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Effects of Aconitine on [Ca^(2+)] Oscillation in Cultured Myocytes of Neonatal Rats

Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2008年第5期28卷 499-503页

作者：刘艳章诗伟梁曼刘茜刘良 Department of Forensic Medicine Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Zhongshan Hospital of Hubei Province

In order to investigate the effects of aconitine on [Ca2＋] oscillation patterns in cultured myocytes of neonatal rats, fluorescent Ca2＋ indicator Fluo-4 NW and laser scanning confocal micro- scope （LSCM） were used to detect the real-time changes of [Ca2＋] oscillation patterns in the cultured myocytes before and after aconitine （1.0 μmol/L） incubation or antiarrhythmic peptide （AAP） and aconitine co-incubation. The results showed under control conditions, [Ca2＋] oscillations were irregu- lar but relatively stable, occasionally accompanied by small calcium sparks. After incubation of the cultures with aconitine, high frequency [Ca2＋] oscillations emerged in both nuclear and cytoplasmic regions, whereas typical calcium sparks disappeared and the average [Ca2＋] in the cytoplasm of the cardiomyocyte did not change significantly. In AAP-treated cultures, intracellular [Ca2＋] oscillation also changed, with periodic frequency, increased amplitudes and prolonged duration of calcium sparks. These patterns were not altered significantly by subsequent aconitine incubation. The basal value of [Ca2＋] in nuclear region was higher than that in the cytoplasmic region. In the presence or absence of drugs, the [Ca2＋] oscillated synchronously in both the nuclear and cytoplasmic regions of the same cardiomyocyte. It was concluded that although oscillating strenuously at high frequency, the average [Ca2＋] in the cytoplasm of cardiomyocyte did not change significantly after aconitine incuba- tion, compared to the controls. The observations indicate that aconitine induces the changes in [Ca2＋] oscillation frequency other than the Ca2＋ overload.

关键词： forensic toxicology aconitine [Ca2+] oscillation primary cell culture

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乌头类生物碱对心肌的毒性作用及分子毒理学研究进展

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中国法医学杂志 2009年第6期24卷 398-401页

作者：刘艳章诗伟周兰刘良华中科技大学同济医学院法医学系湖北武汉430030 湖北省中山医院中心实验室湖北武汉430033

乌头属植物是被子植物亚门毛茛科中一类重要的有毒植物,也是我国最早有记载的药用有毒植物之一;其块根中多含有剧毒的二萜类双酯型生物碱?乌头碱,因个体差异、用法不当以及误服或投毒等原因而发生乌头中毒、甚至死亡的报道屡见不鲜。目... 详细信息

乌头属植物是被子植物亚门毛茛科中一类重要的有毒植物,也是我国最早有记载的药用有毒植物之一;其块根中多含有剧毒的二萜类双酯型生物碱?乌头碱,因个体差异、用法不当以及误服或投毒等原因而发生乌头中毒、甚至死亡的报道屡见不鲜。目前,对乌头碱的研究多局限在临床救治方面,缺乏对乌头碱毒性作用机制研究。本文参考国内外相关文献资料,对乌头碱的心肌细胞毒性作用机制进行了综述。

关键词：法医毒理学乌头类生物碱毒性作用机制心肌细胞

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乌头碱对新生大鼠心肌细胞DNA损伤的影响

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中国法医学杂志 2009年第4期24卷 239-241页

作者：刘艳梁曼刘茜章诗伟刘良华中科技大学同济医学院法医学系湖北武汉430030 湖北省中山医院病理科湖北武汉430033

目的探讨乌头碱对新生大鼠心肌细胞DNA损伤的影响。方法新生SD大鼠20只,随机分为4组,取心室肌以差速贴壁法原代培养心室肌细胞。培养第6天,制成密度为2×105个细胞/mL的细胞悬液,分别加入乌头碱混合液至终浓度为0.1、0.5、1、2μmol/L,... 详细信息

