检索结果-南通市图书馆

IGF1R抑制剂筛选模型的建立，化合物的筛选及苏木色素抗肿瘤作用研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

IGF1R抑制剂筛选模型的建立，化合物的筛选及苏木色素抗肿瘤作用...

作者：童林江上海交通大学

学位级别：硕士

胰岛素样生长因子受体1（IGF1R）在许多类型的肿瘤细胞中高表达,在与肿瘤细胞增殖、迁移、耐药等相关的信号转导过程中发挥了关键的调控作用。本研究的目的是建立一个灵敏的高通量IGF1R抑制剂分子筛选模型,并寻找新型的IGF1R抑制剂。 ... 详细信息

胰岛素样生长因子受体1（IGF1R）在许多类型的肿瘤细胞中高表达,在与肿瘤细胞增殖、迁移、耐药等相关的信号转导过程中发挥了关键的调控作用。本研究的目的是建立一个灵敏的高通量IGF1R抑制剂分子筛选模型,并寻找新型的IGF1R抑制剂。采用Bac-to-BacTM昆虫杆状病毒表达系统表达具有激酶活性的受体酪氨酸激酶IGF1R胞内区重组蛋白,并建立基于酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）原理的IGF1R抑制剂分子筛选模型。筛选得到的化合物通过采取分子对接技术以及表面等离子共振技术（SPR）来阐述其与IGF1R的相互作用模式。采用静脉内皮细胞迁移、管腔形成、大鼠动脉环、鸡胚尿囊膜等实验评价该IGF1R抑制剂的抗新生血管活性,同时采用MTT法检测该化合物对肿瘤细胞的增值抑制作用。用流式细胞术检测其诱导凋亡能力和蛋白印记法来进行。首先,我们成功构建并表达纯化了具有酶活功能的IGF1R胞内区重组蛋白,并且建立了基于ELISA原理的IGF1R抑制剂筛选模型。采用该抑制剂筛选模型对200余个化合物进行筛选并获得了一个对IGF1R酶活具有显著抑制作用的天然的小分子化合物——苏木色素（hematoxylin）。计算机分子对接结果显示苏木色素可能与IGF1R的激酶区存在直接结合。随后我们利用SPR技术观察了苏木色素与IGF1R的结合,结果显示,苏木色素与IGF1R确实存在高亲和力地结合。血管新生是IGF1R活化介导的重要效应,因此,我们进一步观察苏木色素对血管内皮细胞迁移和管腔形成等新生血管生成早期主要步骤的影响;并采用大鼠动脉环、鸡胚尿囊膜模型,评价了苏木色素在半体内、体内水平抑制新生血管生成的作用,结果表明,苏木色素能够明显抑制肿瘤新生血管生成。此外,我们在IGF1R高表达的HL60细胞中观察了苏木色素对IGF1R介导的增殖活性的影响,结果表明,苏木色素可以显著抑制HL60细胞的增殖,深入机制研究揭示,在HL60细胞中,苏木色素通过抑制了IGF1R的磷酸化从而激活了caspase凋亡级联信号通路,发挥了抗增殖的作用。本研究成功建立了灵敏、稳定的IGF1R受体酪氨酸激酶抑制剂的分子水平筛选模型,通过该模型筛选得到对IGF1R有较强抑制活性的苏木色素。本研究为研发以IGF1R受体酪氨酸激酶为靶点的新型抗肿瘤药物奠定了良好的基础,特别是IGF1R抑制剂苏木色素值得进一步研究。

关键词：胰岛素样生长因子I受体苏木色素细胞增殖信号通路凋亡 HL-60细胞

新颖3,4-二氢-苯并[b]氧杂棘-5(2H)-酮类化合物的合成以及蛋白酪氨酸激酶抑制活性研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

有机化学 2017年第6期37卷 1463-1472页

作者：侯桂革江成世刘红椿童林江彭霞季寅淳耿美玉肖伟龚景旭郭跃伟中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室上海201203 滨州医学院"方剂效应与临床评价"国家中医药管理局重点实验室烟台264003 济南大学生物科学与技术学院济南250022 江苏康源药业股份有限公司连云港222001

