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异种移植微囊化新生猪胰岛细胞受体感染PERV潜在风险分析

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中南大学学报（医学版） 2007年第5期32卷 747-752页

作者：叶征邢晓为童琼娟容鹏飞王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所长沙410013

目的:研究新生猪胰岛细胞(neonatal pig islets,NPIs)经微囊化后异种移植到狗体内,受体感染猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的风险。方法:将10只狗随机分成实验组和对照组,分别移植微囊化猪胰岛细胞和未被微囊... 详细信息

目的:研究新生猪胰岛细胞(neonatal pig islets,NPIs)经微囊化后异种移植到狗体内,受体感染猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的风险。方法:将10只狗随机分成实验组和对照组,分别移植微囊化猪胰岛细胞和未被微囊化猪胰岛细胞。应用放射免疫的方法检测狗体内血清特异性猪C-肽以判断胰岛移植物活性;采用免疫组织化学技术检测28d后肝移植部位是否有微囊化猪胰岛细胞;PCR和RT-PCR技术分别检测不同时间点狗外周血中PERV及猪mt DNA。结果:移植微囊化猪胰岛细胞2周后,给受体注射葡萄糖,15～30min狗的外周血中猪C-肽表达明显升高,而对照组检测不到猪C-肽;免疫组化结果表明,狗肝脏移植部位周围可检测到少量微囊化猪胰岛细胞,肝组织无明显异常;PCR和RT-PCR结果表明,移植微囊化猪胰岛细胞在不同时间点狗外周血内均未检测到猪mt DNA及PERV表达,而对照组于移植后4d内检测到猪mt DNA及PERV呈微弱表达,10d后均未见表达。结论:微囊化猪胰岛细胞能够在受体肝脏内存活并发挥作用,受体内不存在PERV的感染,提示海藻酸钠微囊可以有效地防止猪mt DNA及PERV的穿越,可能在异种移植中具有较好的应用前景。

关键词：移植异种猪内源性逆转录病毒微囊化胰岛猪狗

非酒精性脂肪肝肝脾CT值比值与肝功能及血脂关系的分析

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临床放射学杂志 2010年第6期29卷 769-771页

作者：刘珺叶斌王维唐医亚童琼娟中南大学湘雅三医院放射科长沙410013

目的探讨非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者肝脾CT值比值与肝功能及血脂的关系。资料与方法对132例NAFLD患者分别行CT平扫、肝功能及血脂检测,然后根据肝功能及血脂有无异常进行分组。结果 132例NAFLD患者,... 详细信息

目的探讨非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者肝脾CT值比值与肝功能及血脂的关系。资料与方法对132例NAFLD患者分别行CT平扫、肝功能及血脂检测,然后根据肝功能及血脂有无异常进行分组。结果 132例NAFLD患者,肝功能正常54例,肝功能异常78例;血脂正常45例,血脂异常87例。肝功能正常组与异常组其肝脾CT值比值有差异;血脂正常组与异常组其肝脾CT值比值亦有差异;肝脾CT值比值与甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)呈明显负相关(P0.05)。结论 NAFLD肝脾CT值比值与血脂密切相关,而与肝功能氨基转氨酶的变化无明显相关性。

关键词：非酒精性脂肪肝体层摄影术,X线计算机肝功能血脂比值

双能X线骨密度仪(DXA)与定量CT(QCT)测量骨密度的比较研究

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临床放射学杂志 2007年第5期26卷 504-507页

作者：刘珺王维童琼娟刘煌辉欧阳彬中南大学湘雅三医院放射科湖南长沙410013

目的比较定量CT(QCT)和双能X线骨密度仪(DXA)所得测定值与灰重密度的相关性以及两种方法所得体积骨密度的偏离度,探讨QCT测量BMD的临床应用价值。材料与方法取15节猪腰椎椎体,去除周围软组织及附件,分别用QCT及DXA两种方法测量骨密度,... 详细信息

