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SD大鼠EGFR基因cDNA序列的分子克隆

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中国兽医学报 2011年第11期31卷 1672-1675页

作者：章金涛张明昊郑州大学实验动物中心河南郑州450052 河南中医学院基础医学院河南郑州450008

参考大鼠EGFR基因序列,用RT-PCR方法对SD大鼠EGFR基因cDNA序列进行克隆,获得了SD大鼠EGFR基因的全长4 127bp的cDNA序列(GenBank登录号HM801042),其中CDS长度为3 627bp,编码1 209个氨基酸。SD大鼠与国外报道的大鼠、小鼠、牛、猴、人等5... 详细信息

参考大鼠EGFR基因序列,用RT-PCR方法对SD大鼠EGFR基因cDNA序列进行克隆,获得了SD大鼠EGFR基因的全长4 127bp的cDNA序列(GenBank登录号HM801042),其中CDS长度为3 627bp,编码1 209个氨基酸。SD大鼠与国外报道的大鼠、小鼠、牛、猴、人等5个物种的EGFR基因cDNA序列的同源性分别为99.5%、92.9%、78.4%、83.4%、80.2%,其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为99.6%、95.9%、86.6%、89.0%、90.5%。这一结果表明了EGFR基因在进化过程中具有较高的保守性。通过比较SD大鼠EGFR基因与GenBank数据库中发布的EGFR基因的cDNA序列,本试验发现了10个SNP位点,其中5个没有改变氨基酸残基的性质,这一研究结果为EGFR基因的SNPs数据库提供了新的信息。

关键词：大鼠 EGFR基因分子克隆序列分析

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Hr突变体转基因小鼠的构建和表型分析

中国生物化学与分子生物学报 2016年第9期32卷 1054-1059页

作者：朱奎成徐存拴章金涛河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 郑州大学实验动物中心郑州450052

无毛基因(Hr)定位于8p12,在染色体上跨越14 kb,包含19个外显子。无毛基因的自发突变能引起人和动物毛发脱落及相关毛发疾病的产生。为深入研究Hr基因的功能,本文利用Gateway技术构建Hr表达载体,在该基因的3 427位引入点突变(G→A),通过... 详细信息

无毛基因(Hr)定位于8p12,在染色体上跨越14 kb,包含19个外显子。无毛基因的自发突变能引起人和动物毛发脱落及相关毛发疾病的产生。为深入研究Hr基因的功能,本文利用Gateway技术构建Hr表达载体,在该基因的3 427位引入点突变(G→A),通过显微注射建立转基因小鼠。采用PCR方法鉴定出阳性的转基因小鼠,确定首建鼠,通过与C57BL/6小鼠回交后互交数代建系。观察转基因小鼠毛发生长发育规律。结果表明,成功构建了pRP(Exp)-EF1A>m Hairless mutant>IRES/EGFP真核表达载体,通过与野生型小鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,第2代小鼠出生后14 d开始脱发,30 d左右脱落的毛发重新长出。取部分皮肤组织做石蜡切片,皮肤组织学观察发现,脱毛期无毛小鼠毛囊瓦解,真皮内形成大小不等的包囊,毛发重新生长时,真皮内见大量新生的毛囊。蛋白印迹实验表明,转基因小鼠脱发时HR蛋白表达量明显高于同龄阴性小鼠。本文成功建立稳定遗传的Hr突变的转基因小鼠品系,推测无毛基因突变引发转基因小鼠的脱发,为研究Hr基因的功能提供了良好的动物模型。

关键词：无毛基因转基因小鼠表型

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豫医无毛小鼠皮肤形态及超微结构观察

浙江大学学报（理学版） 2005年第6期32卷 678-684页

作者：章金涛方盛国浙江大学生命科学学院濒危野生动物保护遗传学及繁殖生物学教育部重点实验室

对豫医无毛小鼠及对照的有毛小鼠皮肤形态及超微结构进行了对比观察,结果发现豫医无毛小鼠出生后被毛状态正常,但是在12日龄前后开始从上眼睑脱毛,接着向头部、尾部扩展,整个脱毛过程约持续2周时间,结果除胡须外全部脱净,并终生不再生.... 详细信息