通过合成得到了一系列新颖的苯并[b]氧杂棘-5(2H)-酮类化合物单晶,结构经~1HNMR,^(13)CNMR和HREIMS确证,E-7-[(2,5-二羟基苯基)甲亚基]氨基-3,4-二氢-苯并[b]氧杂棘-5(2H)-酮(8k)和E-7-[(2,3,4-三羟基苯基)亚基]氨基-3,4-二氢-苯并[b]氧杂棘-5-(2H)-酮(8n)的结构经单晶X衍射方法进一步确证.系统测试了化合物对蛋白酪氨酸激酶(PTKs),如ErbB1,ErbB2,c-Met,ALK,FGFR1,RET和KDR等的抑制活性,结果表明含有邻苯二酚片段的化合物对蛋白酪氨酸激酶具有显著的抑制活性,其中E-7-[(3,4-二羟基苯基)甲亚基]氨基-3,4-二氢-苯并[b]氧杂棘-5(2H)-酮(8i)对ErbB1和ErbB2的IC50分别为1.0和0.33μmol/L,8n对RET的IC_(50)为0.7μmol/L,7-[(3,4-二羟基苯基)甲基]氨基-2,3,4,5-四氢-苯并[b]氧杂棘-5-醇(10b)对ErbB2的IC_(50)为1.02μmol/L.

关键词： 3,4-二氢-苯并[b]氧杂棘-5(2H)-酮合成蛋白酪氨酸激酶抑制剂 ErbB1 ErbB2

维普期刊数据库

三七皂苷R_1、人参皂苷R_d对微循环及凝血作用的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华西医科大学学报 2002年第4期33卷 550-552页

作者：陈重华粟晓黎张俊霞林瑞超颜有仪仇学伟童林江陈淑杰四川大学华西药学院药理学教研室成都610041 中国药品生物制品检定所成都中医学校四川大学华西基础医学与法医学院

目的　研究三七皂苷 R1 (R1 )和人参皂苷 Rd(Rd)的活血化瘀作用 ,以证实二者为三七中的有效成分。方法　显微电视放大系统定量观测 R1 和 Rd 对正常及去甲肾上腺素 (NA)所致耳廓微循环障碍小鼠耳廓微循环的影响 ;血浆复钙试验测定 R1 和... 详细信息

目的　研究三七皂苷 R1 (R1 )和人参皂苷 Rd(Rd)的活血化瘀作用 ,以证实二者为三七中的有效成分。方法　显微电视放大系统定量观测 R1 和 Rd 对正常及去甲肾上腺素 (NA)所致耳廓微循环障碍小鼠耳廓微循环的影响 ;血浆复钙试验测定 R1 和 Rd 的抗凝作用。结果　 R1 和 Rd 能显著促进或改善正常及 NA所致耳廓微循环障碍小鼠耳廓的微循环 ;亦可延长血浆复钙时间。结论　 R1 和 Rd 均能显著改善微循环并适度延长凝血时间。

关键词：三七皂苷R1 人参皂苷Rd 三七总皂苷微循环抗凝作用中药

维普期刊数据库

新型2-氨基苯并咪唑类EGFR^(T790M)抑制剂的合成及其生物活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

合成化学 2018年第9期26卷 637-646页

作者：段京义张银勇潜安然童林江谢华周先礼西南交通大学生命科学与工程学院四川成都610031 中国科学院上海药物研究所上海201203

以1-氟-2-硝基芳烃和反式-4-氨基环己醇盐酸盐为原料,经亲核取代、还原、环化及缩合等反应合成了15个新型的2-氨基苯并咪唑类EGFR^(T790M)抑制剂(6a^6o),其结构经~1H NMR,^(13)C NMR和HR-MS(ESI)表征。分别采用ELISA法和SRB法测定了6a^6... 详细信息

