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基于NF-кB信号通路萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2022年

作者：游绍伟易旭赵琦王文素杨玲何典城童平珍王学勇詹亚梅贵州中医药大学第二附属医院重庆长寿区人民医院北京中医药大学贵州省人民医院

目的：探析萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis， CAG）的干预作用及其可能的机制。方法：90只SD大鼠随机分为6组：正常对照组，模型组，萎胃通调汤高、中、低剂量干预组，胃复春对照组，每组15只，采用N-甲...

目的：探析萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis， CAG）的干预作用及其可能的机制。方法：90只SD大鼠随机分为6组：正常对照组，模型组，萎胃通调汤高、中、低剂量干预组，胃复春对照组，每组15只，采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine， MNNG）多因素复合造模法制备CAG大鼠模型。经组织病理学检测鉴定模型制备成功后，给药组分别灌胃给予浓度为18 g·kg;·d;、9 g·kg;·d;、4.5 g·kg;·d;的萎胃通调汤及0.45 g·kg;·d;胃复春水溶液，12周后取大鼠胃黏膜组织经H&E染色后，光学显微镜下观察胃黏膜CAG相关病理学表现；采用实时荧光定量PCR法（Quantitative Real-Time PCR， qRT-PCR）、免疫组织化学法（Immunohistochemistry， IHC）及蛋白免疫印迹法（Western Blot）分别分析大鼠胃黏膜组织核因子-κB（Nuclear factor kappa-B，NF-кB）信号通路关键指标mRNA及蛋白表达水平。结果：CAG大鼠胃黏膜固有腺体排列和形态极不规则，伴不同程度减少或消失，固有层可见炎性细胞浸润，约48.4%出现肠上皮化生表现。萎胃通调汤处理后显著改善CAG大鼠胃黏膜固有腺体减少与肠化生等病理改变，呈一定的剂量依赖关系。萎胃通调汤及胃复春干预后CAG大鼠胃黏膜组织环氧化酶2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、NF-κB P65、白细胞介素-（Interleukin-1α、1β、10、8α、8β，IL-1α、IL-1β、IL-10、IL-8α、IL-8β）mRNA及COX-2、NF-κB P65、IL-10蛋白表达水平显著下调（P＜0.01），其中萎胃通调汤高剂量干预组相应指标表达水平接近正常对照组（P＞0.05）。结论：萎胃通调汤能改善甚至逆转CAG大鼠病变胃黏膜，其作用机制可能与萎胃通调汤下调CAG大鼠胃黏膜组织NF-кB信号通路相关指标mRNA及蛋白表达水平有关。

关键词：

萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变及IKKβ,Bcl-2表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2021年第6期27卷 55-61页

作者：游绍伟易旭赵琦王文素杨玲童平珍王学勇詹亚梅贵州中医药大学第二附属医院贵阳550003 重庆长寿区人民医院重庆401220 北京中医药大学北京102488 贵州省人民医院贵阳550002

目的:探讨萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变大鼠胃黏膜病理及IκB激酶β(IKKβ),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达水平的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、胃复春组、萎胃通调汤高、中、低剂量组。N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍... 详细信息

目的:探讨萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变大鼠胃黏膜病理及IκB激酶β(IKKβ),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达水平的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、胃复春组、萎胃通调汤高、中、低剂量组。N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)复合造模法制备CAG癌前病变大鼠模型。萎胃通调汤高、中、低剂量组、胃复春组分别灌胃给予24,12,6 g·kg^(-1)萎胃通调汤及0.45 g·kg^(-1)胃复春混悬液,1次/d,连续12周。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃黏膜组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),免疫组织化学法(IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胃黏膜组织IKKβ,Bcl-2 mRNA及蛋白水平表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜组织镜下可见100%固有腺体萎缩及轻-重度肠上皮化生,25%低级别上皮内瘤变。胃复春、萎胃通调汤均能改善模型大鼠胃黏膜固有腺体萎缩,中、重度肠上皮化生及低级别上皮内瘤变组织病理损伤,其中高剂量效果明显;与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜IKKβ,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.01);与模型组比较,胃复春组与萎胃通调汤高、中、低剂量组大鼠胃黏膜IKKβ,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05,P<0.01),呈一定的剂量依赖关系,其中萎胃通调汤高剂量组IKKβ,Bcl-2 mRNA和蛋白呈现与正常组相似的表达水平。结论:萎胃通调汤能改善甚至逆转大鼠CAG癌前病变胃黏膜,其干预机制可能与通过下调胃黏膜IKKβ,Bcl-2表达有关。

