,探究了其生物被膜的动态演替对厚壳贻贝附着的影响。研究发现,野生型菌株和ΔcheW菌株在6、12、24、48、72和96h等不同时间的运动性能差异显著(P<0.05)。同时,对2株菌株形成菌圈的半径进行测量发现,随着时间的变化,菌圈的半径不断增加,均在96h达到最大。整体上,野生型菌株在不同时间段形成的菌圈大于ΔcheW菌株。在运动性的作用下,2株菌株随着时间的变化形成生物被膜的细菌密度及膜厚在48h达到最大值,在72h后开始扩散。在运动性的影响下,野生型菌株在不同时间段形成的生物被膜对厚壳贻贝附着诱导效果显著高于ΔcheW菌株。在运动性介导下,2株菌株形成生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着率随着时间变化呈现先增长后减少的趋势,在48 h达到最高,在72 h后开始降低,这一结果与不同时间段下形成生物被膜的胞外产物变化一致,且胞外产物分泌与细菌运动性密切相关。因此,运动性影响生物被膜的形成,且在生物被膜动态演替过程中介导了生物被膜的膜厚、细菌密度以及胞外产物的分泌,从而影响了厚壳贻贝的附着。本研究为后续开展细菌运动性、生物被膜形成和厚壳贻贝互作机制研究奠定了基础,为海洋经济物种的生产养殖提供了技术支撑。

关键词：海洋假交替单胞菌运动性生物被膜动态演替厚壳贻贝附着

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厚壳贻贝McCaspase 3-4基因的克隆及其在幼虫变态中的作用

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水生生物学报 2022年第8期46卷 1168-1176页

作者：刘志显李嘉政梁邻利冯丹丹梁箫杨金龙竹攸汀上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海201306 上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 南方海洋科学与工程广东省实验室广州511458

为进一步了解细胞凋亡及其效应基因caspase-3在海洋贝类厚壳贻贝(Mytilus coruscus)变态中的作用,研究通过RACE技术克隆并鉴定了一个厚壳贻贝caspase-3基因的cDNA全长,并对该基因在幼虫变态中的作用进行了研究。碱基序列和氨基酸序列特... 详细信息

为进一步了解细胞凋亡及其效应基因caspase-3在海洋贝类厚壳贻贝(Mytilus coruscus)变态中的作用,研究通过RACE技术克隆并鉴定了一个厚壳贻贝caspase-3基因的cDNA全长,并对该基因在幼虫变态中的作用进行了研究。碱基序列和氨基酸序列特征分析显示,该基因编码的蛋白质具有典型的caspase P20和P10结构域,但核心半胱氨酸活性位点QACXG五肽保守序列发生了突变。系统进化分析结果显示该基因与无脊椎动物Caspase-3聚在一起,并与地中海贻贝(Mytilus galloprovincialis)caspase 3/7-4相似度最高,因此将其命名为McCaspase 3-4。随后,通过实时荧光定量PCR技术对该基因在成贝不同组织及幼虫变态不同时间点的表达水平进行了分析。结果显示, McCaspase 3-4在成贝外套膜和唇瓣中的表达量显著高于其他组织。肾上腺素诱导眼点幼虫变态12h后, McCaspase 3-4的表达水平出现显著上升,并在刺激24h后达到最高,表明该基因可能在幼虫变态早期发挥作用。利用RNA干扰技术敲降眼点幼虫McCaspase 3-4基因表达后的结果显示,肾上腺素对眼点幼虫变态的诱导作用显著下降,表明该基因在调控厚壳贻贝变态过程中具有重要作用。研究结果有助于理解细胞凋亡在厚壳贻贝幼虫变态中的作用及贝类变态的分子机制。

关键词：细胞凋亡 Caspase-3 组织表达幼虫变态厚壳贻贝

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