以1-氟-2-硝基芳烃和反式-4-氨基环己醇盐酸盐为原料,经亲核取代、还原、环化及缩合等反应合成了15个新型的2-氨基苯并咪唑类EGFR^(T790M)抑制剂(6a^6o),其结构经~1H NMR,^(13)C NMR和HR-MS(ESI)表征。分别采用ELISA法和SRB法测定了6a^6o的体外酪氨酸激酶抑制活性和体外抗肿瘤活性。结果表明:6l对EGFR^(T790M)/L858R的抑制活性最好,其IC_(50)为45. 6±18. 8 nmol·L^(-1),优于先导化合物N-{1-[(1R,4R)-4-羟基环己基]-7-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基}-3-(三氟甲基)苯甲酰胺(6,IC_(50)为136. 7±9. 1 nmol·L^(-1)),且对EGFR^(T790M)的选择性高达219倍; 6a,6e,6h和6i对人肺腺癌细胞(NCI-1975)的抑制活性较好,其IC_(50)值分别为1. 929±0. 347,2. 168±0. 819,2. 335±0. 787和1. 930±0. 529μmol·L^(-1),优于先导化合物6(2. 653±1. 395μmol·L^(-1))。

关键词： 1-氟-2-硝基芳烃反式-4-氨基环己醇盐酸盐 2-氨基苯并咪唑 EGFR^T790M 抑制剂合成抗肿瘤活性

维普期刊数据库

组蛋白去乙酰酶HDAC7通过调节c-Myc表达影响肿瘤细胞增殖和衰老

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

组蛋白去乙酰酶HDAC7通过调节c-Myc表达影响肿瘤细胞增殖和衰老

2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：朱才华陈勤童林江耿美玉丁健中国科学院上海药物研究所肿瘤药理实验室

目的表观遗传的变异在肿瘤形成和发展过程中的作用越来越受到重视,与肿瘤异常表观遗传状态密切相关的组蛋白去乙酰酶(histone deacetylase,HDAC)是肿瘤治疗的新靶点。然而,由于HDAC家族成员多样,底物丰富,参与细胞多种生理过程,因此在...

目的表观遗传的变异在肿瘤形成和发展过程中的作用越来越受到重视,与肿瘤异常表观遗传状态密切相关的组蛋白去乙酰酶(histone deacetylase,HDAC)是肿瘤治疗的新靶点。然而,由于HDAC家族成员多样,底物丰富,参与细胞多种生理过程,因此在很大程度上HDAC对肿瘤的调节作用还没有被阐明。本实验通过对肿瘤细胞中8种HDAC的RNA干扰,发现HDAC7在肿瘤细胞周期进行和衰老过程发挥重要的调控作用,证实c-Myc是HDAC7生物学功能的关键下游分子并探索了c-Myc的调节机制。方法1.我们设计了8种HDAC家族成员的RNA干扰序列,对肿瘤细胞中特定HDAC的表达水平进行有效抑制。2.流式细胞术和western blot实验分别检测细胞周期的变化和细胞周期调节蛋白表达的改变。3.构建四羟他莫昔芬调控的过表达c-Myc的HeLa-Myc细胞株,验证c-Myc是否为HDAC7的关键下游效应分子。4.β-半乳糖苷酶染色法检测细胞的衰老。***-time PCR、荧光素酶检测法、放线菌素阻断发和染色质免疫沉淀等实验检测HDAC7调节c-Myc mRNA水平的机制。结果在8种HDAC中HDAC7的RNA干扰导致了最为显著的细胞增殖抑制现象。HDAC7的RNA干扰导致多种肿瘤细胞产生G1/S周期阻滞,并有效抑制c-Myc蛋白的表达,上调p21和p27的蛋白水平,导致细胞β-半乳糖苷酶染色增加。四羟他莫昔芬处理HeLa-Myc细胞株可以逆转HDAC7干扰导致的周期阻滞,下降p21和p27的蛋白水平,并且抑制细胞衰老现象的发生。Real-time PCR证明HDAC7影响了c-Myc的mRNA水平。HDAC7的下调导致c-Myc基因的外显子3与RNA聚合酶Ⅱ的结合下降,而与c-Myc mRNA稳定性及启动子活性无关。结论HDAC7通过调节c-Myc的表达参与调控肿瘤细胞的周期进行和衰老。HDAC7正向调控c-Myc表达,而后者可以有效抑制p21和p27的蛋白水平,使细胞周期持续进行。c-Myc的表达也是HDAC7抑制肿瘤细胞发生衰老的关键分子。HDAC7通过影响RNA聚合酶H与c-Myc基因的结合而调节c-Myc mRNA的延伸和终止。本实验首次发现和探索了HDAC7在肿瘤发生发展中的作用及相关机制,提示HDAC7可能是极富潜力的抗肿瘤药物作用靶点,丰富了对组蛋白去乙酰酶参与肿瘤生物学过程的认识。