关键词：萎胃通调汤慢性萎缩性胃炎胃癌前病变 IκB激酶β B淋巴细胞瘤-2

连朴饮含药血清对LPS干预肺泡Ⅱ型上皮细胞GR、TNF-α基因及蛋白表达的影响

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时珍国医国药 2020年第1期31卷 38-41页

作者：褚璨灿朱星陈云志师为人童平珍徐昌君贵州中医药大学贵州贵阳550025

目的探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)炎症反应后,连朴饮含药血清对其糖皮质激素受体(GR)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因及蛋白表达的影响,为连朴饮防治急性肺损伤(ALI)提供现代医学依据。方法制备含药血清,体外培养并鉴定大鼠原代AECⅡ,用MT... 详细信息

目的探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)炎症反应后,连朴饮含药血清对其糖皮质激素受体(GR)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因及蛋白表达的影响,为连朴饮防治急性肺损伤(ALI)提供现代医学依据。方法制备含药血清,体外培养并鉴定大鼠原代AECⅡ,用MTT法检测不同浓度含药血清对AECⅡ增殖的影响,筛选增值率最高的浓度用于后续实验;将AECⅡ随机分为4组,对照组、模型组、阳性药含药血清组、连朴饮含药血清组,除对照组外,其余各组在常规培养基中加入2μg/mL脂多糖(LPS)培养24h后,按分组给予相应的含药血清培养12h,运用PCR、Western blot法检测各组TNF-α和GR基因及蛋白的表达。结果经鉴定原代AECⅡ培养成功;阳性药含药血清、连朴饮含药血清对AECⅡ都有促增殖作用,两种含药血清浓度为5%时,促增值作用最佳;与模型组相比,连朴饮含药血清能显著上调GR、下调TNF-α基因和蛋白的表达(P<0.01)。结论连朴饮通过上调GR、下调TNF-α的表达减轻AECⅡ炎症损伤,从而起到防治ALI的作用,连朴饮是否以调控GR的表达为靶点,进而抑制TNF-α的表达,将在后期作进一步研究。

关键词：急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞连朴饮肿瘤坏死因子α 糖皮质激素受体

急性前髓细胞性白血病细胞诱导分化实验的研究进展

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现代生物医学进展 2009年第15期9卷 2960-2964页

作者：贺婧童平珍罗招阳曹建国南华大学肿瘤研究所湖南衡阳421001 湖南师范大学医学院湖南长沙410006

急性前髓细胞性白血病或急性早幼粒细胞白血病(APL)是一种特殊类型的血液系统恶性克隆性疾病,其特点是异常早幼粒细胞无限增殖伴分化受阻,是白血病中最危重的一种类型。95%以上的APL患者具有(t15;17)染色体异常,形成PML/RAR融合基因,几... 详细信息

急性前髓细胞性白血病或急性早幼粒细胞白血病(APL)是一种特殊类型的血液系统恶性克隆性疾病,其特点是异常早幼粒细胞无限增殖伴分化受阻,是白血病中最危重的一种类型。95%以上的APL患者具有(t15;17)染色体异常,形成PML/RAR融合基因,几乎存在于所有的APL细胞中,成为APL细胞的一个特异性标志,是APL发病重要分子基础。自从全反式维甲酸(ATRA)成功用于临床诱导APL分化以来,对诱导分化剂的作用机制的研究已取得很大的进展。本文主要对APL细胞遗传学和分子生物学特征、发病机制、诱导分化机制、分化后细胞表型变化等方面对APL细胞诱导分化实验的研究进展进行综述。

关键词：急性前髓细胞性白血病分化

连朴饮含药血清对肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症反应的干预机制

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中药药理与临床 2020年第3期36卷 66-71页

作者：禇璨灿朱星陈云志师为人童平珍徐昌君贵州中医药大学贵阳550002

目的:基于GR基因沉默探讨连朴饮改善急性肺损伤(ALI)炎症反应的机制。方法:构建沉默GR基因的慢病毒载体,制备含药血清,将培养的原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)随机分为9组:正常对照组、模型对照组、地塞米松0.2 mg/kg组、连朴饮9.3 g/kg... 详细信息