目的探讨乌头碱对新生大鼠心肌细胞DNA损伤的影响。方法新生SD大鼠20只,随机分为4组,取心室肌以差速贴壁法原代培养心室肌细胞。培养第6天,制成密度为2×105个细胞/mL的细胞悬液,分别加入乌头碱混合液至终浓度为0.1、0.5、1、2μmol/L,染毒30m in;采用彗星电泳技术及CASP分析软件,检测不同浓度乌头碱染毒后心室肌细胞DNA损伤程度。结果心肌细胞被不同浓度乌头碱染毒后,尾部DNA含量、彗尾长度、尾矩、O live尾矩均随乌头碱浓度增加而升高,头部DNA含量则逐渐降低,与对照组相比,有显著性差异(P<0.01);乌头碱染毒剂量越大,心肌细胞DNA损伤越严重。结论乌头碱染毒引起细胞DNA断裂损伤呈明显的剂量—效应关系,推测细胞DNA损伤是乌头碱毒作用机制之一。

关键词：法医毒理学乌头碱彗星电泳细胞DNA损伤单细胞凝胶电泳

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乌头碱对培养新生大鼠心室肌细胞Connexin43蛋白磷酸化的影响

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中国法医学杂志 2008年第2期23卷 92-95,146页

作者：章诗伟任杰林张黎李强刘艳刘良华中科技大学同济医学院法医学系湖北武汉430030 湖北省中山医院病理科湖北武汉430030

目的建立细胞水平的染毒模型,观察乌头碱对心肌细胞缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)的影响。方法实验分0.25、0.5、0.75、1.0、1.5和2.0μmol/L等6个不同浓度乌头碱染毒组,运用蛋白印迹法和免疫荧光技术,检测各组及对照组心肌细胞Cx43蛋... 详细信息

目的建立细胞水平的染毒模型,观察乌头碱对心肌细胞缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)的影响。方法实验分0.25、0.5、0.75、1.0、1.5和2.0μmol/L等6个不同浓度乌头碱染毒组,运用蛋白印迹法和免疫荧光技术,检测各组及对照组心肌细胞Cx43蛋白磷酸化状态的改变。结果蛋白印迹检测显示,不同浓度染毒组心肌细胞中Cx43蛋白总量与正常对照组无显著差异;0.5μmol/L乌头碱染毒后,Cx43开始出现脱磷酸化;当染毒浓度达到1.0μmol/L后,Cx43脱磷酸化显著,且1.5及2.0μmol/L染毒效果和1.0μmol/L染毒组相当。免疫荧光分析结果提示乌头碱作用后,心肌细胞Cx43蛋白在羧基端第368位点丝氨酸残基(Ser368)发生明显的脱磷酸化。结论一定浓度的乌头碱能诱导心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43发生显著脱磷酸化。

关键词：法医毒理学细胞培养乌头碱 Connexin43 蛋白质磷酸化

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缝隙连接、连接蛋白与冠心病猝死

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法医学杂志 2004年第4期20卷 250-252页

作者：章诗伟陈新山刘世新张益鹄华中科技大学同济医学院法医学系湖北武汉430030

缝隙连接(gapjunction,GJ)构成细胞之间的跨膜水相通道,协调细胞间化学及电信息的交流。心脏上缝隙连接的主要功能是为心肌细胞间的电冲动提供低压传导通路,并维持心肌的协调运动。近年来的研究显示,心肌细胞(特别是心室肌工作细胞)上... 详细信息

缝隙连接(gapjunction,GJ)构成细胞之间的跨膜水相通道,协调细胞间化学及电信息的交流。心脏上缝隙连接的主要功能是为心肌细胞间的电冲动提供低压传导通路,并维持心肌的协调运动。近年来的研究显示,心肌细胞(特别是心室肌工作细胞)上构成缝隙连接的连接蛋白含量、分布及功能的异常与各种心律失常的产生和持续关系密切。这很可能为临床及法医实践中,诊断冠心病猝死心肌早期病变提供一个新的思路。

关键词：缝隙连接连接蛋白冠心病猝死

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不同DAB显色液对免疫组化结果的对比分析

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人人健康 2023年第6期 99-101页

作者：陈洁章诗伟湖北省中西医结合医院病理科

目的：欲更换不同品牌的DAB显色液以降低成本。现将该品牌试用装与现用的DAB进行对比，观察试用装对免疫组化结果是否存在影响，并且能否替代现用的DAB以降低成本。方法：选择2021年5月1日～2021年12月30日不同组织蜡块进行常规切片，... 详细信息