关键词：

缺氧诱导因子HIF-1α表达上调与雷公藤甲素对人卵巢癌SK-OV-3的细胞毒性作用相关

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

缺氧诱导因子HIF-1α表达上调与雷公藤甲素对人卵巢癌SK-OV-3的细...

2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：周兆丽缪泽鸿于冰蒋轶童林江丁健沈阳药科大学生命科学与生物制药学院药理教研室中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室肿瘤药理课题组

缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)是调控组织细胞对缺氧适应性反应的转录因子,包括HIF-1、HIF-2、HIF-3;其中HIF-1因普遍表达于各组织、调控基因众多而备受关注。HIF-1由、亚基组成,亚基为组成性表达;而亚基的水平则受环...

缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)是调控组织细胞对缺氧适应性反应的转录因子,包括HIF-1、HIF-2、HIF-3;其中HIF-1因普遍表达于各组织、调控基因众多而备受关注。HIF-1由、亚基组成,亚基为组成性表达;而亚基的水平则受环境氧浓度等多种因素影响,是决定HIF-1转录活性的主要因素。通常认为,HIF-1与肿瘤发生发展密切相关;但也有报道HIF-1通过抑制增殖及促进凋亡发挥抑瘤作用,缺失HIF-1的畸胎瘤生

关键词：

多靶点酪氨酸激酶抑制剂Al3810抗肿瘤作用机制研究

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

多靶点酪氨酸激酶抑制剂Al3810抗肿瘤作用机制研究

2011医学科学前沿论坛第十二届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：周远锋林莉萍陈奕童林江温微微谢华丁健中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室肿瘤药理课题组

血管新生在肿瘤的发生发展以及肿瘤转移的过程中起着重要的作用,通过抑制肿瘤组织内的血管新生来抑制肿瘤生长是抗肿瘤药物研发的一个重要策略。多种酪氨酸激酶如VEGFR、FGFR、PDGFR等与肿瘤的血管新生密切相关。在相应生长因子(VEGF/b-... 详细信息

血管新生在肿瘤的发生发展以及肿瘤转移的过程中起着重要的作用,通过抑制肿瘤组织内的血管新生来抑制肿瘤生长是抗肿瘤药物研发的一个重要策略。多种酪氨酸激酶如VEGFR、FGFR、PDGFR等与肿瘤的血管新生密切相关。在相应生长因子(VEGF/b-FGF)的刺激下,

关键词：多靶点酪氨酸激酶抑制剂抗肿瘤机制化合物AL3810 血管新生

酪氨酸激酶EGFR和ErbB2双重抑制剂AST-6的抗肿瘤作用以及机理研究

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

酪氨酸激酶EGFR和ErbB2双重抑制剂AST-6的抗肿瘤作用以及机理研究

2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：林莉萍姜勇谢华代梅童林江任晓维郭建辉丁健中国科学院上海药物研究所上海艾力斯医药科技有限公司

研究目的:对新型喹唑啉类衍生物AST-6进行抗肿瘤作用以及机理研究,以评价其抗肿瘤活性并揭示其分子作用机理,并为AST-6实施临床试验提供临床前的实验依据。研究方法:采用ELISA法研究AST-6对多种酪氨酸激酶的抑制作用,明确AST-6的激酶抑...