目的:基于GR基因沉默探讨连朴饮改善急性肺损伤(ALI)炎症反应的机制。方法:构建沉默GR基因的慢病毒载体,制备含药血清,将培养的原代肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)随机分为9组:正常对照组、模型对照组、地塞米松0.2 mg/kg组、连朴饮9.3 g/kg组、干扰对照组、GR干扰组、GR干扰模型组、GR干扰地塞米松0.2 mg/kg组、GR干扰连朴饮9.3 g/kg组;运用QRT-PCR法检测AECⅡ的GR基因沉默效率,运用QRT-PCR、Western blot法检测各组TNF-αmRNA及蛋白的表达,运用ELISA检测各组细胞上清液IL-8和IL-1β的含量,FITC-Dextran法检测细胞通透性。结果:与干扰对照组比较,GR干扰组的GR mRNA表达水平显著下调,GR mRNA沉默效率达67%(P<0.05或P<0.01);与连朴饮9.3 g/kg 5%含药血清组比较,GR干扰连朴饮组TNF-αmRNA及蛋白的表达显著上调,IL-8和IL-1β的含量、细胞通透性显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论:9.3 g/kg连朴饮5%含药血清能抑制TNF-α、IL-8和IL-1β分泌,降低细胞通透性,改善AECⅡ炎症反应,从而防治ALI,其部分通过GR为介导是改善AECⅡ炎症反应的作用途径之一。

关键词：连朴饮肺泡Ⅱ型上皮细胞急性肺损伤炎症糖皮质激素受体基因沉默

基于NF-κB信号通路探讨萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第2期29卷 88-97页

作者：游绍伟易旭赵琦王文素杨玲何典城童平珍王学勇詹亚梅贵州中医药大学第二附属医院贵阳550003 贵州省人民医院贵阳550002 重庆长寿区人民医院重庆401220 北京中医药大学北京102488

目的:探析萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)的干预作用及其可能的机制。方法:90只SD大鼠随机分为正常组,模型组,萎胃通调汤高、中、低剂量干预组,胃复春组6组,每组15只,采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)多因素复合造模法制备CA... 详细信息

目的:探析萎胃通调汤对大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)的干预作用及其可能的机制。方法:90只SD大鼠随机分为正常组,模型组,萎胃通调汤高、中、低剂量干预组,胃复春组6组,每组15只,采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)多因素复合造模法制备CAG大鼠模型。经组织病理学检测鉴定模型制备成功后,给药组分别灌胃给予18、9、4.5 g·kg^(-1)·d^(-1)的萎胃通调汤及0.45 g·kg^(-1)·d^(-1)胃复春水溶液,12周后取大鼠胃黏膜组织经苏木素-伊红(HE)染色后,光学显微镜下观察胃黏膜CAG相关病理学表现;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、免疫组织化学法(IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别分析大鼠胃黏膜组织核转录因子-κB(NF-κB)信号通路关键指标mRNA及蛋白表达水平。结果:CAG大鼠胃黏膜固有腺体排列和形态极不规则,伴不同程度减少或消失,固有层可见炎性细胞浸润,约48.4%出现肠上皮化生表现。萎胃通调汤处理后显著改善CAG大鼠胃黏膜固有腺体减少与肠化生等病理改变,呈一定的剂量依赖关系。与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜组织环氧合酶2(COX-2)、NF-κB p65、白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-10、IL-8α、IL-8βmRNA及COX-2、NF-κB p65、IL-10蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。萎胃通调汤及胃复春干预后CAG大鼠胃黏膜组织COX-2、NF-κB p65、IL-1α、IL-1β、IL-10、IL-8α、IL-8βmRNA及COX-2、NF-κB p65、IL-10蛋白表达水平显著下调(P<0.01),其中萎胃通调汤高剂量组相应指标表达水平接近正常组。结论:萎胃通调汤能改善甚至逆转CAG大鼠病变胃黏膜,其作用机制可能与萎胃通调汤下调CAG大鼠胃黏膜组织NF-κB信号通路相关指标mRNA及蛋白表达水平有关。

关键词：慢性萎缩性胃炎萎胃通调汤核转录因子-κB信号通路

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B7-H4在胃腺癌中的表达及临床意义

贵州医药 2010年第10期34卷 877-879页

作者：童平珍陈春燕阳帅贵阳中医学院第二附属医院病理科 550003 邵东县人民医院病理科衡阳市422800 南华大学第一附属医院病理科 421001

目的研究B7-H4蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义。方法应用S-P免疫组化法检测B7-H4蛋白在20例正常胃黏膜、50例胃腺癌中的表达情况。结果 B7-H4在胃癌中的阳性表达率(82%)高于正常胃黏膜组(10%),差异有显著意义(P0.05),而与组织学分级、... 详细信息