目的：欲更换不同品牌的DAB显色液以降低成本。现将该品牌试用装与现用的DAB进行对比，观察试用装对免疫组化结果是否存在影响，并且能否替代现用的DAB以降低成本。方法：选择2021年5月1日～2021年12月30日不同组织蜡块进行常规切片，并分为A组（试用装）和B组（现用装）。最后对这两种DAB的显色效果进行对比综合评判。结果：两组切片的显色区域基本一致。试用装阳性区域颜色偏深，背景干净，无非特异性着色;而现用组显色偏浅，背景干净，但是局部存在非特异性着色，局部阳性区域未着色。结论：试用装的DAB对免疫组化结果无影响，并且可以替换现用的DAB,达到降低成本的目的。

关键词： DAB显色液免疫组织化学对比

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快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中应用

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实用医技杂志 2022年第6期29卷 658-660,F0003页

作者：吉洪亮罗梓垠章诗伟湖北省中西医结合医院病理科武汉430021

目的探究快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色方法在细胞蜡块结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法分析2019年1月至2021年10月湖北省中西医结合医院病理检查确诊或临床怀疑结核性炎症病例的细胞蜡块标本103例,细胞蜡块均是通过超声快速组... 详细信息

目的探究快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色方法在细胞蜡块结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法分析2019年1月至2021年10月湖北省中西医结合医院病理检查确诊或临床怀疑结核性炎症病例的细胞蜡块标本103例,细胞蜡块均是通过超声快速组织处理系统制作,结合传统抗酸染色方法,通过改进制片及染色的过程,分析快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中的应用价值。结果103例细胞蜡块标本中,结核分枝杆菌检测阳性41例,阳性率为39.8%(41/103),其中20例为结核杆菌簇状阳性。胸腔积液、腹腔积液标本88例,结核杆菌检测阳性34例。肺泡灌洗液标本10例,阳性3例。髋关节和体表包块细针穿刺抽吸脓液标本5例,阳性4例。多数病例通过重复送检或者同时送检活体组织,检测结果均保持一致。结论快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色在细胞蜡块中检测结核分枝杆菌具有阳性率高,耗时短,操作简便,成本低廉等优势,非常具有临床诊断价值。

关键词：石蜡包埋结核分枝杆菌快速石蜡切片抗酸染色

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超声快速组织处理技术在鼻咽癌病理诊断中的应用

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肿瘤基础与临床 2024年第5期37卷 580-582页

作者：罗梓垠吉洪亮章诗伟湖北省中西医结合医院病理科湖北武汉430015

目的探讨超声快速组织处理技术应用于鼻咽癌诊断中的可行性。方法收集2020年1月至2021年5月湖北省中西医结合医院病理科接收的鼻咽肿物标本39例。每例标本取材2块,同时进行超声快速石蜡处理(超声处理组)和常规石蜡处理(常规处理组)。分... 详细信息

目的探讨超声快速组织处理技术应用于鼻咽癌诊断中的可行性。方法收集2020年1月至2021年5月湖北省中西医结合医院病理科接收的鼻咽肿物标本39例。每例标本取材2块,同时进行超声快速石蜡处理(超声处理组)和常规石蜡处理(常规处理组)。分别对石蜡切片进行HE染色、免疫组织化学染色和显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色。在显微镜下观察2组切片,比较2种不同组织脱水处理方式对诊断结果的影响。结果39例鼻咽肿物标本同时进行超声快速组织处理和常规组织处理,其中诊断为鼻咽癌的均为9例、良性均为30例。显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色阳性者均为7例,且均出现在鼻咽癌患者中。超声处理组HE染色效果优于常规处理组,镜下可见切片透明度好,背景干净,核质对比清晰,色彩明艳,且细胞形态更加饱满,结构完整,无收缩。超声处理组和常规处理组免疫组织化学染色结果相似,镜下均可见阳性细胞强度好,定位准确,无非特异性着色,背景干净。超声处理组和常规处理组显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色结果相似,镜下均可见细胞核呈棕褐色,结果定位准确。结论对鼻咽肿物标本进行超声快速组织处理不会影响染色结果,且能有效缩短出片时间,提高病理诊断效率,可以应用于鼻咽癌的病理诊断。