研究目的:对新型喹唑啉类衍生物AST-6进行抗肿瘤作用以及机理研究,以评价其抗肿瘤活性并揭示其分子作用机理,并为AST-6实施临床试验提供临床前的实验依据。研究方法:采用ELISA法研究AST-6对多种酪氨酸激酶的抑制作用,明确AST-6的激酶抑制作用及其选择性;采用稀释法进行酶动力学检测研究AST-6在分子水平对ErbB2抑制是否具有可逆性;通过Western Blot法研究AST-6对EGFR、ErbB2以及下游信号关键分子Erk和Akt的磷酸化抑制作用;采用SRB法检测AST-6对EGFR和ErbB2表达水平不同的人肿瘤细胞以及正常细胞的增殖抑制作用;选择EGFR和ErbB2表达不同的人卵巢癌、肺癌和乳腺癌裸小鼠皮下移植瘤模型以及HER2高表达转基因小鼠的自发性乳腺癌模型研究AST-6的选择性抗肿瘤作用。研究结果:应用ELISA法研究了AST-6在分子水平对EGFR、ErbB2等八种酪氨酸激酶的抑制活性,结果表明AST-6对EGFR和ErbB2具有显著的选择性抑制作用,其IC50分别为0.5 nM和3.0 nM,强于阳性对照药Lapatinib,而对其他6种酪氨酸激酶则无明显的抑制作用;以上结果提示,AST-6为选择性EGFR和ErbB2双重抑制剂。为进-步分析AST-6与ErbB2激酶的结合特性,采用稀释法进行了AST-6对ErbB2激酶结合的可逆性动力学分析,研究结果表明AST-6为ErbB2不可逆抑制剂,而Lapatinib为一慢解离抑制剂。选择EGFR中等程度表达、ErbB2高表达的人卵巢癌SK-OV-3细胞,研究AST-6对生长因子刺激的信号转导通路影响,结果显示AST-6在0.01μM时即显著抑制EGFR、ErbB2及其下游信号分子Erk1/2、AKT的磷酸化;与相同浓度的Lapatinib相比,AST-6作用更强;提示AST-6通过抑制EGFR与ErbB2酪氨酸激酶活性,进而下调其下游的ERK1/2-MAPK和PI3K-AKT信号转导通路,导致肿瘤细胞增殖抑制。肿瘤细胞增殖抑制研究结果表明,AST-6对人乳腺癌、肺癌、卵巢癌等不同组织来源的13株人肿瘤细胞的生长具有明显抑制作用,其中尤以对ErbB2高表达的人乳腺癌细胞BT474、人肺癌细胞Calu-3和EGFR高表达人皮肤鳞癌细胞A-431细胞的增殖抑制作用更强;AST-6对正常小鼠纤维母细胞NIH3T3的增殖无明显影响,而对ErbB2稳转高表达细胞NIH3T3/ErbB2则呈现生长增殖抑制作用;上述结果表明:AST-6对人肿瘤细胞增殖具有明显抑制作用,且这种作用对ErbB2、EGFR高表达人肿瘤细胞具有选择性抑制,而对正常细胞则无明显影响。选择ErbB2、EGFR不同表达程度的人卵巢癌、肺癌和乳腺癌裸小鼠皮下移植瘤模型,研究AST-6的体内抗肿瘤作用,结果表明AST-6对ErbB2高表达的人卵巢癌SK-OV-3、人肺癌Calu-3裸小鼠皮下移植瘤的生长抑制作用非常显著,在SKOV3上中高剂量(50 mg/kg,100 mg/kg)可达完全消退。其药效和耐受性明显好于阳性对照药Lapatinib;而对ErbB2不表达的人卵巢癌HO-8910、人肺癌A-549以及人乳腺癌MDA-MB-468裸小鼠皮下移植瘤则显示轻度抑制作用,但未达有效标准。为了进一步确证AST-6对ErbB2高表达肿瘤生长抑制的选择性作用,利用HER2高表达转基因小鼠的自发性乳腺癌模型研究了其对自发性乳腺癌的生长抑制作用,结果显示其对转基因小鼠自发性乳腺癌具有非常显著的生长抑制作用,该作用呈现出良好的量效关系,高剂量100 mg/kg可达完全消退,其抗肿瘤药效明显优于阳性对照药Lapatinib。研究结论:AST-6是一个具有创新化学结构的酪氨酸激酶EGFR和ErbB2双重不可逆抑制剂,其抗肿瘤作用和耐受性均明显优于已上市药物Lapatinib,为AST-6的Ⅰ类新药申报和临床研究提供了强有力的实验依据。