对豫医无毛小鼠及对照的有毛小鼠皮肤形态及超微结构进行了对比观察,结果发现豫医无毛小鼠出生后被毛状态正常,但是在12日龄前后开始从上眼睑脱毛,接着向头部、尾部扩展,整个脱毛过程约持续2周时间,结果除胡须外全部脱净,并终生不再生.脱毛后的豫医无毛小鼠内脏可视,随年龄的增长,皮肤角化程度和厚度增加,体表面积扩大,形成犀牛状褶痕;指甲过度生长,呈螺旋状弯曲,皮肤表面有淡黄色蜡样粘性物,而且随年龄增长,皮肤表面出现小的丘疹,胡须变得短而稀疏.电镜扫描发现脱毛前毛囊上部的毛管先变大,然后再脱毛,2月龄无毛小鼠皮肤表面有许多形状、大小不规则的泡沬样物质,沿着皮肤沟排列,无毛小鼠毛囊漏斗部极度扩张,内含一些角化样碎片,形成较大的椭圆囊,在真皮及皮下组织出现大小不等的包囊.至8月龄时,无毛小鼠皮肤表面为鳞片状角化物,真皮及皮下组织退化,弹性纤维排列凌乱,真皮及皮下组织几乎全部被几层大的真皮包囊充填.

关键词：无毛小鼠皮肤形态超微结构

豫医卷毛大鼠无毛基因cDNA序列的比较生物学分析

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郑州大学学报（医学版） 2016年第1期51卷 27-31页

作者：张明昊章金涛河南中医学院基础医学院医学机能实验室郑州450046 郑州大学实验动物中心郑州450052

目的:对豫医卷毛大鼠的无毛(Hr)基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Hr基因的c DNA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、野猪、家牛、普通猕猴、人、黑腹果蝇和桔小实蝇的Hr基因c DNA序列及其编码产物的氨基酸... 详细信息

目的:对豫医卷毛大鼠的无毛(Hr)基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Hr基因的c DNA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、野猪、家牛、普通猕猴、人、黑腹果蝇和桔小实蝇的Hr基因c DNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果:获得了豫医卷毛大鼠Hr基因全长5 232 bp的c DNA序列(Gen Bank登录号:KR109217)。豫医卷毛大鼠Hr c DNA与BN大鼠、小家鼠、野猪、家牛、普通猕猴、人、黑腹果蝇和桔小实蝇的同源性分别为99.8%、87.3%、67.3%、70.2%、80.8%、79.8%、29.8%和24.9%,氨基酸序列的同源性分别为100.0%、92.9%、75.4%、74.8%、76.0%、77.8%、7.4%和11.7%。结论:Hr基因在哺乳动物中具有一定的保守性,与昆虫等非哺乳类动物之间具有较大的差异性。

关键词：卷毛大鼠无毛基因同源性比较

豫医无毛小鼠分离近交系的建立及其遗传纯度测定

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Acta Genetica Sinica 2002年第3期29卷 221-225页

作者：章金涛王纯耀康巧珍杜献堂薛敬礼郑州大学医学院实验动物中心郑州450052

采用强迫杂合性兄妹交配方式培育携带无毛突变基因的分离近交系 ,然后用生化标记法、皮肤移植实验和毛色基因测试法对其进行遗传监测。并对其基本生物学特性进行了研究。结果育成了具有独特生物学特性的豫医无毛小鼠分离近交系。现已达... 详细信息

采用强迫杂合性兄妹交配方式培育携带无毛突变基因的分离近交系 ,然后用生化标记法、皮肤移植实验和毛色基因测试法对其进行遗传监测。并对其基本生物学特性进行了研究。结果育成了具有独特生物学特性的豫医无毛小鼠分离近交系。现已达 30代。生化标记法测定的 9条染色体上 13个生化标记位点全部纯合 ;同系异体间皮肤移植 10 0天后 ,未见排斥现象 ,为同系组织遗传性 ;与DBA/2交配进行的毛色基因测试 ,杂交的F1代相同 ,全部为野生色 ,基因型为AABBccDD。表明豫医无毛小鼠已成为一个达到国际标准的新品系。

关键词：豫医无毛小鼠近交系遗传监测生物学特性遗传纯度

豫医无毛小鼠分离近交系T细胞亚群和sIL-2R水平

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动物学杂志 2002年第4期37卷 18-20页

作者：康巧珍章金涛杜春燕杜献堂郑州大学生物工程系郑州450052 郑州大学河南省实验动物中心郑州450052 郑州大学医学院微生物与免疫教研室郑州450052

为研究豫医无毛小鼠分离近交系细胞免疫功能 ,采用单抗致敏的红细胞花环法和双抗夹心ELISA法分别对 2月龄、6月龄无毛小鼠及杂合子有毛小鼠T淋巴细胞亚群及可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)水平进行体外测定 ,结果表明 ,2月龄组无毛小鼠C... 详细信息

