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酶法生产7-氨基头孢烷酸的研究进展

现代化工 2002年第12期22卷 18-22页

作者：罗晖李强童忆舟司颖涛沈忠耀清华大学化工系北京100084

氨基头孢烷酸 (7 ACA)是生产头孢菌素的重要原料 ,目前都由头孢菌素C通过化学法或生物酶法生产。综述了利用酶法生产 7 ACA的研究进展 ,其中涉及催化过程所用两种酶 (D 氨基酸氧化酶和GL 7 ACA酰化酶 )的酶学特性、表达、纯化。

关键词：酶法 7-氨基头孢烷酸研究进展 D-氨基酸氧化酶 GL-7-ACA酰化酶头孢菌素C

三角酵母D-氨基酸氧化酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达

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微生物学报 2004年第3期44卷 336-339页

作者：罗晖童忆舟李强于慧敏沈忠耀清华大学化工系北京100084

从三角酵母中提取总RNA ,反转录后进行PCR扩增得到D 氨基酸氧化酶 (D AminoAcidOxidase ,DAAO)基因 ,经测序可知 ,与文献中三角酵母的DAAO基因序列的同源性在 99%以上。将DAAO基因用NcoⅠ和BamHⅠ双酶切后 ,与相同酶切的大肠杆菌表达载... 详细信息

从三角酵母中提取总RNA ,反转录后进行PCR扩增得到D 氨基酸氧化酶 (D AminoAcidOxidase ,DAAO)基因 ,经测序可知 ,与文献中三角酵母的DAAO基因序列的同源性在 99%以上。将DAAO基因用NcoⅠ和BamHⅠ双酶切后 ,与相同酶切的大肠杆菌表达载体pET 2 8a连接 ,转化大肠杆菌TOP 1 0F′,并筛选得到重组质粒pET DAAO ,转化BL2 1 (DE3)感受态细胞 ,得到重组大肠杆菌BL2 1 (DE3) pET DAAO。对重组大肠杆菌中的D 氨基酸氧化酶进行了诱导表达 ,考察了诱导温度、菌浓度、诱导剂IPTG用量以及溶氧等因素对酶活的影响。结果表明 ,在 2 8℃、菌浓度 (OD6 0 0 ) 1 0、IPTG浓度 1mmol L时 ,DAAO酶活最高达 2 3 3U mL。研究进一步显示 ,用廉价无毒的乳糖可以替代IPTG进行诱导 ,当乳糖浓度为 2mmol L ,DAAO酶活可达 2 2 7U mL。经过补料分批培养和乳糖诱导 ,DAAO酶活可以达到 1 75U mL。

关键词： D-氨基酸氧化酶三角酵母大肠杆菌乳糖

产GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达

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微生物学通报 2004年第4期31卷 38-42页

作者：罗晖胡晓佳周航童忆舟于慧敏李强沈忠耀清华大学化工系生物化学研究所北京100084

为了实现GL 7 ACA酰化酶在大肠杆菌中的成功表达 ,将GL 7 ACA酰化酶基因用PCR的方法去除其信号肽序列 ,并将其连接到质粒pET 2 8a ,通过筛选得到了表达GL 7 ACA酰化酶的重组菌BL2 1 (DE3) /pET ACY。分别考察了诱导温度、菌浓 (OD60 0 ... 详细信息

为了实现GL 7 ACA酰化酶在大肠杆菌中的成功表达 ,将GL 7 ACA酰化酶基因用PCR的方法去除其信号肽序列 ,并将其连接到质粒pET 2 8a ,通过筛选得到了表达GL 7 ACA酰化酶的重组菌BL2 1 (DE3) /pET ACY。分别考察了诱导温度、菌浓 (OD60 0 )、诱导剂IPTG的用量等因素对重组菌表达GL 7 ACA酰化酶的影响。在优化条件下 ,GL 7 ACA酰化酶酶活可达 2 66U/L。GL 7 ACA酰化酶经一步DEAE Sepharose纯化即可达到 80 %的纯度 ,酶活收率为 5 0 %。

关键词： GL-7-ACA酰化酶大肠杆菌表达

三角酵母D-氨基酸氧化酶的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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三角酵母D-氨基酸氧化酶的克隆及其在大肠杆菌中的表达

GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达

第四届中国酶工程学术交流讨论会

作者：罗晖童忆舟胡晓佳周航于慧敏李强沈忠耀清华大学化工系

＜正＞7-氨基头孢烷酸（7-aminocephalosporanic acid,7-ACA）是医药工业生产半合成头孢菌素的重要中间体,一般由头孢菌素C先后经D-氨基酸氧化酶（D-amino acid oxidase,DAAO）和GL-7-ACA酰化酶两步酶催化,脱去其侧链得到。D-氨基酸氧... 详细信息

＜正＞7-氨基头孢烷酸（7-aminocephalosporanic acid,7-ACA）是医药工业生产半合成头孢菌素的重要中间体,一般由头孢菌素C先后经D-氨基酸氧化酶（D-amino acid oxidase,DAAO）和GL-7-ACA酰化酶两步酶催化,脱去其侧链得到。D-氨基酸氧化酶是一种辅酶为FAD的黄素蛋白,是7-ACA生产中的关键酶之一。本文的目的是开发以基因工程菌为载体的高酶活的新的催化体系。为此,本文从三角酵母中提取总RNA,反转录后进行PCR扩增,得到DAAO基因,经测序可知,与文献中三角酵母DAAO基因序列的同源性在99%以上。将

关键词： D-氨基酸氧化酶基因克隆三角酵母大肠杆菌基因表达

来源： cnki会议评论

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GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达

第四届中国酶工程学术交流讨论会

作者：罗晖胡晓佳周航童忆舟于慧敏李强沈忠耀清华大学化工系

＜正＞7-氨基头孢烷酸（7-aminocephalosporanic acid,7-ACA）是医药工业生产半合成头孢菌素的重要中间体,一般由头孢菌素C经D-氨基酸氧化酶和GL-7-ACA酰化酶两步酶催化,脱去其侧链得到。本文的目的是开发以基因工程菌为载体的新的高酶... 详细信息

＜正＞7-氨基头孢烷酸（7-aminocephalosporanic acid,7-ACA）是医药工业生产半合成头孢菌素的重要中间体,一般由头孢菌素C经D-氨基酸氧化酶和GL-7-ACA酰化酶两步酶催化,脱去其侧链得到。本文的目的是开发以基因工程菌为载体的新的高酶活的催化体系。为了提高GL-7-ACA酰化酶在大肠杆菌中的表达,设计了去除GL-7-ACA酰化酶自身信号肽的引物,并以GL-7-ACA酰化酶基因的重组质粒pGEMT-ACY为模

关键词： GL-7-ACA酰化酶大肠杆菌催化体系头孢菌素

来源： cnki会议评论

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高职院校产教融合能力内涵、评价与建设

高等工程教育研究 2025年第1期 139-145页

作者：杨晓珍施星君毛海舟浙江工贸职业技术学院

对于当前产教融合存在的实践困境，高职院校与其抱怨外部环境或机制制约，不如主动提升自身产教融合能力。产教融合能力是高职院校能够具备高水平推进产教融合工作并达到预期目标的条件、资质和内在要求，包含组织能力、场域能力和动态... 详细信息

对于当前产教融合存在的实践困境，高职院校与其抱怨外部环境或机制制约，不如主动提升自身产教融合能力。产教融合能力是高职院校能够具备高水平推进产教融合工作并达到预期目标的条件、资质和内在要求，包含组织能力、场域能力和动态能力。基于此建构了3个维度、7个子类、23个指标、70个观测点的评价指标体系，并以浙江省内20所高职院校为例测度综合产教融合能力与产教融合投入效率，结果具有一定实际价值。鉴于此，高职院校产教融合能力建设不仅要“修炼内功”,提升自身“硬实力”和“软实力”,更要着力增强场域能力和动态能力，以提升在产教融合场域中的“巧实力”。

关键词：高职院校产教融合能力评价

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铝盐对磷酸钾镁水泥性能和水化的影响

硅酸盐学报 2025年

作者：许碧莞张秋实赵翊舟同济大学土木工程学院

铝盐能够延缓磷酸钾镁水泥凝结，但不同铝盐对其性能和水化的影响差异和机理尚未清晰。通过凝结时间测试、强度测试、水化热实验、XRD衍射、热重和Fourier红外光谱分析、pH值与电导率测试以及离子浓度测试实验研究了3种常见铝盐对磷酸... 详细信息