关键词：超声快速组织处理技术鼻咽癌 HE染色免疫组化染色显色原位杂交EB病毒编码核糖核酸染色阳性

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急性心肌缺血猝死例左室心肌Cx43脱磷酸化的免疫组化研究

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法医学杂志 2004年第3期20卷 136-139,142,F003页

作者：章诗伟刘世新邓立彬郭学荣陈新山张益鹄华中科技大学同济医学院法医学系湖北武汉430030

目的观察急性心肌缺血所致心性猝死,特别是冠心病猝死者与对照组,左室心肌闰盘上缝隙连接蛋白Cx43磷酸化状态的差异,探讨其在急性心肌缺血心律失常的发生,及其诊断心肌缺血早期病变中的意义。方法应用免疫组化SP技术,检测无明显心肌梗... 详细信息

目的观察急性心肌缺血所致心性猝死,特别是冠心病猝死者与对照组,左室心肌闰盘上缝隙连接蛋白Cx43磷酸化状态的差异,探讨其在急性心肌缺血心律失常的发生,及其诊断心肌缺血早期病变中的意义。方法应用免疫组化SP技术,检测无明显心肌梗死的冠心病猝死组(组Ⅰ)、其他急性心肌缺血所致心性猝死组(组Ⅱ、Ⅲ)和两对照组(组Ⅳ、Ⅴ,严重颅脑损伤或病理性颅内出血所致急性死亡),共45名死者的左心室局部心肌组织(存档蜡块)中Cx43的磷酸化状态。另选用抗心肌闰盘上粘合连接的主要蛋白Pan-Cadherin的抗体和生物素化菜豆凝集素(PHA-E+L/Bio),分别检测心肌细胞间机械耦联与心肌细胞膜的完整性(后者采用亲和组化技术),以便在实验中与Cx43免疫组化染色结果作比较分析。结果⑴在实验组各例标本的心肌闰盘上磷酸化Cx43明显缺染,少数呈点状弥散于胞浆;但在两对照组中,可见磷酸化Cx43聚集于心肌闰盘处。⑵Pan-Cadherin在各例标本中均表现为心肌闰盘处的强阳性着色。⑶各组标本其心肌细胞膜均显示良好,细胞轮廓清晰可辨。结论急性心肌缺血所致心性猝死者,左室心肌细胞间机械耦联和心肌细胞膜的完整性与对照组相比,无明显改变,但闰盘处主司电耦联的缝隙连接蛋白Cx43却发生了明显的脱磷酸化。这提示,后者可能是急性心肌缺血所?

关键词：急性心肌缺血猝死左室心肌 Cx43脱磷酸化免疫组化心肌闰盘病理形态学

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脑胶质瘤患者预后影响因素分析

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中国肿瘤 2014年第12期23卷 1019-1023页

作者：房莉章诗伟李晶徐国政广州军区武汉总医院湖北武汉430071

[目的]探讨脑胶质瘤患者预后影响因素,以提高胶质瘤患者术后生存率。[方法]外科手术后经病理确诊为脑胶质瘤的患者158例,查找病历和电话随访收集其资料,生存分析单因素分析使用Kaplan-Meier法计算生存率,并采用Log-rank检验;多因素分析... 详细信息

[目的]探讨脑胶质瘤患者预后影响因素,以提高胶质瘤患者术后生存率。[方法]外科手术后经病理确诊为脑胶质瘤的患者158例,查找病历和电话随访收集其资料,生存分析单因素分析使用Kaplan-Meier法计算生存率,并采用Log-rank检验;多因素分析采用Cox分析。[结果]单因素分析表明影响预后的因素有:年龄、肿瘤级别、KPS评分、术后放疗和化疗。多因素分析显示年龄、肿瘤级别、KPS评分、术后放疗和化疗是影响预后的独立因素。[结论]年龄小、级别低、KPS评分高的患者术后预后较好,术后辅助放疗或者化疗有助于改善预后。

关键词：胶质瘤预后生存率

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