目的比较定量CT(QCT)和双能X线骨密度仪(DXA)所得测定值与灰重密度的相关性以及两种方法所得体积骨密度的偏离度,探讨QCT测量BMD的临床应用价值。材料与方法取15节猪腰椎椎体,去除周围软组织及附件,分别用QCT及DXA两种方法测量骨密度,再将去附件椎体灰化,将各自测得的总骨矿含量及骨密度与灰化后得到的椎体的灰重以及灰重密度比较。计算出DXA测量的体积骨密度,QCT测得的皮质骨密度、松质骨密度以及DXA测量得到的体积骨密度分别相对灰重密度的偏离度。结果QCT与DXA测量结果与灰重、灰重密度均有显著相关性(P<0.005),其中以DXA测得总骨矿含量与灰重的相关性最显著(r=0.9995)。且相对灰重密度,QCT测得松质骨密度的偏离度(平均值0.1489)低于DXA测量得到的体积骨密度的偏离度(平均值0.2708)(P<0.05)。结论QCT和DXA都是判断骨矿含量和诊断骨质疏松症较好的方法;QCT测量松质骨密度更接近于作为标准值的灰重密度;QCT测量松质骨密度比DXA测量骨密度能更好、更准确地反映骨质疏松的骨代谢变化。

关键词：双能X线骨密度定量CT

CD4＋T细胞抗体标记超顺磁性氧化铁MR成像诊断异种胰岛移植免疫排斥反应的实验研究

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中华放射学杂志 2008年第10期42卷 1084-1088页

作者：聂唯唐医亚容鹏飞叶斌叶征童琼娟王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗中心长沙410013

目的探讨利用抗人分化抗原簇（CD）4＋T细胞抗体标记的纳米免疫超顺磁性氧化铁（SPIO）作为MRI生物探针，诊断胰岛细胞移植后免疫排斥反应的可行性。方法27只BALB／C裸鼠，每只左肾被膜下移植分离纯化后的猪胰岛细胞2000个，3周后MRI可... 详细信息

目的探讨利用抗人分化抗原簇（CD）4＋T细胞抗体标记的纳米免疫超顺磁性氧化铁（SPIO）作为MRI生物探针，诊断胰岛细胞移植后免疫排斥反应的可行性。方法27只BALB／C裸鼠，每只左肾被膜下移植分离纯化后的猪胰岛细胞2000个，3周后MRI可观察到肾包膜下移植物大小，然后采用数字表法随机将实验动物分为实验组（21只）和对照组（6只）。将人T淋巴细胞注入实验组鼠腹腔内重建人的T淋巴细胞免疫系统，其中20只重建成功。实验组动物免疫系统重建前及重建后3、7和14d，经尾静脉注射纳米免疫SPIO，30min后行MRI T2WI，观察移植物的MRI信号改变。MRI结束后立即安乐死方法牺牲动物，取下左肾行移植物病理组织检查；对照组动物胰岛细胞移植后，不进行免疫处理，与实验组动物相同时间点给予相同检查。并以病理检查为金标准，用临床诊断一致性检验计算MRI对异种胰岛细胞移植后免疫排斥反应诊断的灵敏度、特异性、Youden指数和符合率。结果2组动物在移植胰岛细胞3周后MRI可显示移植物。实验组BALB／C裸鼠，重建免疫系统前及重建成功后3d注入纳米免疫SPIO，MRI移植物局部未见异常信号；免疫系统重建成功后7d，MRI显示移植物对应区域信号减低，苏木精-伊红及CD4＋T免疫组织化学染色显示移植物局部大量淋巴细胞浸润，提示免疫排斥反应发生。对照组动物移植物所有MRI均未见异常；病理组织学检查移植物局部未见炎性细胞浸润。MRI对免疫反应检测的灵敏度、特异度、Youden指数和符合率分别为：（72．96±0.24）％、100％、0．73±0．24、（88．46±0．13）％（Kappa值为0．76）。结论通过抗人CD4＋T细胞抗体标记的纳米免疫SPIO生物探针MRI，可以检查异种胰岛细胞移植后免疫排斥反应，并能早期、实时、无创性的对移植受体免疫排斥反应进行诊断。

关键词：磁共振成像分子探针技术移植物排斥

猪内源性逆转录病毒移植免疫抑制异种受体内跨种系感染的研究

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猪内源性逆转录病毒移植免疫抑制异种受体内跨种系感染的研究