目的研究B7-H4蛋白在胃腺癌中的表达及临床意义。方法应用S-P免疫组化法检测B7-H4蛋白在20例正常胃黏膜、50例胃腺癌中的表达情况。结果 B7-H4在胃癌中的阳性表达率(82%)高于正常胃黏膜组(10%),差异有显著意义(P0.05),而与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 B7-H4在胃腺癌中表达上调,可能与胃腺癌的转移和预后相关。

关键词： B7-H4 胃腺癌免疫组化

基于肠道菌群探讨慢性阻塞性肺疾病肺肠同治的科学内涵

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现代中西医结合杂志 2023年第8期32卷 1086-1091页

作者：沈俊希朱星陈云志李文徐昌君童平珍贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550003

慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺失宣降,肠腑气机郁滞,多伴有肠道功能障碍等症。中医学认为“肺与大肠相表里”,中医临床运用肺肠同治法治疗COPD取得显著疗效。大肠为“传导之官”,是脏腑气机升降出入的重要环节;肠道菌群参与人体营养、... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺失宣降,肠腑气机郁滞,多伴有肠道功能障碍等症。中医学认为“肺与大肠相表里”,中医临床运用肺肠同治法治疗COPD取得显著疗效。大肠为“传导之官”,是脏腑气机升降出入的重要环节;肠道菌群参与人体营养、代谢功能、免疫调节等过程。肠道菌群结构及丰度影响COPD发生发展的病理过程,并通过胆汁酸、短链脂肪酸等代谢产物作用于远端器官,这与肺肠同病等中医理论相吻合。本文从肠道菌群理论的角度揭示了COPD之肺肠同病的病变本质,凸显中医学脏腑相关的理论内涵,使得中医肺肠同治法具有更为前沿的科学内涵,也为COPD等肺系疾病的临床辨治提供新的思路与方法。

关键词：肠道菌群慢性阻塞性肺疾病肺肠同治肺-肠轴

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萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜病变及IL-6表达的影响

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贵州中医药大学学报 2020年第6期42卷 10-15页

作者：王文素游绍伟詹亚梅易旭赵琦童平珍何典城贵州中医药大学第二附属医院贵州贵阳550003 贵州省人民医院贵州贵阳550002

目的:观察萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠胃黏膜病变的影响,并探讨其作用机制。方法:90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、萎胃通调汤高剂量组、萎胃通调汤中剂量组、萎胃通调汤低剂量组... 详细信息

目的:观察萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠胃黏膜病变的影响,并探讨其作用机制。方法:90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、萎胃通调汤高剂量组、萎胃通调汤中剂量组、萎胃通调汤低剂量组、胃复春对照组各15只。实验组大鼠采用N-甲基-N′-硝基-N′-亚硝基胍(MNNG)多因素复合法连续造模12周制备CAG大鼠实验模型,造模成功后分别灌胃给予萎胃通调汤高、中、低剂量组及胃复春对照组大鼠(18 g·kg^(-1)/d、9g·kg^(-1)/d、4.5g·kg^(-1)/d)剂量的萎胃通调汤及(0.45 g·kg^(-1)/d)胃复春水溶液,连续给药12周后收集大鼠胃黏膜组织,分别采用组织病理学HE染色、实时荧光定量(qRT-PCR)、免疫组化(IHC)及Western blot分析大鼠胃黏膜的病理情况和检测胃黏膜组织IL-6 mRNA及蛋白表达水平。结果:模型组大鼠胃黏膜固有腺体伴不同程度缺失、肠化,有大量炎性细胞浸润。萎胃通调汤能改善甚至逆转病变胃黏膜,萎胃通调汤及胃复春干预组胃黏膜组织IL-6 mRNA及蛋白表达水平较模型组显著下调(P0.05)。结论:萎胃通调汤能改善甚至逆转CAG大鼠病变胃黏膜,其作用机制可能与萎胃通调汤下调CAG大鼠胃黏膜组织IL-6 mRNA及蛋白表达有关。

关键词：慢性萎缩性胃炎萎胃通调汤 IL-6