关键词：

二氢青蒿素促进癌蛋白c-MYC降解并诱发c-myc高表达的癌细胞凋亡

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

二氢青蒿素促进癌蛋白c-MYC降解并诱发c-myc高表达的癌细胞凋亡

2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：陆金健蒙凌华朱才华童林江林莉萍丁健中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室肿瘤药理组

目的:青蒿素是从药用植物青蒿中分离提取的具有过氧桥结构的倍半萜内脂类化合物,二氢青蒿素(DHA)是该类化合物体内代谢后的主要活性形式。近年来研究发现青蒿素类化合物除具有显著的抗疟疾作用外,还具有良好的体外抗肿瘤作用,并且在NCI6...

目的:青蒿素是从药用植物青蒿中分离提取的具有过氧桥结构的倍半萜内脂类化合物,二氢青蒿素(DHA)是该类化合物体内代谢后的主要活性形式。近年来研究发现青蒿素类化合物除具有显著的抗疟疾作用外,还具有良好的体外抗肿瘤作用,并且在NCI60株筛选细胞模型上显示出独特的作用机制,因此阐述其作用靶点和机理对于开发这类化合物具有重要意义。方法:将青蒿素类化合物对NCI60增殖抑制的IC与近8000个基因的表达水平进行比对;SRB或MTT法检测细胞存活率;PI单染和Annexin V/PI双染检测细胞凋亡;采用逆转录病毒稳定转染细胞,构建c-myc高表达和低表达细胞株;采用逐步筛选法筛选耐DHA的耐药细胞株;Real-time PCR检测mRNA水平;Western blot检测相关蛋白变化。结果:通过比对发现,癌基因c-myc的表达水平与青蒿素类化合物抗肿瘤活性高度相关(r=0.585,p<0.0001)。DHA有效诱导c-myc高表达的HL-60和HCT116细胞凋亡,而c-myc低表达的A549和MDA-MB-231细胞对DHA不敏感。稳定下调HCT116细胞c-MYC的表达导致该细胞对DHA诱导的凋亡耐受。相反的,若在NIH3T3细胞中高度表达c-MYC,DHA诱导的细胞凋亡升高。DHA能有效下调HL-60和HCT116细胞中的癌蛋白c-MYC,而对A549和MDA-MB-231细胞中的c-MYC蛋白水平基本没有影响。通过长期给予DHA而筛选得到的对DHA耐受的细胞株HCT116/R对其他青蒿素类化合物均产生耐受。HCT116/R细胞c-MYC的蛋白水平较之亲本细胞显著降低,且DHA只能微弱下调其c-MYC水平。进一步研究发现,药理浓度的DHA并不影响c-myc的mRNA水平,但加速了其蛋白降解。蛋白酶体抑制剂MG-132能显著逆转DHA导致的c-MYC降解。用LiCl抑制GSK-3活性后也能显著逆转c-MYC蛋白的下调,表明DHA是通过磷酸化c-MYC蛋白58位苏氨酸后通过蛋白酶体途径导致其降解的。结论:由于c-myc的表达与青蒿素类化合物的活性呈显著的正相关,且该类化合物又能显著下调癌蛋白c-MYC,而c-myc在多数恶性肿瘤中高度激活,提示青蒿素类化合物用于肿瘤治疗的良好前景。

关键词：