铝盐能够延缓磷酸钾镁水泥凝结，但不同铝盐对其性能和水化的影响差异和机理尚未清晰。通过凝结时间测试、强度测试、水化热实验、XRD衍射、热重和Fourier红外光谱分析、pH值与电导率测试以及离子浓度测试实验研究了3种常见铝盐对磷酸钾镁水泥性能和水化的影响。结果表明：与等质量掺量的硼酸钠相比，AlCl3、Al(NO3)3和Al2(SO4)3作用下的净浆凝结时间可分别延长80%、45%和25%，表现相对较好缓凝作用。相比Al2(SO4)3和Al(NO3)3，AlCl3对净浆体积稳定性影响较为明显，导致体积膨胀与开裂。添加Al2(SO4)3和Al(NO3)3均会降低净浆早期强度，其中Al2(SO4)3弱化作用主要发生在3 h之前，而Al(NO3)3主要在12 h之前，与其较好缓凝作用相符；但二者对净浆后期强度无不利影响。添加Al(NO3)3和Al2(SO4)3能降低水化体系pH，延缓水化进程，降低水化热，并轻微抑制钾基-鸟粪石生成。铝盐中Al3+沉淀为无定型含铝物相，而NO3–和SO42–在低水灰比下分别沉淀为硝酸钾和硫酸钾，影响宏观性能。

关键词：磷酸钾镁水泥铝盐凝结力学性能水化

天牛群搜索算法在机械臂时间最优轨迹规划的应用

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机械科学与技术 2025年

作者：曹梅赵建勇陈稳舟王成光杭州电子科技大学计算机学院

针对在机械臂的时间最优轨迹规划中，常见的智能优化方法存在全局搜索能力差和稳定性不佳的问题，提出了一种基于天牛群搜索算法的轨迹规划方法。该方法以笛卡尔空间中机械臂末端直线路径作为约束条件，利用3-5-3型连续多段多项式构造... 详细信息

针对在机械臂的时间最优轨迹规划中，常见的智能优化方法存在全局搜索能力差和稳定性不佳的问题，提出了一种基于天牛群搜索算法的轨迹规划方法。该方法以笛卡尔空间中机械臂末端直线路径作为约束条件，利用3-5-3型连续多段多项式构造机械臂关节空间轨迹模型，采取桥接分批优化策略降低优化复杂度，以及使用群智能优化理论和莱维飞行建立天牛群搜索算法，使轨迹运动时间达到最优。通过在实际机械臂上的实验结果表明，相比较于ISSA、PSO和CS，天牛群搜索算法的运动时间分别缩短了9.35%、8.91%和3.43%，并且在多次寻优中拥有更小的时间方差，表现出更优越的全局寻优性和稳定性。

关键词：机械臂轨迹规划天牛群搜索算法连续多段多项式桥接分批优化

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考虑出行链信息的城际旅客组合出行决策建模

北京交通大学学报 2025年

作者：鲍薪宇张琦肖雅玲纪羽舟北京交通大学交通运输学院

针对考虑出行链信息的城际旅客组合出行决策问题，开展出行链信息对城际旅客组合出行决策的影响研究。基于乘客出行的非集计理论，考虑离散型变量出行方式和连续型变量出发时间不相互独立的性质，建立Copula联合模型。针对北京—太原的... 详细信息

针对考虑出行链信息的城际旅客组合出行决策问题，开展出行链信息对城际旅客组合出行决策的影响研究。基于乘客出行的非集计理论，考虑离散型变量出行方式和连续型变量出发时间不相互独立的性质，建立Copula联合模型。针对北京—太原的出行场景，通过不同出行链信息的对照，设计问卷调查旅客的组合出行决策，应用构建的Copula联合模型分析对城际出行方式和出发时间有显著影响的因素。结果表明：当已知不同的出行链信息时，出行者的组合出行决策显著不同；根据Copula参数的检验结果，验证了出行方式和出发时间的相关性；此外，Copula联合模型相比独立的多项Logit模型和对数线性回归模型具有更好的预测精度。

关键词：城市交通组合出行出行链 Copula联合模型问卷调查