为研究豫医无毛小鼠分离近交系细胞免疫功能 ,采用单抗致敏的红细胞花环法和双抗夹心ELISA法分别对 2月龄、6月龄无毛小鼠及杂合子有毛小鼠T淋巴细胞亚群及可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)水平进行体外测定 ,结果表明 ,2月龄组无毛小鼠CD3 、CD4 、CD8阳性T细胞及CD4 CD8与有毛小鼠相比无显著性差异 ,sIL 2R水平无毛小鼠高于有毛小鼠 ,差异显著 (P <0 0 5 ) ;6月龄组无毛小鼠与有毛小鼠相比 ,CD4 无显著性差异 ,CD3 、CD4 CD8高于有毛小鼠 ,CD8、sIL 2R低于有毛小鼠 ,差异显著 (P <0 0 5 )。提示了豫医无毛小鼠分离近交系两种基因型小鼠细胞免疫功能有一定差异。

关键词：豫医无毛小鼠分离近交系 T细胞亚群 sIL-2R水平

豫医卷毛大鼠转化生长因子α基因的比较生物学分析

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郑州大学学报（医学版） 2014年第6期49卷 770-773页

作者：张明昊章金涛河南中医学院基础医学院医学机能实验室郑州450046 郑州大学实验动物中心郑州450052

目的:对豫医卷毛大鼠的转化生长因子α(TGFα)基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠TGFα的cD NA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的TGFαcD NA序列及其... 详细信息

目的:对豫医卷毛大鼠的转化生长因子α(TGFα)基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠TGFα的cD NA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的TGFαcD NA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果:获得了豫医卷毛大鼠TGFα基因全长970 bp的cD NA序列(GenB ank登录号:KF366251)。豫医卷毛大鼠与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的同源性分别为98.6%、95.0%、85.5%、85.3%、85.5%、86.3%、86.3%、73.2%、73.2%和56.8%,氨基酸序列的同源性分别为98.8%、96.9%、90.6%、90.6%、91.2%、91.9%、91.9%、72.6%、72.6%和38.8%。结论:TGFα基因在进化过程中具有较高的保守性,但不同物种之间也具有功能上的特异性。

关键词：卷毛大鼠转化生长因子α 同源性比较

豫医卷毛大鼠Krt71基因cDNA序列的比较生物学分析

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郑州大学学报（医学版） 2015年第6期50卷 757-760页

作者：张明昊章金涛河南中医学院基础医学院医学机能实验室郑州450046 郑州大学实验动物中心郑州450052

目的:对豫医卷毛大鼠的Krt71基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Krt71的c DNA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的Krt71 c DNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源... 详细信息

目的:对豫医卷毛大鼠的Krt71基因进行比较生物学分析。方法:采用PCR方法对豫医卷毛大鼠Krt71的c DNA序列进行克隆、测序,并与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的Krt71 c DNA序列及其编码产物的氨基酸序列进行同源性比较和系统遗传学分析。结果:获得了豫医卷毛大鼠Krt71基因全长1 573 bp的c DNA序列(Gen Bank登录号:KF303588)。豫医卷毛大鼠与BN大鼠、小家鼠、家牛、家绵羊、家猫、苏门答腊猩猩和人的同源性分别为99.9%、95.2%、88.5%、87.5%、88.0%、88.1%、88.1%,氨基酸序列的同源性分别为99.9%、98.9%、92.4%、91.2%、91.4%、92.3%、92.1%。结论:Krt71基因在哺乳动物进化过程中具有较高的保守性,是一个具有重要功能的"持家基因"。

关键词：卷毛大鼠 Krt71基因同源性比较

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豫医无毛小鼠血液学常规指标的测定与分析

动物学杂志 1998年第6期33卷 15-16页

作者：王纯耀宋国英章金涛康巧珍祝庆蕃河南医科大学实验动物中心

用血液学常规检查法对豫医无毛小鼠血液学ＲＢＣ、ＷＢＣ、ＢＰＣ、Ｈｂ及白细胞分类进行了测定。结果表明：豫医无毛小鼠雌雄间血液学５项指标均无显著性差异；１月龄比２月龄豫医无毛小鼠ＢＰＣ有显著增高，Ｐ＜００５；６月龄比１... 详细信息

用血液学常规检查法对豫医无毛小鼠血液学ＲＢＣ、ＷＢＣ、ＢＰＣ、Ｈｂ及白细胞分类进行了测定。结果表明：豫医无毛小鼠雌雄间血液学５项指标均无显著性差异；１月龄比２月龄豫医无毛小鼠ＢＰＣ有显著增高，Ｐ＜００５；６月龄比１月龄和２月龄豫医无毛小鼠ＷＢＣ计数有显著增高，Ｐ＜００５。目的在提供豫医无毛小鼠基础数据，为医学生物学研究提供背景资料。

关键词：豫医无毛小鼠小鼠血液学常规指标测定