采用Edmonton免疫抑制方案的成人胰岛移植治疗1型糖尿病八例

中华医学会第十三届全国放射学大会

作者：童琼娟邢晓为叶征黎淑娟王维中南大学湘雅三医院

目的:PERV属于典型的C型逆转录病毒,普遍存在于猪的组织和细胞中,它是一种以前病毒DNA的形式整合进宿主细胞基因组中,并随染色体复制而复制的反转录病毒。目前研究证实了猪胰岛细胞产生的PERV在体外培养感染人细胞,并在体内感染了严重...

目的:PERV属于典型的C型逆转录病毒,普遍存在于猪的组织和细胞中,它是一种以前病毒DNA的形式整合进宿主细胞基因组中,并随染色体复制而复制的反转录病毒。目前研究证实了猪胰岛细胞产生的PERV在体外培养感染人细胞,并在体内感染了严重联合免疫缺陷的小鼠,但不能在体内感染免疫功能正常的移植受体。本

关键词：

来源： cnki会议评论

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中华器官移植杂志 2007年第7期28卷 433-436页

作者：胡平安莫朝晖王维朱晒红叶启发叶斌杨文龙刘晟刘敏谢艳红叶征金萍童琼娟何红晖董琼卫生部移植医学工程技术中心中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究中心长沙410013

目的探讨成人胰岛移植治疗1型糖尿病的临床效果。方法为8例1型糖尿病患者施行胰岛移植,供胰来自于成人尸体,消化、分离获得的胰岛培养过夜,然后经动脉插管输注至肝固有动脉,每例输注胰岛数为(8415±757)胰岛当量/kg。其中3例接受1个供... 详细信息

目的探讨成人胰岛移植治疗1型糖尿病的临床效果。方法为8例1型糖尿病患者施行胰岛移植,供胰来自于成人尸体,消化、分离获得的胰岛培养过夜,然后经动脉插管输注至肝固有动脉,每例输注胰岛数为(8415±757)胰岛当量/kg。其中3例接受1个供者的胰岛移植,5例接受2个供者的胰岛移植(分2次进行)。8例患者中,除1例供、受者的ABO血型不同外,其余供、受者的ABO血型均相同。本组病例未行HLA配型。术后免疫抑制治疗采用Edmonton方案中的免疫抑制剂使用方法,即不使用类固醇激素,采用西罗莫司和他克莫司联用,并辅以5剂达利珠单抗。术后观察外源性胰岛素的使用量、血糖及血清C-肽的变化。结果移植后平均随访7.7个月,2例完全停用胰岛素,5例的胰岛素用量减少47%～90%,1例效果不明显,胰岛素用量仅减少21%。8例血糖从移植前的(10.6土3.9)mmol/L降至(6.6±1.3)mmol/L,控制更为平稳;糖化血红蛋白A_1从(11.9±1.6)%降至(5.9±1.2)%。移植有效者的血清C-肽基础值及葡萄糖刺激后C-肽水平分别由移植前的(0.054±0.076)nmol/L和(0.075±0.045)nmol/L升高至(0.620±0.080)nmol/L和(1.580±0.770)nmol/L。免疫抑制剂相关的并发症主要为白细胞减少(6例),减少或停用免疫抑制剂后白细胞可回升至正常,无大出血、门静脉栓塞或门静脉高压等并发症发生。结论经肝动脉输注成人胰岛治疗1型糖尿病具有一定的临床效果,采用Edmonton免疫抑制方案安全、有效。

关键词：糖尿病 1型胰岛移植

异种移植候选供体宁乡猪内源性逆转录病毒调查

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异种移植候选供体宁乡猪内源性逆转录病毒调查

第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学...

作者：邢晓为易受南董琼叶斌童琼娟叶征王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所

目的对异种移植候选供体宁乡猪携带的内源性逆转录病毒进行调查分析,为评价从猪到人异种移植中的生物安全性提供依据。方法从宁乡猪保种群中随机采集22头个体的血样标本,应用PCR技术分别对这些个体基因组中猪内源性逆转录病(porcine end...

目的对异种移植候选供体宁乡猪携带的内源性逆转录病毒进行调查分析,为评价从猪到人异种移植中的生物安全性提供依据。方法从宁乡猪保种群中随机采集22头个体的血样标本,应用PCR技术分别对这些个体基因组中猪内源性逆转录病(porcine endogenous retrovirus,PERV)env-A,env-B,env-C基因及线粒体基因CoⅡ进行扩增,明确宁乡猪种群携带PERV的亚型;RT-PCR分别扩增PERVpol,gag基因,了解PERV是否具有转录活性;为进一步探索宁乡猪基因组中PERV-A, -B的序列变异及其特性,在PERV env序列上游设计一对PERV-A,-B共用引物,分别用高保真酶从3头不同个体中PCR扩增1.8 kb PERV env序列,然后,将PCR产物克隆至pUCm-T载体,PCR扩增法鉴定阳性克隆,并分别用限制性内切酶KpnⅠ和MboⅠ对所扩增的PCR产物进行酶切鉴定,测序分析不同酶切图谱的阳性克隆;最后,用两对不同的引物对PERV-C阳性的个体中的PERV-A/C重组序列进行PCR扩增,分析这些个体中是否存在PERV-A/C重组。结果所检测的21头宁乡猪均带有PERV前病毒DNA,PERV env-A,env-B,env-C存在于所有的个体中,说明宁乡猪具有3个PERV亚型,即:PERV-A,PERV-B, PERV-C三种。RT-PCR扩增结果表明,PERV pol,gag在所有个体中均有表达,说明宁乡猪中PERV均具有转录活性。应用共用引物PCR扩增1.8 kb PERV env序列后,克隆至pUCm-T载体,筛选得到42个阳性克隆,对所插入的片段PCR扩增并用KpnⅠ和MboⅠ进行双酶切,结果发现KpnⅠ酶切后的有6种酶切谱,MboⅠ酶切后的有8种酶切谱,结合两种酶切谱的结果共得到11种不同的克隆,其中PERV-A约为30%,该结果表明,宁乡猪中存在多种变异的PERV-A和PERV-B序列。PERV-A/C重组筛查结果发现,90%以上的宁乡猪带有PERV-A/C重组序列,提示该猪种携带PERV具有较强的跨种系感染能力。结论宁乡猪带有PERV前病毒DNA,PERV在该猪种中具有转录活性,该猪种携带3种PERV亚型,即:PERV-A,PERV-B,PERVC。在该猪种基因组中存在多种PERV-A和PERV-B变异序列,不易从基因组中剔除,而且绝大多数个体中均存在PERV-A/C重组,增加了PERV跨种系感染的风险,从生物安全性角度考虑,该猪种不宜作为异种移植候选供体为人类提供器官和细胞来源。

关键词：

来源： cnki会议评论

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专业能力导向教学在影像医学教学中的分析

中国继续医学教育 2019年第20期11卷 3-5页

作者：张声旺王维聂唯童琼娟章雅琴颜智敏容鹏飞中南大学湘雅三医院放射科

精准医疗已成为现代医学发展的新方向,影像医学是一门交叉学科,精准医疗的发展对影像医学人才培养质量提出了更高的要求。影像医学传统教学模式容易造成理论知识与临床应用脱节,遵循医学教育的基本规律,顺应2030健康中国的需求,影像医... 详细信息

精准医疗已成为现代医学发展的新方向,影像医学是一门交叉学科,精准医疗的发展对影像医学人才培养质量提出了更高的要求。影像医学传统教学模式容易造成理论知识与临床应用脱节,遵循医学教育的基本规律,顺应2030健康中国的需求,影像医学教学必须积极改革传统的教学模式。以培养专业能力为导向,针对不同专业本科生与住培医生,综合应用现代教学方法,紧扣专业能力需求进行区别教学,重点培养本科生与住培医生专业相关的影像诊断能力。本文分析了传统教学模式存在的问题、专业能力导向教学模式具体的方法与优势,最终达到培养高质量医学人才的目的。

关键词：精准医疗影像医学专业能力教学本科生住培医生

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人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病8例报道

人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病8例报道